( PDF ) Avaliação do óleo de nim, compostos homeopáticos e biológicos sobre Anticarsia gemmatalis e Epinotia aporema em soja e em Trichogramma pretiosum

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UNIVERSIDADE DO ESTADO DE SANTA CATARINA – UDESC

CENTRO DE CIÊNCIAS AGROVETERINÁRIAS – CAV

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS AGRÁRIAS

MESTRADO EM PRODUÇÃO VEGETAL

GILVANE LUIS JAKOBY

AVALIAÇÃO DO ÓLEO DE NIM, COMPOSTOS HOMEOPÁTICOS E

BIOLÓGICOS SOBRE Anticarsia gemmatalis E Epinotia aporema EM

SOJA E EM Trichogramma pretiosum

Dissertação apresentada à Coordenação do

Programa de Pós Graduação em Ciências

Agrárias (CAV/UDESC) como requisito

parcial para obtenção do título de Mestre em

Produção Vegetal.

Orientador: Ph.D. Mari Inês Carissimi Boff

Co-orientador: Ph.D. Pedro Boff

LAGES – SC

2008

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Livros Grátis

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Milhares de livros grátis para download.

Ficha catalográfica elaborada pela Bibliotecária

Renata Weingärtner Rosa – CRB 228/14ª Região

(Biblioteca Setorial do CAV/UDESC)

Jakoby, Gilvane Luis.

Avaliação do óleo de Nim, compostos homeopáticos e

biológicos sobre Anticarsia gemmatalise e Epinotia

aporema em soja e em Trichogramma pretiosum

/ Gilvane Luis Jakoby – Lages, 2008.

108 p.

Dissertação (mestrado) – Centro de Ciências

Agroveterinárias / UDESC.

1.Soja – Doenças e pragas. 2.Lagarta-da-soja.

3.Homeopatia. 4.Trichogramma. I.Título.

CDD – 633.34

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GILVANE LUIS JAKOBY

AVALIAÇÃO DO ÓLEO DE NIM, COMPOSTOS HOMEOPÁTICOS E

BIOLÓGICOS SOBRE Anticarsia gemmatalis E Epinotia aporema EM

SOJA E EM Trichogramma pretiosum

Dissertação apresentada ao Centro de Ciências Agroveterinárias da Universidade do Estado

de Santa Catarina, como requisito parcial para obtenção do título de Mestre em Produção

Vegetal.

Aprovado em: 16/12/2008

Pela banca examinadora:

__________________________________

Ph.D. Mari Inês Carissimi Boff

Orientador – UDESC/Lages-SC

__________________________________

Ph.D. Fábio Kessler Dal Soglio

UFRGS/Porto Alegre-RS

__________________________________

Dr. Ricardo Trezzi Casa

UDESC/Lages-SC

Homologado em:

Por:

__________________________________

Dr. Ricardo Trezzi Casa

Coordenador Técnico do Programa de

Mestrado em Produção Vegetal e

Coordenador Geral do Programa de

Pós-graduação em Ciências Agrárias

__________________________________

Dr. Adil Knackfuss Vaz

Diretor Geral do Centro de Ciências

Agroveterinárias – UDESC/Lages-SC

__________________________________

Dr. Clovis Arruda de Souza

UDESC/Lages-SC

LAGES – SC, 16/12/2008

Aos meus pais Mario Francisco Jakoby e Neli

Jakoby pelo apoio e incentivo na busca dos

meus objetivos, e às minhas irmãs Zaira e

Aline, OFEREÇO

À minha noiva, Isabel Cristina, pelo

companheirismo durante o mestrado e pelo

amor e carinho a mim dedicados, DEDICO

AGRADECIMENTOS

À Deus, pela força na conquista de mais uma realização profissional.

Aos meus pais Mario e Neli pela vida, apoio, confiança e incentivo.

Às minhas irmãs Zaíra Viviane e Aline Aparecida pelo companheirismo e ao meu

afilhado Felipe pelos momentos de alegria.

À minha noiva Isabel Cristina pelo amor, pelos momentos de descontração, pelos

sábios conselhos e principalmente pela dedicação.

À família da minha noiva Isabel Cristina pela confiança a mim depositada e pelos

incentivos.

Aos meus Orientadores Mari Inês e Pedro Boff pela oportunidade, amizade, conselhos,

ensinamentos e disposição durante o desenvolvimento dos trabalhos.

Aos colegas de mestrado Michele, Simone, Rosângela, Tarita, Alexandre, Tatiane,

Ariane, Carolina e Gustavo pelos conhecimentos e momentos de alegria compartilhados.

Ao casal Fernando e Cláudia pela amizade e pelos momentos de descontração.

Ao Centro de Ciências Agroveterinárias CAV/UDESC e ao Programa de Pós

graduação em Ciências Agrárias pela oportunidade do mestrado.

À CAPES pela concessão da bolsa de mestrado.

À Estação Experimental da Epagri de Lages, pela estrutura fornecida.

Ao projeto Rede Guarani/Serra Geral - Apoio MCT/CNPq/CT_HIDRO e FAPESC

através do projeto FUNJAB/FAPESC Conv. 15915/2007-8.

Às laboratoristas Elisângela Madruga e Aparecida do Laboratório de Homeopatia e

Saúde Vegetal da Epagri/Lages, pela ajuda prestada.

Aos funcionários da Epagri/Lages Jéferson, Junior e Daniel e aos graduandos em

Agronomia Murilo e Marcelo pelo auxílio na condução dos experimentos de campo.

Ao pesquisador da Embrapa Soja, Dr. Adeney de Freitas Bueno, pelo fornecimento

dos insetos para que pudesse iniciar a criação no laboratório de entomologia do CAV e pelas

contribuições e sugestões nos trabalhos realizados.

À colega de mestrado Simone Silva Vieira pela ajuda na condução do experimento de

seletividade.

À bolsista de Pós-doutorado da UFG, Drª. Regiane Cristina Oliveira de Freitas Bueno

pelo incentivo no ingresso da pós-graduação e pelas contribuições e sugestões nos trabalhos

realizados.

Ao colega Ruben pelo auxílio na manutenção da criação dos insetos e ajuda na

condução dos experimentos.

Ao professor Dr. Ricardo Trezzi Casa por ceder os equipamentos de pulverização.

Aos professores David José Miquelutti e Jefferson Luis Coimbra pelo auxílio nas

análises estatísticas.

RESUMO

O objetivo foi estudar o potencial do óleo de nim (Azadirachta indica) e de preparados

homeopáticos no controle de lepidopteros praga na cultura da soja conduzida sob o sistema

orgânico. O consumo foliar, o desenvolvimento e a mortalidade de Anticarsia gemmatalis

Hubner, 1818 (Lepidoptera: Noctuidae) foi avaliado em laboratorio, a partir de lagartas

submetidas aos seguintes tratamentos: folha pulverizada com óleo de nim a 0,5, 1,5 e 2,5%,

folha pulverizada + lagarta pulverizada com óleo de nim 1,5%, folha pulverizada com

nosódio macerado de A. gemmatalis 10 mL.L

-1

, folha pulverizada com nosódio triturado de A.

gemmatalis 10 mL.L

-1

, folha pulverizada + lagarta pulverizada com nosódio macerado de A.

gemmatalis 10 mL.L

-1

, folha pulverizada + lagarta pulverizada com nosódio triturado de A.

gemmatalis 10 mL.L

-1

, folha pulverizada com Dipel

SC (Bacillus thuringiensis) 0,5 L.ha

-1

testemunha sem intervenção. Para o experimento com broca-das-axilas, Epinotia aporema

Wals (Lepidoptera: Tortricidae) a campo, foram utilizados os seguintes tratamentos: óleo de

nim a 1, 3 e 5%, nosodio triturado de E. aporema, Dipel

SC 0,5 e 0,7 L ha

-1

e testemunha

sem intervenção, com delineamento de blocos ao acaso e quatro repetições, sendo realizado

duas aplicações, a primeira no estádio V4 a V5 e a segunda 15 dias após a primeira.

Adicionalmente, foi realizado um ensaio para verificar o poder residual desses produtos,

através do fornecimento de folhas pulverizadas a campo para A. gemmatalis em laboratório

em três épocas diferentes, aos 0, 4 e 8 dias após a pulverização. Para verificar a

compatibilidade desses produtos com o controle biológico, foi realizado teste de seletividade a

inimigos naturais em laboratório, segundo as normas padronizadas da International

Organization of Biological Control (IOBC), utilizando o parasitóide de ovos Trichogramma

pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) na fase imatura (pupa). O óleo de

nim reduziu o consumo foliar, provocou deformações nos insetos e causou índice de

mortalidade superior a 98% nas duas maiores concentrações. Os preparados homeopáticos

não promoveram redução no consumo foliar, assim como não provocaram efeitos deleterios

no desenvolvimento das lagartas de A. gemmatalis. O óleo de nim nas duas maiores

concentrações apresentou eficiência de controle de E. aporema superior a 80%, seguido do

tratamento Dipel

SC 0,7 L ha

-1

, porém, o tratamento com Dipel

SC 0,7 L ha

-1

não alcançou

índice de controle superior a 50%. Nosódio de E. aporema na 30CH não apresentou efeito

sobre a própria espécie. Os efeitos adversos do óleo de nim e do B. thuringiensis provocados

em lagartas de A. gemmatalis foram mais evidentes quanto menor o intervalo entre a

aplicação e o início da alimentação das lagartas. O efeito residual do óleo de nim foi

dependente da concentração utilizada, sendo que quanto maior a concentração maior o efeito

residual. Os bioterápicos pouco influenciaram no desenvolvimento e na mortalidade das

lagartas de A. gemmatalis. No teste de seletividade, os tratamentos bioterapicos com nosódio

de A. gemmatalis e Dipel

SC, foram classificados como inócuos e o óleo de nim 0,5%,

levemente nocivo, já os tratamentos com óleo de nim nas concentrações 1,5% e 2,5%, foram

classificados como moderadamente nocivos.

Palavras-chave: Lagarta-da-soja. Broca-das-axilas. Nim. Nosódio. Seletividade.

Trichogramma. Glycine max.

ABSTRACT

Four trails were conducted with the objective to study the potential of neem oil, Azadirachta

indica, and biotherapics on the control of lepidoptera pests in organic soybean culture. Leaf

consumption, development and mortality of Anticarsia gemmatalis Hubner, 1818

(Lepidoptera: Noctuidae) were evaluated in laboratory, with larvae submitted to the

treatments: leaf sprayed with neem oil (0.5%), leaf sprayed with neem oil (1.5%), leaf sprayed

with neem oil (2.5%), leaf and larvar sprayed with neem oil (1.5%), leaf sprayed with A.

gemmatalis macerated bioteraphic 10 mL.L

-1

, leaf sprayed with A. gemmatalis triturated

bioteraphic 10 mL.L

-1

, leaf and larvae sprayed with A. gemmatalis triturated bioteraphic 10

mL.L

-1

, leaf sprayed with Dipel

0,5 L.ha

-1

and control. To the experiment with the soybean

shoot borer Epinotia aporema Wals (Lepidoptera: Noctuidae) in the field, the treatments:

neem oil (1; 3 and 5%), E. aporema triturated biotherapic, Dipel

SC (Bacillus thuringiensis)

0.5 and 0.7 L ha

-1

and control with no intervention, were applied twice in a completely

randomized blocks design with four replicates. Additionally, a study to verify the residual

effect of the products was performed by offering soybean leaves sprayed in the field to A.

gemmatalis at the laboratory, at 0, 4 and 8 days after spraying. To evaluate the compatibility

of these products with the biological control, a selectivity test to natural enemies was

conducted under in vitro conditions, according to the International Organization of Biological

Control (IOBC), using the immature phase of the parasitoid Trichogramma pretiosum Riley,

1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Neem oil reduced leaf consumption, caused insects

deformation and high mortality indexes. The biotherapics did not have effect to leaf

consumption and neither caused deleterious effects in A. gemmatalis development. The two

highest concentrations of neem oil showed control efficiency of E. aporema superior to 80%,

followed by the treatment Dipel

SC 0,7 L ha

-1

, but did not reach a control index higher than

50%. Epinotia aporema biotherapics (30 CH) did not show effect on the own species.

Adverse effects of neem oil and B. thuringiensis in larvae of A. gemmatalis were more evident

when the time between spraying and starting larvae feeding was smaller. The residual effect

of neem oil was higher according to the increase of the concentration used. Biotherapics had

little influence in the development and mortality of A. gemmatalis. In the selectivity test, A.

gemmatalis biotherapics and Dipel

SC were classified as innocuous, neem oil (0.5%) as

slightly harmful, and neem oil 1.5% and 2.5% as moderately harmful.

Keywords: Velvetbean caterpillar. Soybean shoot borer. Neem. Biotherapics. Seletivity.

Trichogramma. Glycine max.

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 - Esquema representativo com materiais e etapas utilizadas na criação de Anticarsia

gemmatalis: A) Gaiolas confeccionadas com tubos de PVC para coleta das

posturas, B) Pote com folhas de sulfite contendo ovos, C) Potes plásticos contendo

dieta artificial para criação na fase larval, D) Pote plástico contendo pupas, E)

Gaiola telada (50 x 30 cm) para emergência e acasalamento. .............................40

Figura 2 - Viabilidade do parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley, após o tratamento

com óleo de nim, de bioterápicos e do Bacillus thuringiensis na fase de pupa do

parasitóide.......................................................................................................... 87

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 - Composição da dieta artificial utilizada para alimentação de Anticarsia gemmatalis

em laboratório.........................................................................................................41

Tabela 2 - Consumo foliar por lagartas de Anticarsia gemmatalis no período de 24 horas em

laboratório. Temperatura: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10%. Lages, SC............................44

Tabela 3 - Peso larval de Anticarsia gemmatalis alimentadas por 5 dias com folhas de soja

submetidas a diferentes tratamentos em laboratório. Temperatura: 25 ± 2 ºC; UR:

70 ± 10%. Lages, SC.............................................................................................47

Tabela 4 - Mortalidade diária acumulada de lagartas de Anticarsia gemmatalis, alimentadas

com folhas de soja submetidas a diferentes tratamentos. Temperatura: 25 ± 2 ºC,

UR: 70 ± 10%. Lages, SC.......................................................................................47

Tabela 5 - Número médio de pupas de Anticarsia gemmatalis provenientes de lagartas

submetidas a alimentação com folhas de soja tratadas com diferentes substâncias

em laboratório e viabilidade da fase pupal. Temperatura: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ±

10%. Lages, SC....................................................................................................49

Tabela 6 - Tratamentos utilizados na aplicação realizada em 21/01/2008 em soja cultivada sob

sistema orgânico, para o controle de Epinotia aporema. Lages-SC, ano agrícola

2007/2008................................................................................................................55

Tabela 7 - Tratamentos utilizados na aplicação realizada em 05/02/2008 em soja cultivada sob

sistema orgânico, para o controle de Epinotia aporema. Lages-SC, ano agrícola

2007/2008................................................................................................................56

Tabela 8 - Danos e infestação de Epinotia aporema na cultura da soja, em diferentes datas de

avaliação após a primeira aplicação realizada em 21/01/2008. Lages-SC, ano

agrícola 2007/2008..................................................................................................57

Tabela 9 - Eficiência de controle de larvas de Epinotia aporema apresentados pelos diferentes

tratamentos pulverizados em plantas de soja em 21/01/2008. Lages-SC, ano

agrícola 2007/2008..................................................................................................58

Tabela 10 - Danos e infestação de Epinotia aporema na cultura da soja, em diferentes datas de

avaliação após a segunda aplicação realizada em 05/02/2008. Lages-SC, ano

agrícola 2007/2008................................................................................................60

Tabela 11 - Eficiência de controle de larvas de Epinotia aporema apresentados pelos

diferentes tratamentos pulverizados em plantas de soja em 05/02/2008. Lages-

SC, ano agrícola 2007/2008...............................................................................61

Tabela 12 - Produtos utilizados nos respectivos tratamentos de plantas de soja cultivadas no

campo. Lages, SC, ano agrícola 2007/2008.........................................................68

Tabela 13 - Desenvolvimento de lagartas de Anticarsia gemmatalis alimentadas durante 5 dias

em laboratório com folhas de soja submetidas a diferentes tratamentos, com início

da alimentação aos 0, 4 e 8 dias após a pulverização. Temperatura: 25 ± 2 ºC; UR:

70 ± 10%, fotofase:12 h.........................................................................................70

Tabela 14 - Análise de contrastes referentes ao peso médio de lagartas de Anticarsia

gemmatalis alimentadas com folhas de soja aos 0, 4 e 8 dias após a

pulverização. Temperatura: 25 ± 2 ºC; UR: 70 ± 10%, fotofase:12 h................71

Tabela 15 - Efeito residual expresso na mortalidade de lagartas de Anticarsia gemmatalis

alimentadas com folhas de soja submetidas a diferentes tratamentos, com inicio

da alimentação aos 0, 4 e 8 dias após a pulverização. Temperatura: 25 ± 2 ºC;

UR: 70 ± 10%, fotofase:12 h...............................................................................72

Tabela 16 - Análise de contraste referentes ao percentual de mortalidade de lagartas de

Anticarsia gemmatalis alimentadas com folhas de soja aos 0, 4 e 8 dias após a

pulverização (DAP). Temperatura: 25 ± 2 ºC; UR: 70 ± 10%, fotofase:12 h .....73

Tabela 17 - Análise de contraste referente ao peso e mortalidade de lagartas de Anticarsia

gemmatalis entre as épocas para cada tratamento................................................75

Tabela 18 - Efeito do óleo de nim, de bioterapicos e do Bacillus thuringiensis na redução da

viabilidade (E) de Trichogramma pretiosum Riley em relação a testemunha

(água), na fase de pupa do parasitóide e classificação de seletividade desses

produtos. Temperatura 25 ± 2 ºC, Umidade Relativa: 70 ± 10%, Fotofase: 12

horas.......................................................................................................................85

SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO GERAL................................................................................................15

2 REFERENCIAL TEÓRICO .........................................................................................17

2.1 CONSIDERAÇÕES SOBRE A CULTURA DA SOJA..................................................17

2.2 A LAGARTA-DA-SOJA Anticarsia gemmatalis (HUBNER, 1818) ..............................19

2.2.1 Distribuição geográfica e plantas hospedeiras..............................................................19

2.2.2 Biologia de Anticarsia gemmatalis.............................................................................. 20

2.3 A BROCA-DAS-AXILAS Epinotia aporema (WALS) ................................................. 21

2.3.1 Distribuição geográfica e plantas hospedeiras .............................................................21

2.3.2 Biologia de Epinotia aporema ....................................................................................21

2.4 MANEJO DE INSETOS-PRAGA EM SISTEMA ORGÂNICO DE CULTIVO DE

SOJA.........................................................................................................................................22

2.5 EXTRATOS VEGETAIS .............................................................................................. 24

2.6 O NIM, Azadirachta indica ...........................................................................................27

2.7 PREPARADOS HOMEOPÁTICOS PARA O MANEJO DE PRAGAS ........................31

2.8 ESTUDOS DE SELETIVIDADE A INIMIGOS NATURAIS .......................................34

2.9 CONSIDERAÇÕES SOBRE O PARASITÓIDE Trichogramma spp. ...........................34

3 CAPÍTULO I: EFEITO DO ÓLEO DE NIM E DE PREPARADOS

HOMEOPÁTICOS NO DESENVOLVIMENTO E MORTALIDADE DE Anticarsia

gemmatalis .........................................................................................................................36

3.1 RESUMO....................................................................................................................... 36

3.2 INTRODUÇÃO ............................................................................................................37

3.3 MATERIAL E MÉTODOS ........................................................................................... 39

3.3.1 Obtenção das plantas de soja...........................................................................................39

3.3.2 Criação de Anticarsia gemmatalis...................................................................................39

3.3.3 Produtos utilizados nos bioensaios..................................................................................41

3.3.4 Bioensaio 1 – Consumo foliar de soja tratada com óleo de nim e preparados

homeopáticos por Anticarsia gemmatalis.................................................................................42

3.3.5 Bioensaio 2 – Desenvolvimento e mortalidade de Anticarsia gemmatalis alimentadas

com folhas de soja tratadas com óleo de nim e preparados homeopáticos...............................43

3.4 RESULTADOS E DISCUSSÃO ...................................................................................44

3.4.1 Bioensaio 1 – Consumo foliar de soja tratada com óleo de nim e preparados

homeopáticos por Anticarsia gemmatalis.................................................................................44

3.4.2 Bioensaio 2 – Desenvolvimento e mortalidade de Anticarsia gemmatalis alimentadas

com folhas de soja tratadas com óleo de nim e preparados homeopáticos...............................46

3.5 CONCLUSÕES ............................................................................................................ 50

4 CAPÍTULO II: MANEJO DA BROCA-DAS-AXILAS Epinotia aporema (WALS)

(LEPIDOPTERA: TORTRICIDAE), EM SOJA CULTIVADA SOB O SISTEMA

ORGÂNICO ......................................................................................................................51

4.1 RESUMO....................................................................................................................... 51

4.2 INTRODUÇÃO ............................................................................................................52

4.3 MATERIAL E MÉTODOS ........................................................................................... 53

4.3.1 Estabelecimento da cultura da soja..................................................................................54

4.3.2 Caracterização e obtenção dos produtos utilizados..........................................................54

4.3.2.1 Preparo do composto homeopático...............................................................................54

4.3.3 Condução do experimento...............................................................................................55

4.4 RESULTADOS E DISCUSSÃO ...................................................................................56

4.5 CONCLUSÕES ............................................................................................................ 61

5 CAPÍTULO III: EFEITO RESIDUAL DO ÓLEO DE NIM, Bacillus thuringiensis E

DE PREPARADOS HOMEOPÁTICOS PARA O CONTROLE DE Anticarsia

gemmatalis .........................................................................................................................62

5.1 RESUMO....................................................................................................................... 62

5.2 INTRODUÇÃO ............................................................................................................63

5.3 MATERIAL E MÉTODOS............................................................................................ 65

5.3.1 Local e condições do estabelecimento do experimento...................................................65

5.3.2 Semeadura da soja............................................................................................................65

5.3.3 Criação de Anticarsia gemmatalis...................................................................................65

5.3.4 Produtos utilizados no experimento.................................................................................66

5.3.5 Condução do experimento...............................................................................................67

5.4 RESULTADOS E DISCUSSÃO ...................................................................................69

5.5 CONCLUSÕES ............................................................................................................ 78

6 CAPÍTULO IV: EFEITO DO ÓLEO DE NIM, DE BIOTERÁPICOS E DO Bacillus

thuringiensis SOBRE A FASE IMATURA DO PARASITÓIDE DE OVOS

Trichogramma pretiosum RILEY (HYMENOPTERA: TRICHOGRAMMATIDAE) ...79

6.1 RESUMO....................................................................................................................... 79

6.2 INTRODUÇÃO ............................................................................................................80

6.3 MATERIAL E MÉTODOS ........................................................................................... 82

6.4 RESULTADOS E DISCUSSÃO ...................................................................................84

6.5 CONCLUSÕES ............................................................................................................ 88

7 CONCLUSÕES GERAIS ..............................................................................................89

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS .............................................................................90

ANEXOS ......................................................................................................................... 106

1 INTRODUÇÃO GERAL

A cultura da soja é um dos principais cultivos realizado no Brasil. A nível mundial, o

Brasil ocupa a segunda colocação entre os principais países produtores desta oleaginosa, com

fortes indicativos de que se tornará o primeiro ainda nessa década, principalmente em função

da limitação de áreas para expansão em outros países produtores (DALL’ AGNOL, 2007).

Nesse contexto, nos últimos anos tem aumentado o cultivo da soja sob o sistema orgânico. Os

principais fatores que tem estimulado esse setor é a crescente preocupação da sociedade em

relação à qualidade do alimento consumido, com a saúde e com os efeitos das mudanças

climáticas, o que tem dispertado na sociedade o interesse por uma agricultura ecológica, por

ver nesse sistema de cultivo um menor impacto ao meio ambiente (LUNARDON, 2008).

Outro fator importante que tem alavancado o cultivo da soja sob o sistema orgânico é de

ordem econômica, já que o mercado paga em média 30% a mais, comparado a soja

convencional (SUJII et al., 2002).

Os maiores desafios encontrados pelos agricultores para a conversão do sistema de

cultivo convencional para o cultivo orgânico, assim como para manutenção da produtividade

da cultura da soja sob o sistema orgânico, está relacionado ao controle de insetos-praga,

doenças e plantas daninhas. No entanto, existe uma carência de informações, com poucas

pesquisas visando o manejo fitossánitario na cultura da soja manejada sob o sistema orgânico.

Dentre as principais espécies de Lepidoptero praga que atacam à cultura da soja, a

lagarta-da-soja, Anticarsia gemmatalis Hubner, 1818 (Lepidoptera: Noctuidae), é considerada

praga chave (EMBRAPA, 2006). Porém, nas últimas safras, outras lagartas vêm provocando

danos expressivos nas plantas, tais como a lagarta falsa-medideira, Pseudoplusia includens

Walker, 1857 (Lepidoptera: Noctuidae), lagarta enroladeira, Omiodes indicata Fabricius,

1775 (Lepidoptera: Pyralidae), e algumas espécies do gênero de Spodoptera, tais como,

lagarta-das-vagens, S. eridanea (Cramer, 1872), lagarta-do-cartucho-do-milho, S. frugiperda

(J. E. Smith, 1797) e S. cosmioides (Walker, 1858) (Lepidoptera: Noctuidae) (BUENO et al.,

2008). Além dessas, existem outras pragas de importância secundária com maior relevância

para algumas regiões restritas, como por exemplo, a broca-das-axilas (Epinotia aporema)

(Wals) (Lepidoptera: Tortricidae) (HOFFMANN-CAMPO et al., 2000).

A principal tática de manejo desse complexo de lagartas na soja convencional é o

controle químico. No entanto, no sistema orgânico, os agrotóxicos são proibidos e, portanto, o

manejo de insetos-praga em sistema de cultivo orgânico deve-se basear em medidas

alternativas, que mantenham o equilíbrio do agroecossitema (CORRÊA-FERREIRA, 2004),

tais como, a diversificação de cultivos, rotação de culturas, manejo cultural, controle

biológico e intervenções com inseticidas biologicos e botânicos (ZEHNDER, 2006).

Espécies de plantas da família Meliaceae destacam-se entre as demais com potêncial

fonte de substâncias inseticidas. Dentre essas o nim, Azadirachta indica A. Juss. tem sido

considerada a mais importante e estudada (ROEL & VENDRAMIM, 2006). De acordo com

Mordue & Balckwell (1993) insetos pulverizados ou alimentados com azadiractina

apresentam inibição de crescimento, morte de larvas durante o processo de ecdise,

alongamento da fase larval, formação de pupas e adultos deformados e redução da

fecundidade e fertilidade dos adultos.

A homeopatia é apontada por Casali (2004) como um método para o manejo

fitossanitario em sistemas de cultivos orgânico. Fundamentada por Hahnemann em 1796, a

homeopatia trabalha com o princípio da cura pela semelhança. A isopatia, uma derivação da

homeopatia, trabalha com o princípio da igualdade, pressupondo o equilíbrio por meio de

produtos causadores do próprio mal, os quais são denominados de nosódios isoterápicos. Os

nosódios constituem uma possibilidade para o manejo ecológico de pragas e doenças de

plantas por utilizar como matéria prima, os próprios agentes causais, as pragas ou doenças

(ARRUDA et al., 2005).

Assim, o presente trabalho teve o objetivo de avaliar o potêncial do óleo de nim A.

indica e de preparados homeopáticos para o controle de E aporema e A. gemmatalis na

cultura da soja conduzida sob o sistema orgânico, e está dividido em quatro capítulos. O

primeiro capítulo dessa dissertação trata dos efeitos dos produtos sobre o consumo foliar,

desenvolvimento e mortalidade de A. gemmatalis em laboratorio. O segundo capítulo

apresenta os resultados da aplicação desses produtos a campo para o controle de E. aporema.

No terceiro capítulo, é evidenciado o efeito residual apresentado por esses produtos quando

utilizados a campo. E por fim, no quarto capítulo destaca os efeitos dos referidos produtos aos

parasitóides de ovos Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera:

Trichogrammatidae), aplicados sobre a fase imatura desse parasitóide.

2 REFERENCIAL TEÓRICO

2.1 CONSIDERAÇÕES SOBRE A CULTURA DA SOJA

A soja (Glycine Max L. Merrill) é uma das principais culturas cultivada no Brasil e no

mundo, em função do seu alto potencial produtivo, sua composição química e valor nutritivo.

A soja representa hoje a principal fonte de proteína vegetal, com teor médio de proteína nos

grãos de 30 a 45%. Os carboidratos são o segundo componente mais encontrado no grão e

representam cerca de 30 a 35% da sua composição total (MANDARINO et al. 2006). É

considerada também a principal oleaginosa cultivada no mundo, apresenta nos grãos em torno

de 19% de lipídios (DALL’AGNOL, 2007).

A nível mundial e em comparação com outras espécies produtoras de grãos, a soja foi

a mais cultivada nos últimos 37 anos, apresentando crescimento de 763% de 1970 a 2007. No

Brasil, passou de uma área cultivada de 1.300.000 ha em 1970 para 20.700.000 ha em 2007,

representando 45% da área semeada com cultivos anuais (DALL’AGNOL, 2007).

Os principais países produtores de soja são os Estados Unidos, Brasil e Argentina

(DALL’AGNOL, 2007). Na safra 2007/08 o líder nacional na produção de soja foi o estado

do Mato Grosso com 17,8 milhões de toneladas (5.696 ha), seguido do estado do Paraná com

11,9 milhões de toneladas (3.977 ha), Rio Grande do Sul com 7,7 milhões de toneladas (3.834

ha) e Goiás com 6,5 milhões de toneladas (2.179 ha) (CONAB, 2008).

Na economia brasileira, o complexo soja (grão, farelo e óleo) lidera a lista de

exportação de produtos agropecuários, injetando anualmente cerca de 10 bilhões de reais

(VISÃO AGRICOLA, 2006). Em 2007, o Brasil exportou 23,7 milhões de toneladas de soja

em grão, 12,4 milhões de toneladas de farelo de soja e 2,3 milhões de toneladas óleo

(ABIOVE, 2008).

A produção de soja no Brasil tem se caracterizado por ser dependente de uma gama de

insumos químicos, como agrotóxicos utilizados para o controle de pragas, doenças e plantas

invasoras além de fertilizantes químicos utilizados para incrementar a fertilidade do solo

(GARCIA, 2003).

Recentemente, uma nova forma de cultivo tem sido proposta, o cultivo da soja em

sistema orgânico. Esse sistema de produção tem sido impulsionado pela demanda de

alimentos mais saudáveis, necessidade de se praticar uma agricultura ambiental e

economicamente sustentável e com ênfase na conservação dos recursos naturais. A demanda

de soja cultivada sob o sistema orgânico, principalmente pelo mercado japonês e europeu tem

alavancado a expansão de áreas cultivadas no Brasil. Outro fator que tem motivado a

conversão do cultivo convencional para o orgânico é de ordem econômica, já que o produto

orgânico recebe preços mais altos (GARCIA, 2003). Segundo Sujii et al., (2002) a demanda

pelo produto orgânico na safra 2000/2001 no mercado internacional possibilitou a

comercialização da soja produzida sob este sistema em valor superior a 30% do que aquela

cultivada sob o sistema convencional. Entre as safras 2006 e 2007, os preços pagos pela soja

orgânica ao produtor subiram em torno 41% passando de R$ 525,37, em 2006, para R$

743,14 a tonelada, em 2007. Para 2008, a cotação já está acima de R$ 900,00 a tonelada

(SEAB, 2008). De acordo com Pelinnski & Guerreiro (2004), a soja orgânica brasileira é um

dos produtos mais almejados pelo mercado externo.

A produção de soja orgânica iniciou na região norte do Rio Grande do Sul, na safra de

1997/98 por um grupo de 13 agricultores incentivados pela empresa Sustentagro Assessoria e

pelos sindicatos de trabalhadores rurais da região, com uma área semeada em torno de dois

hectares por agricultor. Devido aos bons resultados encontrados pelos pioneiros, na safra

2000/01, já eram mais de 425 agricultores certificados (HOFFMANN, 2004).

A soja orgânica é atualmente cultivada nos estados do Rio Grande do Sul, Santa

Catarina, Paraná, São Paulo, Goiás, Distrito Federal e Mato Grosso, com poucas informações

atualizadas sobre área plantada (PLANETA ORGÂNICO, 2005). Em 2000, a área cultivada

com soja orgânica era estimada em 10.000 hectares, com uma expansão de 25 % para a safra

de 2002, atingindo 12.516 hectares (HARKALY, 2000; ORMOND et al., 2002). O principal

produtor de soja orgânica tem sido o estado do Paraná que na safra 2003/2004 teve mais de

4,5 mil hectares, com uma produção superior a nove mil toneladas (SEAB 2006). De acordo

com Planeta Orgânico (2005), na safra de 2005 a produção nacional de soja orgânica atingiu

30 mil toneladas.

A soja produzida sob o sistema orgânico, normalmente, é destinada para o uso na

alimentação humana ou para a produção de rações para alimentação de animais que são

criados sob normas orgânicas. A soja para alimentação humana necessita de algumas

características especiais, como tamanho do grão. O mercado consumidor exige grãos grandes

com peso de 100 grãos acima de 18 gramas e hilo com tonalidade clara, já que hilos mais

escuros, preto ou marrom, pigmentam o produto final (CARVALHO & WANDERLEY,

2007).

A variação na produtividade tem sido um dos principais problemas no cultivo de soja

orgânica em que os valores variam entre 1.200 a 3.700 kg ha

-1

. Esse último valor se iguala aos

obtidos no sistema convencional (GARCIA, 2003; OSTERROHT & PETTERSSEN, 2004).

Segundo Osterroht & Petterssen (2004), o sucesso no cultivo orgânico depende muito da

competência do produtor, já que necessita de uma maior capacidade de utilização de

tecnologias apropriadas ao método de cultivo. Os principais fatores que contribuem para

avariação de rendimento estão relacionados à fertilidade do solo, manejo de plantas invasoras,

doenças e insetos-praga (GARCIA, 2003; HOFFMANN, 2004).

Dentre as espécies de insetos-praga que atacam à cultura da soja a lagarta-da-soja

(Anticarsia gemmatalis) (Hubner, 1818), a lagarta falsa-medideira (Pseudoplusia includens)

(Walker, 1857) (Lepidóptera: Noctuidae) e o complexo de percevejos, principalmente Nezara

viridula (Linnaeus, 1758), Piezodoros guildinii (Westwood, 1837) e Euschistus heros

(Fabricius, 1798) (Hemíptera: pentatomidae), são considerados pragas-chave. Outras pragas

de importância secundária com maior relevância para algumas regiões restritas podem

ocorrer, a exemplo da broca-das-axilas (Epinotia aporema) (Wals) (Lepidoptera: Tortricidae)

(EMBRAPA, 2006; HOFFMANN-CAMPO et al., 2000).

2.2 A LAGARTA-DA-SOJA, Anticarsia gemmatalis (HUBNER, 1818)

2.2.1 Distribuição geográfica e plantas hospedeiras

A lagarta da soja Anticarsia gemmatalis é uma espécie de clima tropical e sub-tropical,

e ocorre em todas as regiões produtora de soja do continente americano, principalmente na

América do Sul (PEDIGO, 2002; SOSA-GOMEZ, 2000; TURNIPSEED & KOGAN, 1976).

No Brasil, essa lagarta pode ser encontrada nos vários locais que produzem soja. Os ataques

se iniciam a partir do mês novembro para as regiões ao norte do Paraná e a partir dos meses

de dezembro e janeiro para as regiões ao Sul do País (HOFFMANN-CAMPO et al., 2000).

Apesar de sua preferência pela cultura da soja, a lagarta pode atacar eventualmente

outras espécies, com preferência por leguminosas. O ataque pode ocorrer também em

gramíneas, como arroz e trigo e em plantas das famílias das malváceas, como o algodão,

principalmente quando o plantio dessas espécies ocorre após a colheita da soja (SOSA-

GOMEZ, 2000).

2.2.2 Biologia de Anticarsia gemmatalis

Na fase adulta de A. gemmatalis, que dura em média 20 dias, as mariposas apresentam

envergadura de 30 a 38 mm, de coloração cinza a marrom avermelhado ou amarelado, com

uma linha transversal na parte superior das asas que pode ser visualizada quando estão em

posição de repouso, e possuem hábito noturno (GALLO et al., 2002; HOFFMANN-CAMPO

et al., 2000; SOSA-GOMEZ, 2000).

O processo reprodutivo, acasalamento e posturas, de A. gemmatalis, ocorre durante a

noite, com picos entre 21:00 e 23:00 horas. Os ovos são depositados de forma isolada na face

inferior das folhas, no caule, nos ramos e nos pecíolos com maior concentração nos terços

médio e inferior das plantas. Os ovos são arredondados e achatados na superfície inferior,

medem de 1 a 2 mm de diâmetro e apresentam coloração verde claro, assim que depositados.

Próximo à eclosão das lagartas tornam-se escurecidos. O período de incubação dos ovos é

regulado pela temperatura, que dura em média três dias, mas em temperaturas mais baixas

pode durar até sete dias. Cada fêmea pode colocar até 1000 ovos, com grande parte das

posturas ocorrendo entre oito e dez dias de vida da mariposa (HOFFMANN-CAMPO et al.,

2000; SOSA-GOMEZ, 2000; TONET et al., 2000).

O período larval dura em média 12 a 15 dias, passando por cinco a seis ínstares. Nos

dois primeiros ínstares, as lagartas apresentam os dois primeiros pares de falsas pernas,

locomovendo-se medindo palmos, fato que pode levá-la a ser confundida com outra espécie, a

Pseudoplusia includens. Nos estágios iniciais, dois primeiros instares, as lagartas se

alimentam do parênquima raspando as folhas. Somente a partir do terceiro ínstar é que as

lagartas conseguem perfurar as folhas (GALLO et al., 2002; HOFFMANN-CAMPO et al.,

2000). A lagarta, em fase inicial de desenvolvimento, apresenta a característica de se jogar da

parte áerea, ficando presas por um fio, quando as plantas são tocadas (TONET et al., 2000). A

partir do terceiro ínstar, a lagarta apresenta quatro falsas pernas no abdômen podendo atingir

até 40 mm de comprimento. Em geral, as lagartas têm coloração verde com cinco estrias

longitudinais branca no dorso, mas em condições de alta infestação ou falta de alimento,

podem ficar escuras, mantendo as listras brancas. No estágio de pré-pupa, que dura em média

dois dias, as larvas param de se alimentar, encolhem, atingindo um comprimento médio de 25

mm e adquirem cor marrom escura com poucas listras longitudinais. O estágio pupal dura em

média sete dias. As pupas podem apresentar cor verde ou marrom, são lisas e medem de 18 a

20 mm de comprimento e 4 a 6 mm de largura. São encontradas abaixo da superfície do solo a

uma profundidade de aproximadamente 2 cm (GALLO et al., 2002; HOFFMANN-CAMPO

et al. 2000; SOSA-GOMEZ, 2000).

Os danos causados à cultura da soja ocorrem na fase larval de A. gemmatalis. A

lagarta é encontrada na maioria das vezes na parte superior das plantas alimentando-se dos

folíolos (SOSA-GOMEZ, 2000). Inicialmente, as lagartas raspam as folhas das plantas,

causando maiores prejuízos à medida que vão se desenvolvendo. Consomem todas as partes

da folha, desde o limbo foliar até as nervuras, podendo ocasionar 100% de desfolha. Durante

seu estádio larval, cada lagarta pode consumir cerca de 100 a 150 cm

de área foliar, com

maior parte desse consumo, cerca de 96%, nos três últimos ínstares (GALLO et al., 2002;

HOFFMANN-CAMPO et al., 2000; MOSCARDI et al., 2002; SOSA-GOMEZ, 2000).

2.3 A BROCA-DAS-AXILAS Epinotia aporema (WALS)

2.3.1 Distribuição geográfica e plantas hospedeiras

A ocorrência de E. aporema já foi relatada no Sul dos Estados Unidos, Chile, Uruguai

e Brasil (GAZZONI, 2000). Na Argentina, é considerada uma das principais pragas da cultura

da soja (SAUKA et al., 2007). Neste país, os ataques intensificam-se a partir do mês de

dezembro, estendendo-se até o mês de abril (LA DULCE INFORMATIVO, 2006). Essa

espécie apresenta preferência por regiões de maior altitude e temperaturas mais frias, em

especial as noturnas (GAZZONI, 2000).

No Brasil, as regiões mais sujeitas ao ataque de E. aporema são o sul e sudeste do

estado do Paraná, em todo estado de Santa Catarina e Rio Grande do Sul, porém, a ocorrência

dessa praga pode ser observada em todas as regiões que cultivam soja no Brasil (GAZZONI

& OLIVEIRA, 1981, HOFFMANN-CAMPO et al., 2000) .

A broca-das-axilas ataca também outras espécies de leguminosas, como feijão,

lentilha, ervilha e alfafa (GALLO et al., 2002, QUINTELA, 2002).

2.3.2 Biologia de Epinotia aporema

Os adultos de E. aporema apresentam dimorfismo sexual. Os machos possuem o

corpo, cabeça, antena e pernas, de coloração cinza. As asas são acinzentadas com bordas mais

escuras, e quando estão ao sol surgem reflexos castanhos ou cor de cobre. Na ponta do

primeiro par de asas, o macho apresenta uma mancha escura com o centro de cor preta e uma

faixa curva de cor preta que sai da ponta da cabeça percorrendo toda a asa, alternando faixas

escuras e mais claras e que diminui de intensidade até chegar à borda da asa. O segundo par

de asas é de coloração mais clara do que o primeiro, com as bordas bem acinzentadas. As

fêmeas apresentam maior quantidade de escamas sobre as asas, com o primeiro par de asas de

coloração castanho acinzentado com reflexos de coloração cobre (GAZZONI, 2000). A fase

de adulto dura em média 15 a 22 dias e possuem hábitos noturnos (QUINTELA, 2002).

Geralmente, dois dias após o acasalamento, as fêmeas iniciam o processo de

oviposição. Cada fêmea coloca em média 100 ovos. As posturas são realizadas nos ponteiros

das plantas e de forma isolada. Os ovos possuem um formato elíptico, medindo 0,5 x 0,3 mm

de coloração amarelo pálido. O período de incubação dos ovos dura de quatro a sete dias

(GAZZONI, 2000; QUINTELA, 2002; TONET et al., 2000). A fase larval dura em torno de

14 a 22 dias, passando por cinco ínstares (QUINTELA, 2002). Nos primeiros ínstares as

lagartas apresentam coloração branca a verde claro com a cabeça escura, medem de 1 a 2 mm.

À medida que a larva se desenvolve, sua coloração se torna mais amarelada, chegando

próxima a coloração rósea nos últimos íntares. Ao final da fase larval pode atingir 10 mm de

comprimento (HOFFMANN-CAMPO et al. 2000). Desde o início da fase larval, as larvas

apresentam a característica de broquear as plantas, intensificando-se à medida que se

desenvolvem (GAZZONI, 2000).

A fase de pupa pode ocorrer nas folhas das plantas ou no solo. Próximo a fase de pupa,

as lagartas deixam as galerias que formaram nas plantas e se dirigem ao solo. O período de

pupa dura de 12 a 16 dias. As pupas têm coloração castanho rosada, medindo 7 mm de

comprimento e 2 mm de diâmetro. O ciclo da postura até a eclosão das mariposas, leva em

torno de 30 a 40 dias (GAZZONI, 2000; QUINTELA, 2002).

2.4 MANEJO DE INSETOS-PRAGA EM SISTEMA ORGÂNICO DE CULTIVO DE SOJA

A agricultura orgânica trabalha com o princípio da sustentabilidade da unidade de

produção, visando a preservação ambiental, a agrobiodiversidade e a atividade biológica.

Nesse sistema de produção, exclui-se a utilização de fertilizantes de alta solubilidade,

agrotóxicos, antibióticos, hormônios e organismos geneticamente modificados (NEVES et al.,

2000).

A manutenção da biodiversidade, seja ela pela preservação da vegetação nativa ou

pela diversidade de cultivos, tem papel fundamental para a estabilidade do agroecossitema,

conferindo-lhe maior resiliencia (ALTIERI et al, 2003). A biodiversidade atua na preservação

e manutenção dos inimigos naturais devido à disponibilidade e abundância de alimentos, além

de servir como barreira viva que dificulta a entrada dos insetos nas áreas de cultivos

(CORRÊA-FERREIRA, 2004; GONÇALVEZ & BOFF, 2002). De acordo com Panizzi

(2003), as características da área para o cultivo da soja orgânica são muito importantes. O

ideal é que o cultivo seja realizado em áreas pequenas, com grande diversidade de vegetação

nativa e de outros cultivos, afim de que os insetos-praga tenham dificuldade em localizar-se e

colonizar as áreas com soja, seja em função de estímulos olfativos ou visuais.

O controle biológico, seja ele natural ou aplicado, também assume grande importância

para a manutenção da população das pragas em equilíbrio. Uma grande variedade de espécies

de inimigos naturais ocorre naturalmente nas lavouras de soja orgânica (CORRÊA-

FERREIRA, 2004). De acordo com Corrêa-Ferreira & Peres (2003), os cultivos de soja

conduzidos sob o sistema orgânico apresentam as condições ideais para a preservação e

manutenção dos inimigos naturais. Segundo Venzon et al. (2005), a criação de áreas de

refúgio e/ou microclima favorece a manutenção dos inimigos naturais, a exemplo da formação

de montículos de palha distribuídos pela lavoura que servem como refúgio para insetos

predadores. A manutenção da vegetação natural, próxima às áreas de cultivo também possui

influência no controle biológico aplicado. Corrêa-Ferreira & Panizzi (1999) obtiveram uma

maior eficiência do controle biológico de percevejos da soja no estado do Paraná com os

parasitóides Trissolcus basalis Wollaston em áreas que eram cercadas por uma vegetação

natural, as quais serviram de refúgio para os parasitóides.

Para o controle de insetos-praga, em sistema de cultivo orgânico, devem-se utilizar

medidas alternativas, que mantenham o equilíbrio do agroecossitema (CORRÊA-FERREIRA,

2004). O manejo de lepidópteros-praga pode ser realizado com vários agentes

entomopatogênicos. Exemplo disso é a utilização do Baculovírus da lagarta-da-soja, que é um

vírus de poliedrose nuclear (VPNAg) para o controle da A. gemmatalis (MOSCARDI, 2003).

Porém, em função da falta de alternância com outras estratégias de controle, já existem

populações A. gemmatalis resistentes ao Baculovírus, fato que tem desestimulado a utilização

desse produto pelos agricultores (GASSEN, 2007). Os estudos com Baculovírus de

Pseudoplusia includens (Baculoloviridae: Núcleo-poliedrovírus) (Psin NPV) estão em inicio

no Brasil pela instituição Embrapa Soja, a partir de isolados obtidos na Guatemala. Trabalhos

realizados em laboratório e a campo nos EUA demonstraram bons resultados, o que sugere a

possibilidade do uso desse produto biológico para o manejo de P. includens (BUENO et al.,

2007).

O controle de lepidopteros com entomopatógenos pode ser também realizado com a

bactéria Bacillus thuringiensis. Essa bactéria é de ocorrência natural no solo, pertencente à

família Bacilliaceae. A principal atividade inseticida da bactéria B. thuringiensis advém do

processo de esporulação onde são produzidas proteínas, denominadas de proteínas cristal

(Cry), que contém endotoxinas. Essas toxinas causam desintegração e paralisia das células

epiteliais do intestino médio dos insetos, fazendo com que o inseto pare de se alimentar, logo

depois de ingerido o alimento contaminado, podendo morrer por inanição, que é a fraqueza

por falta de alimento. Causa, também, ruptura dos tecidos do intestino médio, provocando a

mistura da hemolinfa com o conteúdo do intestino, acarretando a morte do inseto por infecção

generalizada (GLINK & PATERNAK, 1998; MOSCARDI, 2003; MOINO JÚNIOR, 2005;

POLANCZYK et al. 2008). Além desses, existem outros entomopatógenos que ocorrem de

forma natural e que regulam as populações das lagartas, como os fungos Nomuraea rileyi,

Pandora gammae e Zoophthora radicans. Esses dois últimos são comum de infectarem P.

includens (HOFFMANN-CAMPO et al. 2003).

De acordo com Oliveira & Hoffmann-Campo (2003), o manejo das pragas de solo ou

de insetos que passam pelo menos uma fase de seu desenvolvimento no solo deve ser

realizado com métodos culturais, como a rotação de culturas com espécies não preferenciais

ou não hospedeiras e, também, com a manipulação da época de semeadura. Os autores ainda

salientam que o controle de insetos com hábito subterrâneo, após a cultura já implantada é

difícil, sendo necessário que se desenvolvam estratégias de controle antes da implantação da

cultura, principalmente em áreas com histórico de ocorrência dessas pragas.

Hoffmann-Campo et al. (2003) citam que outras táticas de manejo podem ser

empregadas para o manejo de insetos-praga na cultura da soja cultivada sob o sistema

orgânico, tais como a utilização de cultivares resistentes a pragas, uso de armadilhas,

feromônios, semioquímicos e a aplicação de extratos vegetais com propriedades inseticidas.

Da mesma forma, os preparados homeopáticos também são apontados como substâncias

alternativas para o controle de insetos-praga em cultivos conduzidos sob o sistema orgânico

(ALMEIDA et al., 2003, CASALI, 2004).

2.5 EXTRATOS VEGETAIS

A utilização de extratos vegetais com propriedades inseticidas é uma prática que vem

sendo adotada pelo homem desde a idade antiga (VIEGAS JÚNIOR, 2003). Até a descoberta

dos inseticidas sintéticos, na primeira metade do século XX, essas substâncias eram muito

utilizadas no controle de insetos, principalmente nos países tropicais (COSTA et al., 2004;

VENDRAMIM & GASTIGLIONI, 2000). Nessa época, o Brasil era um grande produtor de

inseticidas botânicos, como piretro, rotenona e nicotina, tornando-se um empreendimento

comercial considerável, inclusive para exportação (AGUIAR-MENEZES, 2005). De acordo

com Lagunes et al. (1984) os primeiros inseticidas botânicos utilizados foram a nicotina,

extraída de Nicotiana tabacum (Solanaceae), a rianodina extraída de Ryania speciosa

(Flacuortiaceae), a sabadina e outros alcalóides provenientes de Schoenocaulon officinale

(Liliaceae), as piretrinas extraídas de Chrysanthemum cinerariaefolium (Asteraceae) e a

rotenona presente em Derris spp. e Lanchocarpus spp. (Fabaceae).

Com o fim da segunda guerra mundial, os agrotóxicos que eram utilizados para

combater homens e desinfestar áreas de invasão, passaram a ser utilizados no controle de

pragas agrícolas em grande escala e os inseticidas botânicos acabaram sendo deixados de lado

(NEVES et al., 2003), já que os sintéticos se mostravam mais eficientes e com menor custo

(SOUZA, 2004). Apesar da eficiência dos inseticidas sintéticos, eles apresentam alguns

efeitos maléficos com o uso contínuo e indiscriminado, como contaminação ambiental,

presença de resíduos nos alimentos, desequilíbrio biológico com a destruição dos insetos

benéficos e a seleção de insetos resistentes (HERNANDEZ & VENDRAMIN, 1996). Além

de causarem problemas de intoxicação ao homem (NEVES et al., 2003).

De acordo com Vendramim & Gastiglioni (2000) as pesquisas com plantas inseticidas

são realizadas com o objetivo de descobrir novas moléculas que possam compor novos

inseticidas sintéticos, e para a obtenção de inseticidas botânicos naturais que possam ser

utilizados no controle de pragas, principalmente onde os inseticidas sintéticos não são

permitidos como no sistema de cultivo orgânico.

A retomada dos estudos com fitoinseticidas deve-se principalmente à necessidade de

obter novos compostos para utilização no controle de pragas, que sejam menos agressivos ao

meio ambiente, sem problemas de resíduos nos alimentos, que evitem ou retardem o

aparecimento de insetos resistentes e ainda que não apresentem ação sobre organismos

benéficos (GALLO et al., 2002; VENDRAMIM & GASTIGLIONI, 2000).

A utilização dos inseticidas botânicos tem o objetivo de reduzir a população da praga,

de forma que a morte do inseto é apenas um dos efeitos causados por esses produtos, em

conseqüência de outros efeitos, tais como repelência, inibição da oviposição e da alimentação,

distúrbios no desenvolvimento causado por alterações hormonais e deformações (GALLO et

al., 2002; ROEL, 2001;).

A deterrência alimentar é um distúrbio associado a mecanismos sensoriais e causa a

redução do consumo de alimento. Conseqüentemente, a deterrência provoca deficiência

nutricional que ocasiona atraso no desenvolvimento, deformações e redução da capacidade de

movimentação do inseto (COSTA et al., 2004; MORDUE (LUNTZ) & NIBEST, 2000).

Com o objetivo de avaliar a atividade antialimentar de diversas espécies de plantas,

Saito et al. (2004) utilizaram as espécies de lagartas Spodoptera frugiperda e Anticarsia

gemmatalis. Os extratos alcoólicos foram obtidos pelo método de percolação e após a diluição

foram aplicados em discos de folhas de milho ou soja. Os discos tratados foram colocados em

placas de Petri, alternados com discos não tratados, utilizando uma lagarta de 5º ínstar de

acordo com a espécie. Após duas horas, os discos foram retirados e área foliar medida para

verificação do consumo. Os autores observaram que as espécies de plantas que apresentaram

efeito de deterrência alimentar foram Agonandra brasiliensis, Ocotea suaveolens, Annona

dióica e Machaerium hirtum, as quais apontavam a presença de saponinas, alcalóides,

cumarinas ou falavonóides, obtidos através da análise de grupos químicos.

Novo & Nassetta (1998) constataram o efeito de deterrência alimenatar para

Anticarsia gemmatalis quando fornecidos discos de folhas de soja tratadas com extrato de

Larrea divaricata e Chenopodium ambrosioides, ambos na concentração de 5%. A

deterrência foi calculada a partir do percentual de folha consumida pelo inseto no alimento

tratado e não tratado. Roel et al. (2000) observaram que lagartas de Spodoptera frugiperda

alimentadas com folhas de milho imersas em extrato de Trichilia pallida morreram durante o

processo de ecdise, sem conseguir liberar completamente a exúvia e outro grupo de lagartas

morreram na fase de pré-pupa e pupa. Segundo esses autores essas alterações morfológicas

resultaram de efeitos dos componentes químicos do extrato no sistema hormonal do inseto.

Outro efeito importante de plantas inseticidas é a redução da fertilidade e a inibição da

oviposição através da repelência. Medeiros et al. (2005) avaliaram o efeito de extratos

aquosos de 20 diferentes espécies de plantas em relação à preferência para oviposição de

Plutella xylostella Linnaeu, 1758 (Lepidoptera: Plutellidae). Discos de folhas de couve foram

imersos em cada extrato à concentração de 10%, por um minuto. Em seguida, foram divididos

em quatro partes iguais e duas partes foram colocadas alternadamente com outras duas partes

tratadas com água destilada, em uma gaiola. A contagem dos ovos foi feita após 24 horas. Os

autores observaram que os extratos apresentaram efeito deterrente na oviposição da praga,

com destaque para os extratos de Enterolobium contortisilliquum (frutos), Sapindus

saponaria (frutos) e Trichilia pallida (folhas), apresentando 100% de deterrência na

oviposição.

O efeito ovicida foi observado em trabalho realizado por Almeida et al. (2005) com

extrato de Piper nigrum (pimenta do reino) e de Calopogonium caeruleum (Cipó-Timbó) na

dose de 3 e 6 mL, aplicados em sementes de feijão. Esses extratos reduziram o percentual de

sementes com orifícios de emergência de Callosobruchus maculatus (Fabr., 1775)

(Coleoptera: Bruchidae), comprovando dessa forma o efeito ovicida. Segundo o mesmo autor,

além do efeito ovicida, esses extratos interferem no período de incubação dos ovos viáveis,

aumentando o ciclo evolutivo dos insetos, possivelmente por possuirem constituintes

químicos ativos que afetam o processo fisiológico e bioquímico da formação embrionária e

evitam a viabilidade ou retardam o seu desenvolvimento.

O efeito de repelência do extrato macerado metanólico e macerado acetônico de Piper

nigrum foi observado por Boff et al. (2006) em teste de múltipla escolha, realizado com

adultos do caruncho-do-feijão (Acanthoscelides obtectus) (Say) (Coleoptera: Bruchidae). Os

autores observaram que a preferência pelos grãos sem nenhum tratamento começou a se

evidenciar somente 72 horas após a liberação dos insetos nas gaiolas, e que 120 horas após o

início do experimento, 69% do total de A. obtectus liberados, preferiram se alojar nas placas

que não possuíam nenhum tratamento ou tratadas somente com o solvente utilizado para

preparar os extratos.

A Família Meliaceae tem se destacado por possuir espécies com alta atividade

biológica sobre os insetos. Dentre essas, se destaca a Azadirachta indica, conhecida como nim

ou amargosa, sendo considerada uma das plantas inseticidas mais eficientes já estudadas no

mundo (HOFFAMANN-CAMPO et al., 2003; NEVES et al., 2003).

2.6 O NIM, Azadirachta indica

O nim, Azadirachta indica A. Juss., é uma árvore pertencente à família Meliaceae, a

mesma da santa-barbára, cedro ou mogno. A planta é de origem asiática, natural de Burna e

das regiões áridas do subcontinente indiano, encontrada e cultivada atualmente nos Estados

Unidos, Austrália, países da África e América Central. No Brasil, existem algumas plantações

nas regiões nordeste, centro-oeste e sul (NEVES et al. 2003; SCHMUTTERER, 1990;

VIANA & PRATES, 2003). A planta se desenvolve bem em locais onde o pH do solo se

encontra entre 6,2 a 7,0, com precipitações médias anuais entre 400 a 800 mm e temperatura

entre 21 e 32 ºC. Temperaturas abaixo de 14 ºC comprometem o desenvolvimento da planta,

que não tolera geadas (NEVES et al. 2003).

Em estudos recentes, já foram descobertos 25 diferentes ingredientes ativos presentes

na planta de nim encontrados nas folhas, frutos e sementes, dos quais pelo menos nove desses

ingredientes atuam no desenvolvimento e comportamento dos insetos. Em geral, esses

compostos pertencem à classe dos produtos naturais dos triterpenos, conhecidos também

como limonóides, cujos principais são a azadiractina, nimbina e salanina, que atuam nas

diversas fases de desenvolvimento dos insetos (AGUIAR-MENEZES, 2005; MOSSINI &

KEMMELMEIER, 2005).

A azadiractina é um limonóide de molécula muito complexa, com atividade biológica

variável e encontrada em maiores quantidades nas sementes. Esse composto tem capacidade

para controlar mais de 400 espécies de insetos pertencentes às ordens Coleoptera, Diptera,

Hemiptera, Hymenoptera, Lepidoptera, Orthoptera, Thysanoptera e Neuroptera, além de

alguns fungos, bactérias e nematóides (FIOVARANTE FILHO et al., 2003; MORDUE

(LUNTZ) & NISBET, 2000; VIANA & PRATES, 2003). Segundo Aguiar-Menezes (2005)

ainda não foi relatado nenhum caso de insetos apresentando resistência ou tolerância a essa

molécula.

De modo geral, a azadiractina afeta o desenvolvimento dos insetos interferindo nos

hormônios reguladores do crescimento e metamorfose, por essa razão, as formas jovens de

insetos são mais fáceis de controlar. Geralmente não causa a morte do inseto de imediato,

dado o seu efeito fisiológico, porém, afeta a ecdise, reduz o consumo de alimento, retarda o

desenvolvimento, repele os adultos e atua na reprodução (ISMAN, 2006; MORDUE

(LUNTZ) & NISBET, 2000; NEVES et al., 2003; SCHMUTTERER, 1990; VIANA et al.,

2006).

De acordo com Vendramim & Castiglione (2000), extratos provenientes de nim

apresentam atividade sistêmica, eficiência em baixas concentrações e baixa toxicidade. Em

mamiferos a toxicidade oral e dermal é baixa, com a DL

oral de 13.000 mg/kg, bem superior

a toxicidade dermal apresentada pelo piretro, rotenona e nicotina, os quais apresentam DL

10.000 g/kg (AGUIAR-MENEZES, 2005). Os compostos de nim possuem maior ação por

ingestão que por contato, de modo que os insetos mastigadores são mais facilmente afetados

(NEVES et al., 2003; VIANA & PRATES, 2003). Segundo Schmutterer (1990), a ordem

Lepidoptera é o grupo de insetos mais sensível ao efeito regulador de crescimento dos

produtos a base de nim.

Martinez & Van Emden (2001) observaram que larvas de Spodoptera littoralis

(Boisduval) alimentadas com dieta artificial tratada com azadiractina tiveram seu

desenvolvimento afetado. Segundo esses autores ocorreu prolongamento dos ínstares larvais,

processos de ecdises incompletos, anormalidades nas fases mais avançadas de

desenvolvimento dos insetos e alta taxa de mortalidade, quando utilizadas concentrações mais

altas. Observaram ainda, que quando a azadiractina foi fornecida para lagartas de último

instar, a mortalidade foi maior do que para lagartas de terceiro ínstar.

Resultados semelhantes foram encontrados por Viana & Prates (2003), estudando o

efeito do extrato aquoso de folhas de nim sobre o desenvolvimento e a mortalidade de lagartas

recém eclodidas de Spodoptera frugiperda, observaram que as folhas de milho submergidas e

pulverizadas com extrato de nim causaram elevada taxa de mortalidade e prejudicaram o

desenvolvimento das lagartas sobreviventes. Esses mesmos autores relatam que quando

somente as lagartas receberam o tratamento via pulverização tópica e foram alimentadas com

folhas de milho sem nenhum tratamento a mortalidade acumulada aos 10 dias foi bem

inferior, 12,6%, comparado ao tratamento em que as lagartas se alimentaram de folhas

submersas no extrato de nim, 94,4%, comprovando dessa forma o baixo efeito de contato

desse extrato.

O extrato aquoso de sementes de nim sobre o pulgão do algodoeiro Aphis gossypii

Glover (Hemiptera: Aphididae) foi avaliado por Santos et al. (2004). Foram utilizadas

concentrações de 23,8, 122,0, 410,0 e 1.410,0 mg do pó da semente para cada 100 mL de

água. Os pulgões mantidos sobre discos de folhas tratadas com as duas maiores concentrações

obtiveram respectivamente, 60 e 100% de mortalidade. Segundo o autor em exceção a maior

concentração, as demais não prolongaram a taxa de desenvolvimento dos pulgões.

Trindade et al. (2000) estudou o efeito do extrato metanólico da semente de nim sobre

a mortalidade de ovos e de lagartas de Tuta absoluta (Meyrick, 1917) (Lepidoptera:

Gelechiidae). O extrato foi diluído em metanol para obtenção das concentrações de 1000, 500,

250, 125, e 62,5 mg L

-1

. Folíolos de tomate, contendo posturas com 24 horas de idade, foram

pulverizadas com mini pulverizador manual com volume de calda de 5 ml de cada

concentração, e nas testemunhas com água destilada e metanol. Não foi verificado efeito

tóxico desse extrato sobre a viabilidade dos ovos da traça-do-tomateiro, assim como não

houve diferenças significativas para o período de incubação. No entanto, quando lagartas da

traça-do-tomateiro foram alimentadas com folíolos de tomate imersos nos extratos, seis dias

após o tratamento, a mortalidade foi de 100% para todas as concentrações.

Estudos comparativos da biologia da lagarta-das-fruteiras, Argyrotaenia sphaleropa

(Meyrick, 1909) (Lepidoptera:Tortricidae), alimentada com dieta contendo produtos

permitidos na produção em sistemas orgânicos, em condições de laboratório, foram

realizados por Morandi Filho et al. (2006). Os tratamentos consistiram de óleo de nim

(Natuneem) nas concentrações de 0,25 e 0,50%, extrato pirolenhoso (Biopirol), a 0,25 e

0,50% e testemunha, dieta sem incorporação de inseticida. Os produtos foram incorporados a

dieta no final do preparo. Os autores relatam que o óleo de nim a 0,25 e 0,50%, provocaram

um aumento na duração da fase larval, menor viabilidade da fase de lagarta e de pupa, e

afetou a longevidade dos machos, que viveram aproximadamente 15 dias nos tratamentos

contendo extratos vegetais e 19 dias no tratamento testemunha. O período de oviposição

diferiu da testemunha somente nos tratamentos com óleo de nim (0,50%) e extrato

pirolenhoso (0,50%), sendo que nas menores doses a fase de pré-oviposição se igualou a

testemunha. O tratamento contendo óleo de nim (0,50%) também interferiu na taxa líquida de

reprodução, número de vezes que a população aumenta a cada geração (Ro), ficando em torno

de 42,22, enquanto que na dieta sem extrato foi de 147,01, demonstrando menor capacidade

do aumento da população neste tratamento.

A atividade deterrente alimentar do óleo e do extrato aquoso de nim foi observado por

Lemos et al. (2008), utilizando como inseto teste Spodoptera frugiperda. Foram fornecidos,

para as lagartas de 4º e 5º ínstar discos de folhas de milho (5 cm

) imersas por cinco segundos

nas concentrações 0,25, 0,5, 1,0, e 1,5 %. Os autores relatam que tanto o óleo de nim como

o extrato aquoso de nim nas concentrações de 1,0 e 1,5% apresentaram forte ação deterrente,

diminuindo o estímulo de S. frugiperda à alimentação.

A eficiência de inseticidas naturais foi estudada também por Lima et al. (2008),

avaliando diversos produtos comerciais a base de nim para o controle de S. frugiperda na

cultura do milho cultivado em agroecossistema de várzea. Foram realizadas duas épocas de

semeadura, a primeira no dia nove de novembro de 2005 e a segunda no dia oito de dezembro

de 2005. Em cada época foram realizadas três aplicações dos tratamentos. As avaliações

foram realizadas no oitavo dia após cada pulverização em 10 plantas por parcela, contando o

número de plantas atacadas e com lagartas vivas. Para a primeira época os autores observaram

uma diminuição no percentual de plantas atacadas com larvas vivas após cada aplicação.

Após a segunda aplicação, os tratamentos com NeemAzal- T/S (0,5%), Dalneem

emulcionável (0,5%) e Organic neem (0,5%) não diferiram do tratamento padrão com o

inseticida Match CE. Após a terceira aplicação os tratamentos com NeemAzal- T/S (0,5%)

e Dalneem emulcionável (0,5%) obtiveram uma eficiência de controle de 92,3, superior ao

tratamento padrão com Match CE com eficiência de controle de 76,9. Na segunda época, os

tratamentos se comportaram de forma similar a primeira época, destacando-se os tratamentos

com NeemAzal- T/S (0,5%) e Dalneem emulcionável (0,5%).

Schluter (2006) avaliou a eficiência de extratos vegetais para o controle de Anticarsia

gemmatalis a campo, sob diferentes pressões populacionais. Em experimento realizado com

baixa pressão populacional, o tratamento com óleo de nim (Dalneem) na concentração de 5%

não diferiu do tratamento padrão (Pounce 250 CE) até aos 21 dias após a pulverização, porém,

manteve sua eficiência de controle superior a 80% somente até aos 10 dias após a

pulverização. O autor ainda relata que a eficiência no controle foi aumentando com o passar

dos dias, com um índice de eficiência de controle de 43,25% aos dois dias após a aplicação,

atingindo aos sete dias após a pulverização um índice médio de eficiência de 84,2%. Quando

o autor analisou o efeito do óleo de nim de forma diferenciada para lagartas pequenas

(<1,5cm) e grandes (>1,5cm), observou que as lagartas pequenas foram mais sensíveis ao

tratamento, com eficiência de controle de 100% até sete dias após a pulverização. Quando os

tratamentos foram aplicados sob alta pressão populacional, o óleo de nim (5%) também

atingiu uma eficiência de controle superior a 80%, aos 10 dias após a pulverização.

2.7 PREPARADOS HOMEOPÁTICOS PARA O MANEJO DE PRAGAS

De acordo com Almeida et al. (2003) uma das alternativas para o controle de insetos-

praga em cultivo conduzido sob o sistema orgânico é a utilização de preparados

homeopáticos. Casali (2004) afirma que a homeopatia está sendo o recurso tecnológico mais

pertinente para o manejo de pragas e doenças nesse sistema de cultivo, por visar um equilíbrio

no agroecossitema. Os preparados homeopáticos não apresentam toxicidade e nem deixam

resíduos no ambiente em função da utilização de concentrações infinitesimais da matéria

prima (ANDRADE, 2001).

A homeopatia é uma palavra de origem grega que quer dizer doença semelhante

(homoios = semelhante e pathos = sofrimentos). É uma ciência que pode ser aplicada a todos

os seres vivos, humanos, animais, vegetais e microrganismos (VITHOULKAS, 1980).

A homeopatia é uma prática terapêutica milenar, enunciada ainda por Hipocrátes em

459 a.c. Em 1810, este método recebeu metodologia própria através da publicação de suas

bases conceituais por Samuel Hahnemann no livro “Organon a arte de curar” (LOBÃO,

2004). Tem como base, quatro princípios fundamentais: Lei dos semelhantes, experimento no

homem ou experimentação patogênica e patogenesia, medicamento único e emprego de dose

única e dinaminizada (ESPINOZA et al., 2001; LOBÃO, 2007).

As matérias primas utilizadas na preparação das substâncias homeopáticas podem ter

origem do reino mineral, vegetal e animal, além, de produtos metabólicos e patológicos como

secreções, pus, urina, sangue, dentre outros (VITHOULKAS, 1980; ARRUDA et al, 2005). O

primeiro passo para produzir um preparado homeopático é a obtenção da tintura-mãe,

posteriormente o processo envolve diluições extremas e sucussões sucessivas das substâncias,

processo denominado de dinamização. O princípio da dinaminização é consiste na realização

de diluições seriais na base 1/10 e subseqüente sucussão através de movimentos ascendentes e

descendentes do líquido, escala denominada de decimal. As diluições, também, podem ser

realizadas na base 1/100, denominada de Centesimal Hahnemaniana (CH). A primeira

diluição 1/100 é chamada de 1CH, a segunda 2CH e assim sucessivamente. A partir da 12ª

diluição pela escala Centesimal Hahnemaniana, não há teoricamente nenhuma molécula da

substância original presente, restando apenas o registro de suas informações garantido pelo

processo da sucussão. A técnica de dinaminização torna os preparados homeopáticos potentes

e ativos, o que lhes confere o poder da homeostase à energia vital do organismo em

tratamento (CASALI et al., 2006; VITHOULKAS, 1980).

A homeopatia vegetal não possui uma base consolidada, necessitando de uma

transcrissão por analogia da matéria médica para a obtenção dos preparados, ou de derivados,

que apesar de não cumprirem todos os princípios hahnemanianos da homeopatia, possibilitam

sua utilização no tratamento de plantas, como exemplo a isopatia (ANDRADE & CASALI,

2004).

A isopatia não aplica o princípio fundamental da homeopatia, mas é uma técnica que

utiliza a mesma metodologia de preparação e trabalha com o princípio da igualdade,

pressupondo o equilíbrio por meio de produtos causadores do próprio mal, os quais são

denominados de nosódios isoterápicos. Os nosódios constituem uma possibilidade para o

manejo ecológico de pragas e doenças de plantas por utilizar como matéria prima, os próprios

agentes causais, as pragas ou doenças (ARRUDA et al., 2005; FARMACOPÉIA

HOMEOPATICA BRASILEIRA, 1997).

No Brasil, o uso de preparados homeopáticos para o manejo fitossanitário de plantas é

aceito no sistema orgânico e considerado insumo agrícola pela instrução normativa número 7

do Ministério da Agricultura e Abastecimento publicada no Diário Oficial em 17 de maio de

1999 (BRASIL, 1999). A utilização de preparados homeopáticos em vegetais é ainda muito

insignificante, mas vem crescendo ano após ano (BONATO & PERES, 2007).

Em experimento de campo realizado por Almeida et al. (2003), na cultura do milho,

para avaliar o controle de Spodoptera frugiperda, foram utilizados três preparados

homeopáticos: Euchlaena 6CH (espécie botânica ancestral do milho), Dorus 4CH (inimigo

natural da lagarta do cartucho) e o nosódio de S. frugiperda 30CH. As plantas que receberam

o nosódio de S. frugiperda apresentaram menor número de lagartas, mantendo a população

abaixo do nível de dano econômico, durante a fase vegetativa da cultura. Fazolim et al.

(1999), obtiveram bons resultado com o nosódio de Cerotoma tingomarianus (Coleoptera:

Chysomelidade) nas potências D5, D9, D15 e D29, aplicados em plantas de feijão (Phaseulus

vulgaris L. cv. Carioquinha) para o controle da própria espécie. Foi detectada a não

preferência na alimentação destes insetos em plantas tratadas.

Segundo Almeida et al. (2003), a aplicação de preparados homeopáticos desencadeia

mecanismos de defesas nas plantas em relação ao ataque de insetos, do tipo não preferência

pelo consumo (antixenose) ou através da produção de compostos secundários que são tóxicos

para os insetos (antibiose). O aumento na produção de metabólitos secundários foi verificado

por Andrade et al. (2004) em plantas de Chambá (Justicia pectoralis) quando aplicados

preparados homeopáticos de Justicia carnea (Acanthaceae) nas potências 6CH, 12CH, 18CH

e 30CH. Segundo esses autores, o aumento na produção e concentração de cumarima

possivelmente atuará no mecanismo de resistências dessas plantas.

A eficiência dos preparados homeopáticos foi demonstrada por Giesel (2007) para o

manejo de formigas cortadeiras do gênero Atta e Acromyrmex. Os tratamentos homeopáticos

utilizados no experimento com Atta foram: macerado de formiga 30CH, triturado de formiga

30CH e Belladonna 30CH. Para o experimento com Acromyrmex foram utilizados: macerado

de formiga 30CH, triturado de formiga 30CH, macerado da cultura fúngica 30CH, triturado

da cultura fúngica 30CH e Belladonna 30CH. As aplicações dos preparados homeopáticos

foram realizadas diariamente por um período de 10 dias sobre formigas em movimento no

carreiro ou no olheiro. As avaliações foram realizadas diariamente antes da aplicação,

contando o número de formigas forrageando e o total de formigas em movimento com e sem

cargas, por minuto. Entre os tratamentos homeopáticos utilizados para o experimento com

Acromyrmex, o melhor resultado foi obtido com o triturado de formiga 30CH, com a maior

redução da atividade total (71%) e forrageira (73%). Para o experimento com Atta, os

resultados foram semelhantes aos encontrados para Acromyrmex, com destaque para o

tratamento triturado de formiga 30CH, com uma redução de 60% na atividade total e 68% na

atividade forrageira.

Gonçalves et al. (2008) realizou um experimento com o objetivo de avaliar o efeito do

preparado homeopático de Natrum muriaticum sobre a incindência de tripes (Thrips tabaci)

na cultura da cebola, utilizando as potências 6CH, 12CH e 30CH na dose de 1%, em água.

Segundo os autores a incidência do inseto foi menor em relação a testemunha com água

somente no tratamento Natrum muriaticum 12 CH, incrementando também de forma

significativa a massa de bulbos.

2.8 ESTUDOS DE SELETIVIDADE A INIMIGOS NATURAIS

Eventualmente, o controle biológico seja ele natural ou aplicado não é suficiente para

manter a população dos insetos-praga em nível de equilíbrio, sendo necessário realizar

processos de intervenções de forma curativa. Porém, no sistema de cultivo orgânico os

inseticidas sintéticos são estritamente proibidos. Dessa forma, as intervenções quando

necessárias devem ser realizadas com produtos que sejam menos agressivos ao meio ambiente

(CORRÊA-FERREIRA & PERES, 2006).

De acordo com Bueno (2008), a escolha dos produtos utilizados para o controle de

pragas e um fator decisivo, já que esses podem limitar a ação dos inimigos naturais presentes

nos agroecossistemas ou daqueles inimigos naturais que são criados massalmente para serem

liberados de forma inundativa nos campos, visando à manutenção da população dos insetos-

praga em equilíbrio. Nesse sentido, os estudos de seletividade de agroquímicos, assim como

de produtos biológicos e naturais devem ser realizados para gerar informações que possam

auxiliar na tomada de decisão em programas de Manejo Integrado de Pragas (MIP) e na

manutenção desses agentes naturais no ambiente (MOURA et al., 2005).

Embora os efeitos prejudiciais dos bioinseticidas a base de B. thuringiensis assim

como dos extratos de plantas inseticidas sobre os inimigos naturais sejam mínimos, ou em

menor significância que dos agrotóxicos, eles não podem ser desprezados, sendo necessário

realizar estudos de seletividade para verificar a possível utilização desses agentes de controle

em conjunto (AGUIAR-MENEZES, 2005; PRATISSOLI et al., 2006).

Entre os agentes de controle biológico com grande potencial de uso no manejo

integrado do complexo de lagartas que vem ocasionando danos nas plantas de soja, têm-se os

parasitóides de ovos do gênero Trichogramma (BUENO et al., 2007).

2.9 CONSIDERAÇÕES SOBRE O PARASITÓIDE Trichogramma spp.

O gênero Trichogramma pertence à ordem Hymenoptera e família

Trichogrammatidae. Esses insetos são parasitóides de ovos de várias espécies de pragas da

Ordem Lepidoptera (PINTO, 1997), ocorrendo de forma abundante no Brasil com mais de

200 espécies descritas em todo o mundo (PARRA, 1997).

As espécies de Trichogramma possuem tamanho pequeno de difícil visualização a

olho nu, medindo cerca de 0,2 a 1,5 mm de comprimento, são solitárias ou gregárias,

endoparasitóides primários de ovos de insetos (PINTO, 1997).

A fase embrionária e larval do gênero Trichogramma ocorre no interior do ovo de

outro inseto hospedeiro, onde fica se alimentando do vitelo do ovo, um alimento muito rico

(GRENIER, 1997). Durante a fase larval apresentam baixa exigência de oxigênio (DE LA

TORRE, 1993).

As fêmeas de Trichogramma, quando encontram um potencial hospedeiro,

inspecionam-o através do caminhamento para frente e para trás sobre a superfície do ovo,

realizando toques contínuos com a antena. Se tratando de um hospedeiro, o parasitóide inicia

uma nova etapa, a perfuração do ovo, e então a análise da qualidade do hospedeiro irá

determinar o sexo do ovo a ser depositado. O número de ovos colocado pelo parasitóide em

cada ovo hospedeiro depende da quantidade de nutrientes presentes no ovo, assim como do

seu tamanho e volume. Normalmente quando o hospedeiro é adequado as fêmeas de

Trichogramma permanecem sobre a massa de ovos até que grande parte desses seja parasitada

(VISON, 1997).

Uma característica dos ovos parasitados por Trichogramma é a coloração escura em

função da deposição de sais de urato na fase de pré-pupa. No início, os sais de urato

encontram-se dispersos no tegumento e com o passar do tempo, concentram-se na região

central do abdômen da pupa, tornando-a de coloração escura (CÔNSOLI et al., 1999; GIOLO

et al., 2007).

O parasitóide de ovos Trichogramma tem sido estudado e utilizado em várias partes

do mundo em programas de controle biológico para o controle de pragas de importância

agrícola, sendo altamente efetivo por impedir a emergência do hospedeiro antes que qualquer

dano seja causado na cultura (GONÇALVES-GERVÁZIO & VENDRAMIM, 2004;

PRATISSOLI et al, 2006; ZUCCHI & MONTEIRO, 1997). O maior avanço na utilização do

parasitóide de ovos do gênero Trichogramma ocorreu no final da década de 20, quando S. E.

Flanders propôs um método de criação massal desse parasitóide, utilizando como hospedeiro

alternativo Sitotroga cerealella (Olivier) (Lepidóptera: Gelechiidae), facilitando e

viabilizando a criação e a multiplicação de Trichogramma em larga escala (PARRA, 1997).

O desenvolvimento de Trichogramma é muito influenciado pelos fatores abióticos,

como temperatura, umidade e luz. A temperatura é o fator de maior importância, podendo

afetar a duração do desenvolvimento, a razão sexual, o longevidade dos adultos e a eficiência

no parasitismo (PRATISSOLI & PARRA, 2000; STEIN & PARRA,1987).

3 CAPÍTULO I: EFEITO DO ÓLEO DE NIM E DE PREPARADOS

HOMEOPÁTICOS NO DESENVOLVIMENTO E MORTALIDADE DE Anticarsia

gemmatalis

3.1 RESUMO

A lagarta-da-soja Anticarsia gemmatalis Hubner, 1818 (Lepidoptera: Noctuidae) é

considerada a principal praga desfolhadora da cultura da soja, e em função da crescente

expansão do cultivo de soja sob o sistema orgânico, tem-se buscado métodos alternativos para

o seu controle. O objetivo do trabalho foi avaliar os efeitos da aplicação do óleo de nim e de

preparados homeopáticos no consumo foliar, no desenvolvimento e na mortalidade de

Anticarsia gemmatalis em laboratório. O trabalho constou de dois experimentos. No primeiro

experimento foram recortados discos de folhas de soja com auxílio de um vasador,

proporcionando uma área de 29,90 cm

e imersos na calda dos tratamentos por cinco

segundos. Os tratamentos utilizados foram: óleo de nim, 0,5; 1,5 e 2,5%; nosódio macerado

de A. gemmatalis, 10 mL.L

-1

; nosódio triturado de A. gemmatalis, 10 mL.L

-1

; Dipel

0,5 L.ha

; álcool 5% e testemunha, folha de soja sem nenhum tratamento. Em seguida, os discos

foram fornecidos para lagartas de A. gemmatalis em 5º instar por um período de 24 horas.

Após esse período, foi realizada a análise do consumo foliar em cm

, utilizando-se o medidor

de área foliar. Para o segundo experimento, plantas de soja no estádio R5 receberam os

seguintes tratamentos: folha pulverizada com óleo de nim a 0,5; 1,5 e 2,5%, folha pulverizada

+ lagarta pulverizada com óleo de nim 1,5%, folha pulverizada com nosódio macerado de A.

gemmatalis 10 mL.L

-1

, folha pulverizada com nosódio triturado de A. gemmatalis 10 mL.L

-1

folha pulverizada + lagarta pulverizada com nosódio macerado de A. gemmatalis 10 mL.L

-1

folha pulverizada + lagarta pulverizada com nosódio triturado de A. gemmatalis 10 mL.L

-1

folha pulverizada com Bacillus thuringiensis (Dipel

0,5 L.ha

-1

)

e testemunha, sem

intervenção. Após a pulverização das plantas de soja as folhas foram fornecidas para lagartas

de A. gemmatalis em laboratório. O efeito dos tratamentos sobre o desenvolvimeto das

lagartas foi avaliado ao quinto dia após o início da alimentação, através do peso das lagartas.

A mortalidade foi avaliada até que as lagartas atingissem a fase de pupa e posteriormente a

viabilidade pupal das lagartas que alcançaram a fase de pupa. O menor consumo foliar foi

proporcionado pelos tratamentos com B. thuringiensis e óleo de nim nas três concentrações.

Os tratamentos com nosódios de A. gemmatalis se igualaram ao tratamento com álcool 5%,

demonstrando dessa forma não haver ação anti-alimentar. O óleo de nim nas duas maiores

concentrações afetou o desenvolvimento das lagartas, apresentando menor peso larval em

relação ao tratamento testemunha. Os tratamentos com nosódios não apresentaram efeito

deletério sobre o desenvonvimento das lagartas. O óleo de nim nas concentrações de 1,5 e

2,5% provocaram mortalidade superior a 98%, se igualando ao tratamento com B.

thuringiensis. Os tratamentos com nosódio apresentaram baixos índices de mortalidade, não

ultrapassando os 23%.

Palavras-chave: Lagarta-da-soja. Nim. Nosódio. Glycine max.

3.2 INTRODUÇÃO

A forma imatura de Anticarsia gemmatalis, é conhecida como lagarta-da-soja,

considerada a principal praga desfolhadora da cultura da soja (GALLO et al., 2002;

HOFFMANN-CAMPO et al., 2000; SILVA et al. 2003). Essa espécie ocorre em todas as

regiões produtoras de soja, aparecendo nas plantações a partir do mês de novembro, nas

regiões ao norte do Paraná, e mais tardiamente, a partir de dezembro e janeiro na região Sul

do País (HOFFMANN-CAMPO et al., 2000; SOSA-GÓMEZ, 2004).

As lagartas de A. gemmatalis situam-se na maioria das vezes no terço superior das

plantas, alimentando-se dos folíolos (SOSA-GÓMEZ, 2000). Nos primeiros dois ínstares da

fase larval, as lagartas raspam o parênquima foliar e a partir do terceiro ínstar começam a

provocar perfurações nas folhas. Durante seu estádio larval, cada lagarta pode consumir entre

100 a 150 cm

de área foliar, com mais de 91% desse consumo a partir do 4° ínstar. Em seus

últimos instares a lagarta-da-soja consome todas as partes da folha, desde o limbo foliar até as

nervuras, e pode ocasionar 100 % de desfolha (HOFFMANN-CAMPO et al., 2000;

MOSCARDI et al., 2002). Em ataques intensos, na escassez de folhas, as lagartas podem

consumir, também, as hastes mais finas das plantas (TONET, 2000). Os danos indiretos

provocados pela desfolha das plantas comprometem a formação e o enchimento das vagens

em função da redução da área fotossintética, com reflexos negativos na produtividade (SILVA

et al., 2002).

O controle de A. gemmatalis e de outros insetos-praga que ocorrem na cultura da soja

é realizado na maioria das vezes mediante aplicações freqüentes de inseticidas químicos

sintéticos (NEGREIRO et al., 2004). Na agricultura orgânica, o uso destes pesticidas é

terminantemente proibido (ALMEIDA et al., 2000). O cultivo de soja sob o sistema orgânico

vem crescendo a cada ano, impulsionado pela demanda desse produto pelo mercado japonês e

europeu (GARCIA, 2003), além do fator de ordem econômica, já que o preço pago pelo

mercado é até 30 % maior comparado à soja convencional (SUJII et al., 2002). Neste

contexto, tem-se a necessidade de buscar alternativas ao controle químico para atender

sistemas manejados organicamente, através de medidas que visam um equilíbrio no

agroecossistema (CORRÊA-FERREIRA & PERES, 2006).

Produtos naturais a base de extratos vegetais que apresentam substâncias secundárias

nocivas aos insetos podem ser uma alternativa para o controle de pragas em sistemas de

cultivos orgânicos. Além disso, esses produtos não deixam resíduos nos alimentos, tem menor

impacto ao meio ambiente, menor probabilidade de seleção de insetos resistentes e são mais

seletivos aos insetos benéficos (AGUIAR-MENEZES, 2005; ROEL & VENDRAMIM, 2006;

VASCONCELOS et al. 2006; VENDRAMIM & GASTIGLIONI, 2000).

Espécies de plantas da família Meliaceae destacam-se entre as demais com potencial

fonte de substâncias inseticidas, dentre essas a árvore do nim Azadirachta indica A. Juss. tem

sido considerada a mais importante e a estudada (HOFFMANN-CAMPO et al., 2003; ROEL

& VENDRAMIM, 2006). Segundo Aguiar-Menezes (2005), já foram isolados 25 diferentes

ingredientes ativos presentes na planta de nim, encontrados nas folhas, frutos e sementes no

qual, pelo menos nove desses ingredientes, cujo principal composto é a azadiractina,

apresentam propriedades inseticidas e afetam o desenvolvimento ou o comportamento dos

insetos (AGUIAR-MENEZES, 2005; ISMAN, 2006).

Preparados homeopáticos por sua vez são também substancias alternativas para o

controle de insetos praga nos cultivos conduzidos sob o sistema orgânico, sendo bastante

pertinente a essa forma de cultivo por visar um equilíbrio no agroecossitema (CASALI,

2004). Esses produtos são considerados pelo Ministério da Agricultura e Abastecimento

insumos agrícolas desde 17 de maio de 1999 (BRASIL, 1999).

Diante dessas informações, o objetivo deste trabalho foi de avaliar os efeitos da

aplicação do óleo de nim e de preparados homeopáticos no consumo foliar, no

desenvolvimento e na mortalidade de A. gemmatalis em laboratório sob condições

controladas.

3.3 MATERIAL E MÉTODOS

Os experimentos foram conduzidos nas dependências do Laboratório de Entomologia

do Centro de Ciências Agroveterinárias da Universidade do Estado de Santa Catarina

(CAV/UDESC), Lages-SC, durante os meses de novembro de 2007 a feverreiro de 2008.

3.3.1 Obtenção das plantas de soja

As plantas de soja foram cultivadas na casa-de-vegetação climatizada a temperatura

mínima de 18 ± 2 ºC e máxima regulada para 25 ± 2 ºC, em vasos plásticos com 25 cm de

diâmetro e 22 cm de altura, contendo substrato preparado com três partes de terra, uma parte e

meia de esterco bovino (seco) e meia parte de areia (3 x 1,5 x 0,5).

Foram semeadas oito sementes por vaso da variedade de soja BR 36, num total de 50

vasos. Após a emergência das plântulas procedeu-se o desbaste deixando somente quatro

plantas por vaso.

3.3.2 Criação de Anticarsia gemmatalis

Para realizar os bioensaios foi iniciada e mantida uma criação de A. gemmatalis no

laboratório de Entomologia do Centro de Ciências Agroveterinárias. A criação foi iniciada a

partir de insetos na fase de pupa e de ovos obtidos da criação massal do laboratório de

entomologia da Embrapa Arroz e Feijão e da Embrapa Soja.

Os adultos de A. gemmatalis foram mantidos em gaiolas confeccionadas com tubos de

PVC (10 cm de diâmetro x 21,5 cm de altura) para coleta das posturas (Figura 1A). Essas

gaiolas foram cobertas na parte superior com tecido branco tipo “voile” e revestidas na parte

interna com folhas de papel sulfite para permitir a oviposição das fêmeas. Os adultos foram

alimentados com solução de mel a 10 %, colocado em chumaços de algodão no interior da

gaiola, os quais foram trocados a cada 72 horas. As folhas de papel sulfite contendo as

posturas foram removidas diariamente. Partes das folhas contendo as posturas foram

recortadas e acondicionadas em potes plásticos (10 x 28 cm), contendo dieta artificial (Figura

1B). Esses potes foram tampados com tampas plásticas perfuradas e vedadas com tecido

“voile”, e mantidos em sala climatizada (temperatura: 25º ± 2º C, UR: 70 ± 10%).

A dieta artificial foi preparada seguindo metodologia proposta por Kasten et al. (1978),

com algumas adaptações. Os ingredientes e quantidades utilizadas no preparo da dieta estão

descritos na Tabela 1. Quando as lagartas de A. gemmatalis atingiram o segundo ínstar, eram

transferidas para potes plásticos, capacidade de 4 litros, com tampa. Em cada pote, contendo

dieta artificial, eram colocadas aproximadamente 40 lagartas (Figura 1C). A dieta artificial foi

reposta à medida que se observava a necessidade, de forma que não faltasse alimento para as

lagartas. Ao longo do desenvolvimento das lagartas, foram realizadas transferências dessas

para potes limpos (sem fezes), até que atingissem a fase de pupa (Figura 1D).

Figura 1 - Esquema representativo com materiais e etapas utilizadas na criação de Anticarsia gemmatalis: A)

Gaiolas confeccionadas com tubos de PVC para coleta das posturas; B) Pote com folhas de papel

sulfite contendo ovos; C) Potes plásticos contendo dieta artificial para criação na fase larval; D) Pote

plástico contendo pupas; E) Gaiola telada (50 x 30 cm) para emergência e acasalamento dos adultos.

Ao atingir a fase de pupa, essas eram coletadas e colocadas em uma gaiola telada (50 x

30 cm) para aguardar a emergência dos adultos (Figura 1E). Os adultos permaneciam nas

gaiolas até 72 horas após a emergência, tempo para permitir o acasalamento. Em seguida eram

transferidos paras as gaiolas de PVC numa proporção de sete casais por gaiola, a fim de obter

as posturas para reiniciar e manter a criação estoque.

Tabela 1 - Composição da dieta artificial utilizada para alimentação de Anticarsia gemmatalis em laboratório.

Ingredientes Quantidade

Feijão 56,25 g

Levedura de Cerveja 28,15 g

Germe de trigo 45,00 g

Proteína de soja 22,50 g

Caseína 22,50 g

Solução vitamínica 6,75 mL

Ácido ascórbico 2,70 g

Ácido sórbico 1,35 g

Metil parahidroxibenzoato de sódio (Nipagin) 2,25 g

Formaldeído 10% 2,70 mL

Tetraciclina 84,75 mg

Ágar 17,50 g

Água 900 mL

3.3.3 Produtos utilizados nos bioensaios

Nos tratamentos com extrato vegetal foi utilizado óleo de nim (Azadirachta indica),

marca comercial “Organic Neem”, cedido pela empresa Dalquim Indústria Química Ltda,

situada em Itajaí, SC. Como tratamento padrão foram utilizadas bactérias da espécie Bacillus

thuringiensis, produto comercial Dipel

SC.

Os preparados homeopáticos foram desenvolvidos no laboratório de Homeopatia e

Saúde Vegetal da Estação Experimental da Epagri, Lages-SC, conforme técnicas prescritas na

Farmacopéia Homeopática Brasileira (1997). As lagartas de A. gemmatalis utilizadas no

preparo dos nosódios foram obtidas da criação massal do Laboratório de Entomologia do

Centro de Ciências Agroveterinárias (CAV/UDESC), Lages-SC. Foram utilizados dois

métodos de obtenção da tintura mãe, por trituração e por maceração:

a) Método de trituração: Para compor a amostra da matéria prima foram utilizadas 50

lagartas vivas, incluindo lagartas grandes e pequenas. Em seguida, procedeu-se a

homogeneização, através da pré-trituração das lagartas em almofariz. Na etapa seguinte,

procedeu-se a desconcentração e trituração com auxílio de almofariz e pistilo até a potência

3CH trit, em meio sólido, utilizando lactose. Após obter a 3CH trit, procedeu-se a

desconcentração em álcool 70%, e posterior sucussão com auxílio de braço mecânico até a

potência 30CH.

b) Método de maceração: Para a obtenção da tintura mãe através do método de

maceração foram utilizadas 5 g de lagartas vivas de 5º ínstar para cada 95 ml de álcool 70 %,

acondicionados em frascos de vidro âmbar e deixados para macerar por 20 dias. Todos os

dias, durante o período de maceração, os frascos eram agitados manualmente. No final do

período de maceração foi realizada a diluição em álcool 70% e a dinamização com auxilio de

braço mecânico até a potência 30CH.

3.3.4 Bioensaio 1 – Consumo foliar de soja tratada com óleo de nim e preparados

homeopáticos por Anticarsia gemmatalis

As folhas de soja utilizadas nesse experimento foram coletadas quando as plantas

cultivadas em vasos se encontravam no estádio R3 (início da formação de vagens), de acordo

com a escala proposta por Fehr & Caviness (1977). Foram utilizadas lagartas de A.

gemmatalis de 4° e 5° ínstar, provenientes da criação massal em laboratório.

O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com oito tratamentos e dez

repetições. Os tratamentos utilizados no experimento foram: óleo de nim, 0,5%; óleo de nim,

1,5%; óleo de nim, 2,5%; nosódio macerado de A. gemmatalis, 10 mL.L

-1

; nosódio triturado

de A. gemmatalis, 10 mL.L

-1

; Dipel

0,5 L.ha

-1

; álcool 5% e testemunha, folha de soja sem

nenhum tratamento. Cada repetição foi composta por uma placa de Petri acrílica (6 cm de

diâmetro por 2 cm de altura) forradas com papel filtro umedecido e uma lagarta.

As folhas de soja foram inicialmente lavadas em água corrente e em seguida em água

destilada. Posteriormente, com auxílio de um vazador foram recortados discos de folhas,

proporcionando uma área foliar de 29,90 cm

. Os discos foram deixados em temperatura

ambiente para evaporação do excesso de umidade por 30 minutos. Após esse período, os

discos de folhas foram imersos de forma individual com auxilio de uma pinça nas caldas dos

respectivos tratamentos por um período de 5 segundos, retiradas e deixadas a temperatura

ambiente por uma hora para evaporação do excesso de calda. Passado esse período, os discos

foram transferidos para placas de Petri, nas quais foram adicionadas uma lagarta de A.

gemmatalis em cada placa. As placas foram vedadas com filme de PVC e acondicionadas em

sala climatizada (Temperatura: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10%).

As lagartas se alimentaram dos discos foliares por um período de 24 horas. Quando

completado esse período foi realizada a análise do consumo foliar em cm

, utilizando-se do

medidor de área foliar (Portable Área Meter, modelo Li – 3000 A). A área foliar consumida

foi obtida subtraindo-se a área final dos discos após 24 horas da área inicial (29,90 cm

). Os

resultados obtidos foram submetidos à anàlise de variância e as médias comparadas pelo teste

de Tukey a 5% de probabilidade.

3.3.5 Bioensaio 2 – Desenvolvimento e mortalidade de Anticarsia gemmatalis alimentadas

com folhas de soja tratadas com óleo de nim e preparados homeopáticos

O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com quatro

repetições. Os tratamentos consistiram de: folha pulverizada com óleo de nim a 0,5% (FPNim

0,5%), folha pulverizada com óleo de nim a 1,5% (FPNim 1,5%), folha pulverizada com óleo

de nim a 2,5% (FPNim 2,5%), folha pulverizada + lagarta pulverizada com óleo de nim 1,5%

(FP + LP Nim 1,5%), folha pulverizada com nosódio macerado de A. gemmatalis 10 mL.L

-1

(FPNMac.), folha pulverizada com nosódio triturado de A. gemmatalis 10 mL.L

-1

(FPNTrit.),

folha pulverizada + lagarta pulverizada com nosódio macerado de A. gemmatalis 10 mL.L

-1

(FP + LPNMac), folha pulverizada + lagarta pulverizada com nosódio triturado de A.

gemmatalis 10 mL.L

-1

(FP + LPNTrit), folha pulverizada com Dipel

0,5 L.ha

-1

(FPDipel) e

testemunha, sem intervenção. As plantas de soja cultivadas em casa-de-vegetação foram

pulverizadas no estádio R5 de acordo com a escala de Fehr & Caviness (1977), utilizando

pulverizador costal pressurizado com CO

, aplicando um volume de calda de 200 litros por

hectare.

Após a pulverização das plantas de soja, as folhas foram retidas e levadas ao

laboratório para serem oferecidas às lagartas. Um grupo dessas lagartas foi submetido à

pulverização antes de receber o alimento, através da aplicação tópica, utilizando pulverizador

costal pressurizado com CO

, aplicando um volume de calda de 200 litros por hectare. Cada

repetição foi composta de um pote de 7 x 14 x 21 cm (altura x largura x comprimento) forrado

com papel filtro umedecido com seis folhas de soja e 25 lagartas de A. gemmatalis com sete

dias de idade. Os potes foram vedados com fita crepe para evitar fuga das lagartas e

acondicionados em sala climatizada (temperatura: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10%). Diariamente

era realizada a manutenção dos potes e as folhas de soja repostas de forma que não faltasse

alimento para as lagartas.

O efeito dos tratamentos sobre o desenvolvimento das lagartas foi avaliado ao quinto

dia após o início do experimento, através do peso das lagartas. Foram pesadas 10 lagartas,

escolhidas aleatoriamente pora cada repetição, num total de 40 lagartas por tratamento. A

avaliação da mortalidade foi realizada aos 2, 4, 6, 8, 10 e 12 dias após o início do

experimento, até que as lagartas atingissem a fase de pupa. As lagartas que atingiram a fase de

pupa avaliou-se quanto a viabilidade das mesmas, analisando se essas apresentavam alguma

deformação. Todos os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias dos

tratamentos comparadas pelo teste de Tukey (P ≤ 0,05), onde os dados de mortalidade

acumulada foram transformados em √(x + 1).

3.4 RESULTADOS E DISCUSSÃO

3.4.1 Bioensaio 1 – Consumo foliar de soja tratada com óleo de nim e preparados

homeopáticos por Anticarsia gemmatalis

De modo geral, todos os tratamentos proporcionaram redução no consumo de folhas

de soja por A. gemmatalis, quando comparado com a testemunha em que as folhas de soja não

receberam nenhum tratamento (Tabela 2). O menor consumo de folhas foi proporcionado pelo

tratamento realizado com B. thuringiensis (Dipel

), seguido dos tratamentos com óleo de nim

nas três concentrações, não havendo diferenças estatísticas entre esses tratamentos. Segundo

Moscardi (2003), após as lagartas ingerirem pequena quantidade de folhas submetidas ao

tratamento com B. thuringiensis elas cessam sua alimentação, reduzindo o consumo em

praticamente 95% comparado a uma lagarta não infectada, porém, continuam vivas por mais

alguns dias sem causar danos à cultura.

Tabela 2 - Consumo foliar por lagartas de Anticarsia gemmatalis no período de 24 horas em laboratório.

Temperatura: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10%. Lages, SC.

Tratamentos Área Foliar (cm

)

Óleo de nim 0,5% 6,04 c*

Óleo de nim 1,5% 6,75 c

Óleo de nim 2,5% 5,80 c

Nosódio macerado de A. gemmatalis 21,42 b

Nosódio triturado de A. gemmatalis 21,46 b

Dipel

1,67 c

Álcool 5% 24,41 ab

Testemunha (nenhum tratamento) 29,87 a

CV (%) 27,58

* Medias seguidas de mesma letra não diferem pelo teste de Tukey (P ≤ 0,05).

A redução no consumo de alimento de A. gemmatalis em folhas tratadas com óleo de

nim deve-se ao efeito anti-alimentar provocado pela azadiractina (Aguiar-Menezes, 2005). De

acordo com Mordue (Luntz) & Nibest (2000), a azadiractina provoca a deterrência alimentar,

um distúrbio que está associado a mecanismos sensoriais dos insetos que causa a redução no

consumo de alimento. Esses autores relatam que o comportamento alimentar dos insetos

depende da interação do sistema nervoso central com os quimioreceptores, localizados nos

tarsos, nas peças bucais e na cavidade oral, e que a azadiractina atua sobre os

quimioreceptores, estimulando as células deterrentes específicas ou bloqueando os

fagoestimulantes, como as células receptoras de açúcar, o que inibe a alimentação. Pelo fato

dos insetos reduzirem o consumo de alimento provocado pela deterrência, causa problemas de

desnutrição, o que pode ocasionar atraso no seu desenvolvimento ou provocar deformações.

Esses efeitos atuam sobre a capacidade de movimentação dos insetos, na busca por alimentos

de melhor qualidade e na reprodução (COSTA et al., 2004; SCHMUTTERER, 1990).

Os resultados obtidos neste trabalho são semelhantes aos obtidos por Mancebo et al.

(2002), que forneceram discos de folhas de Cedrela spp. tratadas com nim para larvas de

Hypsipyla grandella Zeller, 1848 (Lepidoptera: Pyralidae). A atividade deterrente alimentar

do óleo e do extrato aquoso de nim também foi observada por Lemos et al. (2008), quando

forneceram para lagartas de 4º e 5º ínstar de S. frugiperda discos de folhas de milho (5 cm

)

imersas por cinco segundos nas concentrações 0,25, 0,5, 1,0, e 1,5 %. Os autores relatam

que tanto o óleo como o extrato aquoso de nim nas concentrações de 1,0 e 1,5% apresentaram

forte ação deterrente, diminuindo o estímulo de S. frugiperda à alimentação. Schluter (2006)

observou a ação de deterrência alimentar do óleo de nim em trabalho realizado a campo, onde

as parcelas de plantas de soja tratadas com óleo de nim (5%) apresentavam níveis de desfolha

15 dias após a pulverização de 3%, enquanto na testemunha o nível de desfolha provocado

por A. gemmatalis era superior a 36%.

Nos dois tratamentos com isopatia realizados com nosódio de A. gemmatalis, não foi

observada redução tão drástica na alimentação quanto nos tratamentos com óleo de nim e com

B. thuringiensis, não havendo diferença significativa entre o nosódio obtido pelo método de

maceração e de trituração. Os nosódios se igualaram ao tratamento com álcool 5% não

dinamizado que é utilizado para o preparo do composto homeopático. De acordo com

Almeida (2003) os preparados homeopáticos promovem nas plantas a síntese de compostos

secundários que atuam na defesa das plantas ao ataque de insetos. Como as folhas utilizadas

no experimento foram destacadas das plantas de soja para depois receberem os tratamentos, a

possibilidade da síntese de substâncias que provocassem ação anti-alimentar é nula, havendo

desta forma a necessidade de realizar experimentos com as folhas de soja fixas nas plantas, a

fim de verificar se os preparados homeopáticos realmente promovem a síntese de substâncias

que reduzam o consumo de A. gemmatalis.

3.4.2 Bioensaio 2 – Desenvolvimento e mortalidade de Anticarsia gemmatalis alimentadas

com folhas de soja tratadas com óleo de nim e preparados homeopáticos

Os menores pesos larvais aos cinco dias após o inicio da alimentação foram

observados nos tratamentos FPNim 1,5%, FPNim 2,5% assim como no tratamento FP + LP

Nim 1,5%, não havendo diferença significativa entre esses tratamentos. O tratamento FPNim

0,5% não apresentou efeito sobre o desenvolvimento das lagartas, com peso médio larval de

15,48 mg, o qual não diferiu do tratamento testemunha em que foram fornecidas folhas sem

nenhum tratamento e que apresentam peso larval de 16,93 mg (Tabela 3). No tratamento

FPDipel

não foi possível avaliar o peso larval em função da mortalidade total das lagartas.

Os dados demonstraram que a aplicação tópica do óleo de nim não incrementou o efeito no

desenvolvimento das lagartas mostrando assim que a maior ação do nim é via ingestão, como

relatado por vários autores (AGUIAR-MENEZES, 2005; NEVES et al., 2003; VIANA et al.,

2003).

Segundo Schmutterer (1990) os insetos da ordem Lepidoptera apresentam a maior

sensibilidade ao efeito regulador de crescimento de produtos derivados de nim. Esse autor

relata também que o efeito causado no inseto é muito dependente da concentração utilizada.

De acordo com Mordue (Luntz) & Nibest (2000), a azadiractina atua no sistema

neurossecretor do inseto, interferindo no seu desenvolvimento. Esses autores relatam que a

azadiractina altera os teores do hormônio ecdisona e de outros hormônios ecdisteróides na

hemolinfa, possivelmente por interferir na síntese e liberação do hormônio protoracicotrópico,

que é o hormônio que estimula a produção de ecdise pelas glândulas protorácicas.

Os tratamentos isopáticos não apresentaram efeitos deletérios sobre o

desenvolvimento das lagartas, sendo que em quase todos os tratamentos com nosódio as

lagartas apresentaram um peso larval superior ao tratamento testemunha. Com exceção do

tratamento FP + LPNTrit em que o peso larval de 17,79 mg que se igualou ao peso larval da

testemunha com 16,93 mg, os demais tratamentos tiveram peso larval superior a 20 mg

(Tabela 3). Contrastando esses resultados, Almeida (2003) verificou que lagartas de S.

frugiperda submetidas ao tratamento com nosódio da própria lagarta apresentaram menor

peso larval aos 10 dias. O autor atribui esse efeito a um período maior para mudança de ínstar

e/ou pelo fato das folhas de milho tratadas com o nosódio de S. frugiperda serem prejudicial

às lagartas nos primeiros ínstares, já que o peso de pupa não foi afetado.

Tabela 3 - Peso larval de Anticarsia gemmatalis alimentadas por 5 dias com folhas de soja submetidas a diferentes

tratamentos em laboratório. Temperatura: 25 ± 2 ºC; UR: 70 ± 10%. Lages, SC.

Tratamentos Peso larval (mg)

Folha pulverizada com óleo de nim 0,5% (FPNim 0,5%) 15,48 c

Folha pulverizada com óleo de nim 1,5% (FPNim 1,5%) 8,98 d

Folha pulverizada com óleo de nim 2,5% (FPNim 2,5%) 9,0 d

Folha pulverizada + lagarta pulverizada com óleo de nim 1,5%

(FP + LP Nim 1,5%)

9,21 d

Folha pulverizada com nosódio macerado (FPNMac) 20,98 ab

Folha pulverizada com nosódio triturado (FPNTrit) 20,45 ab

Folha pulverizada + lagarta pulverizada com nosódio macerado

(FP + LPNMac)

22,16 a

Folha pulverizada + lagarta pulverizada com nosódio triturado

(FP + LPNTrit)

17,79 bc

Folha pulverizada com Dipel

(FPDipel

) ---

Testemunha 16,93 c

CV (%) 31,05

* Medias seguidas de mesma letra não diferem pelo teste de Tukey (P ≤ 0,05).

No intervalo dos dois primeiros dias após o início do experimento, o tratamento

FPDipel

se destacou dos demais tratamentos, provocando mortalidade de 20% das lagartas

(Tabela 4). Na segunda avaliação, quatro dias após o início do experimento, o índice de

mortalidade provocado pelo tratamento FPDipel

atingiu 99%. Neste mesmo período os

tratamentos FPNim 2,5%, FPNim 1,5% e FP + LP Nim 1,5% apresentaram percentual de

mortalidade de 24%, 18% e 16%, respectivamente. Já os tratamentos com nosódio, assim

como o tratamento com FPNim 0,5% apresentaram índices de mortalidade similares a

testemunha (Tabela 4).

Tabela 4 - Mortalidade diária acumulada de lagartas de Anticarsia gemmatalis, alimentadas com folhas de soja

submetidas a diferentes tratamentos. Temperatura: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10%. Lages,SC.

Mortalidade diária acumulada (%)

Dias após o tratamento

Tratamentos

2 4 6 8 10 12

FPNim 0,5% 0 b

0 e 0 d 4 b 26 b 52 b

FPNim 1,5% 4 b 18 bc 27 b 72 a 97 a 98 a

FPNim 2,5% 0 b 24 b 66 a 93 a 100 a 100 a

FP + LP Nim 1,5% 1 b 16 bcd 28 b 62 a 92 a 97 a

FPNMac 0 b 0 e 5 bcd 9 b 10 b 12 c

FPNTrit 0 b 3 cde 6 bcd 17 b 21 b 23 cb

FP + LPNMac 0 b 0 e 6 bcd 16 b 23 b 23 cb

FP + LPNTrit 0 b 2 de 9 bcd 17 b 22 b 23 cb

FPDipel

20 a 99 a 100 a 100 a 100 a 100 a

Testemunha 0 b 1de 5 bcd 9 b 10 b 10 c

CV (%) 16,42 23,99 23,16 17,30 15,02 14,03

Médias seguidas de mesma letra não diferem pelo teste de tukey (P ≤ 0,05).

No sexto dia após o início do experimento, o tratamento FPDipel

atingiu índice

máximo de mortalidade (100%) das lagartas de A. gemmatalis, seguido do tratamento FPNim

2,5% com 66% de mortalidade. Também no sexto dia, os tratamentos FPNim 1,5% e FP + LP

Nim 1,5% atingiram percentual de mortalidade de 27% e 28%, respectivamente (Tabela 4).

Na quarta avaliação oito dias após o início do experimento, o tratamento com óleo de nim na

maior concentração (FPNim 2,5%), apresentou índice de mortalidade larval de 93%. Segundo

Schmutterer (1988) a morte dos insetos alvo é dependente da dose e do tempo de exposição

ao princípio ativo do produto, fato esse que pode ser postulado para esse trabalho, já que o

tratamento FPNim 2,5% causou um percentual de mortalidade larval de 93% aos oito dias

após o tratamento e FPNim 1,5% e FP + LP Nim 1,5% alcançaram índices similares somente

dois dias após, ou seja dez dias após o tratamento (Tabela 4).

Aos doze dias após o tratamento, os percentuais de mortalidade acumulada nos

tratamentos com óleo de nim foram de 100%, 98%, 97% e 52% para FPNim 2,5%, FPNim

1,5%, FP + LP Nim 1,5% e FPNim 0,5%, respectivamente. Os tratamentos com nosódio não

diferiram da testemunha para nenhuma das datas avaliadas, porém, com exceção do

tratamento FPNMac, os demais se igualaram ao tratamento com óleo de nim na menor

concentração (FPNim 0,5%). Quando analisado o efeito da aplicação tópica dos nosódios

sobre lagartas de A. gemmatalis, somente o nosódio obtido pelo método de maceração

incrementou a mortalidade, com índice de 12% para o tratamento FPNMac, contra 23%

apresentado pelo tratamento em que as lagartas também foram pulverizadas (FP + LPNMac),

aos12 dias após o tratamento (Tabela 4). Almeida (2003), através de bioensaios com

Spodoptera frugiperda, observou que as lagartas que se alimentaram de folhas de milho

tratadas com nosódio 30CH da própria lagarta e também submetidas a uma aplicação tópica

do nosódio, apresentaram índices de mortalidade mais altos e rápidos quando comparados

com os apresentados por lagartas que receberam o tratamento somente na alimentação.

Nos tratamentos com óleo de nim foi observado que as lagartas morreram após

processos de ecdises prolongadas e incompletas não conseguindo liberar a exúvia, como em

estágios mais avançados na fase de transformação de pré-pupa para pupa onde as lagartas

apresentavam características intermediárias. Mordue & Blackwell (1993) relatam sintomas

semelhantes em relação a não liberação da exúvia em lagartas submetidas a diferentes doses

de azadiractina. Os autores atribuem esse fato a redução da concentração do ecdisônio ou o

atraso de sua liberação na hemolinfa. Viana & Prates (2003) encontraram resultados

semelhantes em trabalho realizado com S. frugiperda, onde os tratamentos com nim

retardaram o desenvolvimento das lagartas e provocaram altos índices de mortalidade.

Martinez & Van Emdem (2001) relatam que Spodoptera littoralis alimentadas com

dieta artificial, contendo azadiractina por um período de dois dias, sofreram alterações no

desenvolvimento como prolongamento dos ínstares larvais, redução da taxa média de

crescimento relativo, processos incompletos de liberação da exúvia, anormalidades

morfológicas e alta mortalidade. Os autores afirmam, também, que muitos insetos morreram

após permanecerem inativos por vários dias ou durante processos de ecdises prolongadas, e

que nas concentrações mais baixas de azadiractina caso o processo de ecdise tenha sido

completo as alterações no crescimento e anormalidades apareceram em estádios mais

avançados do desenvolvimento dos insetos. O efeito da azadiractina também foi observado

em Nezara viridula (Hemiptera: Pentatomidae), causando mortalidade e formação de adultos

com características de ninfa (RIBA et al., 2003).

Tabela 5 - Número médio de pupas de Anticarsia gemmatalis provenientes de lagartas submetidas à alimentação

com folhas de soja tratadas com diferentes substâncias em laboratório e viabilidade da fase pupal.

Temperatura: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10%. Lages, SC.

Tratamentos Número de pupas Viabilidade (%)

FPNim 0,5%

11,75 b

0,0

FPNim 1,5%

0,5 c 0,0

FPNim 2,5%

--- ---

FP + LP Nim 1,5%

0,75 c 0,0

FPNMac

22 a 98,9

FPNTrit

18,5 a 97,3

FP + LPNMac

19 a 98,7

FP + LPNTrit

19,25 a 98,7

FPDipel

--- ---

Testemunha

22,5 a 100,0

CV (%) 19,66

* Medias seguidas de mesma letra não diferem pelo teste de Tukey (P ≤ 0,05).

Dentre os tratamentos que não atingiram 100% de mortalidade, os menores números

de lagartas que atingiram a fase de pupa foram obtidos em FPNim 1,5% e FP + LP Nim 1,5%

seguidos do tratamento FPNim 0,5% (Tabela 5). Apesar desses tratamentos terem permitido

que algumas lagartas atingissem a fase de pupa, quando analisada a viabilidade pupal, todas

apresentavam deformações, impedindo com que atingisse a fase de adulto. O prolongamento

do estádio de pupa e as deformações em pupas provocadas pelo efeito do nim sobre a espécies

lepidoptera são relatadas por vários autores (DE-LING et al., 2000; SCHMUTTERER, 1990;

TANZUBIL & McCAFERRY, 1990).

Nos tratamentos com nosódio de A. gemmatalis não houve diferença no número de

pupas, todos se igualaram ao tratamento testemunha. Nestes mesmos tratamentos, a

viabilidade das pupas não foi afetada, atingindo índice superior a 97% (Tabela 5).

3.5 CONCLUSÕES

O óleo de nim apresenta ação anti-alimentar, reduz o consumo foliar das lagartas de A.

gemmatalis e provoca deformações nas larvas e pupas, provocando altos índices de

mortalidade.

Os nosódios pouco afetaram o consumo de alimento das lagartas de A. gemmatalis e

não apresentam efeito sobre o desenvolvimento e a mortalidade das lagartas.

4. CAPÍTULO II: MANEJO DA BROCA-DAS-AXILAS Epinotia aporema (WALS)

(LEPIDOPTERA: TORTRICIDAE), EM SOJA CULTIVADA SOB O SISTEMA

ORGÂNICO

4.1 RESUMO

Dentre os cultivos manejados de forma orgânica, a cultura da soja vem se destacando,

com grande expansão de área plantada e volume de produção. Um dos grandes problemas

enfrentados pelos pordutores de soja orgânica esta realacionado ao manejo de insetos-praga,

dentre esses a broca-das-axilas Epinotia aporema (Wals) (Lepidoptera: Tortricidae). O

objetivo do trabalho foi avaliar a eficiência do nosódio da broca-das-axilas e do óleo de nim

Azadiractha indica no controle da broca-das-axilas em infestação natural. O experimento foi

conduzido a campo na área da Estação Experimental da Epagri/Lages, SC. O delineamento

experimental foi de blocos ao acaso com sete tratamentos e quatro repetições. Os tratamentos

utilizados foram: óleo de nim 5%, óleo de nim 3%, Bacillus thuringiensis (Dipel

) 0,5 L. ha

-1

óleo de nim 1%, testemunha, B. thuringiensis (Dipel

) 0,7 L. ha

-1

, nosódio de E. aporema

30CH. Foram realizadas duas aplicações utilizando pulverizador costal e volume de calda de

300 L. ha

-1

, com jato dirigido para o ponteiro das plantas. A primeira aplicação foi realizada

no dia 21/01/2008, quando as plantas encontravam-se no estádio V4 a V5, e a segunda

pulverização quinze dias após a primeira (05/02/2008). Na segunda aplicação houve redução

da dose nos tratamentos com óleo de nim em função de fitotoxicidade nas folhas observada na

primeira pulverização. Foram avaliadas 40 plantas por parcela, através da contagem do

numero de plantas que apresentavam sintomas de ataque e o número de broca-das-axilas. As

avaliações foram realizadas no 1°, 4°, 7°, 10° e 15° dia após a primeira aplicação e no 3°, 6°,

9° e 12° dia após a segunda aplicação. O óleo de nim apresentou os melhores resultados para

o controle da broca-das-axilas, atingindo eficiência de controle superior a 80%. Bacillus

thuringienses não apresentou eficiência de controle satisfatória. O tratamento com nosódio

não diferiu da testemunha em nenhuma época avaliada.

Palavras-chave: Broca-das-axilas. Nim. Nosódio. Glycine max.

4.2 INTRODUÇÃO

A agricultura mundial teve seu grande impulso nas décadas de 60 e 70, com a

chamada “revolução verde”, quando a produção mundial de alimentos alcançou valores

expressivos nunca atingidos até então, em função da mecanização, correção e fertilização do

solo, e uso de produtos químicos para o controle de pragas e moléstias (ALMEIDA et al.,

2000). Os problemas relacionados à contaminação ambiental e de trabalhadores rurais em

função do uso excessivo de produtos químicos não demoraram a aparecer, começaram a ser

notados ainda na década de 70 (DIAS, 2003). A crescente preocupação da sociedade com

preservação e conservação ambiental, assim como o interesse por consumir alimentos mais

saudáveis e sem resíduos de agrotóxicos tem alavancado o sistema de produção agrícola com

enfoques ecológicos, como a produção orgânica (CORREA-FERRERA & PERES, 2006;

QUINTELA & PINHEIRO, 2004; ZEHNDER et al., 2006). Dentre os cultivos manejados de

forma orgânica, a cultura da soja vem se destacando, com grande expansão de área plantada e

volume de produção (GARCIA, 2003).

Independente do sistema de cultivo, os maiores desafios enfrentados pelos produtores

de soja estão relacionado aos problemas fitossanitários. Dentre os insetos praga que infestam

as lavouras de soja, a broca-das-axilas (Epinotia aporema) (Wals) (Lepidoptera: Tortricidae)

é considerada uma praga secundária, de maior importância para o sudoeste do Paraná e os

estados de Santa Catarina e Rio Grande do Sul (HOFFMANN-CAMPO et al., 2000), por

apresentar preferência por regiões de maior altitude e temperaturas mais baixas,

especialmente as noturnas (GAZZONI, 2000).

O ataque da broca-das-axilas inicia-se geralmente pelo ponteiro das plantas. A larva

une os folíolos com uma teia, cavando posteriormente uma galeria descendente

(LILJESTHRÖM & ROJAS-FAJARDO, 2005). No interior do abrigo, as lagartas alimentam-

se do limbo foliar, retardando a abertura das folhas. Após a abertura, as folhas se mostram

encarquilhadas, rugosas e com contornos irregulares, podendo apresentar redução da área

foliar superior a 50% (LOURENÇÃO & MIRANDA, 1983; QUINTELA, 2002). Quando o

ataque ocorre na fase inicial de desenvolvimento da cultura pode ocorrer a morte dos

ponteiros, reduzindo o porte da planta (GAZZONI, 2000). A lagarta pode também broquear

varias partes da planta, como, ramos e caule. A larva penetra na planta pelas axilas situadas na

base do pecíolo, cavando galerias descendentes onde se alimenta da medula, interrompendo o

fluxo de seiva. Em função das galerias provocadas pela alimentação, as plantas ficam

fragilizadas, susceptíveis ao quebramento pela ação do vento ou chuvas fortes (GAZZONI,

2000; HOFFMANN-CAMPO et al., 2000). Em casos de alta população o ataque pode ocorrer

também nas vagens, que apresentam perfurações, e nos grãos que são parcialmente

danificados pela alimentação da lagarta (TONET et al., 2000).

Em sistemas de produção orgânica, onde não é permitido o uso de agrotóxicos, o

manejo de insetos-praga deve basear-se em medidas alternativas que buscam o equilíbrio do

agroecossistema (CORRÊA-FERREIRA & PERES, 2006). Nesse contexto, o manejo de

pragas basea-se na diversificação de cultivos, rotação de culturas, utilização de inimigos

naturais, manejo cultural e intervenção com inseticidas biológicos e botânicos (ZEHNDER,

2006).

Plantas da família Meliaceae apresentam-se como potencial fonte natural de produtos

inseticidas (ROEL & VENDRAMIM, 2006), dentre essas o nim (Azadirachta indica A. Juss.)

e cinamomo (Melia azedarach). O nim, intensivamente pesquisado possui 25 diferentes

ingredientes ativos presentes nas folhas, frutos e sementes. Pelo menos nove desses

ingredientes, cuja principal substância presente é a azadiractina, apresentam propriedades

inseticidas, com efeito no desenvolvimento ou no comportamento dos insetos (AGUIAR-

MENEZES, 2005; HOFFMANN-CAMPO et al., 2003; MORDUE (LUNTZ) & NISBET,

2000).

Os microrganismos entomopatogênicos apresentam-se também como métodos

alternativos ao manejo de pragas. Dentre esses, a bactéria Bacillus thuringiensis destaca-se

como entomopatógeno mais utilizado e estudado no controle de insetos, sendo responsável

por 90% do comercio mundial de bioinseticidas (PRATISSOLI et al., 2006).

No mesmo sentido, a utilização de preparados homeopáticos apresenta-se, também,

como alternativa viável para substituir os agrotóxicos por serem considerados insumos

agrícolas permitidos no manejo fitossanitário em sistema de produção orgânica (BRASIL,

1999).

Este trabalho teve por objetivo avaliar a eficácia do preparado homeopático (nosódio)

de Epinotia aporema, do óleo de nim e de B. thuringiensis no controle da broca das axilas sob

infestação natural a campo, na cultura da soja manejada sob o sistema orgânico.

4.3 MATERIAL E MÉTODOS

O experimento foi conduzido na área experimental da Estação da Epagri de Lages-SC,

situada a 27°48'27'' de latitude, 50º19' 44'' de longitude e altitude de 937,73 metros, durante o

ano agrícola de 2007/2008. O clima da região classificado por Koppen é do tipo Cfb,

apresentando verões amenos, invernos rigorosos e precipitação pluvial adequada durante todo

o ano. Os valores de temperatura mínima, máxima e média diária, média diária de umidade

relativa do ar e precipitação, referentes ao período do experimento encontram-se no ANEXO

4.3.1 Estabelecimento da cultura da soja

Na área experimental, antes de implantar a cultura da soja, foi realizado o cultivo de

inverno com nabo forrageiro, ervilhaca e azevém. Na semeadura de inverno foi realizado a

correção do pH e uma adubação com 200 Kg de Fosfato de gafsa ha

-1

, espalhado a lanço com

posterior incorporação.

Próximo a semeadura da soja foi realizado uma adubação com seis

toneladas por hectare de esterco bovino curtido por seis meses, seguido da incorporação do

adubo verde. Foi utilizada a variedade de soja BR 36, inoculada no dia da semeadura com

TotalNitro na dose de 300 ml para 100 Kg de semente. A semeadura foi realizada com

espaçamento entre linhas de 0,50 m com uma população de 360 mil plantas por ha

-1

4.3.2 Caracterização e obtenção dos produtos utilizados

Nos tratamentos com extrato vegetal foi utilizado óleo de nim (Azadirachta indica),

marca comercial Organic neem, da empresa Dalquim Indústria Química Ltda, situada em

Itajaí, SC. No tratamento biológico com entomopatogenos foram utilizadas bactérias da

espécie Bacillus thuringiensis, produto comercial Dipel

SC.

4.3.2.1 Preparo do composto homeopático

O preparado homeopático bioterápico de Epinotia aporema foi desenvolvido no

laboratório de Homeopatia e Saúde Vegetal da Estação Experimental da Epagri, Lages-SC.

A tintura mãe foi obtida pelo método de trituração das larvas, utilizando larvas de

primeiros e últimos ínstares. As larvas foram coletadas na área do experimento. Para obtenção

do triturado foi realizado uma homogeneização das larvas coletadas, através da pré-trituração

em almofariz. Em seguida procedeu-se a desconcentração e trituração até a potência 3CH

triturado em lactose, com auxílio de almofariz e pistilo, conforme metodologia descrita na

Farmacopéia Homeopática Brasileira (1997). Após obter a 3CH triturado, procedeu-se a

potencialização, desconcentração em via líquida (álcool 70%) e sucussão, até a potência

desejada 30CH, com auxilio de braço mecânico.

4.3.3 Condução do experimento

O delineamento experimental foi de blocos ao acaso, com sete tratamentos e quatro

repetições. Cada unidade experimental constou de 16 m

, com oito linhas de semeadura,

sendo que foram consideradas nas avaliações somente as seis linhas centrais. O espaçamento

foi de um metro entre parcelas e de dois metros entre blocos para evitar efeito de deriva.

Foram realizadas duas aplicações, a primeira no dia 21/01/2008, quando as plantas

encontravam-se no estádio de V4 a V5 (FEHR & CAVINNES, 1977), utilizando os

tratamentos apresentados na Tabela 6, a segunda aplicação realizada 15 dias após a primeira

(05/02/2008) com os tratamentos apresentados na Tabela 7. Na segunda aplicação houve

redução da dose nos tratamentos com óleo de nim em função de fitotoxicidade em folhas

observada nas duas maiores concentrações. As pulverizações foram realizadas com

pulverizador costal e volume de calda de 300 L.ha

-1

com jato dirigido para o ponteiro das

plantas de soja.

As avaliações consistiram da contagem do número de plantas com sintoma de ataque

da praga, caracterizado pela junção das folhas do ponteiro ou morte dos brotos e número de

broca-das-axilas, quando os ponteiros apresentam-se com os folíolos unidos, os mesmos

foram abertos e verificado a presença ou não da larva. As avaliações foram realizadas no 1°,

4°, 7°, 10° e 15° dia após a primeira aplicação e no 3°, 6°, 9° e 12° dia após a segunda

aplicação. Para realizar as avaliações foram demarcadas, aleatoriamente, 20 plantas em duas

fileiras de cada parcela, totalizando 40 plantas por parcela.

Tabela 6 - Tratamentos utilizados na aplicação realizada em 21/01/2008 em soja cultivada sob sistema orgânico,

para o controle de Epinotia aporema. Lages-SC, ano agrícola 2007/2008.

Tratamento Nome Comercial Dose

Empresa fabricante

Óleo de nim Organic neem 5% Dalquim

Óleo de nim Organic neem 3% Dalquim

Bacillus thuringiensis var.

Kurstaki

Dipel

SC 0,5 L ha

-1

Sumitomo Chemical do

Brasil

Óleo de nim Organic neem 1% Dalquim

Testemunha ---- Sem intervenção ----

Bacillus thuringiensis var.

Kurstaki

Dipel

SC 0,7 L ha

-1

Sumitomo Chemical do

Brasil

Triturado de Epinotia aporema

(nosódio 30CH)

---- 10 ml L

-1

----

Volume de calda utilizado a campo (300 L. ha

-1

Tabela 7 - Tratamentos utilizados na aplicação realizada em 05/02/2008 em soja cultivada sob sistema orgânico,

para o controle de Epinotia aporema. Lages-SC, ano agrícola 2007/2008.

Tratamento Nome Comercial Dose

Empresa fabricante

Óleo de nim Organic neem 2,5% Dalquim

Óleo de nim Organic neem 1,5% Dalquim

Bacillus thuringiensis

var. Kurstaki

Dipel

SC 0,5 L ha

-1

Sumitomo Chemical do

Brasil

Óleo de nim Organic neem 0,5% Dalquim

Testemunha ---- Sem intervenção ----

Bacillus thuringiensis

var. Kurstaki

Dipel

SC 0,7 L ha

-1

Sumitomo Chemical do

Brasil

Triturado de Epinotia

aporema (nosódio 30CH)

---- 10 ml

-1

----

Volume de calda utilizado a campo (300 L. ha

-1

Os dados relativos ao número de plantas atacadas e o número de broca foram

submetidos a analise de variância e as médias dos tratamentos comparados pelo teste de

Tukey a 5% de probabilidade. A eficiência de controle foi calculada pela formula de Abbot

(NAKANO et al., 1981).

4.4 RESULTADOS E DISCUSSÃO

Pelos resultados apresentados na Tabela 8, observa-se que na avaliação realizada dois

dias antes da aplicação dos tratamentos, a infestação da broca-das-axilas estava acima do

nível de controle recomendado para a praga. De acordo Hoffmann-Campo et al. (2000),

devem ser tomadas medidas de controle quando 25 a 30% das plantas avaliadas estiverem

com os ponteiros atacados. No primeiro dia após a primeira pulverização não foi observado

diferenças significativas na percentagem de plantas atacadas e número de brocas entre os

tratamentos. Esse resultado demonstra que os produtos utilizados não possuem efeito de

choque. Segundo Aguiar-Menezes (2005), os maiores efeitos provocados pela azadiractina

(Nim) nos lepidópteros seria pela via oral, sendo necessário que o inseto ingira o composto

através da alimentação. Almeida (2003), em bioensaios com Spodoptera frugiperda observou

que as lagartas que se alimentaram de folhas de milho tratadas com nosódio 30CH da própria

lagarta e também submetidas a uma aplicação tópica do nosódio, apresentaram índices de

mortalidade mais altos e rápidos quando comparados com os apresentados por lagartas que

receberam o tratamento somente na alimentação.

Tabela 8 - Danos e infestação de Epinotia aporema na cultura da soja, em diferentes datas de avaliação após a

primeira aplicação realizada em 21/01/2008. Lages-SC, ano agrícola 2007/2008.

Dias após a aplicação dos tratamentos

Previa 1 4 7 10 15

Tratamentos

Dano (% de plantas atacadas)

Óleo de nim 5% 41,87 a

61,25 a 33,12 a 30 a 28,12 ab 13,75 a

Óleo de nim 3% 53,12 a 53,75 a 38,75 ab 32,5 ab 19,37 a 19,37 ab

Dipel

0,5 L ha

-1

46,25 a 54,27 a 43,12 ab 47,5 bc 47,5 bc 46,25 cd

Óleo de nim 1% 38,75 a 45 a 43,12 ab 44,37 abc 42,5 bc 41,87 bc

Testemunha 47,5 a 50 a 55 b 66,25 d 59,37 c 68,12 d

Dipel

0,7 L ha

-1

47,5 a 38,12 a 33,12 a 38,12 abc 40 abc 41,25 bc

Nosódio 30CH 50,62 a 53,75 a 55,62 b 55 cd 58,35 c 59,37 cd

CV % 22,64 19,97 17,95 16,61 21,33 25,29

Infestação (Número de broca-das-axilas)

Óleo de nim 5% --- 10,75 a 9,75 a 8,75 a 7,00 ab 3,00 a

Óleo de nim 3% --- 9,75 a 8,75 a 8,75 a 5,50 a 3,75 a

Dipel

0,5 L ha

-1

--- 12,00 a 13,25 ab 14,00 ab 11,25 abc 12,00 bc

Óleo de nim 1% --- 8,50 a 13,00 ab 14,00 ab 14,00 abc 10,00 abc

Testemunha --- 10,75 a 15,50 ab 19,00 b 20,25 c 17,50 c

Dipel

0,7 L ha

-1

--- 7,25 a 8,50 a 13,00 ab 9,25 ab 9,50 ab

Nosódio 30CH --- 11,25 a 19,50 b 16,00 ab 15,50 bc 14,25 bc

CV % --- 26,16 28,12 23,87 32,59 32,15

Médias seguidas de letras iguais na mesma coluna não diferem entre si pelo teste de Tukey, a nível de 5% de

significância. Valores médios de quatro repetições.

A partir da segunda avaliação, realizada quatro dias após a aplicação observa-se

diferenças significativas entre os tratamentos tanto na percentagem de plantas atacadas

(danos) como na incidência da broca-das-axilas. Os tratamentos com menor percentagem de

plantas atacadas e número de broca foram o óleo de Nim na maior dose (5%) e o tratamento

com Dipel

0,7 L ha

-1

, ambos com 33,12% de plantas apresentando danos de ataque, em

comparação de 50% na testemunha. Apesar do efeito significativo os dois tratamentos

apresentaram baixa eficiência de controle com 39,8% (Tabela 9). Ao contrário do resultado

obtido neste trabalho, SCHLUTER (2006) obteve 100% de controle para lagartas pequenas de

Anticarsia gemmatalis sob condições de campo, utilizando óleo de Nim na concentração de

5% aos quatro dias após a pulverização. Como larvas de E. aporema alimentam-se do limbo

foliar no interior do abrigo e da medula de caules e ramos, acabam por consumir pequena

parte da planta que ficou exposta ao tratamento, fato que pode ter influenciado na menor

eficiência de controle.

Tabela 9 - Eficiência de controle de larvas de Epinotia aporema apresentados pelos diferentes tratamentos

pulverizados em plantas de soja em 21/01/2008. Lages-SC, ano agrícola 2007/2008.

Eficiência de controle (%)

Dias após a aplicação dos tratamentos

Tratamentos

1 4 7 10 15

Óleo de nim 5% 0 39,8 54,7 52,6 79,8

Óleo de nim 3% 0 29,5 50,9 67,4 73,4

Dipel

0,5 L ha

-1

0 21,6 28 20 23,1

Óleo de nim 1% 0 21,6 33,0 28,4 38,5

Testemunha --- --- --- --- ---

Dipel

0,7 L ha

-1

23,8 39,8 24,8 32,6 39,4

Nosódio 30CH 0 0 17,0 1,1 12,8

O tratamento com Nim, na dose de 5%, na avaliação realizada aos sete dias após a

pulverização apresentou menor índice de plantas atacadas (30%), porém não diferiu dos

tratamentos com óleo de nim 1 e 3% assim como do Dipel

0,7 L.ha

-1

(Tabela 8). Em relação

ao número de broca, somente os tratamentos com óleo de Nim, nas maiores doses, diferiram

da testemunha, mas se igualaram a todos os demais tratamentos (Tabela 8). Como as

avaliações não foram destrutivas, uma hipótese a ser levantada sobre a pouca diferença

encontrada entre os tratamentos em relação ao número de brocas, pode ter sido devido à

dificuldade de visualizar a praga no ato da avaliação, uma vez que lagarta se abriga no interior

de galerias que são formadas pela alimentação da medula dos caules ou de ramos.

Os dados demonstram que tratamentos com óleo de Nim a 5 e 3%, tiveram redução

contínua na percentagem de plantas atacadas e no número de broca, desde a primeira

avaliação realizada, um dia após a pulverização, persistindo até a avaliação realizada 15 dias

após a pulverização. Para o tratamento com Dipel

0,7 L ha

-1

, a redução foi verificada

somente no percentual de plantas com danos, o qual perdurou somente até quatro dias após a

pulverização. Segundo MOSCARDI (2003), o residual de produtos a base de B. thuringiensis

é de no máximo 7 a 10 dias. No tratamento testemunha (sem intervenção) e no tratamento

homeopático com nosódio de E. aporema 30 CH, acorreu o inverso, foi observado um

aumento contínuo na incidência da broca e na percentagem de plantas atacadas. Este fato

demonstra que as posturas continuaram a serem efetuadas nesses tratamentos. De acordo com

NEVES et al., (2003), os extratos a base de Nim possuem também efeito de repelência,

inibindo os insetos de realizem posturas. MEDEIROS et al. (2005) observou que discos de

folhas de couve (Brassica oleracea var. acephala) submetidas ao tratamento com extrato de

folhas de Nim proporcionou efeito deterrente na oviposição da traça-das-cruciferas (Plutella

xylostella). Resultado semelhante também foi encontrado por SELJASEN & MEADOW

(2006), com uma redução no numero de posturas de Mamestra brassicae em plantas de couve

tratadas com óleo de Nim. Resultado similar foi obtido por Naumann & Isman (1995), em

relação à repelência na oviposição de Spodoptera litura (Fabricius, 1775) em plantas tratadas

com nim. Estes autores relatam também que houve um incremento na atividade de repelência

à medida que aumentou a concentração de nim. Quintela & Pinheiro (2004) em trabalho

realizado com plantas de feijão em ambiente telado, observaram que o óleo de nim nas

concentrações de 1,0, 2,5 e 5% reduziu as posturas de Bemisia tabaci (Genn.) biótipo B

(Hemiptera: Aleyrodidae) em mais de 99% em relação ao tratamento testemunha.

Na avaliação realizada aos quinze dias após a primeira pulverização, a percentagem de

plantas atacadas nos tratamentos com Nim 5 e 3%, se encontravam abaixo do nível de

controle, com 13,75 e 19,37, respectivamente (Tabela 8), demonstrando uma eficiência de

controle superior a 70% (Tabela 9). No tratamento com nosódio de E. aporema 30CH, para a

mesma data de avaliação não foi observado efeito na redução da percentagem de plantas com

danos. ALMEIDA et al. (2003) encontraram resultados discordantes aos obtidos no presente

trabalho. Através da aplicação de preparados homeopáticos obtidos de nosódio da lagarta do

cartucho (Spodoptera frugipreda) e do teosinto (Euchlaena mexicana), ancestral mais

próximo da família do milho, manteve a população da lagarta do cartucho abaixo do nível de

controle. Segundo esses autores, os preparados homeopáticos desencadearam mecanismos de

defesa nas plantas ao ataque desse inseto, do tipo não-preferência pelo consumo (antixenose)

e/ou antibiose.

Em relação à segunda época de aplicação dos tratamentos, cabe destacar que nas

avaliações realizadas aos três, seis e nove dias após a aplicação os tratamentos com óleo de

nim nas duas maiores doses 2,5 e 1,5%, apresentaram resultados satisfatórios (Tabela 10),

atingindo uma eficiência de controle (Tabela 11) nove dias após a pulverização de 81,6 e

65,5%, respectivamente. O tratamento com óleo de nim na dose 0,5% aos nove dias após a

aplicação se igualou ao tratamento com Dipel

na maior dose (0,7 L ha

-1

), em relação à

percentagem de plantas atacadas, porém com uma eficiência de controle superior, com 49,4 e

40,2%, respectivamente. Lima et al. (2008) em trabalho realizado na cultura do milho, em

agroecossitema de várzea, avaliou o efeito de inseticidas naturais para o controle de S.

frugiperda e obteve resultados expressivos com tratamentos a base de nim, com eficiência de

controle superior a 90% após três aplicações. O tratamento homeopático com nosódio de E.

aporema 30CH se igualou a testemunha nas quatro avaliações realizadas após a segunda

aplicação. Resultado semelhante foi encontrado por Gonçalves (2007), onde não obteve

resultados significativos com os preparados homeopáticos para o controle de Thrips tabaci

Lind (Thysanoptera: Thripidae) em cebola cultivada sob o sistema orgânico.

Tabela 10 - Danos e infestação de Epinotia aporema na cultura da soja, em diferentes datas de avaliação após a

segunda aplicação realizada em 05/02/2008. Lages-SC, ano agrícola 2007/2008.

Dias após a aplicação dos tratamentos

3 6 9 12

Tratamentos

Dano (% de plantas atacadas)

Óleo de nim 2,5% 15 ab

10,62 a 10 a 13,12 a

Óleo de nim 1,5% 11,25 a 16,87 ab 18,75 ab 15,62 a

Dipel

0,5 L ha

-1

49,37 cd 46,25 cd 40 cd 22,5 a

Óleo de nim 0,5% 34,37 cd 38,12 bc 27,5 bc 23,75 a

Testemunha 71,87 e 53,12 cd 54,37 e 47,5 b

Dipel

0,7 L ha

-1

23,75 c 33,75 abc 32,5 bcd 23,75 a

Nosódio 30CH 64,37 de 63,12 d 46,87 de 44,37 b

CV % 20,99 26,76 22,67 28,94

Infestação (No. de broca das axilas)

Óleo de nim 2,5% 4,00 a 3,25 a 1,75 a 0,50 a

Óleo de nim 1,5% 2,75 a 5,50 ab 5,00 ab 2,75 a

Dipel

0,5 L ha

-1

10,75 ab 8,50 abc 5,00 ab 2,25 a

Óleo de nim 0,5% 10,50 ab 10,25 abc 8,50 ab 3,00 a

Testemunha 17,50 b 15,25 c 11,75 b 5,00 a

Dipel

0,7 L ha

-1

9,75 ab 8,25abc 6,25 ab 3,00 a

Nosódio 30CH 16,50 b 11,00 bc 8,25 ab 5,50 a

CV % 34,83 36,11 49,83 68,29

Médias seguidas de letras iguais na mesma coluna não diferem entre si pelo teste de Tukey a nível de 5% de

significância. Valores médios de quatro repetições.

Na avaliação realizada aos doze dias após a pulverização, o percentual de plantas

atacadas reduziu-se para todos os tratamentos, com exceção do tratamento com nosódio de E.

aporema 30CH que não diferiu da testemunha. Esta redução na percentagem de plantas

atacadas pode ser explicada pelo fato das plantas de soja estarem nos estádios mais

avançados. Segundo GAZZONI (2000), a broca-das-axilas tem preferências por brotações

novas, sendo muito comum o desaparecimento dessa praga quando a soja entra na fase

reprodutiva.

Tabela 11 - Eficiência de controle de larvas de Epinotia aporema apresentados pelos diferentes tratamentos

pulverizados em plantas de soja em 05/02/2008. Lages-SC, ano agrícola 2007/2008.

Eficiência de controle (%)

Dias após a aplicação dos tratamentos

Tratamentos

3 6 9 12

Óleo de nim 2,5% 79,13 80 81,6 72,36

Óleo de nim 1,5% 84,34 68,23 65,51 67,1

Dipel

0,5 L ha

-1

31,3 12,94 26,43 52,63

Óleo de nim 0,5% 52,17 28,23 49,42 50

Testemunha --- --- --- ---

Dipel

0,7 L ha

-1

43,47 36,47 40,22 50

Nosódio 30CH 10,43 0 13,79 6,57

4.5 CONCLUSÕES

O óleo de nim é eficaz e viável para ser utilizado no manejo da broca-das-axilas nos

cultivos orgânicos de soja.

Bacillus thuringienses não apresenta eficiência adequada no controle da broca-das-

axilas.

Nosódio de Epinotia aporema na 30CH não tem efeito sobre a própria espécie.

Portanto, são necessárias novas pesquisas analisando novas diluições, dosagens e freqüência

de aplicação.

5 CAPÍTULO III: EFEITO RESIDUAL DO ÓLEO DE NIM, Bacillus thuringiensis E

DE PREPARADOS HOMEOPÁTICOS PARA O CONTROLE DE Anticarsia

gemmatalis

5.1 RESUMO

Inseticidas de origem natural apresentam pouca persistência quando utilizados a

campo, pois são afetados por varios fatores, principalmente os climáticos. Com o objetivo de

avaliar o efeito residual do óleo de nim Azadirachta indica A. Juss., e de nosódios da lagarta-

da-soja Anticarsia gemmatalis (Hubner, 1818) (Lepidoptera: Noctuidae) em folhas de soja

pulverizadas a campo, foi instalado um experimento na Esatação Experimental da Epagri em

Lages, SC. O delineamento experimental no campo foi composto de uma única parcela de 16

para cada tratamento. Quando as plantas se encontravam no estádio R5 receberam uma

única aplicação com os seguintes tratamentos: óleo de nim a 0,5; 1,5 e 2,5%, nosódio

macerado de A. gemmatalis 10 ml

-1

, nosódio triturado de A. gemmatalis 10 ml

-1

, Bacillus

thuringiensis (Dipel

0,5 L.ha

-1

) e testemunha sem intervenção. Após a pulverização, lagartas

de A. gemmatalis iniciaram a alimentação com folhas retiradas das parcelas tratadas no campo

em três épocas diferentes, aos 0, 4 e 8 dias após apulverização. No laboratório, o

delineamento foi inteiramente casualizado com seis repetições. Cada repetição foi composta

por um pote com 24 lagartas com sete dias de idade. Para cada época foi avaliado o peso

larval ao quinto dia após o inicio da alimentação e a mortalidade até a formação de pupa. Os

efeitos adversos do óleo de nim e do B. thuringiensis provocados em lagartas de A.

gemmatalis foram mais evidentes quanto menor o intervalo entre a aplicação e o início da

alimentação das lagartas. O efeito residual do óleo de nim foi dependente da concentração

utilizada, sendo que quanto maior a concentração maior o efeito residual. Os bioterápicos

pouco influênciaram no desenvolvimento e na mortalidade das lagartas de A. gemmatalis.

Palavras-chave: Lagarta-da-soja. Azadirachta indica.Nosódio. Glycine max.

5.2 INTRODUÇÃO

A lagarta-da-soja Anticarsia gemmatalis (Hubner, 1818) (Lepidoptera: Noctuidae), é

considerada a principal praga desfolhadora da cultura da soja. Em períodos de picos

populacionais, comuns de ocorrer em ocasiões de escassez de chuva, esta espécie chega a

causar 100% de destruição da área foliar (HOFFMANN-CAMPO et al., 2000). Os períodos

de ataque mais prejudiciais a cultura ocorrem na fase reprodutiva, após a floração (período

critico), pois as plantas de soja não conseguem recuperar a redução da área foliar. A desfolha

compromete o processo de enchimento de vagens, em função da diminuição da área

fotossintética, ocasionando quedas na produtividade (GAZZONI & YORINORI, 1995;

SILVA et al., 2002).

O controle de A. gemmatalis é efetuado normalmente com inseticidas sintéticos

(CAPANHOLA & BETTIOL, 2003). No entanto, a preocupação da sociedade com a

preservação e a conservação ambiental tem estimulado a busca pela implantação de sistemas

de produção agrícola com enfoques ecológicos, como por exemplo, a produção orgânica. No

sistema de produção orgânica, não é permitido o uso de inseticidas sintéticos (ALMEIDA et

al., 2000). Assim, o manejo de insetos-praga deve basear-se em medidas alternativas que

buscam o equilíbrio do agroecossistema (CORRÊA-FERREIRA & PERES, 2006). Nesse

contexto, o manejo de pragas deve ser realizado através da diversificação de cultivos, rotação

de culturas, utilização de controle biológico, manejo cultural e intervenção com inseticidas

biológicos e botânicos (ZEHNDER, 2006).

Produtos naturais extraídos de plantas apresentam-se como fontes de substâncias

bioativas que podem ser utilizadas para o controle de pragas, compatíveis com o Manejo

Integrado de Pragas (MIP). Isto que pode reduzir os efeitos maléficos provocados pela

aplicação intensiva de inseticidas orgânosinteticos, tais como, resíduos nos alimentos,

desequilíbrio biológico, intoxicação de operadores e a seleção de espécies de insetos

resistentes aos inseticidas (MEDEIROS et al., 2005; SHIN-FOON & YU-TONG, 1993).

Plantas da família Meliaceae se destacam como potencial fonte de substâncias

inseticidas (ROEL & VENDRAMIM, 2006), com maior ênfase para a Azadirachta indica A.

Juss., conhecida como nim (HOFFMANN-CAMPO et al., 2003; VENDRAMIM &

GASTIGLIONI, 2000). O interesse maior por A. indica ocorre em função de um complexo de

diferentes ingredientes ativos, encontrados nas folhas, frutos e sementes dessa espécie, cujo

principal é um limonóide denominado de azadiractina. A azadiractina apresenta propriedades

inseticidas e sua atividade sobre alguns insetos é comparável aos melhores inseticidas

sintéticos (AGUIAR-MENEZES, 2005; ISMAN, 2006; SCHMUTTERER, 1990). De acordo

com Mordue & Balckwell (1993) insetos pulverizados ou alimentados com azadiractina

apresentam inibição de crescimento, morte de larvas durante o processo de ecdise,

alongamento da fase larval, formação de pupas e adultos deformados e redução da

fecundidade e fertilidade dos adultos.

Estudos recentes têm apontado também a homeopatia com alto potencial de uso na

agricultura. De acordo com Casali (2004), os preparados homeopáticos são substâncias

alternativas aos agrotóxicos para o controle de insetos praga nas culturas conduzidas sob o

sistema orgânico, sendo bastante pertinentes a essa forma de cultivo por visarem o equilíbrio

no agroecossitema. Segundo Almeida et al. (2003) a aplicação de preparados homeopáticos

desencadeia mecanismos de defesas nas plantas em relação ao ataque de insetos, do tipo não

preferência pelo consumo (antixenose) ou através da produção de compostos secundários que

são tóxicos para os insetos (antibiose).

Microrganismos entomopatogênicos apresentam-se, também, como métodos

alternativos ao manejo de pragas. A bactéria Bacillus thuringiensis destaca-se como

entomopatógeno mais utilizado no controle de insetos, sendo responsável por 90% do

comércio mundial de bioinseticidas (PRATISSOLI et al., 2006). A principal atividade

inseticida da bactéria B. thuringiensis advém do seu processo de esporulação onde são

produzidas proteínas, denominadas de proteínas cristal (Cry), que contém endotoxinas. Essas

toxinas causam desintegração e paralisia das células epiteliais do intestino médio dos insetos,

fazendo com que o inseto pare de se alimentar logo depois de ingerido o alimento

contaminado, podendo morrer por inanição (fraqueza por falta de alimento). B. thuringiensis

causa, também, ruptura dos tecidos do intestino médio, provocando a mistura da hemolinfa

com o conteúdo do intestino, acarretando a morte do inseto por infecção generalizada

(GLINK & PATERNAK, 1998; MOINO JÚNIOR, 2003; MOSCARDI & SOUZA, 2002;

POLANCZYK et al., 2008).

Apesar dos produtos naturais ou a base de microrganismos causarem menor impacto

ao meio ambiente (SCHMUTTERER, 1990), a maioria apresenta a limitação de serem

facilmente degradados quando utilizados a campo, comprometendo sua utilização como

métodos alternativos no controle de pragas, necessitando de repetidas aplicações (COSTA et

al., 2004; LOVATTO et al. 2004; ROEL & VENDRAMIM, 2006). Os principais fatores

ambientais responsáveis pela degradação e sua permanência no ambiente são temperatura,

umidade, raios ultravioletas e chuvas (SCHMUTTERER, 1990).

Com base nessas informações, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito

residual da atividade inseticida do óleo de nim, do B. thuringiensis e de preparados

homeopáticos (nosódios) pulverizados em plantas de soja no campo, para o controle de A.

gemmatalis.

5.3 MATERIAL E MÉTODOS

5.3.1 Local e condições do estabelecimento do experimento

O experimento foi conduzido durante o ano agrícola de 2007/2008 na Estação

Experimental de Lages- Epagri (Empresa de Pesquisa Agropecuária e Extensão Rural de

Santa Catarina), situado a 27° 48' 27'' de latitude, 50º 19' 44'' de longitude e altitude de 937,73

metros. O clima da região, classificado por Köppen, é do tipo Cfb, apresentando verões

amenos, invernos rigorosos e precipitação pluvial adequada durante todo o ano. Os valores de

precipitação, temperatura mínima, máxima e média diária, e média diária de umidade relativa

do ar, no período do experimento, foram obtidos da estação de metereológia da Epagri de

Lages, SC e encontram-se no ANEXO B.

5.3.2 Semeadura da soja

O preparo da área experimental, antes de implantar a cultura da soja, foi realizado com

cultivo de inverno através do consócio de adubos verdes, contituidos de nabo forrageiro,

ervilhaca e azevém. Antes da semeadura de inverno foi realizada a correção do pH e adubação

com 200 Kg de Fosfato de gafsa ha

-1

, espalhado a lanço e posterior incorporação.

Próximo a

semeadura da soja foi realizada uma adubação com seis toneladas por hectare de esterco

bovino curtido (seis meses), seguida da incorporação do esterco e do adubo verde. A

variedade de soja utilizada foi BR 36, inoculada no dia da semeadura com TotalNitro

dose de 300 ml para cada 100 Kg de sementes. A semeadura foi realizada no dia 26/11/2007,

com espaçamento entre linhas de 0,50 m com uma população de 360 mil plantas por ha

-1

5.3.3 Criação de Anticarsia gemmatalis

A criação de A. gemmatalis foi mantida no laboratório de Entomologia do Centro

de Ciências Agroveterinárias da Universidade do Estado de Santa Catarina,

CAV/UDESC. A criação foi iniciada a partir de insetos obtidos da criação massal do

laboratório de entomologia da Embrapa Arroz e Feijão e da Embrapa Soja.

Os adultos foram mantidos em gaiolas confeccionadas a partir de tubos de PVC

(10 cm de diâmetro x 21,5 cm de altura) para coleta das posturas. Essas gaiolas foram

cobertas na parte superior com tecido branco tipo “voile” e revestidas na parte interna

com folhas de papel sulfite para permitir a oviposição das fêmeas. Os adultos foram

alimentados com solução de mel a 10 %, colocado em chumaços de algodão no interior da

gaiola, os quais foram trocados a cada 72 horas. As folhas de papel sulfite contendo

posturas eram removidas diariamente e os pontos contendo os ovos foram cortados e

acondicionadas em potes plásticos (10 x 28 cm), contendo dieta artificial. Esses potes

foram tampados com tampas plásticas, perfuradas e vedadas com tecido voile e mantidas

em sala climatizada (Temperatura: 25 ± 2 ºC, UR: 70 ± 10%). A dieta artificial foi

confeccionada conforme a técnica proposta por Kasten et al. (1978).

Ao atingirem o segundo ínstar, as lagartas de A. gemmatalis foram transferidas

para potes de plástico com tampa, capacidade de 4 litros, mantendo aproximadamente 40

lagartas por pote, contendo dieta artificial. A dieta artificial era reposta à medida que se

observava a necessidade, de forma que não faltasse alimento para as lagartas. Ao longo do

desenvolvimento das lagartas, foram realizadas transferências para potes limpos (sem

fezes), até que atingisse a fase de pupa.

Ao atingir a fase de pupa, essas eram coletadas e colocadas em uma gaiola telada

(50 x 30 cm) para a emergência dos adultos. Os adultos permaneciam nessas gaiolas até

72 horas após a emergência para o acasalamento. Em seguida eram instaladas novamente

gaiolas de adultos para a coleta de posturas, mantendo sete casais no interior de cada

gaiola.

5.3.4 Produtos utilizados no experimento

No tratamento com extrato vegetal, foi utilizado óleo de nim (Azadirachta indica),

marca comercial Organic neem, da empresa Dalquim Indústria Química Ltda, situada em

Itajaí, SC. Para o tratamento com microrganismos entomopatogênicos foram utilizados

bactérias de Bacillus thuringiensis, na formulação comercial Dipel

SC, produzido pela

empresa Sumitomo Chemical do Brasil.

Os preparados homeopáticos foram desenvolvidos no laboratório de Homeopatia e

Saúde Vegetal da Estação Experimental da Epagri, Lages-SC, com lagartas de A. gemmatalis

oriundas da criação massal do Laboratório de Entomologia do Centro de Ciências

Agroveterinárias (CAV/UDESC), em dois métodos de preparo.

a) Por trituração: A partir da matéria prima composta por 50 lagartas vivas, incluindo

lagartas grandes e pequenas, procedeu-se à homogeneização, através da pré-trituração das

lagartas em almofariz. Em seguida, tomou-se uma porção desta, adicionando-a em 99 partes

de lactose. Procedeu-se a trituração com auxílio de almofariz e pistilo conforme a

Farmacopéia Homeopática Brasileira (1997). E assim sucessivamente até a 3CH trit. Após

obter a 3CH trit, procedeu-se a desconcentração em via líquida (álcool 70%), e posterior

sucussão até a potência 30CH, com auxílio de braço mecânico.

b) Por maceração: Tomaram-se 5 g de lagartas vivas de 5º ínstar e adicionou-se 95 ml

de álcool 70 %. A mistura foi acondicionada em frascos de vidro âmbar e deixada para

macerar por 20 dias. Os frascos foram agitados diariamente. Posteriormente, procedeu-se a

dinamização em via líquida até a potência 30CH, utilizando braço mecânico, conforme

descrito na Farmacopéia Homeopática Brasileira (1997)

5.3.5 Condução do experimento

O delineamento experimental no campo foi composto de parcela única de 16 m

para

cada tratamento, contendo oito linhas de semeadura em quatro metros. Quando as plantas de

soja se encontravam no estádio R5, de acordo com a escala proposta por FHER &

CAVINESS (1977), receberam uma única aplicação com os tratamentos listados na Tabela

12. A pulverização foi efetuada com pulverizador costal pressurizado a C0

sob pressão

constante de 3,0 kgf. cm

-2

, dotado de barra com quatro bicos, espaçadas de 0,50 m na barra e

um volume de calda de 200 L. ha

-1

Após a pulverização, folhas de soja situadas no terço superior da planta foram

coletadas diariamente no campo, colocadas em sacos plásticos, acondicionadas em caixa de

isopor forrada com papel toalha umedecido para manutenção da umidade, e levadas ao

laboratório para serem fornecidas às lagartas de A. gemmatalis. As lagartas iniciaram a

alimentação com folhas tratadas em três épocas diferentes, aos 0, 4 e 8 dias após a

pulverização (DAP), para verificar o efeito desses produtos ao longo dos dias no

desenvolvimento e na mortalidade das lagartas. Para cada época, foram utilizadas lagartas

com sete dias de idade.

Tabela 12 - Produtos utilizados nos respectivos tratamentos de plantas de soja cultivadas no campo. Lages, SC,

ano agrícola 2007/2008.

Produtos Nome comercial Dosagem

Empresa fabricante

T1 Óleo de nim Organic neem 0,5% Dalquim

T2 Óleo de nim Organic neem 1,5% Dalquim

T3 Óleo de nim Organic neem 2,5% Dalquim

T4 Nosódio Macerado

30CH

--- 10 ml

-1

---

T5 Nosódio Triturado

30CH

--- 10 ml

-1

---

T6 Bacillus thuringiensis

var. Kurstaki

Dipel

SC 0,5 L ha

-1

Sumitomo Chemical do

Brasil

T7 Testemunha --- Sem intervenção ---

Volume de calda utilizado a campo (200 L. ha

-1

O delineamento experimental no bioensaio foi inteiramente casualizado com sete

tratamentos e seis repetições para cada época. Cada repetição constituiu de um pote nas

dimensões de 7 x 14 x 21 cm (altura x largura x comprimento), contendo papel germiteste

umedecido com oito folhas de soja, onde foram liberadas 24 lagartas. As folhas de soja foram

repostas diariamente de forma que não faltasse alimento para as lagartas.

Para cada época, foi avaliado o peso médio das lagartas que estavam vivas no quinto

dia após o início da alimentação e a avaliação referente à mortalidade foi realizada até a

formação de pupa aos 2, 4, 7, 10 e 12 dias após o início do bioensaio. As análises estatísticas

foram realizadas a partir dos dados de todas as unidades experimentais incluídas nos

tratamentos estudados, de acordo com o delineamento experimental utilizado. Adotou-se um

modelo linear de análise de variância com medidas repetidas no tempo (LITTEL et al., 2006).

As comparações entre os valores médios, de cada uma das variáveis analisadas nos diferentes

tratamentos em cada momento de leitura e, entre os momentos dentro de cada tratamento

foram efetuadas por meio de contrastes específicos e testadas através do teste t de Student

(STEEL et al., 1997). A variável peso de lagartas foi corrigida em relação ao número de

lagartas presentes em cada unidade experimental. Para atenderem-se as pressuposições

teóricas implícitas do referido teste, houve necessidade de se transformar a variável

percentagem de mortalidade de lagartas, elevando-se os seus valores unitários à potência ½ e

obtendo-se a seguir a função seno inversa (transformação arco-seno), conforme sugerido pela

análise descritiva dos dados. Os resultados são apresentados na escala original desta variável.

Todas as análises foram procedidas usando-se o procedimento MIXED (LITTEL et al., 2006)

do software computacional estatístico SAS

(Statistical Analysis System, 2003). Para os

testes efetuados foi considerado o nível mínimo de significância de 5%.

5.4 RESULTADOS E DISCUSSÃO

O resultado obtido através da análise de contrastes realizada com o tratamento

testemunha sem nenhuma intervenção versus os demais tratamentos mostrou haver efeito dos

produtos avaliados em relação ao peso das lagartas nas três épocas (Tabela 13), pela

significância obtida no contraste (Tabela 14). O tratamento testemunha apresentou peso larval

superior aos demais tratamentos na maioria das épocas avaliadas, com médias de 28,0, 27,8 e

22,0 mg para as épocas 0, 4 e 8, respectivamente (Tabela 13). A exceção foi apresentada pelo

tratamento nosódio de A. gemmatalis obtido pelo método de trituração na terceira época (8

DAP), o qual apresentou peso larval superior ao tratamento testemunha, com média de 25,5

mg (Tabela 13).

O contraste envolvendo o tratamento Dipel

SC (T6) versus os demais tratamentos

(Tabela 14), teve também efeito significativo, apresentando menor peso larval. Para a

primeira época (0 DAP), não foi possível efetuar a avaliação do peso das lagartas no

tratamento com Dipel

SC, em função de que esse tratamento causou 100% de mortalidade

aos cinco dias após o início da alimentação. Já nas avaliações realizadas para a segunda e

terceira época (4 e 8 DAP), as lagartas apresentaram os menores pesos larvais, com 2,5 e 8,8

mg, respectivamente (Tabela 13). De acordo com Costa et al., (2008) os primeiros sintomas

observados em lagartas que ingerem os cristais e esporos produzidos pela bactéria B.

thuringienis é a parada alimentar, paralisia do intestino, vômito e diarréia comprometendo o

desenvolvimento do inseto. Moscardi (2003) relata que produtos a base de B. thuringiensis

apresentam efeito residual de até dez dias após a aplicação. Essa afirmação vai de encontro

aos resultados obtidos neste trabalho, em que o tratamento dom Dipel

SC manteve seu efeito

no desenvolvimento de A. gemmatalis até oito dias após a pulverização.

Tabela 13 - Desenvolvimento de lagartas de Anticarsia gemmatalis alimentadas durante 5 dias em laboratório

com folhas de soja submetidas a diferentes tratamentos, com início da alimentação aos 0, 4 e 8 dias

após a pulverização. Temperatura: 25 ± 2 ºC; UR: 70 ± 10%, fotofase:12 h.

Peso larval (mg)

Tratamentos

0 DAP

4 DAP 8 DAP

Óleo de nim 0,5% 16,5

19,5 23,3

Óleo de nim 1,5% 10,0 10,8 19,6

Óleo de nim 2,5% 6,0 5,8 15,0

T4 Nosódio Macerado 30CH

25,4 25,4 21,4

T5 Nosódio Triturado 30CH

27,0 26,3 25,5

Dipel

--- 2,5 8,8

Testemunha 28,0 27,8 22,0

Dias após a pulverização.

Quando contrastados os dois tratamentos bioterápicos (nosódio macerado e nosódio

triturado) com os tratamentos com óleo de nim (0,5%, 1,5% e 2,5%), observa-se um efeito

significativo para as duas primeiras épocas (0 e 4 DAP), e não significativo na terceira época

(8 DAP) (Tabela 14). 0s tratamentos com óleo de nim nas duas primeiras épocas apresentaram

menor peso larval em relação aos tratamentos com nosódio de A. gemmatalis (Tabela 13).

O contraste entre os dois tratamentos bioterápicos (nosódio macerado x nosódio

triturado) foi significativo (Tabela 14). Os menores pesos larvais foram encontrados no

tratamento com nosódio obtido pelo método de maceração, com peso médio de 25,4 mg, 25,4

mg e 21,4, contra 27,0 mg, 26,3 mg e 25,5 mg, apresentado pelo nosódio triturado, para a

primeira, segunda e terceira época, respectivamente (Tabela 13). Resultados positivos também

foram encontrados por Almeida (2003) em lagartas de Spodoptera frugiperda, submetidas ao

tratamento homeopático com nosódio da própria espécie. Essas lagartas tiveram seu

desenvolvimento afetado através da redução do peso. Segundo esse autor o nosódio de S.

frugiperda desencadeou mecanismos de antibiose nas plantas de milho, reduzindo dessa

forma a alimentação das lagartas e por conseqüência seu peso larval.

Tabela 14 - Análise de contrastes referentes ao peso médio de lagartas de Anticarsia gemmatalis alimentadas

com folhas de soja aos 0, 4 e 8 dias após a pulverização. Temperatura: 25 ± 2 ºC; UR: 70 ± 10%,

fotofase:12 h.

0 DAP 4 DAP 8 DAP

Contrastes

Estimativa

EP Estimativa EP

= (T7) x (T1,...,T6) 0,7620** 0,05124 0,7449** 0,04117 0,2077** 0,03583

= (T6) x (T1,..., T5) 0,7018** 0,04685 0,6061** 0,03403 0,2357** 0,03037

= (T4, T5) x (T1, T2, T3) 0,3555** 0,04386 0,2518** 0,03894 0,05278

0,03009

= (T4) x (T5) -0,1783** 0,01114 -0,1919** 0,008119 -0,06073** 0,007889

= (T1) x (T2) -0,1219** 0,02307 0,1482** 0,01819 -0,1418** 0,007920

= (T2) x (T3) 0,05730** 0,008273 0,08717** 0,007757 0,03750** 0,007757

Dias após a pulverização.

Erro padrão.

Não Significativo a 5% de probabilidade pelo teste t;

*Significativo a 5% de probabilidade pelo teste t;

**Significativo a 1% de probabilidade pelo teste t.

Para analisar o efeito das diferentes concentrações do óleo de nim utilizados no

experimento sobre o desenvolvimento das lagartas de A. gemmatalis foram realizados dois

contrastes. O primeiro entre a menor concentração (0,5%) e a concentração intermediária

(1,5%) e o segundo contrastando a concentração intermediária (1,5%) versus a maior

concentração (2,5%) (Tabela 14). Os resultados significativos obtidos em ambos os contrastes

mostram que à medida que se aumenta a concentração do produto, maior foi o efeito

observado sobre o desenvolvimento das lagartas que apresentaram média de peso larval igual

a 16,5 mg, 10,0 mg e 6,0 mg para as concentrações de 0,5%, 1,5% e 2,5%, respectivamente,

na primeira época de avaliação (0 DAP) (Tabela 13). O efeito das diferentes concentrações

do óleo de nim em relação ao peso das lagartas também foi observado na segunda e terceira

época avaliadas (4 e 8 DAP), através da significância apresentada pelos contrastes (Tabela

14). De acordo com Viana & Prates (2003) os efeitos da azadiractina provocados nos insetos é

muito dependente da concentração utilizada. Esses mesmos autores encontraram resultados

semelhantes aos obtidos neste trabalho em S. frugiperda alimentadas com folhas de milho

submersas no extrato de nim. Segundo os autores as lagartas que se alimentaram de folhas

tratadas com o extrato de nim apresentaram redução no desenvolvimento, com comprimento

médio de 5,6 mm, peso médio de 4,0 mg e largura média da cápsula cefálica de 0,9 mm.

Enquanto no tratamento testemunha o comprimento foi de 24,6 mm, peso de 205,0 mg e

largura da cápsula cefálica de 2,5 mm. Os mesmos resultados foram obtidos por Bogorini &

Vendramim (2003) em S. frugiperda alimentadas com folhas de milho submersas em extratos

aquosos de Trichilia pallida e Trichilia pallens, plantas pertencentes à mesma família da A.

indica (Meliaceae).

As ações deletérias no desenvolvimento das lagartas podem provocar efeitos ao longo

de seu desenvolvimento e gerar indivíduos com deformidades, comprometendo ações vitais

como alimentar-se, voar ou andar (baixa capacidade de dispersão), deixando-os mais

vulneráveis à ação de inimigos naturais. Podem ainda, afetar a reprodução e até mesmo evitar

que esses causem danos a cultura (MARTINEZ &VAN ENDEM, 2001).

Quando contrastados o tratamento testemunha versus os demais tratamentos em

relação à mortalidade das lagartas, observa-se um efeito significativo nas três épocas (Tabela

16). Isso demonstra que os produtos avaliados apresentam ação inseticida, porém alguns em

menor expressão, como observado na Tabela 15.

Tabela 15 - Efeito residual expresso na mortalidade de lagartas de Anticarsia gemmatalis alimentadas com folhas

de soja submetidas a diferentes tratamentos, com inicio da alimentação aos 0, 4 e 8 dias após a

pulverização. Temperatura: 25 ± 2 ºC; UR: 70 ± 10%, fotofase:12 h.

Mortalidade (%)

Tratamentos

0 DAP

4 DAP 8 DAP

T1 Óleo de nim 0,5% 37,5 2,75 12,5

T2 Óleo de nim 1,5% 100 27,75 22,91

T3 Óleo de nim 2,5% 100 97,91 66,66

T4 Nosódio Macerado 30CH 17,33 6,25 7,62

T5 Nosódio Triturado 30CH 10,41 7,62 13,16

Dipel

SC 100 98,58 58,33

T7 Testemunha 3,45 3,45 2,75

Dias após a pulverização.

O contraste realizado com Dipel

SC versus os demais tratamentos mostrou

significancia para as três épocas avaliadas (0, 4 e 8 DAP) para o parâmetro mortalidade

(Tabela 16). Esse tratamento apresentou mortalidade de 100%, 98,58% e 58,33% para a

primeira, segunda e terceira época, respectivamente (Tabela 15). Na primeira época, o

tratamento com óleo de nim nas concentrações de 1,5 e 2,5% mostrou-se similar ao

tratamento com Dipel

SC, com mortalidade de 100% das lagartas (Tabela 15).

Quando contrastados os dois tratamentos bioterápicos (nosódio macerado e nosódio

triturado) com os tratamentos de óleo de nim (0,5%, 1,5% e 2,5%), observa-se efeito

significativo na mortalidade, somente na primeira época (0 DAP) e não significativo na

segunda e terceira época (4 e 8 DAP) (Tabela 16). Os tratamentos com óleo de nim, nas três

concentrações avaliadas, apresentaram mortalidade superior aos obtidos pelos tratamentos

com nosódios na primeira época, com percentual de mortalidade de 37,5%, para o óleo de nim

na menor concentração (0,5%) e de 100% para as duas maiores concentrações (1,5 e 2,5%),

contra 17,33% e 10,41% para o nosódio macerado e nosódio triturado, respectivamente.

Assim como foi realizado para a variável peso de lagarta, para analisar o efeito das

diferentes concentrações do óleo de nim sobre a mortalidade de lagartas de A. gemmatalis

foram realizados dois contrastes, o primeiro entre a menor concentração (0,5%) e a

concentração intermediaria (1,5%) e o segundo contrastando a concentração intermediaria

(1,5%) versus a maior concentração (2,5%) (Tabela 16).

Tabela 16 - Análise de contraste referentes ao percentual de mortalidade de lagartas de Anticarsia gemmatalis

alimentadas com folhas de soja aos 0, 4 e 8 dias após a pulverização (DAP). Temperatura: 25 ± 2

ºC; UR: 70 ± 10%, fotofase:12 h

0 DAP

4 DAP 8 DAP

Contrastes

Estimativa EP

= (T7) x (T1,...,T6) -344,44** 26,2283 -220,14** 26,2283 -164,58** 26,2283

= (T6) x (T1,..., T5) -302,78** 22,1669 -195,14** 22,1669 -102,08* 22,1669

= (T4, T5) x (T1, T2, T3) -122,92** 22,1669 54,1668

22,1669 35,4167

22,1669

= (T4) x (T5) 82,6388** 5,7235 91,6667** 5,7235 59,0278** 5,7235

= (T1) x (T2) 62,5000** 5,7235 95,8333** 5,7235 45,8335** 5,7235

= (T2) x (T3) 10,4170

5,7235 -24,9998** 5,7235 -62,5000** 5,7235

Dias após a pulverização.

Erro padrão.

Não Significativo a 5% de probabilidade pelo teste t;

*Significativo a 5% de probabilidade pelo teste t;

**Significativo a 1% de probabilidade pelo teste t.

Através das análises dos contrates, pode-se observar que as diferentes concentrações

de óleo de nim provocaram índices de mortalidade diferenciados (Tabela 16). Quando

contrastada a menor concentração (0,5%) contra a concentração intermediária (1,5%), os

contrastes mostraram-se significativos para as três épocas. Nesse contraste, os maiores

percentuais de mortalidade foram apresentados pela concentração 1,5%, com 100%, 27,75% e

22,91%, contra 37,5%, 2,75% e 12,5% observado na menor concentração (0,5%), para a

primeira (0 DAP), segunda (4 DAP) e terceira (8 DAP) época, respectivamente (Tabela 15).

No contraste realizado entre a concentração intermediária do óleo de nim (1,5%) e a maior

concentração (2,5%) não houve diferença significativa para a primeira época (Tabela 16)

porque ambas provocaram 100% de mortalidade das lagartas (Tabela 15). Na segunda e na

terceira época, os contrastes foram significativos (Tabela 16). Os maiores índices de

mortalidades foram observados na maior concentração (2,5%), com 98,58 % para a segunda

época e de 58,33% para a terceira época, contra 27,75% para a segunda e de 22,91% para a

terceira época apresentado pelo óleo de nim na concentração intermediária (1,5%) (Tabela

15). Resultados semelhantes foram obtidos por Martinez & Van Emden (2001), através do

fornecimento de dieta tratada com azadiractina para Spodoptera littoralisis. Os autores

observaram que os efeitos provocados nas lagartas foram dependentes das doses utilizadas,

sendo que os maiores índices de mortalidade foram observados nas doses mais elevadas.

Para verificar o efeito de cada tratamento sobre o desenvolvimento e mortalidade das

lagartas entre as épocas, foram realizados dois contrastes para cada tratamento, o primeiro

contrastando a primeira época (0 DAP) versus a segunda época (4 DAP) e o segundo

contraste entre a segunda (4 DAP) e a terceira época (8 DAP) (Tabela 17).

A análise de contraste realizada para o tratamento óleo de nim 0,5% (T1) entre a

primeira e segunda época não apresentou significância para a variável peso de lagarta (Tabela

17), com peso médio larval de 16,5 mg e de 19,5 mg para a 0 e 4 DAP, respectivamente.

Quando analisada a segunda época em contraste com a terceira, observa-se diferença, sendo

que lagartas avaliadas na terceira época apresentaram maior peso médio (23,3 mg) (Tabela

13). Para a variável mortalidade, nesse mesmo contraste houve diferenças significativas tanto

no primeiro contraste realizado com a primeira época contra a segunda, assim como na

segunda versus a terceira época (Tabela 17).

Para o tratamento óleo de nim 1,5% (T2), o contraste entre a primeira época versus a

segunda bem como o contraste da segunda época contra a terceira para peso de lagarta foram

significativos (Tabela 17). Pode-se observar pela Tabela 13, que quanto menor o tempo entre

a pulverização e o início da alimentação das lagartas, maiores os efeitos provocados sobre o

desenvolvimento das lagartas que apresentaram menor peso. Para o percentual de

mortalidade, contrastando 0 DAP com 4 DAP, foram encontradas diferenças significativas,

com mortalidade de 100% e de 27,75% para a primeira e segunda época, respectivamente

(Tabela 15). Para o contraste realizado entre a 4 DAP e 8 DAP não foram observadas

diferenças significativas no percentual de mortalidade (Tabela 17), com médias de 27,75% e

22,91% para 4 DAP e 8 DAP, respectivamente (Tabela 15).

Nos contrastes para óleo de nim 2,5% (T3), observa-se que não foram obtidas

diferenças significativas no peso larval em relação à primeira e segunda época (Tabela 17).

Foram obtidas diferenças significativas no peso larval quando contrastado a segunda época

com a terceira, no qual as lagartas da terceira época apresentaram peso superior (15,0 mg) aos

encontrados na segunda (5,8 mg) (Tabela 13). Para mortalidade, não foi verificado diferença

entre 0 e 4 DAP (Tabela 17), que apresentaram mortalidade média de 100% e 97,91%,

respectivamente (Tabela 15). Entretanto, através da análise de contrastes entre a segunda e a

terceira época, observam-se diferenças significativas (Tabela 17), sendo que na terceira época

houve uma redução da percentagem de mortalidade das lagartas. No entanto, plantas aos 8

DAP ainda continham uma quantidade residual do produto suficiente para provocar

mortalidade de 66% das lagartas (Tabela 15). Através do ANEXO B, pode-se obervar que um

dia após a pulverização (13/03/2008) houve uma precipitação de 29,4 mm, não reduzindo os

efeitos na mortalidade das lagartas que iniciaram a alimentação após esse volume de chuva no

tratamento com óleo de nim 2,5%, atingindo mortalidade de 97,91 e 66% aos 4 e 8 DAP

(Tabela 15). De acordo com Sousa & Vendramim (2005) produtos a base de nim possuem

ação sistêmica e translaminar na planta, o que aumenta o poder residual do produto, já que a

azadiractina, principal componebte ativo do nim e sensível á fotodegradação.

Tabela 17 - Análise de contraste referente ao peso e mortalidade de lagartas de Anticarsia gemmatalis entre as

épocas para cada tratamento.

Peso (mg) Mortalidade (%)

Contrastes

Estimativa Erro Padrão Estimativa

Erro Padrão

= T1(0) x (4) -0,00353

0,01037

1,3889

5,6678

= T1(4) x (8)

-0,04519

0,01668

40,2778

5,6678

= T2 (0) x (4)

-0,02985

0,008244

34,7222

5,6678

= T2 (4) x (8)

-0,03878

0,008174

-9,7220

5,6678

= T3 (0) x (4) 0,000020

0,009093

72,2223

5,6678

= T3 (4) x (8)

-0,08845

0,008174

4,8608

5,6678

= T4 (0) x (4)

0,01295

0,009810

2,0833

5,6678

= T4 (4) x (8)

-0,08987

0,008267

31,2500

5,6678

= T5 (0) x (4)

-0,00064

0,008170

11,1112

5,6678

= T5 (4) x (8)

0,04128

0,008174

-1,3889

5,6678

= T6 (0) x (4)

--- ---

2,7778

5,6678

= T6 (4) x (8)

0,02987

0,008207

-5,5556

5,6678

Não Significativo a 5% de probabilidade pelo teste t;

*Significativo a 5% de probabilidade pelo teste t;

**Significativo a 1% de probabilidade pelo teste t.

Os resultados obtidos com óleo de nim demonstram que os efeitos provocados sobre

as lagartas, assim como a capacidade de causar a morte das lagartas dependem da

concentração do produto utilizado bem como do tempo após a pulverização, sendo que quanto

menor o intervalo entre a pulverização e o início da alimentação das lagartas maiores foram os

efeitos observados tanto no desenvolvimento e no percentual de mortalidade. Esses resultados

são semelhantes aos encontrados por Roel & Vendramim (2006) para lagartas de S.

frugiperda alimentas com folhas de milho tratadas com extrato de Trichilia pallida aos 1, 3 e

7 dias após a pulverização. Schluter (2006) avaliou a eficiência de extratos vegetais para o

controle de A. gemmatalis sob diferentes pressões populacionais a campo. Em experimento

realizado com baixa pressão populacional o tratamento com óleo de nim (Dalneem) na

concentração de 5% não diferiu do tratamento padrão (Pounce 250 CE) até aos 21 dias após a

pulverização. Porém, manteve sua eficiência de controle superior a 80% somente até aos 10

dias após a pulverização. O autor ainda relata que a eficiência no controle foi aumentando

com o passar dos dias, com um índice de 43,25% aos dois dias após a aplicação, atingindo aos

sete dias após a pulverização um índice médio de eficiência de 84,2%. Este autor observou

também que nas parcelas que não receberam nenhum tratamento, o percentual de lagartas foi

aumentando ao longo dos dias, indicando que as posturas de A. gemmatalis continuaram a ser

realizadas, enquanto que nas parcelas tratadas com óleo de nim ocorreu uma redução da

infestação, possivelmente em função do efeito de repelência apresentado pela azadiractina.

De acordo com Schmutterer (1990), a ação de repelência é um efeito considerável dos

extratos vegetais, pois impedem a colonização dos insetos-praga nos cultivos. Lima et al.

(2008), em testes com inseticidas naturais para o controle de S. frugiperda na cultura do milho

em agroecossistema de várzea, observaram que para atingir eficiência de controle satisfatória

foram necessárias três pulverizações de óleo de nim na concentração de 0,5%.

No presente estudo, o peso médio larval não diferiu no tratamento com nosódio

macerado de A. gemmatalis (T4) entre a primeira e a segunda época, porém, quando

contrastado a segunda época contra a terceira foi observado diferença significativa (Tabela

17). O menor peso larval foi observado nas lagartas que iniciaram a alimentação aos 8 DAP,

de 21,4 mg contra 25,4 mg observado aos 4 DAP (Tabela 13). Para mortalidade, o teste de

contraste apresentou significância entre a primeira e segunda época, mas não para a segunda

época versus a terceira (Tabela 17), sendo que na primeira época a mortalidade foi de 17,33%

e de 6,25% e 7,62 para a segunda e terceira época, respectivamente (Tabela 15).

Quando contrastados as épocas de fornecimento das folhas de soja pulverizadas com

nosódio triturado de A. gemmatalis (T5), não foram obtidas diferenças significativas no peso

de lagarta entre a primeira e a segunda época, No entanto, foram obtidas diferenças

significativas entre a segunda e a terceira época (Tabela 17). Semelhante ao ocorrido no

tratamento com nosódio macerado, as lagartas que se alimentaram das folhas de soja aos 8

DAP apresentaram menor peso (Tabela 13). Segundo Almeida et al. (2003), em condições de

campo, os preparados homeopáticos ativariam substâncias do metabolismo secundário,

induzindo a resistência das plantas ao ataque dos insetos. Dessa forma, talvez esses produtos

necessitem de um período mais prolongado para ativar a síntese dessas substâncias capazes de

provocar alterações no desenvolvimento dos insetos. Nesse mesmo contraste, não foram

obtidas diferenças estatísticas entre a primeira e segunda época para mortalidade, assim como

da segunda versus a terceira época (Tabela 17), embora possa ser observado que a

mortalidade na terceira época foi superior as demais (Tabela 15).

Em trabalho realizado por Giesel (2007) com preparados homeopáticos no manejo de

formigas cortadeiras, o autor observou que após 10 dias de aplicação consecutiva do nosódio

triturado da formiga do gênero Acromyrmex spp. houve uma redução na atividade total e

forrageira das formiguas. O autor ainda relata que houve um efeito prolongado desse

tratamento, sendo observadas reduções na atividade total e forrageira até 19 dias após a última

pulverização.

No tratamento com Dipel

(T6) em nosso estudo não foi possível realizar o contraste

entre a primeira e a segunda época para peso de lagarta, em função de que na primeira época

já havia ocasionado total mortalidade das lagartas. Quando contrastada a segunda época com

a terceira, houve diferenças significativas (Tabela 17), sendo que para as lagartas que

iniciaram a alimentação com folhas 4 DAP, o peso médio larval foi de 2,5 mg, enquanto que,

para as lagartas que iniciaram a alimentação aos 8 DAP foi de 8,8 mg (Tabela 13). Para

mortalidade, não foram observadas diferenças estatísticas pela análise de contraste entre as

épocas (Tabela 17). Entretanto, pode-se observar que o percentual de mortalidade foi reduzido

a medida em que se passavam os dias após a pulverização, havendo uma quantidade residual

de produto capaz de provocar 58,33% de mortalidade nas lagartas que iniciaram a

alimentação aos 8 DAP. Os resultados obtidos com B. thuringiensis condizem com o que foi

relatado por Moscardi (2003), de que os produtos a base de B. thuringiensis apresentam um

efeito residual de no máximo dez dias.

5.5 CONCLUSÕES

Os efeitos adversos do óleo de nim e do B. thuringiensis provocados em lagartas de A.

gemmatalis são mais evidentes quanto menor o intervalo entre a aplicação e o início da

alimentação das lagartas.

O efeito residual do óleo de nim é dependente da concentração utilizada, sendo que

quanto maior a concentração maior o efeito residual.

Os bioterápicos não influênciaram no desenvolvimento e na mortalidade das lagartas

de A. gemmatalis.

6 CAPÍTULO IV: EFEITO DO ÓLEO DE NIM, DE BIOTERÁPICOS E DO Bacillus

thuringiensis SOBRE A FASE IMATURA DO PARASITÓIDE DE OVOS

Trichogramma pretiosum RILEY (HYMENOPTERA: TRICHOGRAMMATIDAE)

6.1 RESUMO

Considerando a importância do controle biológico de pragas e a possibilidade de sua

associação com inseticidas botânicos, produtos bioterapicos e dos entomopatogênos em

programas de manejo integrado para os sistemas orgânicos, o objetivo do trabalho foi estudar

o efeito do óleo de nim Azadirachta indica A. Juss., do nosódio de Anticarsia gemmatalis

Hubner, 1818 (Lepidoptera: Noctuidae) e do Bacillus thuringiensis sobre a fase imatura do

parasitóide de ovos Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatide)

segundo as normas padronizadas da International Organization of Biological Control (IOBC).

O experimento foi conduzido no laboratório de Entomologia da Embrapa Arroz e Feijão. O

delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com quatro repetições. Os

tratamentos foram: óleo de nim 0,5%, 1,5% e 2,5%, nosódio macerado de A. gemmatalis,

nosódio triturado de A. gemmatalis, B. thuringiensis (Dipel

0,5 L. ha), álcool 5%, clorpirifós

480 g. i.a./ha (Lorsban 0,5 L. ha) como inseticida nocivo e água destilada como testemunha.

Cartelas de 4 cm

contendo cerca de 2.000 ovos de Anagasta kuehniella (Zeller, 1879)

parasitados por T. pretiosum foram deixados em sala climatizada até o parasitóide atingir a

fase de pupa. Em seguida, as cartelas foram imersas nas caldas dos respectivos tratamentos

por um período de cinco segundos. Reduções na emergência dos parasitóides em relação à

testemunha (água) foram utilizadas para calassificar os produtos em: em 1 – inócuo (<30%), 2

– levemente nocivo (30 – 79%), 3 – moderadamente nocivo (80 – 99%) e 4 nocivo (>99%).

Os tratamentos relizados com nosódios de A. gemmatalis e com o bioinseticida Dipel

foram

classificados como inócuos (classe 1). O óleo de nim na concentração de 0,5% foi classificado

como levemente nocivo (classe 2), e nas concentrações de 1,5 e 2,5% foram classificados

como moderadamente nocivos (classe 3) ao parasitóide de ovos T. pretiosum na fase de pupa.

Palavras-chave: Seletividade. Parasitoide. Azadirachta indica. Nosódio.

6.2 INTRODUÇÃO

O cultivo de soja tem se caracterizado por ser altamente dependente dos agroquímicos,

como fertilizantes, herbicidas, fungicidas e inseticidas. Recentemente, tem-se intensificado o

interesse pelo cultivo de soja conduzido sob o sistema orgânico, impulsionado principalmente

pelo mercado consumidor japonês e europeu e pelo fator de ordem econômica, já que a soja

cultivada sob esse sistema recebe em média uma remuneração 30% maior em relação à soja

convencional (GARCIA, 2003; SUJII et al., 2002).

Independente do sistema de cultivo, a cultura da soja pode ser atacada por varios

insetos-praga durante o seu ciclo de desenvolvimento (HOFFMANN-CAMPO et al., 2000),

tendo como principal praga desfolhadora a lagarta-da-soja Anticarsia gemmatalis Hubner,

1818 (Lepidoptera: Noctuidae) (SOSA-GOMEZ, 2004). Porém, nas últimas safras tem-se

observado um aumento no número de outras lagartas causando danos nas plantas de soja,

como a lagarta falsa-medideira, Pseudoplusia includens (Walker, 1857), lagarta enroladeira,

Omiodes indicata (Fabricius, 1775), e algumas espécies do gênero de Spodoptera, tais como,

lagarta-das-vagens, S. eridanea (Cramer, 1872), lagarta-do-cartucho-do-milho S. frugiperda

(J. E. Smith, 1797) e S. cosmioides (Walker, 1858) (BUENO et al., 2008; BUENO, 2008).

Em sistema de cultivo orgânico o manejo de insetos-praga deve basear-se em medidas

que mantenham o equilíbrio do agroecossitema (CORRÊA-FERREIRA, 2004), tais como,

diversificação de cultivos, rotação de culturas, manejo cultural e utilização de agentes de

controle biológico (ZEHNDER, 2006).

Entre os agentes de controle biológico com grande potencial de uso no manejo de

lagartas nos sistemas orgânicos são os parasitóides de ovos do gênero Trichogramma

(BUENO et al.,2007). Parasitóides do gênero Trichogramma tem sido estudados e utilizados

em várias partes do mundo em programas de controle biológico para o controle de pragas de

importância agrícola, sendo altamente efetivos por impedir a eclosão do hospedeiro (lagartas)

antes mesmo que qualquer dano seja ocasionado à cultura (GONÇALVES-GERVÁZIO &

VENDRAMIM, 2004; ZUCCHI & MONTEIRO, 1997). Segundo Carvalho et al. (2001), a

preservação de inimigos naturais no agroecossitema é de suma importância para a

manutenção das populações de insetos-praga abaixo do nível de dano econômico. Portanto,

toda e qualquer intervenção deve ser estuda e considerara seus efeitos secundários sobre os

inimigos naturais.

Eventualmente, o controle biológico seja ele natural ou aplicado, não é suficiente para

manter a população dos insetos-praga em nível de equilíbrio, sendo necessário realizar

processos de intervenções de forma curativa. No sistema de cultivo orgânico, os inseticidas

sintéticos são estritamente proibidos (CORRÊA-FERREIRA & PERES, 2006). Dessa forma,

intervenções devem ser realizadas quando necessárias com produtos que sejam menos

agressivos ao meio ambiente sem efeito sobre populações não alvo.

De acordo com Mourão et al. (2004), os estratos de plantas com potencial inseticidas

representam uma alternativa para o controle de pragas em sistemas de cultivo orgânico. O

nim (Azadirachta indica A. Juss.) constitui-se em potencial uso, devido à presença de uma

grande variedade de substâncias presentes na planta, cujo principal é a azadiractina. Esse

composto afeta o desenvolvimento dos insetos interferindo nos hormônios reguladores do

crescimento e metamorfose. Geralmente, os produtos a base de nim não causam a morte do

inseto de imediato, dado o seu efeito fisiológico, porém, além de afetar a ecdise, reduzem o

consumo de alimento, retardam o desenvolvimento, repelem os adultos e atua na reprodução

(ISMAN, 2006; MORDUE (LUNTZ) & NISBET, 2000; SCHMUTTERER, 1990; SILVA &

MARTINEZ, 2004; VIANA et al., 2006).

Outra metodologia de uso crescente no manejo de insetos-praga nos sistemas de

cultivo orgânico é a utilização de preparados homeopáticos, visto que a aplicação dessa

tecnologia visa um equilíbrio do agroecossitema (CASALI, 2004). Segundo Almeida et al.

(2003) a aplicação de preparados homeopáticos desencadeia mecanismos de defesas nas

plantas em relação ao ataque de insetos, do tipo não preferência pelo consumo (antixenose) ou

através da produção de compostos secundários que são tóxicos para os insetos (antibiose).

Um terceiro grupo de métodos alternativos ao manejo de pragas é o uso de

microrganismos entomopatogênicos. Dentre esses, a bactéria Bacillus thuringiensis destaca-se

como entomopatógeno mais utilizado e estudado no controle de insetos, sendo responsável

por 90% do comércio mundial de bioinseticidas (PRATISSOLI et al., 2006).

Embora os efeitos prejudiciais dos bioinseticidas a base de B. thuringiensis assim

como dos extratos de plantas inseticidas e dos bioterápicos sobre os inimigos naturais são

tidos como mínimos, ou em menor significância que dos agrotóxicos, eles não podem ser

desprezados, sendo necessário realizar estudos de seletividade para verificar a possível

utilização desses agentes de controle em conjunto (AGUIAR-MENEZES, 2005;

GONÇALVES-GERVAZIO & VENDRAMIM, 2004; PRATISSOLI et al., 2006, SILVA &

MARTINEZ, 2004).

Considerando a importância do controle biológico de pragas e a possibilidade de sua

associação com inseticidas botânicos, produtos bioterapicos e dos entomopatogênos em

programas de manejo integrado para os sistemas orgânicos, estudou-se o efeito do óleo de

nim, nosódio de A. gemmatalis e do B. thuringiensis sobre a fase imatura do parasitóide de

ovos Trichogramma pretiosum segundo as normas padronizadas da International

Organization of Biological Control (IOBC).

6.3 MATERIAL E MÉTODOS

O experimento foi conduzido no laboratório de Entomologia da Embrapa Arroz e

Feijão, no município de Santo Antonio de Goiás, GO. Foram utilizadas linhagens de T.

pretiosum, criados em laboratório sobre ovos de Anagasta kuehniella (Zeller, 1879)

(Lepidoptera: Pyralidae), considerado o hospedeiro alternativo mais adequado para criação

desse parasitóide em condições de laboratório (PARRA 1997). A. kuehniella foi mantido em

dieta a base de farinha de trigo integral (97%) e levedura de cerveja (3%) (PARRA et al.,

1989).

O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com nove tratamentos e

quatro repetições. Os tratamentos foram: óleo de nim (Organic neem) 0,5%, 1,5% e 2,5%,

nosódio macerado de A. gemmatalis, nosódio triturado de A. gemmatalis, Bacillus

thuringiensis var. Kurstaki (Dipel

0,5 L. ha), álcool 5%, clorpirifós 480 g. i.a./ha (Lorsban

0,5 L. ha) como inseticida nocivo (padrão) e água destilada como testemunha.

Os preparados homeopáticos foram desenvolvidos no laboratório de Homeopatia e

Saúde Vegetal da Estação Experimental da Epagri, Lages-SC. As lagartas de A. gemmatalis

utilizadas no preparo dos nosódios, foram obtidas da criação massal do Laboratório de

Entomologia do Centro de Ciências Agroveterinárias (CAV). Foram utilizados dois métodos

de preparo, o método de trituração e de maceração, conforme técnicas descritas na

Farmacopéia Homeopática Brasileira (1997):