( PDF ) Estudo descritivo das onicomicoses na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período de janeiro de 2002 até dezembro de 2006

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CLARISSA SANTOS DE CARVALHO

ESTUDO DESCRITIVO DAS ONICOMICOSES NA

CLÍNICA DE DERMATOLOGIA DA SANTA CASA DE SÃO PAULO

NO PERÍODO DE JANEIRO DE 2002 ATÉ DEZEMBRO DE 2006

Dissertação apresentada ao Curso de Pós-

Graduação da Faculdade de Ciências

Médicas da Santa Casa de São Paulo para

obtenção do titulo de Mestre em Medicina.

SÃO PAULO

2010

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CLARISSA SANTOS DE CARVALHO

ESTUDO DESCRITIVO DAS ONICOMICOSES NA

CLÍNICA DE DERMATOLOGIA DA SANTA CASA DE SÃO PAULO

NO PERÍODO DE JANEIRO DE 2002 ATÉ DEZEMBRO DE 2006

Dissertação apresentada ao Curso de Pós-

Graduação da Faculdade de Ciências

Médicas da Santa Casa de São Paulo para

obtenção do titulo de Mestre em Medicina.

Área de Concentração: Ciências da

Saúde

Orientadora: Prof. Dra. Clarisse Zaitz

SÃO PAULO

2010

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FICHA CATALOGRÁFICA

Preparada pela Biblioteca Central da

Faculdade de Ciências Médicas da Santa Casa de São Paulo

Carvalho, Clarissa Santos de

Estudo descritivo das onicomicoses na clínica de dermatologia da

Santa Casa de São Paulo no período de janeiro de 2002 a dezembro

de 2006. São Paulo, 2010.

Dissertação de Mestrado. Faculdade de Ciências Médicas da

Santa Casa de São Paulo – Curso de Pós-Graduação em Medicina

Área de Concentração: Ciências da Saúde

Orientador: Clarisse Zaitz

1. Onicomicose 2. Dermatófitos 3.Leveduras 4. Fungos

filamentosos não dermatófitos 5. Prototheca spp

BC-FCMSCSP/36-10

Agradecimentos

Agradeço primeiramente à Deus, por me dar forças a cada dia para concluir

mais essa etapa.

Agradeço à Faculdade de Ciências Médicas da Santa Casa de São Paulo e à

Irmandade da Santa Casa de Misericórdia de São Paulo, por me permitir realizar

esse trabalho.

Agradeço à minha orientadora, Profa. Dra Clarisse Zaitz, pelo apoio e

colaboração.

Agradeço à Profa. Dra. Valéria Maria de Souza Framil, pelo empenho,

dedicação e amizade.

Agradeço à Profa. Dra. Lígia Rangel Ruiz, pela atenção e pelo carinho.

Agradeço à Bioquímica Laura Hitomi, pela paciência e colaboração.

Agradeço à Secretária da Pós Graduação, Mirtes Dias de Souza, pela

paciência, atenção e dedicação.

Agradeço às amigas Mayra Moutinho Cardoso e Diva Moutinho Cardoso, pela

paciência, amizade e dedicação com a qual fizeram a parte estatística deste

trabalho.

Aos meus familiares e ao meu esposo, que incentivaram e acreditaram na

minha vitória.

Agradeço à FUNDAÇÃO CAPES, pelo apoio financeiro.

Abreviaturas e Símbolos

DMSO Dimetil-Sulfóxido

FFND Fungo Filamentoso Não Dermatófito

KOH Hidróxido de Potássio

OBS Onicomicose branca superficial

OSDL Onicomicose Subungueal Distal e Lateral

OSP Onicomicose Subungueal Proximal

OT Onicodistrofia Total

p Nível de Significância

Sumário

1. INTRODUÇÃO .................................................................................................. 1

1.1. Revisão da literatura ................................................................................... 3

1.1.1. Onicomicose .......................................................................................... 3

1.1.2. Características dos dermatófitos ........................................................... 5

1.1.2.1. Conceito .......................................................................................... 5

1.1.2.2. Histórico .......................................................................................... 6

1.1.2.3. Identificação dos dermatófitos ........................................................ 7

1.1.2.4. Taxonomia dos dermatófitos ........................................................... 8

1.1.2.5. Ecologia e epidemiologia dos dermatófitos em relação às

onicomicoses .................................................................................

1.1.2.6. Patogênese das onicomicoses por dermatófitos ............................ 12

1.1.2.6.1. Fatores inerentes ao fungo .......................................................

1.1.2.6.2. Fatores inerentes ao hospedeiro .............................................. 13

1.1.3. Características dos fungos filamentosos não dermatófitos ................... 14

1.1.3.1. Conceito .......................................................................................... 14

1.1.3.2. Histórico .......................................................................................... 14

1.1.3.3. Identificação dos fungos filamentosos não dermatófitos ................ 15

1.1.3.4. Taxonomia ...................................................................................... 16

1.1.3.5. Ecologia e epidemiologia ................................................................ 16

1.1.3.6. Onicomicose por FFND e sua patogenia ........................................ 17

1.1.4. Características das leveduras ............................................................... 18

1.1.4.1. Conceito .......................................................................................... 18

1.1.4.2. Histórico .......................................................................................... 18

1.1.4.3. Identificação das leveduras .............................................................

1.1.4.4. Taxonomia ...................................................................................... 19

1.1.4.5. Ecologia e epidemiologia ................................................................

1.1.4.6. Patogenia das candidoses .............................................................. 20

1.1.4.7. Onicomicoses provocadas por leveduras ....................................... 20

1.1.5. Características das algas do gênero Prototheca ...................................

1.1.5.1. Conceito .......................................................................................... 21

1.1.5.2. Histórico .......................................................................................... 22

1.1.5.3. Taxonomia ...................................................................................... 22

1.1.5.4. Identificação .................................................................................... 23

1.1.5.5. Ecologia e epidemiologia ................................................................ 23

1.1.5.6. Patogenia e quadro clínico ............................................................. 24

2. OBJETIVOS ......................................................................................................

3. CASUÍSTICA E MÉTODOS ..............................................................................

3.1. Considerações gerais .................................................................................

3.2. Procedimentos laboratoriais .......................................................................

3.2.1. Exame microscópico direto ....................................................................

3.2.2. Cultura ................................................................................................... 31

3.2.2.1. Isolamento e identificação dos dermatófitos ................................... 31

3.2.2.1.1. Aspectos macroscópicos ..........................................................

3.2.2.1.2. Aspectos microscópicos ........................................................... 31

3.2.2.2. Isolamento e identificação dos fungos filamentos não

dermatófitos (FFND) ......................................................................

3.2.2.2.1. Aspectos macroscópicos ..........................................................

3.2.2.2.2. Aspectos microscópicos ........................................................... 33

3.2.2.3. Isolamento e identificação leveduras .............................................. 35

3.2.2.3.1. Aspectos macroscópicos ..........................................................

Sumário

3.2.2.3.2. Aspectos microscópicos ........................................................... 35

3.2.2.4. Isolamento e identificação do gênero Prototheca ...........................

3.2.2.4.1. Aspectos macroscópicos ..........................................................

3.2.2.4.2. Aspectos microscópicos ........................................................... 37

3.3. Análise estatística .......................................................................................

4. RESULTADOS ................................................................................................. 38

4.1. Caracterização das amostras estudadas ................................................... 39

4.1.1. Exame microscópico direto e cultura .....................................................

4.1.2. Onicomicose – faixa etária e sexo .........................................................

4.1.3. Onicomicose – estação do ano e distribuição anual .............................

4.1.4. Localização das onicomicoses .............................................................. 45

4.1.5. Identificação dos agentes etiológicos das onicomicoses ...................... 49

4.1.5.1. Agentes etiológicos das onicomicoses por grupos ......................... 49

4.1.5.2. Agentes etiológicos das onicomicoses – gêneros e espécies ........ 49

4.1.5.3. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses - grupos e

faixa etária das amostras ................................................................

4.1.5.4. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses –

gêneros, espécies e faixa etária das amostras .............................

4.1.5.5. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses – grupos e

sexo das amostras ..........................................................................

4.1.5.6. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses –

gêneros, espécies, localização e sexo das amostras ....................

4.1.5.7. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses – grupos e

estação do ano das amostras .......................................................

4.2. Caracterização das amostras estudadas de acordo com microscópico

direto positivo e cultura positiva .................................................................

4.3. Caracterização das amostras estudadas de acordo com microscópico

direto negativo e cultura positiva ................................................................

5. DISCUSSÃO .....................................................................................................

6. CONCLUSÕES .................................................................................................

7. ANEXOS ........................................................................................................... 68

8. REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFIAS ..................................................................... 73

FONTES CONSULTADAS ............................................................................. 83

RESUMO ......................................................................................................... 85

ABSTRACT ..................................................................................................... 87

1. INTRODUÇÃO

Introdução

Onicomicoses são infecções fúngicas das unhas que podem ser causadas por

dermatófitos, leveduras, fungos filamentosos não dermatófitos (FFND) e atualmente

Prototheca spp (Mercantini et al, 1996; Effendy et al, 2005; Zaitz et al, 2006),

acometendo aproximadamente 8% da população mundial (Finch, Warshaw 2007).

Representam 30% de todas as infecções fúngicas superficiais e em torno de 50%

das afecções ungueais (Willians, 1993; Migdley et al, 1994; Drake et al, 1996;

Ghannoum et al, 2000). Os principais agentes etiológicos das onicomicoses são os

dermatófitos, isolados em até 75% dos casos. As leveduras do gênero Candida

ocorrem em torno de 18 a 20% dos casos e os FFND atingem porcentagens que

variam de um a cinco por cento dos casos (Evans, 1998; Agarwala et al, 2006).

Os estudos epidemiológicos das onicomicoses podem apresentar resultados

divergentes na literatura em função de vários fatores como os ambientais e os

relacionados ao hospedeiro. Os principais fatores ambientais considerados são:

desenvolvimento urbano, industrialização, localização geográfica e condições

climáticas como temperatura e tempo de exposição aos raios ultravioleta. Os fatores

relacionados ao hospedeiro citados na literatura foram: idade, hábitos de vida,

profissão, sexo, cor e as doenças crônicas (Philport, Schuttleworth, 1989; Roberts,

1992; Kaszuba et al, 1998; Gupta et al, 2000b; Sigurgeirsson, Steingrimsson, 2000).

A onicomicose é considerada um problema de saúde pública devido à alta

prevalência associada à morbidades como: diabetes, circulação periférica diminuída,

traumatismo ungueal de repetição, imunodeficiências (Elewski, 1998). É doença cuja

notificação compulsória não existe e dificulta a avaliação precisa da extensão do

problema em nosso meio. Assim, as onicomicoses interferem na qualidade de vida

do paciente e gera prejuízo estético, refletindo diretamente na auto-estima, vaidade,

discriminação social e no potencial de trabalho do paciente (Lopes et al, 1999).

As onicomicoses, apesar de serem infecções comuns, ainda hoje são de difícil

tratamento e estão associadas a altas taxas de recidiva e a ineficácia terapêutica

(Schroeff et al, 1992). O conhecimento da ecologia, da etiologia e da distribuição da

biota dos seus principais agentes etiológicos permite um melhor entendimento da

história natural, da evolução e pode contribuir no futuro para novas modalidades

terapêuticas.

Nesse estudo retrospectivo, foi realizada análise de todos os exames

micológicos positivos oriundos de pacientes com diagnóstico clinico de onicomicose

Introdução

do Laboratório de Micologia da Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São

Paulo, no período de janeiro de 2002 à dezembro de 2006.

1.1 . Revisão de literatura

1.1.1. Onicomicose

Onicomicose é uma palavra que vem do grego “ONYCHOS” que significa

unha e “MYCOSIS” infecção por fungos (Rodriguez, Jodra, 2000). O termo

onicomicose é considerado infecção das unhas (leito, matriz ou lâmina ungueal) dos

pés e das mãos causadas por dermatófitos, leveduras e fungos não dermatófitos

(Rodgers, Bassler, 2001). A onicomicose passa a ser denominada de tinea unguium

ou tinha ungueal quando ocorre a invasão da lâmina ungueal apenas por

dermatófitos (Ramesh et al, 1983; Summerbell, 1997; Evans, 1998; Zaitz, Proença,

1998a).

De acordo com Rodriguez, Jodra, em 2000, as onicomicoses foram incluídas

no grupo das micoses cutâneas por serem usualmente consideradas infecções

fúngicas superficiais e apresentarem uma reação hiperceratósica com destruição da

lâmina ungueal e outras estruturas.

Vários países como Inglaterra, Finlândia, Espanha, Canadá, Índia, Itália,

Dinamarca e Estados Unidos apresentaram estudos de prevalência das

onicomicoses em torno de 2,6% a 13,8% (Roberts, 1992; Heikkilä, Stubb, 1995; Sais

et al, 1995; Gupta et al, 1997a; Ghannoum et al, 2000; Tosti et al, 2000; Svejgaard,

Nilsson, 2004).

Elewski, Charif, em 1997, em Ohio, observaram a prevalência das

onicomicoses em pacientes na faixa etária 10-18 anos, 19-30 anos, e acima de 60

anos, e apresentaram culturas positivas em 1,1%, 2,9% e 28,1% respectivamente.

Elewski, em 1998, relatou uma maior prevalência das onicomicoses em

adultos do que em crianças. Estudou 2.500 pacientes jovens com suspeita clínica de

onicomicose no Canadá e EUA. Apenas 0,44% (N=11) das crianças apresentaram a

doença. O autor justificou a baixa prevalência de onicomicoses nas crianças devido

a um crescimento rápido das unhas, menor incidência de tinha dos pés, menor área

para invasão de fungos e menor exposição aos fungos.

Introdução

Vários autores justificam o aumento da prevalência das onicomicoses em

idosos devido a alguns fatores: circulação periférica mais lenta, inatividade,

inabilidade em cortar e cuidar das unhas, presença de comorbidades (diabetes,

trauma ungueal repetitivo, exposição mais prolongada aos fungos patogênicos e

imunidade relativamente mais baixa) (Ghannoum et al, 2000; Gupta et al, 2000a;

Tosti et al, 2005).

As onicomicoses atuam diretamente na qualidade de vida do paciente, e

interferem em sua parte emocional, social e profissional. Vários foram os fatores de

predisposição às onicomicoses citados na literatura, como a prática de esportes

aquáticos (Gudnadottir et al, 1999; Sigugeirssonand, Steingrimsson, 2004),

pacientes fumantes e imunocomprometidos (Gupta et al, 2000a) e fatores genéticos

(Faergemann et al, 2005).

As variantes clínicas das onicomicoses foram classificadas por Zaias em

1972, de acordo com a forma com que o fungo invade a unidade ungueal. São

conhecidas quatro formas clínicas:

1 – Onicomicose Branca Superficial (OBS): representa 2 a 5% das onicomicoses

causadas por dermatófitos. Caracteriza-se pela penetração do fungo em direção

ao interior da lâmina ungueal. Elewski, em 1998, considerou como um marcador

clínico precoce da infecção pelo HIV.

2 – Onicomicose Subungueal Distal e Lateral (OSDL): a invasão se inicia no

hiponíquio e na borda distal e lateral da lâmina ungueal, estendendo-se de

forma lenta e progressiva até o setor proximal da unha. De acordo com Ballesté

et al (2003) e Sidrim, Rocha (2004) é a forma clínica mais frequente de

onicomicose.

3 - Onicomicose Subungueal Proximal (OSP): o fungo invade o estrato córneo da

dobra ungueal proximal e posteriormente a lâmina ungueal. Ballesté et al

(2003), Sidrim, Rocha (2004) e Fitzpatrick et al (2005) citaram como a variante

clínica menos comum e observada com maior frequência em indivíduos com

imunodeficiência adquirida.

4 – Onicodistrofia Total (OT): observa-se o acometimento total da matriz ungueal

que representa 100% da lâmina ungueal. Ballesté et al (2003) e Sidrim, Rocha

(2004) descreveram como estágio final das onicomicoses por dermatófitos,

Candida spp e FFND.

Introdução

Tosti et al, em 1998, considera ainda uma quinta classificação denominada

onicomicose endonix, que se caracteriza tanto pela invasão superficial quanto por

invasão profunda da lâmina, provocada principalmente pelo Trichophyton

soudanense e menos frequentemente pelo Trichophyton violaceum. A característica

clínica é a presença de rachaduras lamelares na lâmina e penetração das hifas de

forma característica.

Os dermatófitos são os principais agentes etiológicos das onicomicoses e

representam em torno de 75% dos casos. Summerwell et al, em 1989, isolou

Trichophyton mentagrophytes em 20% dos casos e Roseeuw, em 1999, identificou

Trichophyton rubrum em 70% dos casos como o principal agente etiológico de

onicomicose dos pés. A transmissão ocorre principalmente pela superfície úmida do

solo e menos frequentemente por contato interpessoal. Effendy et al, em 2005,

isolaram a Candida albicans (5,6%) acometendo mais as unhas das mãos que dos

pés e Evans, em 1998, isolaram os FFND em três porcento dos casos sendo que o

principal agente causador de onicomicose por fungo filamentoso não dermatófito foi

o Scopulariopsis brevicallius. Segundo Tosti et al, em 2000, o principal agente

causador de onicomicose por FFND é o Fusarium spp.

Elewski, em 1998, chama atenção para o diagnóstico diferencial das

onicomicoses com outras alterações da lâmina ungueal e podem ser erroneamente

rotuladas como onicomicoses. As doenças mais citadas na literatura são: psoríase,

líquen plano, dermatite de contato, síndrome das unhas amarelas, paquioníquia

congênita, infecções bacterianas, onicodistrofias traumáticas, onicólise idiopática e

tumores ungueais.

1.1.2. Características dos dermatófitos

1.1.2.1. Conceito

Os principais agentes etiológicos das onicomicoses são os dermatófitos.

Dermatófito (dermato=pele; phyto=planta) é um termo impróprio, porém consagrado.

Dermatófitos são agentes infecciosos que frequentemente acometem o homem e

alguns animais e são fungos capazes de determinar infecções de pele, pelos e

unhas conhecidas como tinhas. Esses fungos, em vida parasitária, utilizam a

queratina da pele, dos pelos e das unhas como substrato (Lacaz et al, 2002).

Introdução

1.1.2.2. Histórico

Sabouraud, no período de 1890 até 1938, foi o principal autor que fez da

Micologia Dermatológica uma área distinta para novos estudos. Em 1910, lançou o

livro Les Teignes e descreveu a classificação clínica e micológica dos dermatófitos.

Esta classificação foi simplificada por Emmons, em 1934, e baseado nos padrões

morfológicos dos esporos e estruturas especiais, dividiu os dermatófitos em três

gêneros: Trichophyton, Microsporum e Epidermophyton, o que é aceito até hoje

(Weitzman, Summerbell, 1995).

O gênero Microsporum foi descrito por David Gruby, em 1843; o gênero

Trichophyton por Malmsten, em 1845, e o gênero Epidermophyton por Sabouraud,

em 1907.

Em 1959, Dawson e Gentles descreveram o estado perfeito (teleomorfo ou

sexuado) de alguns dermatófitos e de fungos geofílicos não patogênicos (fungos

afins), permitindo grande avanço na taxonomia dos dermatófitos (Rippon, 1988). Os

dermatófitos no estado sexuado ou teleomorfo foram reclassificados no gênero

Arthroderma (Currey, 1854) ou Nannizia (Stockdale, 1961). Weitzman et al, em

1986, concluíram, através de estudos morfológicos que Nannizzia e Arthroderma

constituíam um só gênero, tendo sido adotada na taxonomia a denominação

Arthroderma (Weitzman, Summebell, 1995).

Em 1977, Hennebert e Weresub introduziram novos termos, hoje de uso

corrente: anamorfo para a forma reprodutiva assexuada e teleomorfo para a forma

reprodutiva sexuada (Matsumoto, Ajello, 1987).

Matsumoto, Ajello, em 1987, restringiram o termo dermatófito apenas para

designar as espécies (antropofílicas, zoofílicas e geofílicas dos três gêneros)

causadoras de dermatofitoses. As espécies queratinofílicas incapazes de produzir

dermatofitoses foram denominadas espécies correlatas de dermatófitos e as

infecções de pele, pelos e unhas causadas por fungos não dermatófitos foram

denominadas dermatomicoses.

Introdução

1.1.2.3. Identificação dos dermatófitos

Os dermatófitos são facilmente cultivados em meios artificiais contendo fontes

de carbono e nitrogênio. A identificação pode ser feita por critérios morfológicos,

provas fisiológicas, bioquímicas, imunológicas e moleculares (Souza, 1998; Lacaz et

al, 2002; Zaitz, 2004b).

Devido às semelhanças taxonômicas, morfológicas, fisiológicas e

imunológicas, a identificação das diferentes espécies de dermatófitos muitas vezes

só é possível a partir dos critérios morfológicos, tanto macro como microscópicos.

As características macroscópicas da colônia variam quanto à: coloração do

anverso e reverso, morfologia (plana, elevada, crateriforme, cerebriforme) e textura.

A textura da colônia separa os fungos em dois grandes grupos: leveduras nas quais

as colônias se apresentam de formas pastosas ou cremosas e bolores cujas

colônias podem se apresentar com superfície algodonosa, aveludada, pulverulenta

ou com outras características e com os mais variados tipos de pigmentação (Zaitz,

Proença, 1998a; Zaitz, 2004a).

A unidade estrutural de um fungo é a hifa e o conjunto de hifas é denominado

micélio. O micélio vegetativo é o responsável pela assimilação de nutrientes e o

micélio reprodutivo se diferencia para formar estruturas de frutificação. As

características morfológicas do micélio reprodutivo é que vão permitir a identificação

dos diferentes gêneros e espécies de fungos (Rippon, 1988; Lacaz et al, 2002).

A caracterização microscópica dos três gêneros anamorfos de dermatófitos é

determinada pelos órgãos de reprodução assexuada: macroconídios e microconídios

(Zaitz, Proença, 1998a; Lacaz et al, 2002; Zaitz, 2004a; Sidrim, Rocha, 2004).

O gênero Trichophyton apresenta numerosos microconídios redondos,

unicelulares, de parede fina, isolados ou dispostos em cachos ao longo da hifa, em

grande número. Os macroconídios são mais raros, tendo parede fina e lisa, forma

alongada ou em clava, multisseptados (Lacaz et al, 2002; Sidrim, Rocha, 2004).

O gênero Microsporum apresenta macroconídios numerosos, em forma de

fuso, parede fina e rugosa, septação múltipla (uma a 15 células). Os microconídios

são unicelulares e raramente encontrados ao longo das hifas (Lacaz et al, 2002;

Sidrim, Rocha, 2004).

O gênero Epidermophyton apresenta macroconídios numerosos em forma de

dedos-de-luva, formando cachos. As paredes são lisas e há septação, formando

Introdução

duas a três células, estando ausentes os microconídios (Lacaz et al, 2002; Sidrim,

Rocha, 2004).

Além de macroconídios e microconídios, várias estruturas vegetativas podem

ser produzidas: hifas em espiral (T. mentagrophytes), hifas em raquete (T.

tonsurans) e candelabros fávicos (T. schöenleinii). Muitas espécies de fungos são

polimorfas, ou seja, podem produzir dois ou mais tipos de órgãos de frutificação

(Lacaz et al, 2002; Sidrim, Rocha, 2004).

Os dermatófitos, quando caracterizados microscopicamente por seus conídios

assexuados, estão no estado imperfeito ou conidial, ou seja, atualmente

denominados anamorfos. Quando mecanismos de reprodução são encontrados,

estão no estado perfeito ou ascal, ou seja, teleomorfo. Assim sendo, Trichophyton,

Microsporum e Epidermophyton são considerados gêneros anamorfos (Lacaz et al,

2002; Sidrim, Rocha, 2004).

1.1.2.4. Taxonomia dos dermatófitos

A classificação sistemática dos fungos é um tema ainda controverso. O

esquema proposto por Hawksworth et al e modificado por Matsumoto, Ajello, 1987,

mostra a posição sistemática dos dermatófitos (Quadro 1).

Quadro 1 - Posição sistemática dos dermatófitos e fungos afins (*).

Reino Fungi

Filo

Eumycota

(Reprodução sexuada)

Subfilo

Ascomycotina

Classe

Ascohymenomycetes

Ordem

Onygenales

Família

Arthrodermataceae

Gênero

Arthroderma

(Reprodução assexuada)

Subfilo

Deuteromycotina

Classe

Hyphomycetes

Ordem

Hyphomycetales

Família

Moniliaceae

Gênero

Epidermophyton

Microsporum

Trichophyton

(*) Segundo Hawksworth et al, modificada por Matsumoto, Ajello (1987).

Introdução

A classificação dos gêneros anamorfos de dermatófitos é mostrada no

Quadro 2, sendo reconhecidos três gêneros.

Quadro 2 - Classificação atual de dermatófitos e fungos afins. Gêneros anamorfos e

suas espécies (*).

Epidermophyton Sabouraud, 1907

E. floccosum (Hartz) Langeron et Milochevitch, 1930

E. stockdaleae Prochacki et Engelhard-Zasada, 1974

Microsporum Gruby, 1843

M. amazonicum Moraes, Borelli et Feo, 1967

M. anormorph of Arthroderma cookiellum (de Clercq) Weitzman, McGinnis, Padhye et Ajello, 1985

M. audouinii Gruby, 1843

M. boullardii Dominik et Majchorwitz, 1965

M. canis (Bodin) Bodin, 1902 var. canis

M. cookei Ajello, 1959

M. equinum (Delacroix et Bodin) Gueguen, 1904

M. ferrugineum Ota, 1921

M. fulvum Uriburu, 1909

M. gallinae (Megnin) Grigorakis, 1929

M. gypseum (Bodin) Guiart et Grigorakis, 1928

M. nanum Fuentes, 1956

M. persicolor (Sabouraud) Guiart et Grigorakis, 1928

M. praecox Rivalier, 1954

M. racemosum Borelli, 1965

M. ripariae Hubalek e Rush-Munro, 1973

M. vanbreusenghemii Georg, Ajello, Friedman et Brinkman, 1962

Trichophyton Malmsten, 1845

T. ajelloi (Vanbreusenghem) Ajello, 1968

T. concetricum Blanchard, 1895

T. equinum (Matruchot et Dassonville) Gedoelst, 1902

T. flavescens Padhye et Carmichael, 1971

T. georgiae Varsavsky et Ajello, 1964

T. gloriae Ajello, 1967

T. gourvilii Catanei, 1933

T. longifusum (Florian et Galgoczy) Ajello, 1968

T. mariatii Tapia de Fossaert, Mizrachi, Padhye et Ajello, 1980

T. megninii Blanchard, 1896

T. mentagrophytes (Robin) Blanchard, 1896

T. phaseoliforme Borelli et Feo, 1966

T. rubrum (Castellani) Sabouraud, 1911

T. schoenleinii (Lebert) Langeron et Milochevitch, 1930

T. simii (Pinoy) Stockdale, Mackenzie et Austwick, 1965

T. soundanense Joyeux, 1912

T. terrestre Durie et Frey, 1957

T. tonsurans Malmsten, 1845

T. vanbreuseghemii Rioux, Tarry et Tuminer, 1964

T. verrucosum Bodin, 1902

T. violaceum Bodin, 1902

T. yaoundei Cochet et Doby Dubois, 1957

(*) Reproduzido de Matsumoto, Ajello (1987).

Introdução

Nas últimas décadas, espécies teleomorfas de dermatófitos foram

descobertas, promovendo mudanças na classificação dos mesmos. O conhecimento

do estado teleomorfo dos dermatófitos permitiu uma classificação mais precisa. A

maioria dos teleomorfos descobertos pertence às espécies geofílicas, enquanto que

as espécies antropofílicas permanecem pouco conhecidas.

O Quadro 3, proposto por Matsumoto, Ajello, em 1987, mostra a relação

entre dermatófitos teleomorfos e anamorfos.

Quadro 3 - Dermatófitos. Relação entre fungos teleomorfos e anamorfos (*).

TELEOMORFOS

Arthroderma Currey ex Berkeley emend.

Weitzman, McGinnis, Padhye et Ajello,1986

ANAMORFOS

Microsporum Gruby, 1843

Trichophyton Malmsten, 1845

A. benhamiae Ajello et Cheng, 1967 T. mentagrophytes**

A. borelli (Moraes, Padhye et Ajello)

Padhye, Weitzman, Mc.Ginnis et Ajello, 1986.

M. amazonicum

A. cajetani (Ajello), Weitzman, McGinnis, et Padhye, 1986 M. cookei

A. ciferrii Varsavsky et Ajello,1964 T. georgiae

A. cookiellum (de Clerq) Weitzman, McGinnis, Padhye et

Ajello,1986

Microsporum anamorfo de

Acookiellum

A. corniculatum (Takashiro et de Vroey)

Weitzman, McGinnis, Padhye et Ajello, 1986

M. boullardii

A. flavescens Padhye et Carmichael, 1971 T. flavescens

A. fulvum (Stockdale) Weitzman, McGinnis, Padhye et Ajello,

1986

M. fulvum

A. gertleri Bonme, 1967 T. vanbreuseghemii

A. gloriae Ajello, 1967 T. gloriae

A. grubyi (Georg, Ajello, Friedman, et Brinkman) Ajello, Weitzman,

McGinnis et Padhye, 1986

M. vanbreuseghemii

A. gypseum (Nannizzi) Weitzman, McGinnis, Padhye et Ajello,

1986

M. gypseum**

A. incurvatum (Stockdale) Weitzman, McGinnis, Padhye et Ajello,

1986

M. gypseum**

A. insingulare Padhye et Carmichael, 1972 T. terrestre**

A. lenticularum Pore, Tsao et Plunkett, 1965 T. terrestre**

A. obtusum (Dawson et Gentles) Weitzman, McGinnis, Padhye et

Ajello, 1986

M. nanum

A. otae (Hlasegawa et Usui) McGinnis, Weitzman, Padhye et

Ajello, 1986

M. canis var. canis

M. canis var. distortum

A. persicolor (Stockdale) Weitzman, McGinnis, Padhye et Ajello,

1986

N. persicolor

A. quadrifidum Dawson et Gentles, 1961 T. terrestre**

A. simii Stockdale, Mackenzie et Austwick, 1965 T. simii

A. racemosum (Rush-Munro, Smith et Borelli) Weitzman,

McGinnis, Padhye et Ajello, 1986

M. racemosum

A. uncinatum Dwason et Gentles, 1961 T. ajelloi (=Keratinomyces

ceretanicus)

A. vanbreuseghemii Takashi, 1973 T. mentagrophytes**

(*) Reproduzido de Matsumoto, AJjello (1987).

(**) Estas espécies anamorfos são consideradas geneticamente complexas, cada uma delas incluindo

pelo menos mais de um teleomorfo.

Introdução

Em 1997, Kane descreveu o complexo Trichophyton rubrum com suas

espécies morfológicamente semelhantes, entre elas está o Trichophyton

raubitschekii.

1.1.2.5. Ecologia e epidemiologia dos dermatófitos em relação às

onicomicoses

Matsumoto, Ajello, em 1987, descreveram os dermatófitos de acordo com seus

ambientes naturais e hospedeiros preferenciais em três categorias: geofílicos,

zoofílicos e antropofílicos.

A variação da biota dermatofítica é influenciada por fatores como: idade, sexo,

aspectos sócio-econômicos, modo de vida, influência de animais domésticos,

variações climáticas, correntes migratórias e fatores geográficos, entre outros (Ruiz,

1999).

As espécies antropofílicas têm o homem como hospedeiro. Raramente

infectam animais e não sobrevivem nem proliferam no solo. Os principais

dermatófitos desta categoria, com distibuição universal, são o T.rubrum, E.

floccosum, M.audouinni, T.mentagrophytes var.interdigitale, T.tonsurans e T.

violaceum (Carvalhaes, 2000).

Os fungos geofílicos que não têm a capacidade de infectar tecidos

queratinizados do homem e animais não podem ser classificados como dermatófitos.

São considerados membros geofílicos dos gêneros Trichophyton, Microsporum e

Epidermophyton, ou ainda, “fungos afins”.

Aly, em 1994, sugeriu que os dermatófitos fossem inicialmente sapróbios do

solo que adquiriram a capacidade de digerir restos de queratina e assim se tornaram

queratinofílicos. Alguns desses evoluíram e começaram a parasitar tecidos

queratinizados de animais que viviam próximos ao solo, e foram progressivamente

se adaptando aos animais e perderam a capacidade de sobreviver no solo,

tornando-se zoofílicos. Os dermatófitos antropofílicos teriam sido zoofílicos no

passado, que perderam a capacidade de digerir queratina animal e adquiriram

grande afinidade pela queratina humana.

Alguns dermatófitos são cosmopolitas, ou seja, de distribuição universal,

enquanto outros possuem limites geográficos bem definidos. O estudo dos

dermatófitos de uma determinada região durante um determinado período, permite

Introdução

estabelecer as espécies de ocorrência comum ou esporádica dessa região. Permite

também observar as variações em diferentes períodos estudados facilitando assim a

orientação terapêutica a ser utilizada (Londero, 1990; Reis et al, 1992; Zaitz,

Proença, 1998a; Carvalhaes, 2000).

Para melhor visualização da classificação ecológica dos dermatófitos e fungos

afins foi elaborado o Quadro 4.

Quadro 4 - Ecologia dos dermatófitos e fungos afins (*).

DERMATÓFITOS FUNGOS AFINS

NÃO PATOGÊNICOS

Antropofílicos

Cosmopolitas

Zoofílicos Geofilicos Geofílicos

E.floccosum M.canis var canis M. cookei M. anamorph of

A. cookiellum

M. audouinii M. equinum M. gypseum T. ajelloi

T. mentagrophytes

var interdigitale

M. gallinae M. fulvum T. terrestre

T. equinum M. nanum

T. rubrum T. mentagrophytes

var mentagrophytes

T. tonsurans T. verrucosum

T. violaceum

LIMITADOS LIMITADOS

M. ferrugineum M. canis var distortum M. persicolor E. stockdaleae

T. concentricum T. mentagrophytes var

erinacei

M. praecox M. amazonicum

T. gourvilii T. mentagrophytes

var quinckeanum

M. racemosum M. boullardii

T. megninii

M.vanbreuse-ghemii

T. schöenleinii

T. phaseoliforme M. ripariae

T. simii T. flavescens

T.vanbreuse- ghemii T. georgiae

T. soudanense

T. gloriae

T. yaoundei

T. longifusum

(*) Reproduzido de Matsumoto, Ajello (1987).

1.1.2.6. Patogênese das onicomicoses por dermatófitos

O contágio inicial pode ser feito de forma direta (através do contato direto com

seres humanos, animais ou solos contaminados) ou de forma indireta (através de

fômites contaminados).

A colonização do dermatófito começa na camada córnea e sua progressão

depende de fatores inerentes ao fungo, ao hospedeiro e ao local anatômico onde

ocorre a infecção.

Introdução

1.1.2.6.1. Fatores inerentes ao fungo

A) Queratinofilia

Define-se como a afinidade dos dermatófitos por queratina sendo esta uma

condição essencial para sua existência.

Cada um dos três gêneros anamorfos possuem afinidades seletivas para os

diferentes tipos de queratina: Microsporum infectam preferencialmente pele e pelo,

enquanto o gênero Epidermophyton infecta a pele e a unha. Já espécies do gênero

Trichophyton infectam pele, pelos e unhas. Os dermatófitos produzem ceratinases e

outras enzimas proteolíticas. A queratina humana seria, portanto, um substrato ideal

in vivo para o crescimento dos dermatófitos

(Kamalam, Thambiah, 1980; Kamalam,

Thambiah, 1981).

B) Virulência

As espécies antropofílicas são bem adaptadas ao homem e costumam causar

infecções brandas e crônicas. As espécies geofílicas e zoofílicas, menos adaptadas

ao homem, causam geralmente lesões agudas e inflamatórias. O dano ao tecido é

decorrente da destruição da queratina e da resposta imunológica do hospedeiro (Aly,

1994).

1.1.2.6.2. Fatores inerentes ao hospedeiro

A) Integridade da pele

A epiderme íntegra se comporta como barreira natural impedindo a

colonização do fungo. Pequenos traumatismos na superfície da pele são

necessários para instalação da dermatofitose em indivíduos imunocompetentes

(Friedlander et al, 2003).

B) Fatores séricos, graxos e genéticos

A transferrina ligada ao ferro (insaturada) inibe o crescimento de alguns

fungos como o T. mentagrophytes privando-o do ferro, importante fator de

crescimento para o fungo (Artis et al, 1983).

Estudos para avaliar a influência de fatores genéticos na susceptibilidade à

infecção dermatofítica são controversos. Segundo Wanke et al, em 1991, os grupos

sangüíneos do sistema ABO não influenciaram na infecção dermatofítica em estudo

Introdução

realizado no Rio de Janeiro. Svejgaard et al, em 1983, não encontraram diferenças

significativas na distribuição dos antígenos de histocompatibilidade (HLA-ABC e

HLA-DR) entre pacientes com dermatofitose crônica e o grupo controle. Técnicas

recentes de definição de HLA por DNA genômico detectaram uma associação

negativa do HLA-B14 com a dermatofitose crônica por T. rubrum, ou seja, indivíduos

que expressam esse antígeno seriam mais resistentes à dermatofitose crônica

(Sadahiro, 1997).

C) Hábitos e costumes

A falta de higiene é um dos fatores responsáveis pela transmissão de

infecção por fungos antropofílicos. Essa transmissão pode ser inter-humana ou

através de fômites (lençóis, toalhas, pentes, bonés) (Towersey et al, 1992). O uso de

sapatos fechados e o aumento da frequência em academias de condicionamento

físico (maior prática de esportes) está relacionado ao aumento das tinhas do pé e

das unhas por fungos antropofílicos (Zaitz, Proença, 1989; Aly, 1994; Mercantini et

al, 1996; Marchisio et al, 1996; Gudnadottir et al, 1999; Sigurgeirsson,

Steingrimsson, 2004). Os dermatófitos têm sido isolados não só do pó de

residências de pacientes, mas também do piso de banheiros públicos e piscinas

(Ninomiya et al, 1998).

1.1.3. Características dos fungos filamentosos não dermatófitos

1.1.3.1. Conceito

Dermatomicose é o termo utilizado para denominar as micoses provocadas

por uma variedade de fungos filamentosos não dermatófitos que produzem lesões

na pele, pelo e unhas, clinicamente semelhantes às dermatofitoses (Zaitz, 1998d).

1.1.3.2. Histórico

Gentle, Evans, em 1933, descreveram pela primeira vez a presença de lesões

nas unhas e nos pés provocadas por Hendersonula toruloidea, fungo considerado

não patogênico ao homem (Zaitz, 1998d). Os mesmos autores, em 1970,

descreveram Scytalidium lignicola, hoje denominado Scytalidium dimidiatum, como

Introdução

patógeno humano. Campbell, Mulder, em 1977, observaram uma segunda espécie

de Scytalidium: o Scytalidium hyalinum.

1.1.3.3. Identificação dos fungos filamentosos não dermatófitos

A alteração ungueal provocada pelo Scytalidium dimidiatum ou Scytalidium

hyalinum é indistinguível da alteração ungueal provocada pelos dermatófitos. Os

filamentos de Scytalidium são frequentemente sinuosos com aparência de duplo

contorno e de largura variável, dando um aspecto de pinçamento. É possível

distinguir as hifas dos FFND dos dermatófitos no exame direto das hifas, desde que

o examinador tenha experiência em laboratório de micologia médica (Moore, 1986;

Elewski, Greer, 1991).

Diante de uma suspeita de infecção por Scytalidium, é essencial que se faça

a cultura em meio com e sem cicloheximida. Em meio adequado, ambas as espécies

de Scytalidium crescem rapidamente e ocupam toda a placa de Petri em três dias a

uma temperatura de 26°C. Scytalidium dimidiatum produz um micélio aéreo, fibroso,

inicialmente branco, tornando-se gradativamente cinza e depois negro. Os achados

na microscopia incluem hifas pigmentadas, septadas de várias larguras e cadeias de

artroconídios. Em relação ao Scytalidium hialinum, apresenta colônia clara com hifas

hialinas e artroconídios (Lacaz et al, 2002).

O gênero Aspergillus apresenta algumas espécies importantes: Aspergillus

niger, Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus. A presença de hifas hialinas

septadas na amostra clínica, associada a três amostras de cultura positiva, é um

indicativo de diagnóstico correto. O exame microscópico direto tem pouca utilidade,

pois o fungo pode ser um contaminante. A cultura é feita em Ágar-Sabouraud

dextrose com cloranfenicol sem cicloheximida, 25 a 37°C, a partir do fragmento do

tecido. A colônia é filamentosa, aspecto pulverulento devido à cabeça aspergilar,

podendo ter várias colorações: amarelada, preta, verde entre outras. À microcultura,

aparecem hifas hialinas septadas, conidióforo longo com vesícula globosa na

extremidade, coberta por fiálides que dão origem aos conídios (Lacaz et al, 2002).

No gênero Fusarium o exame micológico direto apresenta-se com hifas

septadas hialinas e ramificadas. A cultura deve ser realizada em Ágar Sabouraud

dextrose sem cicloheximida, apresentando-se como colônia filamentosa branca no

anverso e pigmento róseo, alaranjado ou violeta difundido no reverso. A microcultura

Introdução

caracteriza-se por hifas hialinas, macroconídios septados fusiformes e afilados, além

de microconídios unicelulares ovóides (Lacaz et al, 2002).

O gênero Acremonium também aparece em exame micológico direto com

hifas septadas hialinas e ramificadas e deve ter sua cultura feita em meio Ágar

Sabouraud-dextrose sem cicloheximida, apresentando como características ser

colônia filamentosa de coloração creme, cinza, rósea ou marrom. Na microcultura

observam-se hifas hialinas septadas. Conídios em forma de salsicha, mantendo-se

em pequenos aglomerados devido à substância mucóide (Lacaz et al, 2002).

A espécie Scopulariopsis brevicallius apresenta-se ao micológico direto com

hifas longas e numerosos conídios com paredes espessas em forma de limão. A

cultura também é realizada em meio Ágar Sabouraud-dextrose com cloranfenicol

sem cicloheximida. A colônia apresenta-se com numerosos grãos marrons. Na

microcultura observam-se numerosos conidióforos bifurcados com cadeias em forma

de limão (Tosti et al, 1996).

1.1.3.4. Taxonomia

Embora vários fungos filamentosos não dermatófitos já tenham sido isolados

de unhas, somente algumas espécies são identificadas como agentes de

onicomicose. Estes incluem Scopulariopsis brevicaulis, Fusarium spp, Acremonium

spp, Aspergillus spp, Scytalidium spp e menos frequentemente Onichocola

canadensis (Tosti et al, 2000). Zaitz, em 1998d, citou outros FFND agentes de

onicomicose: Hendersonula toruloidea, Pyrenochaeta ungueum hominis,

Chaetonium globosum Kunze, Chaetoma dermo-unguis sp.

Em um estudo realizado por Bonifaz et al, no México, em 2007, observou-se

78 casos de onicomicose causada por fungo não dermatófito e estavam incluídas

várias espécies entre elas: Scopulariopsis brevicaulis, Aspergillus niger, Aspergillus

terreus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus, Fusarium oxysporum, Fusarium

solani, Cladosporium spp, Alternaria alternata, Curvularia lunata, Cephalosporium

spp (Acremonium spp).

1.1.3.5. Ecologia e epidemiologia

Na realidade nenhum dos fungos filamentosos não dermatófitos é

Introdução

considerado queratinofílico. Todos vivem à custa do cimento intercelular ou da

queratina desnaturada previamente, por trauma ou doença. São considerados

invasores secundários, mas permanecem colonizando ativamente a epiderme (Zaitz,

1998d).

Os FFND fazem parte de um grupo amplo e heterogêneo, que têm seu habitat

em plantas e solos. Alguns autores citam a possibilidade de transmissão

antropofílica de Hendersonula toruloides e Scytalidium hialinum em pacientes que

residem ou visitam áreas em que o fungo é prevalente (Elewski, Greer, 1991). São

considerados como fungos contaminantes, sapróbios e agentes oportunistas, porém

nos últimos anos tem aumentado sua frequência entre as onicomicoses (Gianni et al,

2000).

A prevalência e a ecologia da onicomicose por FFND variam de acordo com a

região geográfica.

1.1.3.6. Onicomicose por FFND e sua patogenia

Uma das questões mais controversas no diagnóstico da onicomicose é como

identificar uma infecção ungueal causada por um fungo filamentoso de

comportamento geralmente sapróbio. Geralmente os fungos sapróbios,

diferentemente dos dermatófitos e de espécies de Scytalidium isoladas em regiões

tropicais, não devem ser considerados patogênicos toda vez que são isolados

(Summerbell, 1997).

Muitos destes fungos, na verdade, são mais comumente vistos como

contaminantes de unhas do que como agentes etiológicos de tais infecções. Devido

a essas questões, são estabelecidos critérios diagnósticos para a infecção ungueal

por fungos oportunistas: o exame micológico direto deve demonstrar formas

invasivas de elementos fúngicos, compatíveis com o fungo isolado; isolar o agente

causal suspeito sucessivamente em duas ou mais ocasiões distintas; ausência de

crescimento de dermatófito ou de Scytalidium spp (Gupta et al, 2001).

A frequência da onicomicose por FFND varia de 2% a 22% nos diferentes

estudos (Ghannoum et al, 2000; Gianni et al, 2000; Gupta et al, 2000c; Tosti et al,

2000; Araújo et al, 2003b). Em uma revisão realizada por Crespo, em 2002, dos 319

pacientes estudados em Málaga, 7,5% deles apresentavam onicomicose causada

por FFND. Segundo este mesmo autor, os principais agentes encontrados foram:

Introdução

S. brevicaulis, Aspergillus sydowii, Acremonium spp e Fusarium spp.

1.1.4. Características das leveduras

1.1.4.1. Conceito

Geralmente, as leveduras do gênero Candida são agentes de onicomicose

causadas pelas leveduras.

1.1.4.2. Histórico

Em 1842, Gruby já descrevia o sapinho das crianças. Robin, em 1853,

descreveu o parasita como sendo Oidium albicans, denominação que perdurou

muito tempo juntamente com a de Monilia albicans. Foi em 1923 que Berkhout criou

o gênero Candida, que é aceito até hoje (Carvalhaes, 2000).

1.1.4.3. Identificação das leveduras

Nas onicomicoses por Candida spp, o exame direto do material clínico pode

ser realizado com potassa (KOH) ou coloração pelo método de Gram (são Gram

positivas), onde são observados blastoconídios com brotamento único e pseudo-

hifas. A presença de células leveduriformes somente, mesmo que em abundância,

pode significar meramente colonização (Summerbell, 1997).

Na cultura, as várias espécies de Candida desenvolvem-se em meio Ágar-

Sabouraud-dextrose, acrescido de antibacterianos, apresentando-se como colônias

com coloração de branca a creme, cuja consistência é cremosa. Nas bordas e no

reverso do meio de cultura, é visualizado um aspecto arborescente, que

microscopicamente, corresponde à presença de pseudo-hifas (pseudomicélio ou

micélio gemulante). Segundo Elewski, em 1998, o resultado da cultura deve ser

interpretado com cautela, já que as unhas não são estéreis e fungos contaminantes

podem obscurescer o verdadeiro patógeno ungueal.

Para identificar a Candida albicans podem-se usar duas provas morfológicas:

a formação do tubo germinativo (efeito Reynolds-Braude) que é simples, rápida e

realizada em soro fetal bovino e a presença de clamidósporos que são esporos

Introdução

arredondados, parede dupla, isolados ou grudados à parede da pseudohifa,

cultivados em meio rico em amido.

1.1.4.4. Taxonomia

O gênero Candida compreende mais de uma centena de espécies, das quais

somente oito possuem verdadeira importância como patógenos para a espécie

humana:

• Candida (Torulopsis) glabrata

• Candida krusei

• Candida kefyr

• Candida guilliermondii

• Candida parapsilosis

• Candida tropicalis

• Candida lusitaniae

Das espécies citadas, apenas quatro tem teleomorfos conhecidos, todos do

filo Ascomycota: Issatchenkia orientalis (C. krusei), Kluyveromyces marxianus (C.

kefyr), Pichia guilliermondii (C. guilliermondii) e Clavispora lusitania (C. lusitaniae)

(Guillot, 1996; Crespo et al, 2006).

1.1.4.5. Ecologia e epidemiologia

A Candida albicans é a espécie mais isolada nos quadros patológicos, e

também é a mais comum como simples sapróbio em todas as localizações do corpo

humano, em particular o aparelho digestivo (0-55%), a vagina (2-68%) e a cavidade

oral (2-41%) (Odds, 1988).

A distribuição das leveduras do gênero Candida é muito ampla, tanto no meio

ambiente como fazendo parte da microbiota normal do homem, acometendo

mucosas, pele e anexos. São consideradas cosmopolitas. Frequentemente isolam-

se várias espécies de Candida da microbiota normal da boca, dobras da pele,

orofaringe, intestino, vagina e escarro. A Candida albicans pode estar presente em

solo e água, quando estes são contaminados por dejetos humanos e de animais.

(Zaitz, 1998c).

Introdução

A incidência é muito variável, desde porcentagens baixas nos indivíduos

imunocompetentes, até índices superiores a 50%, dependendo do estado de saúde

do paciente, alimentação e meio sócio-econômico em que vive (Carvalhaes, 2000).

A C. parapsilosis é frequentemente isolada na região ungueal, tanto em

condições normais como em onicomicoses (Ceballos, 2006).

1.1.4.6. Patogenia das candidoses

A candidíase é uma infecção de origem endógena, já que o paciente é o

portador de seu agente causal. Ela expressa muito bem a variedade completa de

relações que ocorrem entre o hospedeiro e a microbiota autócne, ou seja, do

comensalismo à doença sistêmica.

As manifestações de virulência dos fungos oportunistas estão intimamente

relacionadas com a presença de fatores predisponentes intrínsecos do paciente

como a idade avançada, prematuridade, gravidez, neoplasias, hemopatias, fatores

genéticos deficiências congênitas de ferro e zinco, endocrinopatias, avitaminoses,

tuberculose, Aids, aumento da sobrevida de doentes graves e fatores extrínsecos

como: antibacterianos, uso de anticoncepcional, corticóides, agentes neoplásicos,

intervenções cirúrgicas, umidade, maceração cutânea, trauma nas unhas, sapatos

apertados e não arejados, uso de piscinas públicas, ginásios ou duchas

comunitárias (Levy, 1997; Zaitz, 1998c; Baran, Kaukhov, 2005). Deve-se levar em

consideração também os fatores de virulência das leveduras como o fenômeno de

aderência, a forma miceliana, a variabilidade fenotípica, a produção de enzimas

extracelulares (proteases e lípases), as toxinas, entre outros que favorecem ao

aparecimento da doença (Levy, 1997; Zaitz, 1998c; Sampaio, Rivitti, 2001).

1.1.4.7. Onicomicoses provocadas por leveduras

As leveduras são componentes da microbiota normal de mucosas, pele e

anexo, e até há pouco tempo eram consideradas agentes contaminantes, sem

importância clínica. Porém, na atualidade têm sido consideradas responsáveis por

número expressivo de casos de onicomicose.

A Candida albicans tem apresentado importância significativa, considerada

patógeno primário em onicólise de unhas das mãos, particularmente em pacientes

Introdução

portadores de doença vascular periférica e Síndrome de Cushing (Hay et al, 1988). A

onicomicose da mão é mais diagnosticada do que a infecção do pé por chamar mais

a atenção médica, mas certamente é menos frequente (Gupta et al, 1997a).

Segundo Gupta et al, em 2004, as espécies mais comumente isoladas nas

onicomicoses provocadas por leveduras são C.albicans e C.parapsilosis. De acordo

com alguns estudos, as leveduras foram responsáveis por 1,7 a 2,8% dos casos de

onicomicose nos pododáctilos e variando de 50 a 84,4% dos casos nos quirodáctilos

(Gupta et al, 1997a; Lopes et al, 1999).

Estudos realizados em Roma (Mercantini et al, 1996), na Líbia (Ellabib et al,

2002) e na cidade do Rio de Janeiro (Araújo et al, 2003a), as onicomicoses

causadas por leveduras representaram 75%, 59,10% e 49,10% respectivamente.

Araújo et al (2003b) e Martelozzo et al (2005) isolaram leveduras em 26,1% e

37% das onicomicoses dos pododáctilos e em 93,4% e 76% dos quirodáctilos

respectivamente.

A onicomicose por leveduras costuma associar-se a infecções cutâneas,

paroníquias e candidíase mucocutânea, sendo muitas vezes considerada infecção

secundária (Baran, Kaoukhov, 2005; Oliveira et al, 2006). A onicomicose por

leveduras é mais prevalente no sexo feminino do que o masculino com incidência

maior entre 40 e 60 anos de idade (Souza et al, 2007).

Em estudo recente Souza et al, em 2007, descreveram as seguintes espécies

de leveduras como agentes de onicomicose, em 353 amostras isoladas em Maringá

no período de 1997 a 2004: Candida albicans, Candida famata, Candida glabrata,

Candida guilliermondii, Candida krusei, Candida lypolitica, Candida lusitaniae,

Candida parapsilosis, Candida rugosa Candida stellatoidea, Candida tropicalis,

Geotrichum candidum, Malassezia pachydermatis, accharomyces cerevisiae,

Trichosporon asahii, Trichosporon inkin, Trichosporon mucoides, Trichosporon

ovóides.

1.1.5. Características das algas do gênero Prototheca

1.1.5.1. Conceito

A Ficologia médica é o estudo das algas que provocam doença nos homens e

nos animais. As algas procariotas são representadas pelas algas azuis da

Introdução

subdivisão Cyanophyta. As algas eucariotas são representadas por várias divisões,

com destaque maior para Clorophyta, que englobam as algas verdes (Chlorella) e as

aclorofiladas (Prothoteca). As algas do gênero Prototheca pertencem ao Reino

Protista.

Prototecoses são infecções causadas por algas do gênero Prototheca, família

Chlorellaceae. As prototecas diferenciam-se das clorelas pela ausência de

cloroplastos e grânulos citoplasmáticos. São, portanto, aclorofiladas e heterotróficas,

requerendo fontes externas de Carbono e Nitrogênio. A prototecose afeta homens e

animais, localizando-se com maior frequência em pele e subcutâneo, podendo haver

disseminação sistêmica (Zaitz, 1998e).

1.1.5.2. Histórico

Kruger, em 1894, isolou microorganismos unicelulares não-pigmentados na

seiva de árvores. Foram classificados como leveduras e denominados prototecas.

Em 1916, West reclassificou-as como algas, pois seus esporos são

produzidos por septação interna como as clorelas. Davies e colaboradores, em

1964, descreveram o primeiro caso de prototecose no homem, em um trabalhador

de arroz na África. O agente isolado foi a Prototheca zopfii (Zaitz, 1998e).

1.1.5.3. Taxonomia

As algas do gênero Prototheca são unicelulares, esféricas, medindo de 1,2-

13,4 µm a 1,3-16,1 µm. A reprodução é assexuada por septação interna com

produção de endósporos, dando o aspecto característico de mórula ou esporângio.

Foram identificadas quatro espécies do gênero:

• Prototheca zopfii

• Prototheca moriformes

• Prototheca wickerhamii

• Prototheca stagnora

Alguns autores consideram a P. moriformes como uma variante da P. zopfii.

Nas infecções em homens e animais, só foram isoladas P. zopfii e P. wickerhamii

(Zaitz, 1998e).

Introdução

1.1.5.4. Identificação

O exame microscópico direto é pouco utilizado, pois as formas unicelulares

são facilmente confundidas com leveduras. Ele pode ser realizado a partir de

secreções coletadas nas lesões ou imprint em lâmina de fragmento de biópsia.

Além do exame direto, o material também é semeado em Ágar-Sabouraud-

dextrose sem cicloheximida, em temperatura variando de 25 a 37°C. Após 48 horas

já é possível visualizar a colônia. O exame histopatológico, corado por PAS, Gomori

ou Gridley, mostra hiperplasia pseudo-epiteliomatosa com reação granulomatosa

crônica e pequena resposta inflamatória. A Prototheca é facilmente encontrada nos

cortes, geralmente na derme papilar. Apresenta-se nas formas unicelular, células

com septação interna e esporângio ou mórula.

P. zopfii (Kruger, 1894): na cultura apresenta-se como colônia leveduriforme

branca. Na microscopia ocorrem autosporos esféricos, medindo de 9 a 11 um;

esporângios medindo de 14 a 25 um. É capaz de assimilar n-propanol.

P. wickerhamii (Tubaki, Soneda, 1959): na cultura apresenta-se como colônia

leveduriforme creme. Na microscopia ocorrem autósporos esféricos menores (4 a 5

um) e mais numerosos (acima de 50 por teça). Esporângios variam de 7 a 13 um. É

capaz de assimilar trealose.

P. stagnora (Cooke, 1918): na cultura apresenta-se como colônia branca

mucóide, não cresce a 37°C. Na microscopia ocorrem células elipsóides, tamanhos

semelhantes aos da P.wickerhamii, presença de cápsula. Assimila sacarose (Zaitz,

1998e).

1.1.5.5. Ecologia e epidemiologia

As algas do gênero Prototheca têm distribuição universal, tendo sido isoladas

no solo, água (esgoto doméstico, piscina, rios, águas de chuva) e animais (bovinos,

ovinos, suínos, felinos e caninos). No homem há relato do encontro da prototeca na

pele, no trato gastrointestinal, na urina, e no escarro, sem, contudo provocar

infecção. Nesses casos é considerada como biota transitória adquirida de fontes

contaminadas.

A infecção ocorre por inoculação do agente através de traumas, laceração de

partes moles, cirurgias e exposição profissional. As formas sistêmicas estão

Introdução

associadas à imunodeficiência do hospedeiro (Zaitz, 1998e).

1.1.5.6. Patogenia e quadro clínico

A patogênese é incerta, uma vez que a Prototheca spp tem prevalência

extensa na natureza e a infecção é rara. A virulência é baixa em indivíduos

imunocompetentes. Infecção experimental em animais é raramente obtida,

dificultando os estudos mais aprofundados.

A apresentação clínica mais frequente é a cutânea, caracterizada por lesões

únicas ou múltiplas, geralmente em áreas expostas. Desencadeadas por traumas,

as lesões tem evolução lenta. São observados pápulas, nódulos, ulcerações, lesões

granulomatosas ou herpetiforme. A infecção oportunista costuma acometer

pacientes transplantados renais, diabéticos (Zaitz, 1998e).

Nas unhas apresenta-se clinicamente com hiperceratose subungueal de

coloração amarelada. A patogenicidade e a virulência da Prototheca spp são

moderadas e ela é considerada rara como agente oportunista. Amostras isoladas

podem indicar colonização transitória não patogênica, mas isolamentos repetidos

indicam patogenicidade (Zaitz et al, 2006).

2. OBJETIVOS

Objetivos

Os objetivos deste trabalho foram:

1- Analisar a sensibilidade dos métodos de diagnóstico laboratorial para as

onicomicoses no Laboratório de Micologia Médica da Clínica de

Dermatologia da Santa Casa de São Paulo.

2- Analisar a distribuição dos casos de onicomicose de acordo com os

principais agentes etiológicos: dermatófitos, fungos filamentosos não

dermatófitos (FFND), leveduras e protistas.

3- Analisar a distribuição dos casos de onicomicose em relação aos dados

demográficos: sexo e idade.

4- Analisar a possível variação sazonal dos casos em relação aos principais

agentes etiológicos.

3. CASUÍSTICA E MÉTODO

Casuística e Método

Identificação do Agente Etiológico

5407 pacientes com suspeita clínica de onicomicose

foram encaminhados Laboratório de Micologia

no período de janeiro de 2002 a dezembro de 2006

3.822 confirmaram diagnóstico laboratorial de onicomicose

Idade

Sexo

Dados

Demográficos

Exame

Microscópico

Direto

e/ou

Cultura

Estudo

Macroscópico

Dermatofitos

Leveduras

FFND

Protista

Estudo

Microscópico

Dermatofitos

Leveduras

FFND

Protista

Distribuição

onicomicose

Ano

Estação do ano

Faixa Etária

Sexo

Localização

Agente Etiológico

3.1. Considerações gerais

Trata-se de um estudo descritivo realizado na Clínica de Dermatologia da

Santa Casa de São Paulo, através da revisão dos resultados de exames micológicos

realizados no período de janeiro de 2002 até dezembro de 2006.

Todos os pacientes atendidos no ambulatório de Dermatologia que

apresentam, entre as hipóteses diagnósticas, suspeita clínica de onicomicose são

submetidos ao exame micológico para confirmação do diagnóstico de onicomicose.

Os reagentes, meios de culturas, equipamentos e material de consumo

utilizados na rotina do laboratório de micologia médica da Clínica de Dermatologia

da Santa Casa de São Paulo estão relacionados no Anexo A. As fórmulas estão

indicadas no Anexo B e as descrições de técnicas e testes biológicos encontram-se

no Anexo C.

Casuística e Método

A seguir, descreveremos a metodologia utilizada no Laboratório de Micologia

Médica da Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo para a realização

dos exames micológicos.

3.2. Procedimentos laboratoriais

3.2.1. Exame microscópico direto

O material é obtido através de raspagem das escamas com um explorador

dentário, uma cureta de unhas e examinado entre lâmina e lamínula após

clarificação com hidróxido de potássio a 20%, adicionado de dimetil-sulfóxido (Anexo

B). Os elementos fúngicos são identificados de acordo com a sua forma parasitária:

1- Presença de hifas septadas hialinas são considerados característicos de

dermatófitos e/ou fungos filamentosos não dermatófitos hialinos (Fig.1a).

Figura 1a- Exame microscópico direto (KOH 20% + DMSO)- presença

de hifas septadas hialinas características de dermatófitos

e/ou fungos filamentosos não dermatófitos hialinos (FFND).

2- Presença de hifas septadas demáceas são considerados característicos fungos

filamentosos não dermatófitos demáceos (Fig.1b).

Casuística e Método

Figura 1b- Exame microscópico direto (KOH 20% + DMSO) presença

de hifas septadas demáceas características de fungos

filamentosos não dermatófitos demáceos (FFND).

3- Presença de células leveduriformes e pseudofilamentos ou pseudohifas

característicos de leveduras (Fig. 2)

Figura 2- Exame microscópico direto (KOH 20% + DMSO) - presença de

células leveduriformes e pseudo- filamentos ou pseudohifas.

4- Presença de estruturas em forma de mórula sugestivas de prototeca (Fig. 3)

(Lacaz et al, 2002; Zaitz et al, 2006).

Casuística e Método

Figura 3- Exame microscópico direto (KOH 20% + DMSO)- presença de

estruturas em forma de mórula (seta).

3.2.2. Cultura

3.2.2.1. Isolamento e identificação dos dermatófitos

3.2.2.1.1. Aspectos macroscópicos

Os meios de cultivos para isolamento e análise morfológica das espécies de

dermatófitos são os meios de Sabouraud com cloranfenicol e de Sabouraud com

cicloheximida. Em nosso laboratório, o material é semeado em três tubos dos meios

citados e o tempo de crescimento dos dermatófitos é observado em torno de 15 dias

para que possa ocorrer maturação completa das estruturas fúngicas (Lacaz et al,

2002; Sidrim, Rocha, 2004) (Fig. 4).

3.2.2.1.2. Aspectos microscópicos

Utiliza-se a técnica de microcultivo em lâmina e testes biológicos para a

identificação e determinação do gênero e da espécie dos dermatófitos (Anexo C)

(Fig. 4).

Casuística e Método

Trichophyton rubrum

Trichophyton mentagrophytes

Trichophyton tonsurans

Figura 4- Aspectos macroscópicos e microscópicos dos dermatófitos.

Casuística e Método

3.2.2.2. Isolamento e identificação dos fungos filamentos não

dermatófitos (FFND)

3.2.2.2.1. Aspectos macroscópicos

O meio de cultivo utilizado para isolamento e análise morfológica das

espécies de FFND é o meio de Sabouraud com cloranfenicol. Em nosso laboratório,

o material é semeado em três tubos de ensaio dos meios citados e o tempo de

crescimento dos FFND é observado em torno de 15 dias para que possa ocorrer

maturação completa das estruturas fúngicas (Lacaz et al, 2002; Sidrim, Rocha,

2004) (Fig. 5).

O FFND é um fungo saprófita e só é considerado como agente etiológico de

onicomicose quando o isolamento ocorre nas seguintes condições estabelecidas no

nosso laboratório: primeira coleta de material clínico e isolamento do FFND;

segunda coleta de material clínico ocorre após sete dias da primeira coleta e novo

isolamento do FFND e terceira coleta de material clínico após sete dias da segunda

coleta e novo isolamento do FFND.

3.2.2.2.2. Aspectos microscópicos

Utiliza-se a técnica de microcultivo em lâmina para a identificação e

determinação do gênero e da espécie dos fungos filamentosos não dermatófitos

(Anexo C) (Fig. 5).

Casuística e Método

Aspergillus spp

Fusarium spp

Acremonium spp

Figura 5- Aspectos macroscópicos e microscópicos dos fungos filamentosos não dermatófitos

(FFND).

Casuística e Método

3.2.2.3. Isolamento e identificação das leveduras

3.2.2.3.1. Aspectos macroscópicos

O meio de cultivo para isolamento e análise morfológica das espécies de

leveduras é o meio de Sabouraud com cloranfenicol. O tempo de crescimento das

leveduras é observado em torno de sete dias para que possa ocorrer maturação

completa das estruturas fúngicas. O aspecto macroscópico da levedura é de

consistência cremosa com coloração de branca a creme (Lacaz et al, 2002; Sidrim,

Rocha, 2004) (Fig. 6).

3.2.2.3.2. Aspectos microscópicos

Utiliza-se a técnica de microcultivo em lâmina com meio de cultivo com ágar–

fubá para a identificação e determinação do gênero e da espécie das leveduras

(Lacaz et al, 2002; Sidrim, Rocha, 2004).

A Candida albicans caracteriza-se pela presença de clamidoconídios ou

clamidosporos, esporos arredondados, de parede dupla, isolados ou agrupados na

extremidade das pseudohifas (Fig. 6).

O gênero Trichosporon caracteriza-se pela presença de esporos

arredondados com ou sem gemulação simples e artroconídeos (Fig. 6).

Casuística e Método

Candida albicans

Trichosporon spp

Figura 6- Aspectos macroscópicos e microscópicos das leveduras.

3.2.2.4. Isolamento e identificação do gênero Prototheca

3.2.2.4.1. Aspectos macroscópicos

O meio de cultivo para isolamento e análise morfológica das espécies é o

meio de Sabouraud com cloranfenicol. O tempo de crescimento da Prototheca spp é

observado em torno de sete dias. O aspecto macroscópico da Prototheca spp é de

consistência cremosa com coloração de branca a creme (Lacaz et al, 2002; Sidrim,

Rocha, 2004) (Fig. 7).

Casuística e Método

3.2.2.4.2. Aspectos microscópicos

Retira-se um inóculo da cultura a ser identificada e coloca-se em lâmina com

corante lacto-fenol azul de algodão e observa-se as estruturas em forma de mórula

(Fig. 7). A identificação das espécies é realizada através de testes bioquímicos

(Lacaz et al, 2002; Sidrim, Rocha, 2004).

Prototheca wickerhami

Figura 7- Aspectos macroscópicos e microscópicos do gênero Prototheca.

3.3. Análise estatística

Para a análise dos resultados, foi utilizado o teste qui-quadrado no MINITAB

14 e as tabelas em EXCEL 2007, para a caracterização da amostra de material

clínico obtido de unhas de pacientes com suspeita de onicomicose, para avaliar a

associação entre as variáveis idade, sexo, resultado do exame, local acometido,

estação do ano, ano e agente etiológico. Em todos os testes, fixou-se em 0,05 o

nível de significância.

4. RESULTADOS

Resultados

4.1. Caracterização das amostras estudadas

4.1.1. Exame microscópico direto e cultura

No período compreendido entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006, foram

realizados 5.407 exames micológicos com suspeita clínica de onicomicose de 3.541

pacientes de qualquer idade, sexo e cor, que foram analisados segundo exame

microscópico direto e/ou cultura. Desse total de exames, 71% (3.822/5.407) foram

positivos para diagnóstico laboratorial de onicomicose. Dos exames micológicos

restantes que foram analisados, 29% (1.585 / 5.407) foram negativos (Gráfico 1).

Gráfico 1- Resultados dos exames analisados (exame microscópico direto e/ou

cultura) em pacientes com diagnóstico clínico de onicomicose no

laboratório de Micologia da Clínica de Dermatologia da Santa Casa

de São Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

No Gráfico 2 podemos observar a distribuição dos exames micológicos

analisados, a partir dos casos de onicomicose confirmados laboratorialmente através

dos exames microscópico direto e cultura.

Resultados

Gráfico 2- Distribuição dos 3.822 exames microscópicos diretos e culturas em pacientes com

diagnóstico clínico de onicomicose no laboratório de Micologia da Clínica de

Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro

de 2006.

4.1.2. Onicomicose – faixa etária e sexo

Em relação à faixa etária, podemos observar na tabela abaixo que das 3.822

amostras com diagnóstico de onicomicose, 60% (2.287/3.822) apresentam dados de

idade, com a idade mínima de três meses (0,25 anos) e a idade máxima de 98 anos.

A idade média foi de 46,9 anos, com desvio padrão de ± 17,02; observando-se um

coeficiente de variação de 36,3%, concluindo-se que a medida mais representativa

da idade desta população seria a mediana: 47 anos de idade (Tab. 1).

Tabela 1- Análise descritiva da faixa etária das amostras dos pacientes com

diagnóstico clínico e laboratorial de onicomicose no laboratório de

Micologia da Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no

período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

FAIXA ETÁRIA

Média 46,9

Mediana 47,0

Moda 47,0

Desvio Padrão 17,02

Mínimo 0,25

Máximo 98

Nº de Amostras 2.287

Resultados

O Gráfico 3 mostra a distribuição do total das amostras dos pacientes

analisados em relação à faixa etária. A maioria das amostras dos pacientes (60%)

encontra-se na faixa etária de 31 a 60 anos.

Gráfico 3- Distribuição da faixa etária das amostras dos pacientes com diagnóstico clínico e

laboratorial de onicomicose no laboratório de Micologia da Clínica de Dermatologia da

Santa Casa de São Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

No Gráfico 4 analisamos a faixa etária por intervalos: 0 a 10 anos

representando a infância (1%), de 11 a 60 anos representando os jovens e adultos

(76%) e acima de 60 anos ( 23%) os idosos.

Resultados

Gráfico 4- Distribuição da faixa etária em: infância, jovens/adultos e idosos,das amostras

dos pacientes com diagnóstico clínico e laboratorial de onicomicose, no

laboratório de Micologia da Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São

Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

Pode-se observar no Gráfico 5, a distribuição em relação ao sexo dos 3.822

exames micológicos positivos para diagnóstico laboratorial de onicomicose. 2.527

pacientes eram do sexo feminino (66%) e 1.295 do sexo masculino (34%).

Gráfico 5- Distribuição em relação ao sexo das amostras dos pacientes com

diagnóstico clínico e laboratorial de onicomicose, no laboratório de

Micologia da Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo

no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

Resultados

Na Tabela 2 observa-se a distribuição segundo a faixa etária e sexo nos

casos de onicomicose.

Tabela 2- Distribuição das amostras dos pacientes com diagnóstico clínico e

laboratorial de onicomicose no laboratório de Micologia da Clínica de

Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período entre janeiro de

2002 e dezembro de 2006 quanto à faixa etária e sexo

RESULTADO POSITIVO

Faixa Etária Feminino Masculino Total %

0 - 10 8 16 24 1,05%

11 - 20 65 38 103 4,50%

21 - 30 165 106 271 11,85%

31 - 40 207 141 348 15,22%

41 - 50 391 122 513 22,43%

51 - 60 345 150 495 21,64%

61 - 70 196 90 286 12,51%

71 - 80 124 80 204 8,92%

81 - 90 34 6 40 1,75%

91 - 100 3 3 0,13%

Total 1538 749 2287 100%

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, feito para avaliar a associação entre as

variáveis resultado positivo do exame e faixa etária dos pacientes por sexo, mostrou

que existe diferença (p<0,0001) entre a porcentagem de resultado positivo

encontrado em relação à faixa etária dos pacientes por sexo, para o nível de

significância adotado, ou seja, a maior incidência de resultados positivos é na faixa

de 31 a 60 anos para o sexo feminino.

4.1.3. Onicomicose – estação do ano e distribuição anual

A distribuição das onicomicoses em relação a estação do ano está

demonstrada no Gráfico 6, não havendo alteração significativa.

Resultados

p = 0,999 p < 0,05 significativo

Gráfico 6- Distribuição quanto a estação do ano em relação diagnóstico clínico e

laboratorial das onicomicoses no laboratório de Micologia da Clinica de

Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período de Janeiro de 2002

a Dezembro de 2006.

A distribuição das onicomicoses em relação a sua ocorrência anual está

demonstrada no Gráfico 7. Pelo total de amostras (distribuídas de acordo com o ano

em que o material foi coletado), podemos verificar que no ano de 2003, houve mais

casos confirmados de onicomicose.

p = 0,999 p < 0,05 significativo

Gráfico 7- Distribuição quanto ao ano que foi realizado o diagnóstico clínico e laboratorial das

onicomicoses no laboratório de Micologia da Clinica de Dermatologia da Santa Casa

de São Paulo no período de janeiro de 2002 a dezembro de 2006.

Resultados

4.1.4. Localização das onicomicoses

Em relação a localização das onicomicoses podemos observar na Tabela 3

que 3.822 exames analisados que foram positivos para diagnóstico laboratorial de

onicomicose, 99,5% (3.806) apresentaram estes dados. A região do corpo mais

acometida foios pés com 71% (2.716/3.806) e as mãos com 29% (1.090/3.806).

Tabela 3- Distribuição das amostras de pacientes com onicomicoses em relação ao

local acometido na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo

o período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

RESULTADO POSITIVO

Local acometido

N %

Mão 1.090 29,00

Pé 2.716 71,00

Total 3.806 100,00

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis resultado positivo do exame e local acometido, demonstrou a diferença

(p<0,0001) entre a porcentagem de resultado positivo encontrado quanto ao local

acometido, para o nível de significância adotado, ou seja, a maior incidência de

resultados positivos está localizado nos pés.

Em relação a localização das onicomicoses, elas acometeram apenas as

unhas das mãos em 17% (653/3.806), apenas os pés em 59% (2.256/3.806) e

associação pé/mãos 24% (897/3.806), como demonstrado na Tabela 4.

Tabela 4- Distribuição das amostras dos pacientes com onicomicoses em relação

ao local acometido, no laboratório de Micologia Médica da Clínica de

Dermatologia da Santa Casa de São Paulo o período entre janeiro de

2002 e dezembro de 2006.

RESULTADO POSITIVO

Local acometido

N %

Apenas mão 653 17,00

Apenas pé 2256 59,00

Pé/Mão 897 24,00

Total 3.806 100,00

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

Resultados

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis resultado positivo do exame e local acometido, demonstrou que existe

diferença (p<0,0001) entre a porcentagem de resultado positivo encontrado quanto

ao local acometido, para o nível de significância adotado, ou seja, a maior incidência

de resultados positivos está localizada apenas nos pés.

A Tabela 5 demonstra a distribuição dos pacientes com onicomicoses com

acometimento apenas das mãos: mão direita estava acometida em 34% das vezes

(368/1.090), mão esquerda em 27% (294/1.090), associação mão direita e esquerda

em 3% (35/1.090) e não informado em 36% (393/1.090).

Tabela 5- Distribuição das amostras dos pacientes com onicomicoses em relação ao

lado acometido na mão na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de

São Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

RESULTADO POSITIVO

Local acometido

Lado N %

Mão Não informado 393 36,00

Mão Direito 368 34,00

Mão Direito/Esquerdo 35 3,00

Mão Esquerdo 294 27,00

Total Mão 1.090 100,00

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis resultado positivo do exame e o lado acometido nas mãos, demonstrou a

diferença (p < 0,0001) entre a porcentagem de resultado positivo encontrado quanto

ao lado acometido nas mãos, para o nível de significância adotado, ou seja, a maior

incidência de resultados positivos está localizada no lado direito das mãos,

considerando o lado identificado.

Dos dados obtidos em relação ao acometimento das unhas das mãos e pés

(3.806 casos), observamos apenas em 28,6% dos casos (1.090/3.806) informações

sobre os quirodáctilos mais acometidos. A unha do primeiro quirodáctilo das mãos é

mais acometida com 18% (191/1.090), outros quirodáctilos acometidos com 13%

(140/1.090) e a associação do primeiro quirodáctilo e outros quirodáctilos com 1%

(16/1.090) (Tab. 6).

Resultados

Tabela 6- Distribuição das amostras dos pacientes com onicomicoses em relação a

frequência da unhas das mãos mais acometidas na Clínica de

Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período entre janeiro de

2002 e dezembro de 2006.

RESULTADO POSITIVO

Mão – Unhas acometidas

N %

Primeiro quirodáctilo apenas 191 18,00

Primeiro quirodáctilo e outros 16 1,00

Outros quirodáctilos 140 13,00

Quirodáctilo não identificado 743 68,00

Total 1.090 100,00

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis resultado positivo do exame e frequência da unhas das mãos mais

acometidas, demonstrou a diferença (p < 0,0001) entre a porcentagem de resultado

positivo encontrado quanto à frequência da unhas das mãos mais acometidas, para

o nível de significância adotado, ou seja, a maior incidência de resultados positivos

está localizada no primeiro quirodáctilo, considerando os quirodáctilos identificados.

A Tabela 7 mostra a distribuição dos pacientes com onicomicose e

acometimento apenas dos pés: pé direito com 25% (678/2.716), pé esquerdo com

20% (547/2.716), associação dos pés direito e esquerdo com 6% (155/2.716) e não

informado com 49% (1.336/2.716).

Tabela 7- Distribuição das amostras dos pacientes com onicomicoses em relação ao

lado acometido do pé, na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São

Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

RESULTADO POSITIVO

Local acometido

Lado N %

Pé Não informado 1336 49,00

Pé Direito 678 25,00

Pé Direito/Esquerdo 155 6,00

Pé Esquerdo 547 20,00

Total Pé 2.716 100,00

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

Resultados

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis resultado positivo do exame e o lado acometido nos pés, demonstrou que

existe diferença (p<0,0001) entre a porcentagem de resultado positivo encontrado

quanto ao lado acometido nos pés, para o nível de significância adotado, ou seja, a

maior incidência de resultados positivos está localizada no lado direito dos pés,

considerando o lado identificado.

Dos dados obtidos em relação ao acometimento das unhas das mãos e pés

(3.806 casos), observamos apenas em 71% (2.716/3.806) informações sobre os

pododáctilos mais acometidos. A unha do primeiro pododáctilo foi a mais acometida

com 23,1% (627/2.716), outros pododáctilos acometidos com 4,1% (110/2.716), a

associação do primeiro pododáctilo e outros pododáctilos com 0,3% (9/2.716) e

pododáctilo não identificado com 72,5% (1.970/2.716) (Tab. 8).

Tabela 8- Distribuição das amostras dos pacientes com onicomicoses em relação a

frequência das unhas dos pés mais acometidas na Clínica de

Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período entre janeiro de

2002 e dezembro de 2006.

RESULTADO POSITIVO

Pé – Unhas acometidas

N %

Primeiro pododáctilo apenas 627 23,10

Primeiro pododáctilo e outros 9 0,30

Outros pododáctilos 110 4,10

Pododáctilo não identificado 1970 72,50

Total 2.716 100,00

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis resultado positivo do exame e frequência da unhas dos pés mais

acometidas, demonstrou a diferença (p < 0,0001) entre a porcentagem de resultado

positivo encontrado quanto à frequência da unhas dos pés mais acometidas, para o

nível de significância adotado, ou seja, a maior incidência de resultados positivos

está localizada no primeiro pododáctilo, considerando os pododáctilos identificados.

Resultados

4.1.5. Identificação dos agentes etiológicos das onicomicoses

4.1.5.1. Agentes etiológicos das onicomicoses por grupos

A porcentagem de isolamento em cultura e identificação dos agentes

etiológicos foi de 66% (1.428/2.162) das amostras estudadas. A distribuição ocorreu

da seguinte maneira: dermatófitos com 68,6% (980/1.428), FFND com 2,2%

(31/1.428), leveduras com 27,5% (393/1.428), Prototheca spp com 0,1% (2/1.428) e

associações entre os agentes etiológicos como: dermatófio + levedura 1,1%

(16/1.428), FFND + levedura 0,4% (5/1.428), leveduras de gênero diferentes 0,1%

(1/1.428) (Gráfico 8).

Gráfico 8- Distribuição dos grupos dos agentes etiológicos isolados das amostras dos

pacientes com onicomicoses na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de

São Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

4.1.5.2. Agentes etiológicos das onicomicoses – gêneros e espécies

A Tabela 9 mostra os principais agentes etiológicos em relação ao gênero e

as espécies, em amostras de pacientes com onicomicose. O dermatófito mais

frequente foi o Trichophyton rubrum com 55,7% (796/1.428), o FFND mais frequente

foi o Fusarium spp com 1,6% (23/1.428), das leveduras observamos o gênero

Candida com 27,2% (388/1.428), e Prototheca spp com 0,1% (2/1.428).

Resultados

Tabela 9- Distribuição dos gêneros e espécies isolados das amostras dos pacientes

com onicomicose na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São

Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

AGENTE ETIOLÓGICO

NÚMERO DE AMOSTRAS

PORCENTAGEM

Dermatófito 980 68,6%

Epidermophyton floccosum

2 0,1%

Microsporum gypseum

3 0,2%

Trichophyton raubistscheckii

1 0,1%

Trichophyton mentagrophytes

97 6,8%

Trichophyton rubrum

796 55,7%

Trichophyton spp

45 3,2%

Trichophyton tonsurans

36 2,5%

Dermatófito + Levedura 16 1,1%

Trichophyton tonsurans e Candida spp

5 0,4%

Trichophyton mentagrophytes e Candida spp

1 0,1%

Trichophyton rubrum e Candida spp

9 0,6%

Trichophyton spp e Candida spp

1 0,1%

FFND 31 2,2%

Acremonium spp

1 0,1%

Aspergillus spp

1 0,1%

Fusarium spp

23 1,6%

Scytalidium hyalinum

6 0,4%

FFND + Levedura 5 0,4%

Fusarium spp e Candida spp

5 0,4%

Levedura 394 27,6%

Candida spp

388 27,2%

Trichosporon spp

5 0,4%

Trichosporon spp e Candida spp

1 0,1%

Protista 2 0,1%

Prototheca spp 2

0,1%

Total 1428 100,0%

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis resultado positivo do exame e o tipo de agente etiológico, demonstrou a

diferença (p<0,0001) entre a porcentagem de resultado positivo encontrado quanto

ao tipo de agente etiológico, para o nível de significância adotado, ou seja, a maior

incidência de resultados positivos refere-se aos dermatófitos.

Resultados

4.1.5.3. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses - grupos e

faixa etária das amostras

A Tabela 10 mostra os principais agentes etiológicos relacionados ao grupo

etário mais específico das amostras dos pacientes com onicomicose (a relação

grupo etário X agente etiológico em 878 casos).

Tabela 10- Distribuição dos grupos dos agentes etiológicos isolados das amostras

dos pacientes com onicomicoses de acordo com a faixa etária na Clínica

de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período entre janeiro

de 2002 e dezembro de 2006.

AGENTE ETIOLÓGICO

0 - 10

11 – 60

MAIOR QUE 60

TOTAL

Dermatófito 10 451 132 593

Epidermophyton floccosum

0 0 0

Microspporum gypseum

0 0 0

Trichophyton raubistscheckii

0 1 0

Trichophyton mentagrophytes

0 52 18

Trichophyton rubrum

8 367 100

475

Trichophyton spp

0 15 6

Trichophyton tonsurans

2 16 8

Dermatófito + Levedura 0 6 5 11

Trichophyton tonsurans e Candida spp

0 0 2

Trichophyton mentagrophytes e Candida spp

0 1 0

Trichophyton rubrum e Candida spp

0 5 3

Trichophyton spp e Candida spp

0 0 0

FFND 0 23 4 27

Acremonium spp

0 0 0

Aspergillus spp

0 0 1

Fusarium spp

0 17 3

Scytalidium hyalinum

0 6 0

FFND + LEVEDURA 0 4 0 4

Fusarium spp e Candida spp

0 4 0

Levedura 3 179 61 243

Candida spp

3 175 59

237

Trichosporon spp

0 4 0

Trichosporon spp e Candida spp

0 0 0

Protista 0 0 0 0

Prototheca spp

0 0 2

Total 13 663 202 878

p<0,0001 p<0,005 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis,

tipo de agente etiológico e faixa etária, demonstrou a diferença

(p<0,0001) entre o tipo de agente etiológico e faixa etária, para o nível de

significância adotado, ou seja, a maior incidência de dermatófitos ocorreu na faixa

etária entre 11 e 60 anos.

Resultados

4.1.5.4. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses – gêneros,

espécies e faixa etária das amostras

A seguir, a Tabela 11 mostra os principais agentes etiológicos relacionados a

idade das amostras dos pacientes com onicomicose. Existe a relação faixa etária X

agente etiológico em 878 casos. Os dermatófitos aparecem como os mais

frequentes entre 41 e 50 anos de idade.

Tabela 11- Distribuição dos agentes etiológicos – gêneros e espécies isolados das

amostras dos pacientes com onicomicoses de acordo com a faixa etária

na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período

entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

AGENTE ETIOLÓGICO

00-10

11-20

21 -30

31–40

41-50

51-60

61-70

71-80

81–90

91–100

TOTAL

Dermatófito 10 37 92 95 121 106 75 46 11 0 593

Epidermophyton floccosum 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Microspporum gypseum 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Trichophyton raubistscheckii 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0

Trichophyton mentagrophytes 0 0 6 7 16 23 9 7 2 0

Trichophyton rubrum 8 32 81 78 100 76 58 35 7 0

475

Trichophyton spp 0 1 3 3 2 6 3 2 1 0

Trichophyton tonsurans 2 3 2 7 3 1 5 2 1 0

Dermatófito + Levedura 0 0 1 0 3 2 4 1 0 0 11

Trichophyton tonsurans e Candida spp 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0

Trichophyton mentagrophytes e Candida spp

0 0 0 0 1 0 0 0 0 0

Trichophyton rubrum e Candida spp 0 0 1 0 2 2 2 1 0 0

Trichophyton spp e Candida spp 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

FFND 0 0 1 2 11 9 1 0 3 0 27

Acremonium spp 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Aspergillus spp 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0

Fusarium spp 0 0 0 2 9 6 0 0 3 0

Scytalidium hyalinum 0 0 1 0 2 3 0 0 0 0

FFND + LEVEDURA 0 0 0 1 3 0 0 0 0 0 4

Fusarium spp e Candida spp 0 0 0 1 3 0 0 0 0 0

Levedura 3 2 19 30 52 76 22 34 3 2 243

Candida spp 3 2 19 27 52 75 20 34 3 2

237

Trichosporon spp 0 0 0 3 0 1 0 0 0 0

Trichosporon spp e Candida spp 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Protista 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Prototheca spp 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0

Total 13 39 113 128 190 193 102 81 17 2 878

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis, tipo de agente e

tiológico e faixa etária, demonstrou a diferença

(p<0,0001) entre o tipo de agente etiológico e faixa etária, para o nível de

Resultados

significância adotado, ou seja, a maior incidência de dermatófitos ocorreu na faixa de

41 a 50 anos.

4.1.5.5. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses – grupos

e sexo das amostras

Na Tabela 12 observa-se a distribuição dos agentes etiológicos quanto ao

sexo.

Tabela 12- Distribuição dos grupos dos agentes etiológicos isolados das amostras

dos pacientes com onicomicoses de acordo com o sexo na Clínica de

Dermatologia da Santa Casa de São Paulo o período entre janeiro de

2002 e dezembro de 2006.

AGENTE ETIOLÓGICO FEMININO MASCULINO TOTAL

Dermatófito 575 405 980

FFND 30 1 31

Levedura 338 56 394

Protista 2 0 2

Dermatófito + Levedura 15 1 16

FFND + Levedura 4 0 4

Levedura outros gêneros 1 0 1

Total 965 463 1428

p<0,0001 p<0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis agente etiológico e sexo, considerando os resultados positivos,

demonstrou a diferença (p<0,0001) entre a porcentagem de agentes etiológicos

quanto ao sexo em relação aos resultados positivo, para o nível de significância

adotado, ou seja, a maior incidência de qualquer dos agentes etiológicos ocorre no

sexo feminino.

4.1.5.6. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses –

gêneros, espécies, localização e sexo das amostras

Na Tabela 13 é possível ver a correlação entre agente etiológico e sexo.

Resultados

Tabela 13- Distribuição dos agentes etiológicos – gênero e espécie isolados das

amostras dos pacientes com onicomicoses de acordo com o sexo na

Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período entre

janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

AGENTE ETIOLÓGICO FEMININO MASCULINO TOTAL

Dermatófito 583 405 988

Mão 33 63 96

Epidermothton floccosum

0 2 2

Trichophyton mentagrophytes

0 1 1

Trichophyton rubrum

28 54 82

Trichophyton spp

2 3 5

Trichophyton tonsurans

3 3 6

Pé 550 342 892

Microspporum gypseum

0 3 3

Trichophyton raubistscheckii

0 1 1

Trichophyton mentagrophytes

75 22 97

Trichophyton rubrum

434 285 719

Trichophyton spp

23 18 41

Trichophyton tonsurans

18 13 31

FFND 33 1 34

Mão 5 0 5

Fusarium spp

5 0 5

Pé 28 1 29

Acremonium spp

1 0 1

Aspergillus spp

1 0 1

Fusarium spp

20 1 21

Scytalidium hyalinum

6 0 6

Levedura de gêneros diferentes 347 57 404

Mão 298 56 354

Candida spp

293 56 349

Trichosporon spp

4 0 4

Trichosporon spp e Candida spp

1 0 1

Pé 49 1 50

Candida spp

48 1 49

Trichosporon spp

1 0 1

Protista 2 0 2

Mão 2 0 2

Prototheca spp

2 0 2

Total 965 463 1428

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis, tipo de agente etiológico e sexo, demonstrou a diferença (p < 0,0001)

entre tipo de agente etiológico e sexo, para o nível de significância adotado, ou seja,

a maior incidência de dermatófitos ocorreu no sexo feminino.

Resultados

4.1.5.7. Distribuição dos agentes etiológicos das onicomicoses – grupos

e estação do ano das amostras

Na Tabela 14, observa-se a relação entre agente etiológico e estação do ano.

Tabela 14- Distribuição dos grupos dos agentes etiológicos isolados das amostras

dos pacientes com onicomicoses de acordo com a estação do ano em

que foram identificados na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de

São Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

AGENTES ETIOLÓGICOS INVERNO OUTONO PRIMAVERA

VERÃO TOTAL

Dermatófito 254 268 261 197 980

FFND 11 7 13 0 31

Levedura 138 112 70 73 393

Protista 0 0 2 0 2

Dermatófito + Levedura 8 1 6 1 16

FFND + Levedura 4 0 1 0 5

Leveduras outros gênero 0 0 1 0 1

Total 415 388 354 271 1428

p = 0,0013 p<0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis agente etiológico e estações do ano, considerando os resultados positivos,

demonstrou a diferença (p = 0,0013) entre a porcentagem de agentes etiológicos

quanto às estações do ano em relação aos resultados positivos, para o nível de

significância adotado, ou seja, a maior incidência de dermatófitos ocorreu no outono

e na primavera, respectivamente. Já para o FFND, a maior incidência ocorreu no

inverno e na primavera. A levedura ocorreu mais no inverno, seguido do outono. A

Prototheca spp ocorreu na primavera.

4.2. Caracterização das amostras estudadas de acordo com microscópico

direto positivo e cultura positiva

Foram identificados 1.402 amostras de pacientes com exames microscópico

direto positivo e cultura positiva. A distribuição dos principais agentes etiológicos das

onicomicoses nesses pacientes foi: dermatófitos com 69%, leveduras com 27,1%,

Resultados

FFND com 2,2%, Prototheca spp com 0,1% e associações com 1,6% (Gráfico 9).

Gráfico 9- Distribuição dos grupos dos agentes etiológicos isolados das amostras dos pacientes com

onicomicoses na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo no período entre

janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

A Tabela 15 mostra os principais agentes etiológicos em relação ao gênero e

as espécies das 1.402 amostras de pacientes com onicomicoses, com exame

microscópico direto positivo e cultura positiva. O dermatófito mais frequente foi o T.

rubrum com 56%, FFND mais frequente foi o Fusarium spp com 1,6%, nas leveduras

observamos o gênero Candida com 26,7% e Prototheca spp com 0,1%.

Resultados

Tabela 15- Distribuição dos agentes etiológicos - gênero e espécie isolados das

amostras dos pacientes com onicomicoses na Clínica de Dermatologia

da Santa Casa de São Paulo no período entre janeiro de 2002 e

dezembro de 2006.

AGENTE ETIOLÓGICO NÚMERO DE AMOSTRAS PORCENTAGEM

Dermatófito 968 69,0%

Epidermophyton floccosum

2 0,1%

Microsporum gypseum

3 0,2%

Trichophyton raubistscheckii

1 0,1%

Trichophyton mentagrophytes

97 6,9%

Trichophyton rubrum

785 56,0%

Trichophyton spp

44 3,1%

Trichophyton tonsurans

36 2,6%

Dermatófito + Levedura 16 1,1%

Trichophyton tonsurans e Candidaspp

5 0,4%

Trichophyton mentagrophytes e Candida spp

1 0,1%

Trichophyton rubrum e Candida spp

9 0,6%

Trichophyton spp e Candida spp

1 0,1%

FFND 31 2,2%

Acremonium spp

1 0,1%

Aspergillus spp

1 0,1%

Fusarium spp

23 1,6%

Scytalidium hyalinum

6 0,4%

FFND + LEVEDURA 5 0,4%

Fusarium spp e Candida spp

5 0,4%

Levedura 380 27,1%

Candida spp

374 26,7%

Trichosporon spp

5 0,4%

Trichosporon spp e Candida spp

1 0,1%

Protista 2 0,1%

Prototheca spp 2

0,1%

Total 1402 100,0%

p < 0,0001 p < 0,05 significativo

O teste estatístico qui-quadrado, realizado para avaliar a associação entre as

variáveis, tipo de agente etiológico e resultado positivo, demonstrou a diferença

(p<0,0001) entre tipo de agente etiológico e resultado positivo, para o nível de

significância adotado, ou seja, a maior incidência foi de dermatófitos, em relação aos

pacientes que apresentaram microscópico direto positivo e cultura positiva.

Resultados

4.3. Caracterização das amostras estudadas de acordo com microscópico

direto negativo e cultura positiva

Foram identificados 26 amostras de pacientes com exames microscópico

direto negativo e cultura positiva. A distribuição dos principais agentes etiológicos foi:

dermatófitos 46,2% com e leveduras com 53,8% (Gráfico 10).

Gráfico 10- Distribuição dos grupos dos agentes etiológicos isolados das amostras dos

pacientes com onicomicoses na Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São

Paulo no período entre janeiro de 2002 e dezembro de 2006.

A Tabela 16 demonstra os principais agentes etiológicos das amostras dos

pacientes com onicomicose, com exame microscópico direto negativo e cultura

positiva.

Tabela 16- Distribuição dos agentes etiológicos – gênero e espécie isolados das

amostras dos pacientes com onicomicoses na Clínica de Dermatologia

da Santa Casa de São Paulo no período entre janeiro de 2002 e

dezembro de 2006.

AGENTE ETIOLÓGICO NÚMERO DE CASOS PORCENTAGEM

Dermatófilo 12 46,2%

Trichophyton rubrun 11 42,3%

Trichophyton ssp 1 3,8%

Levedura 14 53,8%

Candida spp 14 53,8%

Total 26 100,0%

p=0,999 p < 0,05 significativo

5. DISCUSSÃO

Discussão

A epidemiologia das onicomicoses tem influência multifatorial e sua

prevalência está diretamente relacionada à idade entre outros fatores populacionais,

ao estilo de vida e à associação com outras doenças. Além disso, a distribuição dos

patógenos, agentes de onicomicose não é uniforme, dependendo de vários fatores

tais como geografia, clima da região e, migração de populações (Faergemann,

Baran, 2003).

No Laboratório de Micologia da Clínica de Dermatologia da Santa Casa de

São Paulo no período de janeiro de 2002 a dezembro de 2006 foram avaliados

5.407 pacientes com suspeita clínica de onicomicose. O diagnóstico laboratorial

(micológico direto e/ou cultura positivos) foi confirmado em 71% (3.822/5.407) das

amostras clínicas analisadas. Brito, em 1992, observou 3.772 casos suspeitos de

onicomicose em que apenas 3% (114/3.772) tiveram confirmação através de

exames laboratoriais enquanto Elewski, Charif, em 1997, obteve em 2.065 amostras

clínicas com suspeita de onicomicose a confirmação diagnóstica de 82%

(1.707/2.065). Gupta et al, em 2000c, em estudo multicêntrico, observaram que dos

15.000 pacientes que apresentavam clinicamente unhas com algum tipo de

anormalidade, apenas em 8% dos casos (1.199/15.000) foi confirmada onicomicose

através de exames laboratoriais. Já em estudo realizado por Brilhante et al, em

2005, dos 976 pacientes com suspeita de onicomicose, 52% (512/976) apresentava

a doença. Na Bélgica, Arrese et al, em 2005, relatam onicomicose confirmada por

exames em 36,04% (1.290/3.579) dos pacientes avaliados. Estudo realizado na

Índia (Sarma et al, 2008) mostra que dos 302 pacientes avaliados, 42,4% (128/302)

tiveram confirmação do diagnóstico através de exame laboratorial.

Das 3822 amostras clínicas com exame direto e/ou culturas positivas

analisadas em nosso estudo, pudemos observar que o exame microscópico direto

foi positivo em 99,3% (3.796/3.822) delas enquanto a cultura foi positiva em 66%

(1.428/2.162) do total das amostras estudadas. Estudos na literatura, como o de

Brito, em 1992, relata 82,45% (94/114) de positividade para o exame microscópico

direto e 17,5% (20/114) para a cultura. O autor justifica a diferença devido a

dificuldades que o laboratório de Micologia passou durante certo período que

acarretou em prejuízos à pesquisa. Em 1997, Elewski, Charif relatam positividade de

82% (1.707/2.065) para o exame microscópico direto e 52% (1.069/2.065) para a

cultura.

Discussão

A cultura foi realizada em 56,6% (2.162/3.822) do total das amostras

estudadas, sendo positiva em 66% (1.428/2.162). Em nosso laboratório, devido ao

grande número de exames coletados na rotina diária, não são realizadas culturas de

todos os exames micológicos diretos positivos. O que limita o cultivo de todas as

amostras são o custo do exame e o período necessário para o crescimento do

fungo.

Comparando nossos resultados com os encontrados na literatura podemos

afirmar que o nosso laboratório é eficiente, obtendo resultados semelhantes à

laboratórios de Micologia de referência. Além da dificuldade da realização da cultura

em todas as amostras estudadas, podemos observar que a positividade obtida

através do exame direto é significantemente maior da obtida através da cultura. Este

fato pode ser explicado pela distribuição irregular dos fungos nas lesões; pela

dificuldade na coleta do material de forma adequada, especialmente na região

subungueal; pela facilidade com que ocorre a contaminação das culturas por fungos

anemófilos e microbiota bacteriana, dificultando assim a identificação do verdadeiro

agente etiológico; por limitações inerentes ao exame, como a intensa queratinização

das unhas, que dificulta a observação microscópica dos microorganismos; pela

viabilidade fúngica, que pode resultar em culturas falso negativas e pelo uso de

medicações antifúngicas pelo paciente previamente à coleta (Carvalho, 1990;

Martelozzo et al, 2005).

A faixa etária da população com diagnóstico confirmado de onicomicose

variou de três meses a 98 anos de idade, tendo como mediana 47 anos, ou seja, a

faixa etária de 31 a 60 anos, considerada população economicamente ativa foi

acometida em 60 % de nossa amostra. Concordante com nossos resultados são os

de Martins et al, em 2007, que observaram em estudo com 184 pacientes, que a

idade média de acometimento era de 36 a 64 anos (62%). Já, Sarma et al, em 2008,

em estudo com 302 pacientes, observaram que a onicomicose ocorreu mais na faixa

etária entre 21 e 30 anos (36%).

Dos 3.822 exames micológicos positivos para diagnóstico laboratorial de

onicomicose 2.527 eram oriundos de pacientes do sexo feminino (66%) e 1.295 do

sexo masculino (34%). Segundo análise estatística realizada através do teste qui-

quadrado, há significância desta diferença entre a positividade dos exames nos dois

sexos. Esses dados são concordantes com a literatura, em que alguns autores

observaram frequência de onicomicose variando de 67% a 74% no sexo feminino

Discussão

(Sais et al, 1995; Mercantini et al, 1996; Luque et al, 1997; Vélez et al, 1997; Lopes

et al, 1999; Koussidou et al, 2002; Araújo et al, 2003b; Alvarez et al, 2004; Souza et

al, 2007). Outros autores (Ghannoum et al, 2000; Gupta et al, 2000b; Perea et al,

2000; Sarma et al, 2008), observaram exatamente o contrário: cerca de 64% dos

casos ocorrendo no sexo masculino. A justificativa para essas discrepâncias talvez

esteja na composição da população estudada, uma vez que a infecção fúngica

depende de hábitos culturais, ecologia, como já citado anteriormente.

Da mesma forma que a nossa amostra apresenta predomínio de pacientes do

sexo feminino e, que nesta amostra, a faixa etária mais acometida é a de 31 a 60

anos, pudemos observar maior e significante (p < 0,0001) incidência de resultados

positivos na faixa de 31 a 60 anos para o sexo feminino. Na literatura, estudos como

o de Ghannoum et al, em 2000, relata maior incidência de onicomicose numa faixa

etária ativa com idade média de 57 anos principalmente no sexo masculino (58%)

(1063/1832). Para Shoar et al, em 2002, os pacientes com onicomicose

encontravam-se na faixa de 40-50 anos de idade (67,4%) sendo que 71% eram do

sexo feminino (179/252).

Alguns autores justificam o aumento da prevalência da onicomicose com o

avanço da idade devido a alguns fatores como: circulação periférica mais lenta,

inatividade, inabilidade em cortar e cuidar das unhas, presença de comorbidades

(diabetes, trauma ungueal repetitivo, exposição aos fungos patogênicos por mais

tempo, imunidade relativamente mais baixa). Por outro lado, a razão pela qual a

prevalência de onicomicose é menor em crianças, pode ser justificada devido ao

crescimento ungueal mais rápido, menor exposição aos agentes etiológicos, menor

prevalência de tinha dos pés e menor extensão ungueal para invasão (Elewski,

1998; Tosti et al, 2005).

De acordo com resultados obtidos em nosso trabalho, as estações do ano

não tiveram muita importância com a presença de onicomicose, sendo observado no

outono discreto aumento do número de casos. O ano em que se observou maior

número de casos de onicomicose foi o de 2003. Para estes resultados não foram

encontrados estudos comparativos e por isso são considerados pouco

representativos.

A onicomicose foi mais comum nas unhas dos pés com 71% (2.716/3.806).

As unhas das mãos foram acometidas em 29% (1.090/3.806) das vezes. Quando

analisamos o acometimento exclusivo das unhas das mãos ou dos pés pudemos

Discussão

observar frequências de 17% (653/3.806) e 59% (2.256/3.806) respectivamente,

sendo ainda grande o predomínio de acometimento das unhas dos pés. Já, a

associação de unhas dos pés e mãos acometidas simultaneamente foi de 24%

(897/3.806). O teste do qui-quadrado para avaliar o local de acometimento das

unhas mostrou ser significante (p < 0,0001) a maior frequência de onicomicose das

unhas dos pés. Este resultado coincide com estudos feitos na Grécia (Koussidou et

al, 2002) em que 64% (1.771/2.766) dos exames confirmados foram de onicomicose

das unhas dos pés. Resultados semelhantes foram encontrados também na

Espanha (Sais et al, 1995), no Rio Grande do Sul (Lopes et al, 1999), no Canadá

(Gupta et al, 2000c), no Rio de Janeiro (Araújo et al, 2003a) e na Colômbia (Alvarez

et al, 2004). As prováveis justificativas são: o fato das unhas dos pododáctilos terem

crescimento mais lento que as dos quirodáctilos e a maior ocorrência de tinha do pé

em relação à tinha da mão.

Em nosso estudo foi comprovado que o lado direito, tanto de pés como mãos

(25% e 34% respectivamente), foi mais acometido que o esquerdo. Em relação às

unhas dos quirodáctilos, o primeiro quirodáctilo foi o mais acometido, isolado ou

concomitantemente com outros quirodáctilos, com 19% (207/1.090). A unha do

primeiro pododáctilo foi a mais acometida, tanto isoladamente como associada a

outro pododáctilo em 23,4% dos casos (636/2.716), Estes resultados coincidem com

os de Achten, Wanet-Rouard (1987) e Gupta et al (2000a).

Os dermatófitos são os agentes etiológicos responsáveis pela maioria das

onicomicoses, representando aproximadamente 75% destas infecções (Weitzmann,

Summerbell, 1995; Gupta et al, 1997a; Lopes et al, 1999; Ghannoum et al, 2000;

Gupta et al, 2000a; Rodriguez, Jodra, 2000; Arrese et al, 2005; Effedy et al, 2005;

Seebacher et al, 2007; Afsaneh et al, 2008). Alguns autores como Martelozzo et al

(2005) e Souza et al (2007) encontraram proporções diferentes: 33,85% e 41% para

dermatófitos; 13,97% e 13% para fungos filamentosos não dermatófitos e 52,17% e

46% para leveduras, respectivamente. Há poucos relatos de onicomicose “símile”

causada por Prototheca spp. (Marcano, Feo, 1981; Magerman et al, 1991; Zaitz et

al, 2006).

Em nosso trabalho, os dermatófitos foram os principais agentes etiológicos

isolados (68,6%, 980/1.428) seguidos pelas leveduras com 393 casos (27,5%), os

FFND com 31 casos (2,2%), a Prototheca spp com dois casos 0,1% e finalmente as

associações de agentes etiológicos com 1,6% (22/ 1.428).

Discussão

Quando avaliamos a correlação entre faixa etária e os agentes etiológicos,

observamos a maior incidência de dermatófitos entre 41 a 50 anos. A mesma faixa

etária foi onde ocorreu a maior incidência de onicomicoses por FFND enquanto para

as leveduras a maior incidência foi nos pacientes de 51 a 60 anos e para o

protista,foi de 61-70 anos.

Em nosso estudo observamos, quando analisamos as espécies de

dermatófitos, que o T. rubrum foi isolado em 81,2% (796/980) das vezes, seguido

pelo T. mentagrophytes em 9,9% (97/980), T. tonsurans em 3,6% (36/980), M.

gypseum em 0,2% (3/980), E. floccosum em 0,1% (2/980) e T. raubistscheckii em

0,1% (1/980). Ao revisarmos a literatura encontramos os principais agentes de

onicomicose que são: T. rubrum, T. mentagrophytes e T. tonsurans (Brito, 1992; Sais

et al, 1995; Kemna, Elewski, 1996; Lopes et al, 1999; Ghannoum et al, 2000; Gupta

et al, 2000a). O T. raubistscheckii é considerado por muitos micologistas uma

variante do T. rubrum e raramente é isolado na unha (Lacaz et al, 1999; Papini et al,

2004; Brasch, 2007).

Também os fungos filamentosos não dermatófitos (FFND) são citados na

literatura como agentes etiológicos de onicomicoses. Neste estudo observamos que

o Fusarium spp foi o FFND mais isolado com 74,2% (23/31). Depois apareceu o

Scytalidium hyalinum com 19,3% (6/31), o Acremonium spp e o Aspergillus spp,

ambos com 3,2% (1/31). Tosti et al (2000) observaram que 13,6% das onicomicoses

eram causadas por FFND. O principal agente etiológico identificado pelos autores foi

o Fusarium spp com 21,2% (28/132).

Em relação aos isolados de leveduras, a Candida spp foi encontrada em

98,5% (388/394). Araújo et al (2003b) e Martelozzo et al (2005) observaram que a

Candida spp era a levedura mais frequentemente isolada em casos de onicomicose.

O Trichosporum beigelli foi isolado em 1,2% (5/394) de nossos casos como agente

etiológico de onicomicose por leveduras e alguns estudos também tem resultado

semelhante (Vijaya et al, 2000; Han et al, 2000).

As associações e fungos como agentes de onicomicoses também foram

encontradas. Dermatófito e levedura ocorreram em 1,1% dos casos (16/1.428),

FFND com levedura em 0, 4 % dos casos (5/1.428) e leveduras de outros gêneros

(não Candida) em 0,1% dos casos (1/1.428). São poucos os trabalhos que citam

onicomicoses mistas. Estudos como de Rugeles et al (2001) relatam associação de

onicomicoses por Candida spp com outros fungos em pacientes imunodeprimidos e

Discussão

Koussidou et al (2002) relata possíveis associações de fungos em onicomicoses

num estudo com 2766 pacientes.

A onicomicose “like” causada por Prototheca spp foi uma peculiaridade

observada em nosso estudo. Ocorreram dois casos (mesma paciente com duas

unhas acometidas), o que corresponde a 0,1% dos agentes causadores de

onicomicose. Esse caso foi publicado, sendo o primeiro caso no Brasil de

onicomicose causada por Prototheca e o 3° caso no mundo (Zaitz et al, 2006).

Observamos em nosso trabalho que a maior incidência de todos os agentes

etiológicos de onicomicose ocorre no sexo feminino e que o T. rubrum é o principal

agente de onicomicose nas unhas dos pés de mulheres entre 41 e 50 anos. Todos

estes achados relacionados ao sexo muito provavelmente se devem à composição

de nossa amostra.

A maior incidência de dermatófitos ocorreu no outono e na primavera,

respectivamente. Já os FFND tiveram maior incidência no inverno e na primavera.

Para as leveduras, a maior incidência ocorreu no inverno, seguido do outono. Essa

diferença de sazonalidade pode ser explicada pelo fato que na cidade de São Paulo,

as estações do ano não são bem definidas.

6. CONCLUSÕES

Conclusões

No período de janeiro de 2002 a dezembro de 2006 foram analisadas 3.822

amostras com suspeita clínica de onicomicose que foram confirmadas

laboratorialmente e permitiram as seguintes conclusões:

1- O exame microscópico direto é método sensível, rápido e de baixo custo

para o diagnóstico genérico de onicomicose. Já, a cultura apesar de sua

alta especificidade é de difícil realização, mais custosa e dependente de

vários fatores como: coleta, meio de cultura utilizado e habilidade do

profissional que a realiza.

2- Os principais grupos de agentes etiológicos isolados foram: dermatófitos

(68,6%), FFND (2,2%), leveduras (27,5%), Prototheca spp (0,1%) e

associações de fungos (1,6%). A distribuição das espécies mais

frequentemente encontradas nos diferentes grupos de agentes foi:

a. Dermatófitos: T. rubrum (81,2%), T. mentagrophytes (9,9%) e T.

tonsurans (3,6%);

b. FFND: Fusarium spp (74,2%) e Scytalidium hyalinum (19,3%);

c. Leveduras: Candida spp (98,5%).

3- A faixa etária mais acometida na população estudada foi de 31 a 60 anos

de idade e houve predomínio do sexo feminino (66%).

4 - Observou-se maior frequência de dermatófitos no outono e primavera, de

FFND no inverno e primavera e de leveduras no inverno e outono.

Recomendações:

Estudos como estes são necessários para o melhor conhecimento da

epidemiologia das onicomicoses. Para tanto, o ideal é que se elabore um protocolo

para estudo prospectivo, no qual todas as amostras que tenham micológico positivo

sejam submetidas ao cultivo e que estes exames sejam realizados por uma mesma

pessoa capacitada.

7. ANEXOS

Anexos

Anexo A

MATERIAIS E EQUIPAMENTOS UTILIZADOS

1. Reagentes

- Hidróxido de Potássio (KOH) - Merck S.A., RJ, Brasil.

- Dimetil Sulfóxido (CH

SOCH

) - UCB, Belgium.

- Azul Algodão - Difco Laboratories, U.S.A.

2. Meios de cultura

- Ágar Mycobiotic - Difco Laboratories, U.S.A.

- Ágar Batata e Glicose - Merck S.A., RJ, Brasil.

- Ágar Uréia Base - Difco Laboratories, U.S.A.

3. Equipamentos de laboratório

- Microscópio Óptico - Nikon, Japan.

- Geladeira - Frigidaire, General Motors, SP, Brasil.

4. Materiais de consumo

- Lamínulas para Microscopia 24x24 - Perfecta, SP, Brasil.

- Lâminas para Microscopia - Perfecta, SP, Brasil.

Anexos

Anexo B

DESCRIÇÃO DAS FÓRMULAS UTILIZADAS

1. Hidróxido de potássio a 20% + Dimetil-sulfóxido:

Água destilada ..................................... 60ml

KOH (hidróxido de potássio) ................ 20gr

DMSO (dimetil-sulfóxido) ..................... 20ml

Anexos

Anexo C

DESCRIÇÃO DAS TÉCNICAS EMPREGADAS

1. Cultivo em Lâmina (Sousa, 1998; Lacaz et al, 2002).

Também conhecida como micro cultivo, é utilizada para o estudo dos aspectos

microscópicos característicos: micélio vegetativo e micélio de frutificação. A técnica

utiliza uma câmara úmida contendo duas lâminas de microscópico colocadas sobre

bastão de vidro em U. Um pequeno quadrado (um cm) de ágar batata sobre a lâmina

é semeado com o fungo a ser identificado. Uma lâmina estéril é colocada sobre o

bloco de ágar e, após o crescimento satisfatório, a lâmina é retirada e corada com

lactofenol azul de algodão e submetida ao estudo das estruturas microscópicas do

fungo

(Zaitz, 1998b; Lacaz et al, 2002; Zaitz, 2004b).

2. Testes Biológicos (Sousa, 1998; Lacaz et al, 2002).

2.1. Teste de Perfuração do Pêlo in vitro.

Prova biológica para diferenciação entre Trichophyton mentagrophytes e

Trichophyton rubrum: incubam-se pêlos estéreis em placa de Petri contendo

caldo Sabouraud e inóculo de T. mentagrophytes; a cada 24 horas, um pêlo

da placa é retirado e examinado ao microscópico corado com lactofenol

azul de algodão. O T. mentagrophytes perfura o pêlo radialmente, enquanto

o T. rubrum não é capaz de perfurá-lo.

2.2. Teste de Pigmentação em Ágar-Batata

Prova nutricional para diferenciação entre T. mentagrophytes e T. rubrum. O

repique dos dermatófitos é feito em ágar batata. O T. rubrum pigmenta o

meio em vermelho e o T. mentagrophytes não é capaz de produzir este

pigmento.

2.3. Prova da Urease

Prova bioquímica usada para diferenciação entre T. mentagrophytes e T.

rubrum. O repique do dermatófito é feito em meio de Christensen, rico em

uréia, e a atividade ureásica produz alteração alcalina po pH (de amarelo a

vermelho). Somente o T. mentagrophytes altera a coloração desse meio,

tornando-o róseo.

Anexos

Anexo D

APROVAÇÃO DO COMITÊ DE ÉTICA

8. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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FONTES CONSULTADAS

Fontes Consultadas

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RESUMO

Resumo

Carvalho CS. Estudo descritivo das Onicomicoses na Clínica de Dermatologia da

Santa Casa de São Paulo no período de janeiro de 2002 até dezembro de 2006.

Dissertação (Merstrado). 2010.

Introdução: Onicomicose, infecção das unhas por fungo é a mais frequentes das

doenças ungueais, constituindo aproximadamente metade de todas as alterações

ungueais. Pode ser causada por dermatófitos, leveduras, fungos filamentosos não

dermatófitos e Prothoteca spp. Objetivos: (1) Analisar a sensibilidade dos métodos

de diagnóstico laboratorial para as onicomicoses no nosso laboratório de micologia

Médica da Clínica de Dermatologia da Santa Casa de São Paulo; (2) analisar a

distribuição dos casos de onicomicose de acordo com os principais agentes

etiológicos: dermatófitos, fungos filamentosos não dermatófitos (FFND), leveduras e

protistas; (3) analisar a distribuição dos casos de onicomicose em relação aos

dados demográficos: sexo e idade; (4) analisar a possível variação sazonal dos

casos em relação aos principais agentes etiológicos. Métodos: Cinco mil e

quatrocentos e sete amostras de pacientes com suspeita de onicomicose foram

estudadas no período de janeiro de 2002 a dezembro de 2006, por meio de exames

micológicos diretos e cultura para fungos. Resultados: O diagnóstico de

onicomicose foi confirmado em 3.822 amostras através de micológico direto e/ou

cultura positiva. O diagnóstico etiológico foi estabelecido pela cultura para fungos.

Dentre os 1.428 agentes identificados, os dermatófitos foram responsáveis por

68,6% (N=980) dos casos, seguidos pelas leveduras com 27,5% (N=393), FFND

com 2,2% (N=31), Prototheca spp com 0,1% (N=2), e associações com 1, 6%

(N=22). O sexo feminino foi o mais acometido com 66% (N=2.527) dos casos e a

faixa etária mais acometida variava de 31 a 60 anos de idade (mediana de 47 anos).

Observou-se que não há relação entre estações do ano e resultados de exames

positivos. Conclusão: A microbiota fúngica é alterada frequentemente no mundo,

quantitativa e qualitativamente, sendo afetada por vários fatores ambientais. Assim,

o exame periódico da composição desta microbiota é importante para avaliar a

epidemiologia e assim ter uma resposta terapêutica mais adequada.

Palavras-chave: 1. Onicomicose 2. Dermatófitos 3. Leveduras 4. Fungos

filamentosos não dermatófitos 5. Prototheca spp

ABSTRACT

Abstract

Carvalho CS. Description study of Onychomycosis in the Dermatology Department of

Santa Casa de Sao Paulo in the period January 2002 to December 2006. Thesis.

2010.

Introduction: Onychomychosis, a nail fungus infection is the most frequent nail

disease, constituting about half of all nail disorder. It can be caused by

dermatophytes, yeasts and non-dermatophytes filamentous fungi and Prothoteca

spp. Objectives: (1) Analyze the sensitivity of the methods of laboratory diagnosis for

onychomycosis in our laboratory of mycology; (2) analyze the distribution of cases of

onychomycosis in accordance with the main etiological agents: dermatophytes, non-

dermatophyte filamentous fungi (FFND), yeasts and protists; (3) analyze the

distribution of cases of onychomycosis in relation to demographic data: gender and

age; (4) analyze the possible seasonal variation of cases on the main etiological

agents. Methods: Five thousand four hundred and seven samples of patients with

suspected onychomycosis were studied from January 2002 to December 2006, by

direct mycological examination and culture for fungi. Results: The diagnosis of

onychomycosis was confirmed in samples from 3.822 direct mycological and/or

culture positive. The diagnosis was established by culture for fungi. Among the 1.428

agents identified, the dermatophytes were responsible for 68,6% (N=980) of cases,

followed by yeasts with 27,5% (N=393), FFND with 2,2% (N=31), Prototheca spp with

0,1% (N=2), and associations with 1,6% (N=22). The female was the most affected

with 66% (N=2.527) of cases and the most affected age group ranged from 31 to 60

years of age (median 47 years). There was no relationship between the seasons and

results of tests positive. Conclusion: The fungal microbiota is often changed in the

world, both quantitatively and qualitatively, is affected by several environmental

factors. Thus, the periodic review of the composition of this microbiota is important to

evaluate the epidemiology and thus have a better therapeutic response.

Key words: 1. Onychomycosis, 2. Dermatophytes, 3. Moulds, 4. Non-dermatophytes

filamentous fungi, 5. Prototheca spp

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