( PDF ) Avaliação do balanço autonômico e da resposta hiperglicêmica à hemorragia em ratos obesos induzidos pela dieta hipercalórica

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DANIEL CARVALHO DE LIMA

Avaliação do balanço autonômico e da resposta hiperglicêmica à hemorragia em

ratos obesos induzidos pela dieta hipercalórica

Orientador: Prof. Dr. Cândido Celso Coimbra

Co-orientadora: Profa. Dra. Andrea Siqueira Haibara

Belo Horizonte

2008

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DANIEL CARVALHO DE LIMA

Avaliação do balanço autonômico e da resposta hiperglicêmica à hemorragia em

ratos obesos induzidos pela dieta hipercalórica

Dissertação apresentada ao Departamento de

Fisiologia e Biofísica do Instituto de Ciências

Biológicas da universidade Federal de Minas

Gerais, como requisito parcial para a obtenção do

grau de mestre em fisiologia.

Orientador: Prof. Dr. Cândido Celso Coimbra

Co-orientadora: Profa. Dra. Andrea Siqueira Haibara

Belo Horizonte

2008

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RESUMO

O objetivo deste estudo foi avaliar os ajustes metabólicos à hemorragia em ratos alimentados

com dieta hipercalórica. Ratos Wistar machos (4 semanas) foram alimentados com dieta

controle (grupo controle, n= 12) ou com dieta hipercalórica (Grupo obeso, n = 13) durante 9 e 19

semanas. O peso corporal e a ingestão alimentar foram avaliados semanalmente e a taxa

metabólica basal foi mensurada durante todo o período experimental. Após 19 semanas de dieta,

seis animais de ambos os grupos foram anestesiados com dose letal de barbital de sódio (100

mg de / Kg de peso corporal, IP). O índice de Lee e o grau de obesidade foram avaliados pela

mensuração do peso final e comprimento naso-anal (mm) e pelo peso dos tecidos adiposos. Os

demais animais foram submetidos à implantação de uma cânula venosa (cateter de silicone)

para administração de drogas e realização de hemorragia (1,2 mL/100g iv / 2 minutos). Um

cateter de polietileno (PE50) foi inserido na artéria abdominal através artéria femoral para

registros cardiovasculares. A análise do balanço autonômico foi feito pela avaliação da

sensibilidade do barorreflexo (injeção intravenosa de fenilefrina e nitroprussiato de sódio) e

hemorragia (1,2 mL/100g i.v. / 2 minutos). Os resultados mostraram que a dieta hipercalórica

induziu obesidade, maior ganho de peso e aumento do peso dos tecidos adiposos na 9º semana

de dieta. Os níveis plasmáticos de triglicérides e de ácidos graxos livres aumentaram nos

animais alimentados com a dieta hipercalórica por cerca de 300% e 90% na 9ª semana de dieta

(p<0,01), respectivamente, e mantiveram elevados em aproximadamente 424% e 124% na 19ª

semana (p<0,01). A taxa metabólica basal apresentou-se elevada durante todo o período do

experimento (p<0,01), bem como a insulina e a leptina sérica na 19ª semana de dieta (p<0,01).

Os dados também indicam que a sensibilidade do barorreflexo induzida pela fenilefrina foi

reduzida em 55% e a resposta hiperglicêmica à hipotensão hemorrágica foi 35% superior em

ratos alimentados com a dieta hipercalórica. Encontramos também uma estreita correlação

negativa entre a alteração da sensibilidade do barorreflexo e o aumento da resposta

hiperglicêmica à hipotensão hemorrágica nos ratos obesos (r = 0,72; p<0,01) e uma correlação

positiva entre o índice Lee e a hiperglicemia hemorrágica (r = 0,93; p<0,01). Nossos dados

mostraram que a obesidade induzida pela dieta hipercalórica em ratos Wistar promove um

desequilíbrio autonômico, caracterizado pelo aumento da resposta hiperglicêmica à hipotensão

hemorrágica, o que foi correlacionada com a redução da sensibilidade do barorreflexo. Palavras -

chave: dieta hipercalórica, obesidade, sensibilidade do barorreflexo, hemorragia, e desbalanço

autonômico.

ABSTRACT

The aim of this study was to assess the metabolic adjustments during hemorrhage in adult rats

fed with hypercaloric diet. Male Wistar rats (4 weeks) were fed a chow (CD, n=12) or hypercaloric

diet (HD, n=13) for 19 weeks. Body weight and diet intake were measured every week and the

basal metabolic rate was assessed during the whole period of diet. After 19 weeks on diet, six

animals from both groups were anesthetized with lethal dose of barbital sodium (100 µg/Kg body

weight, I.P.). Lee index and adiposity index were evaluated by measuring the final weight,

nasoanal length (mm), and adipose pads weight. The remaining animals were submitted to

implantation of silastic cannula into the jugular vein for drugs administration, blood collecting and

hemorrhage (1.2 mL/100g bw/2 minutes). A polyethylene catheter (PE50) was inserted into the

abdominal artery through femoral artery for cardiovascular monitoring. The assessment of

autonomic balance was done by evaluation of baroreceptor sensitivity (intravenous injection of

phenylephrine and sodium nitroprusside) and hemorrhage (1.2 mL/100g bw/2 minutes). The

results showed that hypercaloric diet is able to develop obesity, increasing weight gain and

adipose pads weight. The plasma level of triacylglycerides and free fat acids were increased in

animals submitted to hypercaloric diet by about 300% and 90% at 9

week (p<0,01), respectively,

and by about 424% and 124% at 19

week (p<0,01). The basal metabolic rate increased in the

whole period of diet (p<0.01). We observed that baroreflex sensitivity induced by phenylephrine

was reduced on the bradycardia reflex by about 55% and hyperglycemic response to hemorrhage

hypotension was 35% higher in rats fed with hypercaloric diet. We found also a close negative

correlation between the alteration in baroreflex sensitivity and the increase in hyperglycemic

response to hemorrhage of the obese rats (r=0.72, p<0.01) and a positive correlation between the

increased Lee index and the hemorrhagic hyperglycemia (r=0.93, p<0.01. Our data demonstrated

that obesity induced by hypercaloric diet in Wistar rats promotes an autonomic imbalance

characterized by enhanced hyperglycemic response to hemorrhage hypotension which is relate

to an impaired baroreflex sensitivity Key words: Hypercaloric diet, obesity, baroreflex sensitivity,

hemorrhage, and autonomic balance.

1. INTRODUÇÃO

Considerações gerais

A obesidade é uma doença metabólica, caracterizada pelo ganho de peso

excessivo, pelo aumento do tecido adiposo, por modificações no

metabolismo dos carboidratos e lipídeos, e pelo surgimento da resistência

insulínica e da disfunção autonômica (Kaufman et al, 1991; Beske et al,

2002; Fantuzzi, 2005). Seu desenvolvimento tem sido atribuído a questões

multifatoriais, como por exemplo, carga genética, fatores ambientais e

mudanças comportamentais (Beske et al, 2002). A obesidade ainda

apresenta uma forte associação com inúmeras doenças crônicas, tais como

dislipidemia, intolerância a glicose, diabetes, aterosclerose, hipertensão e

outras doenças cardiovasculares (Beske et al, 2002).

O excesso de peso constitui um dos maiores problemas de saúde em

países desenvolvidos e em desenvolvimento (OMS, 2008). Entretanto, o

aumento da prevalência da obesidade pode ser parte de um processo

evolutivo, pelo qual o desenvolvimento de mecanismos eficientes para

estoques energéticos veio de encontro com as mudanças nos hábitos de vida

do homem moderno (Groop, 1999; Kreier et al, 2003). A facilidade nos dias

de hoje em obter alimentos, associada à dieta mal balanceada e ao

sedentarismo muito tem contribuído para a alta incidência da obesidade não

apenas em indivíduos adultos, mas em crianças e adolescentes (IBGE,

2004). A inatividade física e a ingestão calórica em excesso induzem ganho

de peso elevado, hiperplasia e hipertrofia do tecido adiposo, assim como,

alterações nos parâmetros lipídicos do plasma (Kreier et al, 2003) e

modificações no balanço autonômico (Kaufman et al, 1991; Bunag et al,

1990; Bunag et al, 1996).

Modulação da obesidade induzida pela dieta hipercalórica sobre o tônus

autonômico

Um modelo de obesidade animal que mimetiza em laboratório as

alterações metabólicas e autonômicas é realizado com roedores alimentados

com dieta hipercalórica. Essa dieta apresenta valores elevados de

carboidratos ou lipídios, os quais correspondem a no mínimo 50% ou 30% do

valor total de calorias, respectivamente (Oscai, 1982; Cooper et al, 1985;

Zuben et al, 1996). O armazenamento energético proveniente das calorias

dessa dieta ocorre sob a forma de triacilglicerois, principalmente no tecido

adiposo branco e em menor escala no marrom e músculos (Sell et al, 2004).

Contudo, o aumento da deposição lipídica ocorre a partir do surgimento da

resistência insulínica periférica (Um et al, 2004; Manco et al, 2004). Esse

quadro desvia a utilização de glicose pelos tecidos resistentes à insulina para

a síntese de triglicérides no tecido adiposo (Um et al, 2004; Manco et al,

2004).

Estudos já mostraram que o consumo calórico diário dessa dieta é maior

do que o gasto energético total diário do organismo (Young et al, 1977;

Morgan et al, 1993). Hoje se sabe que o balanço energético positivo modifica

a atividade de áreas do sistema nervoso central (SNC), induzindo respostas

contra-regulatórias através da mudança do tônus simpático para territórios

periféricos (Fukushima et al, 1987; Grassi et al, 1998; Young et al, 1977;

Alvarez et al, 2002). Trabalhos realizados com voluntários obesos mostraram

uma forte correlação entre o grau de obesidade associada à resistência

insulínica e o aumento da atividade simpática do músculo esquelético

(Alvarez et al, 2002; Fagius, 2003). Em contrapartida, a redução do peso de

voluntários submetidos a uma dieta hipocalórica mostrou uma atenuação da

atividade simpática do músculo esquelético e melhora da sensibilidade à

insulina e do barorreflexo (Grassi et al, 1998; Emdin et al, 2001). Estudos já

mostraram um aumento da atividade noradrenérgica no tecido adiposo

marrom interscapular e no tecido adiposo branco retroperitoneal e epididimal

de ratos alimentados com uma dieta à base de glicose (Landsberg et al,

1978; Young et al, 2004). Outros autores observaram que animais obesos

induzidos pela dieta hipercalórica apresentam também um aumento da

atividade do nervo renal simpático (Barnes et al, 2003).

Sabe-se que o tecido adiposo branco (TAB) está sobre forte influência de

fibras autonômicas simpáticas, reguladas por áreas centrais, localizadas no

tronco encefálico e no hipotálamo (Bamshad et al, 1998). A hiperatividade

simpática no tecido adiposo de ratos, principalmente no visceral, induz uma

maior mobilização lipídica, levando ao aumento da concentração de ácidos

graxos livres no plasma (Frayan et al, 1994; Hoffstedt et al, 1996). Além

disso, já é bem descrito que AGLs promovem resistência insulínica periférica,

como por exemplo, no fígado e músculo esquelético (Um et al, 2004; Manco

et al, 2004).

Além do TAB, o tecido adiposo marrom (TAM) também sofre forte

influência do sistema nervos simpático (Bamshad et al, 1999; Collins et al,

2006). O TAM tem um papel essencial na manutenção da temperatura

corporal e na regulação do gasto energético, uma vez que é considerado o

local da termogênese (produção de calor) induzida pelo frio e pela dieta

hipercalórica (Himms – Hagen et al, 1981; Himms - Hagen, 1984; Cannon et

al, 1998).

A produção de calor pelo TAM é controlada por diferentes áreas

hipotalâmicas, tais como núcleo ventromedial, núcleo paraventricular e área

pré-óptica. (Bamshad, 1999; Cano et al, 2003; Steiner et al, 2007). As

respostas regulatórias são emitidas através de projeções hipotalâmicas

eferentes para núcleos específicos do tronco encefálico e para a coluna

intermediolateral da medula espinhal, os quais modulam a atividade dos

neurônios pré-ganglionares simpáticos (Cano et al, 2003).

Um dos moduladores centrais da termogênese induzida pela dieta

hipercalórica é a leptina. Esse peptídeo é secretado pelo tecido adiposo

branco e age no controle central do balanço energético (Friedman, 2002;

Boustany et al, 2004; Fantuzzi, 2005), aumentando a atividade simpática do

tecido adiposo marrom e a atividade do nervo simpático renal (Rahamouni et

al, 2007).

Sensibilidade do barorreflexo na obesidade induzida pela dieta

hipercalórica

O barorreflexo é um mecanismo fisiológico de respostas reflexas rápidas

à variabilidade da pressão arterial (Tharasher, 2005), sendo considerado um

sinal aferente para a regulação autonômica periférica. Ele é controlado por

regiões do sistema nervoso central que recebem informações sobre a

variação da pressão arterial, codificadas em frequência de disparos neurais,

oriundas principalmente dos barorreceptores aórtico e carotídeo (Figura 1)

(Pilowsky et al, 2002). De acordo com a característica do estímulo, o

barorreceptor responde aumentando ou diminuindo os impulsos nervosos

aferentes para o SNC (Pilowsky et al, 2002). A primeira sinapse das

informações aferentes dos barorreceptores ocorre no núcleo do trato solitário

(NTS). Neurônios de 2ª ordem do NTS são estimulados determinando

alterações da atividade autonômica aferente simpática e parassimpática

(Pilowsky et al, 2002). Assim, a redução da resistência periférica produz uma

diminuição do estiramento dos barorreceptores, o que inibe a atividade

simpática através de conexão entre o NTS e neurônios gabaérgicos da área

caudal ventro-lateral do bulbo (CVLM), responsáveis pela inibição tônica dos

neurônios pré-motores simpáticos da área rostral ventro lateral do bulbo

(RVLM) (Pilowsky et al, 2002). Por outro lado, o aumento da resistência

periférica induz um maior estiramento dos barorreceptores, provocando uma

elevação do tônus vagal cardíaco induzido pelas conexões entre o NTS e os

neurônios do núcleo ambíguo (NA) e o núcleo motor dorsal do vago (NMDV)

(Pilowsky et al, 2002).

Alterações cardiovasculares e da sensibilidade do barorreflexo têm sido

observadas em humanos e em modelos de obesidade animal induzidos pela

dieta hipercalórica (Bunag et al, 1996; Lohmeier et al, 2003). Crandall et al

(1987) observaram que a ingestão alimentar excessiva associada com

inatividade resultava em aumento do trabalho ventricular esquerdo e do

débito cardíaco em ratos Sprague Dawley. Estudos utilizando dietas

hiperlipídicas ou hiperglicídicas mostraram um ligeiro aumento na pressão

arterial quando mensurada pelo método de pletismografia de cauda, assim

como redução da sensibilidade do reflexo induzido pelo barorreceptor

(Kaufman et al, 1991; Bunag et al, 1990; Bunag et al, 1996). Outros estudos

também demonstraram uma atenuação do reflexo bradicárdico, além de

alterações pressóricas em ratos obesos induzidos pela dieta após a

administração de angiotensina II (Miller et al, 1999).

Vários autores observaram que o desequilíbrio do barorreflexo provoca

mudanças nos ajustes autonômicos periféricos. Estudos já mostraram que a

redução da sensibilidade do barorreflexo induzida pela dieta hipercalórica

(Bunag et al, 1990; Kaufman et al, 1991; Bunag et al, 1996) desencadeia um

aumento do tônus das fibras eferentes simpáticas da coluna intermediolateral

(Lohmeier et al, 2003). Parte dessa resposta tem sido atribuída à elevação

da atividade da área ventrolateral rostral do bulbo (RVLM), uma vez que esta

região é considerada o principal centro gerador do tônus simpático para

territórios periféricos (Lohmeier et al, 2003). A facilitação da atividade

vasomotora simpática modula as respostas cardiovasculares, a secreção de

catecolaminas pela medula adrenal e a atividade gliconeogênica e

glicogenolítica hepática (Jarhult, 1975; Yamaguchi, 1992; Machado et al,

1995a).

Ajustes cardiovasculares e metabólicos induzidos pela hipotensão

hemorrágica em ratos

A hiperglicemia induzida pela hipotensão hemorrágica foi primeiramente

descrita em cães por Claude Bernard (1877) e, mais tarde, confirmada em

diferentes espécies, principalmente no homem (Jarhult et al, 1975;

Yamaguchi, 1992). Ela é parte integrante do mecanismo de ajustes

metabólicos, cardiovasculares e hormonais desencadeados pela hipotensão

hemorrágica aguda (Jarhult, 1975). A hiperglicemia hemorrágica aumenta a

sobrevida, melhora a situação nutricional dos tecidos com baixa perfusão e

atua como um dos fatores osmóticos importantes na recuperação do volume

plasmático (Yamaguchi, 1992). A redução da pressão hidrostática e o

aumento da osmolaridade sanguínea promovem a difusão do fluído

intracelular para a circulação, ajudando na restauração deste volume

(Jarhult, 1975; Yamaguchi, 1992).

A hipotensão hemorrágica provoca uma redução da atividade do

barorreceptor, ativando um sistema redundante de controle da homeostasia

que envolve o aumento do tônus simpático, originados de regiões

hipotalâmicas, tais como PVN e RVLM (Silveira et al, 2003; Silveira et al,

2005). Este sistema, por sua vez, seria responsável pelo aumento da

produção hepática de glicose por meio de quatro mecanismos: 1. secreção

de catecolaminas pela medula da adrenal; 2. inervação simpática direta para

o fígado; 3. secreção pancreática de glucagon e; 4. ativação do sistema

renina – angiotensina periférico (figura 2). Esses mecanismos foram

propostos a partir de experimentos que mostraram que a simpatectomia

esplânquica ou a desnervação hepática regional associada à adrenalectomia

cirúrgica bilateral diminuíam a resposta hiperglicêmica à hipotensão

hemorrágica (Jarhult, 1975; Yamaguchi, 1992; Machado et al, 1995a).

Sabe-se que os ajustes cardiovasculares e metabólicos induzidos pela

hipotensão hemorrágica envolvem a integração da atividade do barorreceptor

com o núcleo paraventricular do hipotálamo (PVN) (Silveira et al, 2003;

Silveira et al, 2005). Conforme ilustrado na figura 1, a ativação dessa via

induz alteração dos disparos neurais das fibras pré-ganglionares simpáticas

da coluna intermediolateral para territórios periférico, (Silveira et al, 2003;

Silveira et al, 2005).

Silveira et al (2005) mostraram ainda que 70% da resposta hiperglicêmica

à hipotensão hemorrágica são referentes à participação direta do

barorreceptor dos corpos carotídeos. Os 30% restantes seria induzido por

outros barorreceptores, possivelmente, pelos aórticos e ou pelos

quimiorreceptores localizados no RVLM sensíveis à hipóxia e à glicopenia.

Dessa forma, os estudos indicam que a hiperglicemia hemorrágica é

resultante de um aumento da atividade simpática desencadeada

principalmente pela redução da atividade dos barorreceptores.

Figura 1: Mecanismos do controle do barorreflexo sobre os ajustes

cardiovasculares e metabólicos. Abreviações: nervo glossofaríngeo (IX),

núcleos do trato solitário (NTS), bulbo ventrolateral caudal (CVLM), bulbo

ventrolateral rostral (RVLM), coluna intermediolateral (IML) e paraventricular

do hipotálamo (PVN). (Silveira et al, 2003 – modificado)

Ajustes cardiovasculares

Fígado

Hipotálamo

PVN

Bulbo

Barorreceptor Medula torácica

Neurônio simpático

Pré-ganglionar

Medula adrenal

Estudos realizados em nosso laboratório mostraram ainda o envolvimento

do sistema renina – angiotensina na modulação da hiperglicemia durante a

hipotensão hemorrágica (Machado et al, 1995ab) (Figura 2). Machado et al,

(1995a) observaram que a administração intravenosa de sarthram, um

antagonista de angiotensina II, promoveu uma atenuação de 51,8% na

hiperglicêmica induzida pela hemorragia.

Figura 2: Mecanismos de controle da hiperglicemia hemorrágica

Ref. n

30 e 60

Ref. n

Fígado

Ref. n

pâncreas

Ref. n

30 e 60

Ref. n

HEMORRAGIA

HIPOTÁLAMO

medula

adrenal

catecolaminas

HIPERGLICEMIA

renina

Angiotensinogênio

Angiotensina I

ECA

Angiotensina II

Atividade dos

barorreceptores

Atividade simpática

glicogenólise / gliconeogênese

Ref. n

30 e 60

insulina / glucagon

Ref. n

10, 39

Levando em consideração a possibilidade de que a obesidade induzida

pela dieta altera a sensibilidade do barorreflexo, é razoável propor que neste

modelo poderia haver, além das alterações autonômicas, modificações

metabólicas que estariam associadas às respostas cardiovasculares

induzidas pela hemorragia. Entretanto, não há relatos na literatura que

mostre a relação da obesidade e a hipotensão hemorrágica. Sendo assim, o

presente estudo avalia se a redução da sensibilidade do barorreflexo está

relacionada com o grau de obesidade e com as respostas reflexas

promovidas pela hipotensão hemorrágica em ratos obesos induzidos pela

dieta.

2. OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Analisar a resposta metabólica à hipotensão hemorrágica em animais com

obesidade induzida por dieta hipercalórica.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

- Analisar os parâmetros metabólicos (ácidos graxos livres do plasma,

triglicérides, glicose, lactato, colesterol plasmáticos e taxa metabólica de

repouso), hormonais (insulina/leptina) e distribuição de gordura em vários

coxins adiposos (retroperitoneal, epididimal, inguinal e interscapular) de ratos

com obesidade induzida pela dieta.

- Avaliar o balanço autonômico de ratos obesos a partir das respostas

cardiovasculares reflexas induzidas por doses intravenosas de fenilefrina

(agonista α adrenérgico) e de nitroprussiato de sódio (doador de óxido

nítrico) e pela avaliação da integração dos ajustes cardiovasculares (pressão

arterial e frequência cardíaca) e metabólicas (glicose e lactato plasmáticos)

frente à hipotensão hemorrágica.

3. MATERIAL E MÉTODOS

3.1. ANIMAIS E DIETA

Para a realização dos experimentos foram utilizados ratos Wistar, recém

desmamados (28 – 30 dias), provenientes do Centro de Bioterismo do

Instituto de Ciências Biológicas da UFMG. Eles foram mantidos em gaiolas

individuais com água e dieta ad libitum e em ambiente de temperatura e

iluminação controlada (14 horas de luz diária, 0500-1900 h).

Os animais foram distribuídos em dois grupos distintos; 1- Grupo

controle: alimentado com a ração da marca Nuvilab - CR e; 2- Grupo obeso:

alimentado com uma dieta hipercalórica, contendo 33% de leite condensado

(moça Nestlé), 33% de ração Nuvilab - CR, 7% de açúcar e 8,6% de água

(Cooper et al, 1985) (Tabela 1).

Os valores calóricos da ração Nuvilab – CR e da dieta hipercalórica foram

de 292 Kcal/100g e 318 Kcal/100g, respectivamente. Dessas calorias, 57,5%

da ração e 68% da dieta provinham do valor calórico do carboidrato contido

nas duas dietas (Tabela 1).

Todos os procedimentos experimentais foram previamente aprovados

pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal da Universidade Federal de

Minas Gerais, sob o protocolo n

100/07.

Tabela 1: Composição calóricas das dietas

Composição

Dieta controle Dieta hipercalórica

Densidade calórica (Kcal/100g) 292 318

Carboidrato (%) 57,5 68

Proteína (%) 30 16

Lipídeo (%) 12,5 16

Umidade (%) 12,5 27

Dieta controle (g/100g de dieta): Ração NUVILAB – CR (carboidrato, 44g;

proteína, 22g; lipídeo, 4g).

Dieta hipercalórica (g/100g de dieta): Ração NUVILAB – CR (carboidrato,

44g; proteína, 22g; lipídeo, 4g); Leite condensado – Moça, Nestlé

(carboidrato, 57g; proteína, 7g; lipídeo, 8g); Sacarose (carboidrato, 99g;

proteína, 0g; lipídeo, 0g).

3.2. TAXA METABÓLICA

Os animais foram pesados e colocados numa câmara hermeticamente

fechada e calibrada para o registro do consumo de oxigênio de repouso. A

taxa metabólica foi mensurada utilizando um sistema de fluxo aberto de

calorimetria indireta (OXYMAX v500, Columbus Instruments / Ohio, USA),

previamente calibrada com uma mistura de gases com certificado padrão do

fabricante (20,5% de 0

e 0,5% de CO

; White Martins). A taxa metabólica de

repouso dos animais foi mensurada durante a 8

, 12

, 16

e 19

semanas de

experimento.

3.3. PROCEDIMENTO CIRÚRGICOS

- CANULAÇÃO ATRIAL E DA ARTÉRIA AORTA

Os animais com 19 semanas de dieta foram anestesiados com uma

solução de quetamina (116 mg/Kg de peso corporal, i.p.) e xilasina (5,75

mg/Kg de peso corporal, i.p) e submetidos ao implante de cateteres venoso e

arterial. Para os procedimentos de colheita de sangue e administração de

drogas uma cânula de silicone (silastic, 0,5 mm de DI, 0,94 mm de DE, Down

Corning, EUA) foi inserida no átrio direito através da veia jugular externa,

segundo a técnica de Harms & Ojeda. Após o implante, a cânula foi

preenchida com uma solução de salina com heparina e a extremidade da

mesma exposta no dorso do animal. No final da cirurgia os animais

receberam antibiótico e analgésico conforme descrito por Pires et al (2007).

Para monitorar os parâmetros cardiovasculares, uma cânula (20 cm de

um tubo de polietileno PE50, soldado por aquecimento a 4 cm de um tubo de

polietileno PE10 foi preenchida com heparina em solução salina e inserida na

aorta abdominal através da artéria femoral esquerda. A extremidade da

cânula foi exteriorizada na região dorsal dos animais.

3.4. PROTOCOLOS EXPERIMENTAIS

- PROTOCOLO 1 – Caracterísiticas dos animais: Parâmetros bioquímicos

e distribuição lipídica.

Durante 9 e 19 semanas, os animais foram monitorados para

avaliação do peso corpóreo e do consumo alimentar. Após esses períodos,

os animais foram sacrificados com uma dose letal de tiopental (80

mg/mL/100g de peso corporal) para a colheita de sangue (0,2 mL),

mensuração dos coxins adiposos (retroperitoneal, inguinal, epididimal e

intraescapular) e avaliação do índice de Lee (Lee, 1929). Esse índice analisa

o grau de obesidade, calculando a raiz cúbica do peso corporal (g) e dividido-

a pelo comprimento naso-anal (mm) e multiplicado-a por 10 (Lee et al, 1929).

As amostras de sangue foram colhidas para análise do conteúdo

plasmático de glicose, lactato, colesterol, HDL, triglicérides, ácidos graxos

livres, insulina e leptina. O plasma foi separado por centrifugação e mantido

congelado a -20 °C até análise.

Análises bioquímicas

As análises de colesterol, HDL e triglicérides plasmáticos foram

determinadas pelo método enzimático (KATAL - Kit, Belo Horizonte, Brasil). A

glicose e o lactato plasmáticos foram mensurados pelo método enzimático,

autoanalyzer 2300 STATPLUS (Yellow String Inst. USA. Os ácidos graxos

livres plasmáticos foram medidos utilizando o kit NEFA 30T (Randox

Laboratories), modificado por análise micrométrica em leitor de microplacas.

A insulina e a leptina foram determinadas por radioimunoensaio (Linco

Research, St. Charles, MO, E.U.A.).

- PROTOCOLO 2 – Avaliação da sensibilidade do barorreflexo em ratos

alimentados com dieta hipercalórica por 19 semanas.

Após 19 semanas de dieta e água ad libitum, os animais foram

submetidos a implantes das cânulas venosa e arterial. Após a recuperação

do peso, cada rato teve sua cânula venosa conectada a um tubo de

polietileno (PE50) de 20cm e a cânula femoral ao sistema de registro (MP100

System Guide – Biopac Systems, Santa Bárbara, CA, model MP100 – CE

series 198122765), ambas preenchida com solução de salina heparinizada.

Essas conexões permitiram a livre movimentação dos ratos nas gaiolas. Os

animais permaneceram em repouso por uma hora e durante todo o período

experimental não tiveram acesso à água e a dieta.

A avaliação barorreflexo foi realizada através de infusão de bolus de 0,1

mL de fenilefrina e nitroprussiato de sódio pela cânula atrial em diferentes

concentrações (1,0; 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 µg/mL). O primeiro agente

farmacológico é um agonista α

seletivo que se difere da adrenalina somente

pela ausência de um grupo hidroxi na posição 4 do anel benzeno (Goodman

& Gilman). A característica principal do efeito fenilefrina é o aumento da

resistência periférica arterial, induzindo resposta bradicárdica reflexa

(Goodman & Gilman). O nitroprussiato de sódio é um agente hipotensor

constituído de uma fração nitroso, responsável pela ação vasodilatadora da

droga (Goodman & Gilman). Ao entrar em contato com os eritrócitos o

nitroprussiato de sódio sofre decomposição, liberando óxido nítrico (NO),

resultando em resposta taquicárdica reflexa (Goodman & Gilman).

A sensibilidade do barorreflexo (∆IP/∆PAM) foi avaliada pela razão entre

as alterações reflexas da frequência cardíaca convertidas em intervalo de

pulso (I.P.= 60.000/FC) e as alterações transitórias da PAM (∆PAM) diante

das infusões das duas drogas.

- PROTOCOLO 3 – Avaliação dos ajustes cardiovasculares e metabólicos à

hemorragia em ratos alimentados com dieta hipercalórica por 19 semanas.

No dia seguinte, após a realização do protocolo 2, foi realizado o

protocolo de hemorragia aguda. Para isso, as cânulas foram conectadas e

em seguida realizou-se a hemorragia , retirando-se um volume de sangue

correspondente à 1,2 mL/100 g de peso corporal / 2 minutos. As amostras

de sangue foram colhidas em seringas heparinizadas (0,2 mL)

imediatamente antes de se iniciar o procedimento e durante os 5, 10, 20, 30

minutos de hipotensão hemorrágica.

As alíquotas de sangue foram mantidas em gelo até a centrifugação em

centrífuga refrigerada (3000 RPM, por 12 minutos). Em seguida, os plasmas

foram separados e armazenados a –20ºC para as posteriores dosagens

bioquímicas.

3.5. ANÁLISES ESTATÍSTICAS

Os resultados foram analisados utilizando análise de variância (two-way

ANOVA), seguido do teste de Newman Keuls. As diferenças entre os grupos

foram analisados pelo teste T de Student e a regressão linear pela correlação

de Pearson. A significância estatística foi aceita a partir de p<0,05.

4. RESULTADOS

PROTOCOLO 1: Características dos animais: Parâmetros bioquímicos e

distribuição lipídica

Os animais alimentados com a dieta hipercalórica apresentaram em

média maior ingestão calórica (11%) quando comparados com os animais

alimentados com a dieta controle (Figura 2A). Observamos, ainda, que o ganho

de peso do grupo obeso foi mais acentuado a partir da quarta semana de

tratamanto, estabelecendo uma diferença de 28% no final das 19 semanas de

tratamento (figura 2B).

Comparando os dois grupos na 9 semana de tratamento (Figura 3),

observou-se que o grupo alimentado com dieta hipercalórica já apresentava um

aumento de 82%, 65%, 41% e 51% no peso dos tecidos adiposos

retroperitonal, epididimal, inguinal e no peso do tecido adiposo marrom

interescapular, respectivamente (p<0,05). Após a 19ª semana de tratamento a

diferença do peso desses tecidos do grupo obeso em relação ao controle foi de

60%, 52%, 40% e 82%, respectivamente (p<0,05).

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19

Kcal /100g peso corporal /dia

Grupo controle (n=24)

Grupo obeso (n=26)

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19

Ganho de peso (g)

100

200

300

400

500

600

Semanas

Figura 2: Ingestão calórica (A) e ganho de peso corporal (B) do grupo controle

(CT) e do grupo obeso (OB). * p<0,05 (OB vs CT)

g/100g do peso corporal.

0,5

1,0

1,5

2,0

2,5

3,0

3,5

Grupo controle (n=12)

Grupo Obeso (n=13)

9 semanas

19 semanas

Retrop. Retrop.

Epid. Epid.

Ing. Ing.

mg/100 g do peso corporal

0,04

0,06

0,08

0,10

0,12

0,14

0,16

0,18

0,20

9 semanas

19 semanas

Figura 3: Peso do tecidos adiposos brancos (A) e do tecido adiposo marrom

interescapular (B), mensurados na 9ª semana e na 19ª semana no grupo

controle (CT) e no grupo obeso (OB). *p<0,05 (OB vs CT).

O índicie de Lee avaliado na 9ª e na 19ª semana de experimento

apresentou, respectivamente, um aumento de 3% e 8%, confirmando o

desenvolvimento da obesidade induzida pela dieta hipercalórica (Tabela 2).

Como observado na tabela 2, não houve diferenças entre os grupos

quanto as concentrações plasmáticas de colesterol, HDL, glicose, lactato na 9ª e

19ª semana de tratamento. Contudo, o tratamento de 9 semanas aumentou os

níveis circulantes de triglicérides e ácidos graxos livres em 311% e 90%,

respectivamente, no grupo com dieta hipercalórica comparado com o grupo

controle (P<0,05). Após a 19ª semana de tratamento dietético, além dos

triglicérides e dos ácidos graxos plasmáticos, também foi observado um

aumento sérico de insulina e leptina (424%, 124%, 119% e 500%,

respectivamente).

9 semanas 19 semanas

Grupo Controle Grupo Obeso Grupo Controle Grupo Obeso

(n=6) (n=6) (n=6) (n=6)

Índice de Lee

0,31 + 0,003

0,32 + 0,002* 0,31 + 0,006 0,33 + 0,005**

Colesterol (mg/dL) 140,5 + 20.0 163,9 + 15,8 151,3 + 16,0 175,0 + 13,0

HDL (mM) 0,61 + 0,03 0,66 + 0,05 0,69 + 0,03 0,66 + 0,03

Triglicérides (mM) 1.32 + 0,46 5,43 + 0,32** 1,26 + 0,22 6,61 + 0,97**

AGL (mM) 0,44 + 0,01 0,84 + 0,01** 0.89 + 0.13 2.00 + 0.33**

Glicose (mM) 10,35 + 0,82 14,60 + 0,75 14,60 + 0,75 15,67 + 0,37

Lactato (mM) 1,41 + 0,28 1,02 + 0,06 3,69 + 0,46 2,34 + 0,22

Insulina (ng/mL) 1.85 + 0.37 4.06 + 0.61*

Leptina (ng/mL) 1.90 + 0.91 11.45 + 1.95 **

Tabela 2: Parâmetros metabólicos avaliados na 9

e na 19

semana no grupo

controle (CT) e no grupo obeso (OB) * p <0,05, **p<0,01 (OB vs CT)

Os animais alimentados com dieta hipercalórica apresentaram um

aumento no consumo de oxigênio durante todo o período experimental

comparados com os animais alimentados com a dieta controle. As medidas

realizadas durante a 8ª, 12ª, 16ª e 19ª semana de tratamento identificaram uma

diferença de 4%, 6%, 16% e 14% na taxa metabólica basal, respectivamente

(figura 4).

mL/Kg/min

Grupo controle (n=5)

Grupo Obeso (n=5)

* *

semana 12

semana

Figura 4: Consumo de oxigênio mensurado durante o período de dieta no grupo

controle (CT) e no grupo obeso (OB). *p<0,05 (OB vs CT)

PROTOCOLO 2: Avaliação da sensibilidade do barorreflexo em ratos

alimentados com dieta hipercalórica por 19 semanas

A resposta à bradicardia reflexa apresentou uma correlação positiva

quanto à variação da pressão arterai (mmHg) nos dois grupos estudados (Grupo

controle, r

=0,980, p<0,01; Grupo obeso, r

=0,940, p<0,01), assim como a

resposta taquicárdica reflexa (Grupo controle: r

=0,970, p<0,01; Grupo obeso:

=0,960, p<0,01).

Conforme a ilustração da figura 5A, a sensibilidade do barorreflexo

induzida pela administração de diferentes doses de fenilefrina (1,0; 2,5; 5,0;

10,0; 20,0 µg/mL) foi significativamente menor no grupo obeso, comparado com

o grupo controle (p<0,01). O reflexo bradicárdico induzido por essa droga foi

atenuado em 55%. Por outro lado, a taquicardia reflexa induzida pela

administração de diferentes doses de nitroprussiato de sódio foi similar nos dois

grupos estudados (Figura 5B).

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

Grupo controle (n=5)

Grupo obeso (n=7)

Fenilefrina

∆IP/∆PAM

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

Nitroprussiato de sódio

∆ PAM (mmHg)

0 10 20 30 40 50 60 70 80

∆ IP (ms)

Grupo controle (r

= 0.98; p < 0.01)

Grupo obeso (r

= 0.94; p <0.01)

∆

IP/

∆

PAM

-50 -40 -30 -20 -10 0

-50

-40

-30

-20

-10

Grupo controle: r

=0,97; p<0,01

Grupo obeso: r

=0,96; p<0,01

∆ PAM (mmHg)

∆

IP (ms)

Figura 5: Avaliação da sensibilidade do barorreflexo induzida pela resposta

reflexa bradicárdica (A) e taquicárdica (B) do grupo controle (CT) e do grupo

obeso (OB) na 19ª semana de experimento. * p<0.01 (OB vs CT)

Verificou-se uma correlação negativa na avaliação entre a relação do

grau de obesidade (índice de Lee) e o índice da sensibilidade do

barorreflexo induzido pela fenilefrina nos animais alimentados com a dieta

hipercalórica (r=0,720; p<0,01; Figura 6).

Índice de Lee

0.324 0.333 0.342 0.351

∆ IP/∆PAM (ms/mmHg)

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

(r = 0.72; p <0.01)

Figura 6: Correlação linear entre o índice de Lee e o índice de sensibilidade

do barorreflexo induzido pela fenilefrina (ms/mmHg) do grupo obeso.

PROTOCOLO 3: Avaliação dos ajustes cardiovasculares e metabólicos à

hipotensão hemorrágica em ratos alimentados com dieta hipercalórica

Ajustes cardiovasculares

Os valores de pressão arterial média e de frequência cardíaca basais do

grupo obeso (106,9 + 3,0 mmHg / 392,0 + 9,3 bpm) não foram diferentes quando

comparados com o grupo controle (105,0 + 1,4 mmHg / 399,2 + 32,7 bpm).

Durante a hemorragia, ambos grupos experimentais apresentaram uma queda

acentuada da pressão arterial média (PAM) aos 10 minutos em torno de 58% e

54%, respectivamente. A recuperação da mesma ocorreu aos 30 minutos,

quando observou-se uma estabilização dos valores de pressão arterial média

em 27 mmHg e 35 mmHg abaixo dos valores basais em ambos os grupos

(Figura 7A).

Comparando com os valores basais, o declínio máximo da frequência

cardíaca foi de 183 batimento por minuto (bpm) no grupo controle e 174 bpm

no grupo obesos, aos 10 e aos 15 minutos após a hemorragia, respectivamente

(figura 7B). A frequência cardíaca do grupo controle e do grupo obeso

estabilizaram a 22 bpm e a 55 bpm dos valores basais, respectivamente.

Entretanto, não foi verificado diferenças estatísitcas entre os grupos.

0 10 20 30

PAM (mmHg)

100

120

Grupo controle (n=6)

Grupo obeso (n=6)

Tempo (minutos)

0 10 20 30

FC (bpm)

150

200

250

300

350

400

450

Figura 7: Avaliação dos ajustes cardiovasculares à hemorragia do grupo

controle (CT) e do grupo obeso (OB). (A) pressão arterial média; (B) frequência

cardíaca. *P<0,05 vs basal. Abreviação: he (Hemorragia).

Ajustes metabólicos

A hiperglicemia induzida pela hemorragia foi observada já aos 5 minutos

após a hemorragia, atingindo o pico aos 10 minutos quando a glicose plasmática

aumentou em torno de 3 e 4 vezes em animais alimentados com dieta controle

e dieta hipercalórica, respectivamente. No entanto, aos 20 minutos de

hemorragia, a hiperglicemia do grupo controle reduziu para 10,2 mM, enquanto

no grupo obeso permaneceu elevado 13,1 mM. Neste ponto, a hiperglicemia do

grupo obeso foi 128% superior ao grupo controle (p <0,05; Figura 8A). O

aumento da resposta hiperglicêmica à hipotensão hemorrágica (p <0,01) dos

animais obesos pode ser melhor observado na figura 8B, a qual ilustra a área

sob a curva de glicose durante os 30 minutos de hemorragia.

Conforme ilustrado na figura 8C, os níveis plasmáticos de lactato também

aumentaram imediatamente após hemorragia em ambos os grupos. Isso foi

observado durante os primeiros 10 minutos do procedimento, quando o lactato

plasmático aumentou em torno de 300% no grupo controle e no grupo obesos.

Após 30 minutos de hipotensão hemorrágica, o lactato plasmático reduziu, mas

permanecendo 64% e 73% acima de níveis basais, respectivamente. No

entanto, esta resposta metabólica a hemorragia foi similar entre os grupos. A

área sob a curva do lactato após 30 minutos de hemorragia ilustra este resultado

(Figura 8D).

A análise do efeito da obesidade sobre a resposta hiperglicêmica nos

animais obesos, mostrou a existência de uma correlação positiva entre o índice

de Lee e o aumento da glicose plasmática após a hemorragia ( r=0,93; p<0,01;

Figura 9). Além disso, houve uma correlação negativa entre as variações de

glicose no plasma após a hemorragia e o índice de sensibilidade do barorreflexo

induzido pela fenilefrina (r = 0,72, p <0,01) em ratos alimentados com a dieta

hipercalórica.

Tempo (minutos)

0 10 20 30

∆

glicose (mM)

Grupo controle (n=6)

Grupo obeso (n=6)

Área sob a curva da glicose (mM) x 30 min

100

125

150

175

Grupo controle (n=6)

Grupo obeso (n=6)

0 10 20 30

∆

lactato (mM)

Tempo (minutos)

Área sob a curva do lactato (mM) x 30 min

100

120

Figura 8: Avaliação dos ajustes metabólicos à hemorragia no grupo controle

(CT) e do grupo obeso (OB). (A) glicose plasmática; (B) área sob a curva de

glicose; (C) lactato plasmático; (D) área sob a curva de lactato. *P<0,05 (OB vs

CT). Abreviação: he (Hemorragia).

∆ glicose (mM)

4 6 8 10

∆

IP/

∆

PAM (ms/mmHg)

0.0

0.3

0.6

0.9

1.2

1.5

Índice de Lee

0.328 0.332 0.336 0.340

Área sob a curva de glicose (mM)

105

140

175

210

r = 0.930 (p<0.01)

(r = 0.720; p <0.01)

Figura 9: Correlação linear entre o índice de Lee e a hiperglicemia hemorrágica

(A) e o índice de sensibilidade do barorreflexo induzido pela fenilefrina com a

hiperglicêmia hemorrágica (B) do grupo obeso.

5. DISCUSSÃO

O presente estudo mostra que a dieta hipercalórica promove redução da

sensibilidade do barorreflexo e aumento da resposta hiperglicêmica à hipotensão

hemorrágica em ratos obesos induzidos pela dieta hipercalórica. Ambos os

resultados foram correlacionados com o grau de obesidade. Esses dados

indicam que a obesidade interfere nos ajustes metabólicos que dependem do

aumento da atividade simpática periférica induzido pela redução da sensibilidade

do barorreflexo. De fato, a exacerbação da resposta hiperglicêmica à hemorragia

demonstra que a dieta hipercalórica promove um desequilíbrio autonômico a

partir da redução da sensibilidade da bradicardia barorreflexa.

Foi demonstrado que os receptores carotídeos (baro- e

quimiorreceptores) participam de respostas neuroendócrinas em várias

situações fisiológicas, como por exemplo o exercício (Koyama et al, 2001), a

hipóxia (Zinker et al, 1994), a hipoglicemia (Koyama et al, 2000) e a hipotensão

hemorrágica (Silveira et al, 2003; Silveira et al, 2005). Estudos anteriores

revelaram que a resposta hiperglicêmica à hemorragia é modulada pelo

baroreceptor e a conexão com os receptores colinérgicos do PVN integra o

circuito neural responsável por esta resposta metabólica (Silveira et al, 2003). A

liberação de glicose pelo fígado ocorre através de vários mecanismos reflexos

distintos, incluindo aumento da atividade simpática para o mesmo, secreção de

catecolaminas pela medula adrenal e elevação de angiotensina II circulante.

Existem várias evidências anatômicas e fisiológicas que suportam essa idéia

(Strack et al, 1989; Machado, 1995ab; Palkovits et al, 1999; Silveira et al, 2003;

Silveira et a., 2005). Nossos resultados sugerem que a dieta hipercalórica,

promovendo a redução da sensibilidade do barorreflexo, talvez altere a atividade

desse circuito. Alguns autores já demonstraram que os neurônios do PVN estão

cronicamente ativados em cães obesos e que há uma predominância da

atividade das fibras simpáticas oriundas do RVLM, indicando uma redução da

sensibilidade do barorreceptor (Lohmeier et al, 2003). Além disso, já foi relatado

que ratos com obesidade induzida por dieta hipercalórica apresentam redução

da sensibilidade do barorreflexo observado pela administração intravenosa de

fenilefrina (Bunag et al,1990; Bunag et al, 1996; Miller et al, 1999). Esses

estudos corroboram com a hipótese que alterações na regulação metabólica de

ratos obesos talvez sejam mediadas, inicialmente e em parte, pela

dessensibilização do barorreflexo, promovendo uma exacerbação da atividade

simpática induzida pela hipotensão hemorrágica.

O aumento dos coxins adiposos brancos e marrom e elevação da taxa

metabólica associados com o aumento plasmático de triglicérides e de ácidos

graxos livres observados nos ratos obesos, indicam a possibilidade da

participação do sistema renina angiotensina periférico (SRA) no desequilíbrio

autonômico. Alguns estudos já demonstraram que a dieta hipercalórica induz

elevação da atividade do nervo renal simpático (Barnes et al, 2003) e eleva a

concentração plasmática de angiotensina II e a expressão de angiotensinogênio

nos tecidos adiposos de ratos (Boustany et al, 2004). Assim, essas observações

indicam um possível envolvimento da angiotensina II no aumento da atividade

simpática observado nos animais obesos. Além disso, a angiotensina II induz

disfunção do barorreflexo (Tan et al, 2007) e participa da reposta hiperglicêmica

à hipotensão hemorrágica em ratos (Machado et al, 1995a). Ela produz

hiperglicemia direta e indiretamente, ativando a glicogenólise e a

gliconeogênese hepática (Coimbra et al, 1999) e elevando o fluxo simpático para

a periferia (Machado et al, 1995a; Mishessen-neto et al, 1996). Esses trabalhos

reforçam a possibilidade da participação da angiotensina II circulante nas

respostas reflexas alteradas presentes neste estudo.

O aumento da leptina plasmática observado em nossos resultados

associada com a elevada taxa metabólica basal e mobilização de ácidos graxos

confirma a ação desse hormônio em induzir o aumento da atividade simpática

periférica para o tecido adiposo marrom, rins e medula adrenal (Dunbar et al,

1997). A leptina é uma proteína secretada pelo tecido adiposo que passa pela

barreira hemato-encefálica e ativa neurônios localizados em diversas áreas do

hipotálamo, incluindo o núcleo paraventricular (Van Dijk et al, 1996; Elmquist et

al, 2001). Além de sua ação no controle do balanço energético, a leptina

também participa da regulação do sistema cardiovascular (Dunbar et al, 1997;

Correia et al, 2001). Já foi mostrado que a administração de leptina em áreas do

sistema nervoso central aumenta a atividade simpática resultando na elevação

da pressão arterial sistêmica (Dunbar et al, 1997; Correia et al, 2001). Essa

alteração cardiovascular observada pela ação central da leptina parece ser

mediada pela sua interação com o barorreflexo (Grassi et al, 2004). É importante

ressaltar que o PVN faz parte de um circuito neural que envolve a modulação

dos reflexos cardiovasculares e ativação simpática, levando a uma resposta

hiperglicêmica induzida pela hipotensão hemorrágica (Silveira et al, 2003). Já foi

mostrado que a ativação dos neurônios do PVN pela leptina resulta em aumento

do tônus simpático, taquicardia e supressão do reflexo do barorreceptor (Shih et

al, 2003). Também já foi observado que a ativação do barorreflexo induzida pela

fenilefrina abole totalmente o aumento da atividade simpática do nervo renal

induzido pela leptina (Hausberg et al, 2002). Dessa forma, a redução da

sensibilidade do barorreflexo induzida pela fenilefrina em ratos obesos,

observada em nosso trabalho, talvez facilite a ativação simpática do nervo renal

induzindo o aumento da atividade do sistema renina angiotensina periférico.

Sendo assim, o desequilíbrio autonômico induzido pela dieta hipercalórica ocorre

através de diversos fatores endócrinos que afetam a homeostase metabólica e

cardiovascular, os quais contribuem para o reflexo hiperglicêmico determinado

pela hipotensão hemorrágica.

Em suma, nossos resultados demonstram que a dieta hipercalórica

consumida pelos ratos Wistar induz prejuízo da sensibilidade do barorreflexo, o

qual está intimamente correlacionado com o grau de obesidade desses animais,

e induz aumento da resposta hiperglicêmica à hipotensão hemorrágica. Além

disso, a obesidade está correlacionada com o tônus simpático, confirmado pelo

aumento da taxa metabólica basal e da mobilização de ácidos graxos livres.

Sendo assim, nossos resultados mostram que a obesidade induzida pela dieta

hipercalórica promove um desequilíbrio autonômico e metabólico dependentes

da elevação da atividade simpática periférica induzida pela redução da

sensibilidade do barorreflexo.

6. REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA

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