( PDF ) Estudo em ratos jovens consumindo alimentos nordestinos adicionados com suplemento protéico e submetidos ao exercício físico

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LUCIANA GONÇALVES WANDERLEY

ESTUDO EM RATOS JOVENS CONSUMINDO ALIMENTOS

NORDESTINOS ADICIONADOS COM SUPLEMENTO

PROTÉICO E SUBMETIDOS AO EXERCÍCIO FÍSICO

RECIFE

2008

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LUCIANA GONÇALVES WANDERLEY

ESTUDO EM RATOS JOVENS CONSUMINDO ALIMENTOS

NORDESTINOS ADICIONADOS COM SUPLEMENTO

PROTÉICO E SUBMETIDOS AO EXERCÍCIO FÍSICO

Tese apresentada ao Colegiado do Programa

de Pós-Graduação em Nutrição do Centro de

Ciências da Saúde da Universidade Federal

de Pernambuco para a obtenção do grau de

“Doutor em Nutrição”.

ORIENTADORA: Prof

Francisca Martins Bion

Professora Associada I do Departamento de Nutrição da UFPE

Doutora em Ciências dos Alimentos pela Universidade de São Paulo

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Wanderley, Luciana Gonçalves

Estudo em ratos jovens consumindo alimento

nordestinos adicionados com suplemento protéico

submetidos ao exercício físico / Luciana Gonçalve

anderley. – Recife : O Autor, 2008.

xi, 94 folhas ; il., fig., tab.

Tese (doutorado) – Universidade Federal de

Pernambuco. CCS. Nutrição, 2008.

Inclui bibliografia e anexo.

1. Suplementação nutricional – Exercício físico.

Título.

613.25 CDU (2.ed.) UFPE

612.398 CDD (22.ed.) CCS2008-083

Título: Estudo Em Ratos Jovens Consumindo Alimentos Nordestinos

Adicionados Com Suplemento Protéico e Submetidos Ao Exercício Físico

Luciana Gonçalves Wanderley

Tese aprovada em: 20 de junho de 2008

Banca Examinadora:

Recife

2008

iii

"O ser humano vivencia em si mesmo, seus

pensamentos, como algo separado do resto do universo numa

espécie de ilusão de ótica de sua consciência. E essa ilusão é um

tipo de prisão que nos restringe a nossos desejos pessoais,

conceitos e ao afeto apenas pelas pessoas mais próximas. Nossa

principal tarefa é a de nos livrarmos dessa prisão ampliando

nosso círculo de compaixão para que ele abranja todos os seres

vivos e toda a natureza em sua beleza. Ninguém conseguirá

atingir completamente este objetivo, mas, lutar pela sua

realização já é, por si só, parte de nossa liberação e o alicerce de

nossa segurança interior."

Albert Einstein

DEDICATÓRIA

Ao meu filho Lucas que, mesmo com pouca idade, se mostrou um grande

companheiro, compreendendo minhas ausências e se preocupando sempre com meu bem-estar.

À minha mãe (in memorian), Maria das Graças, que tinha no seu nome, “Gracinha”, a

tradução de sua pessoa, cheia de vida, contemplada com a graça de fazer o bem, agregar

pessoas e fazer sorrir com seu jeito divertido de ser.

A minha orientadora Francisca Martins Bion, uma grande mulher, mestra, parceira e

amiga, exemplo a ser seguido. Ademais, merecedora da minha mais profunda gratidão.

AGRADECIMENTOS

Ao Programa de Pós-Graduação em Nutrição, que viabilizou a realização deste projeto.

Aos professores, funcionários e técnicos do Departamento de Nutrição da UFPE, que

possibilitaram a realização de todas as tarefas, cada qual com sua parcela de contribuição.

À Petróleo Brasileiro S.A. – PETROBRAS, que reconheceu a necessidade de prosseguir com

a minha formação acadêmica, evidenciando sua valorização ao profissional que busca se

atualizar, em especial aos gerentes Carlos Roberto Kohler, Suzana Schirmer Cunha Campos,

Maria Fernanda Pires Barbosa e Maria Goretti de França Lima.

A minha irmã Renata que inúmeras vezes me ajudou nas tarefas diárias e cuidou do meu filho

como uma grande mãe.

A José Paulino, França e Norma pelo cuidado especial com os animais utilizados no

experimento, pessoas pelas quais tenho um carinho especial e profundo respeito.

A Neci, sempre atenta às ações exigidas pela pós-graduação, me lembrando de meus deveres e

ajudando no que eu precisava.

A todos os meus amigos e familiares que torceram e sentiram comigo em cada etapa vencida.

SUMÁRIO

I. APRESENTAÇÃO 1

II. JUSTIFICATIVA 3

III. OBJETIVOS 4

GERAL 4

ESPECÍFICOS 4

IV. REVISÃO DA LITERATURA 5

RESUMO 7

INTRODUÇÃO 8

SUPLEMENTO NUTRICIONAL 9

PROPOSTAS DE DISTRIBUIÇÃO PROTÉICA 12

SUPLEMENTOS NUTRICIONAIS PARA GANHO DE MASSA MAGRA 14

CONCLUSÕES 22

ABSTRACT 24

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 25

V. ARTIGO ORIGINAL 34

ABSTRACT 36

INTRODUCTION 36

MATERIALS AND METHODS 38

RESULTS 42

DISCUSSION 44

vii

CONCLUSIONS 49

LITERATURE CITED 50

VI. CONCLUSÕES 60

VII. RECOMENDAÇÕES 61

VIII. PERSPECTIVAS 62

ANEXOS 63

ANEXO A - RECIBO DE ENVIO DO ARTIGO DE REVISÃO 63

ANEXO B - RECIBO DE ENVIO DO ARTIGO ORIGINAL 64

ANEXO C- VERSÃO EM PORTUGUÊS DO ARTIGO ORIGINAL 65

RESUMO 66

ABSTRACT 67

INTRODUÇÃO 68

METODOLOGIA 70

RESULTADOS 74

DISCUSSÃO 77

CONCLUSÕES 84

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 85

viii

LISTA DE TABELAS

TABELA I: CARACTERÍSTICAS DA UTILIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS E

SUPLEMENTOS PROTÉICOS PARA A MODIFICAÇÃO DA

COMPOSIÇÃO CORPORAL, SEGUNDO ALGUNS AUTORES............. 20

TABEL 1: CHEMICAL COMPOSITION OF THE DIETS (g.kg

-1

)..................................57

TABEL 2: FOOD, PROTEIN AND CALORIC INTAKE OF THE GROUPS STUDIED 58

TABEL 3: SERUM PARAMETERS .................................................................................. 59

TABELA 1: COMPOSIÇÃO QUÍMICA DAS DIETAS (g.kg

-1

)........................................ 92

TABELA 2: INGESTÃO ALIMENTAR, PROTÉICA E CALÓRICA ............................. 93

TABELA 3: PARÂMETROS SÉRICOS............................................................................. 94

LISTA DE FIGURAS

FIGURE 1: EXPERIMENTAL SCHEMA........................................................................54

FIGURE 2: WEIGHT BEHAVIOR OF THE ANIMALS AT THE END OF EACH

PERIOD (WEEK) ...............................................................................................................55

FIGURE 3: WEIGHT GAIN AND FAT PERCENTAGE IN ANIMALS WITH

DIFFERENT LEVELS OF WHEY PROTEIN SUPPLEMENTATION AND PHYSICAL

EXERCISE..........................................................................................................................56

FIGURA 1: ESQUEMA EXPERIMENTAL.....................................................................89

FIGURA 2: COMPORTAMENTO PONDERAL DOS ANIMAIS EM CADA FIM DE

PERÍODO (SEMANAL) ....................................................................................................90

FIGURA 3: GANHO DE PESO E PERCENTUAL DE GORDURA DE ANIMAIS

SUBMETIDOS A DIFERENTES NÍVEIS DE SUPLEMENTAÇÃO COM WHEY

PROTEIN E DE EXERCÍCIO FÍSICO.............................................................................91

RESUMO

Este trabalho teve como objetivo: estudar, em ratos jovens, os efeitos da ingestão de Nutri

Whey Protein® sobre alguns metabólitos e na composição corporal dos animais, como também

em substituição à proteína convencional. A dissertação inclui dois artigos: um de revisão da

literatura e outro original. O primeiro, composto por uma revisão sistemática da literatura, em

periódicos especializados impressos e eletrônicos, onde identificou-se que é idéia corrente

entre os praticantes de exercício físicos que é necessário consumir mais nutrientes do que o

recomendado sendo destacado o consumo do whey protein. No segundo artigo, 108 ratos,

com 60 dias de idade foram alimentados com três dietas: padrão (com 17% de proteínas) e

suplementadas com 5 e 10% de whey protein (ambas com 22% de proteínas); e submetidos ou

não ao exercício (sedentários, natação sem e com carga), divididos em nove grupos (n=12): S,

sedentário-dieta padrão; E, exercitado-dieta padrão; EC, exercitado com carga-dieta padrão;

S-5, sedentário-dieta suplementada com 5% de whey protein; E-5, exercitado-dieta

suplementada com 5% de whey protein; EC-5, exercitado com carga-dieta suplementada com

5% de whey protein; S-10, sedentário-dieta suplementada com 10% de whey protein; E-10,

exercitado-dieta suplementada com 10% de whey protein; EC-10, exercitado com carga-dieta

suplementada com 10% de whey protein. Determinou-se: ganho de peso, ingestão alimentar,

gordura da carcaça, uréia, creatinina, alanina (ALT) e aspartato aminotransferase (AST).

Resultados: Tanto o exercício quanto a suplementação promoveram aumento significativo no

consumo alimentar sendo mais pronunciado nos grupos exercitados com carga. Houve

alteração nos pesos dos exercitados com carga (EC, EC5 e EC10), que se apresentaram

significativamente menores que os demais grupos. Ocorreu interação entre a dieta e o exercício

no sentido de diminuição no ganho de peso. No caso da gordura coporal os grupos E, E5 e

E10, apresentaram aumento significativo, independentemente da dieta consumida. EC5 e EC10

apresentaram uma elevação significativa na concentração sérica da uréia (U) quando

comparados ao grupo S, onde exercício e dieta interferiram significativamente no aumento da

uréia. Quanto à creatinina (CR) foi verificado que as dietas suplementadas (5% e 10%)

promoveram aumento significativo neste metabólito, independentemente da intensidade do

exercício executado. A AST apresentou aumento significativo em todos os grupos submetidos

ao exercício com carga (EC, EC5 e EC10), intensificado pela suplementação de 10% do whey

protein. No caso da ALT, o comportamento em relação ao exercício físico foi semelhante nas

três dietas, verificando-se aumento significativo nos grupos exercitados com carga (EC, EC5 e

EC10) em comparação aos demais. Os resultados levam a concluir que: é de suma

importância, para praticantes de atividades físicas, a ingestão de uma alimentação adequada;

faz-se necessária a revisão do conceito de suplementos, como também alertar sobre os que

apresentam risco ou ineficiência, devendo-se respeitar uma ingestão até 2,0g de proteína/kg de

peso corporal/dia. É imprescindível a fiscalização, regulação da comercialização e publicidade

dos suplementos pelo Ministério da Saúde, bem como a intervenção do nutricionista na

prescrição e acompanhamento do seu uso. O whey protein foi pouco efetivo na melhoria da

composição corporal, sendo contra-indicado para sedentários. Quanto aos parâmetros

bioquímicos, tanto a suplementação quanto o exercício podem ter promovido um desequilíbrio

no metabolismo, podendo causar danos à saúde.

Palavras-chave: proteína, whey protein, suplementação, suplementos protéicos, exercício

físico, ratos.

ABSTRACT

The aim of the present study was to investigate the effects of the ingestion of Nutri Whey

Protein® by young rats on metabolites and body composition as well as it substitution for

conventional protein. The dissertation included two articles: a literature review and an original

article. The systematic literature review in specialized print and electronic periodicals identified

the current notion among exercise practitioners that it is necessary to consume more than the

recommended amount of nutrients, with particular emphasis on the intake of whey protein. In

the second article, 108 rats aged 60 days were fed three diets: standard (17% protein),

supplemented with 5% whey protein and supplemented with 10% whey protein (both

supplemented diets contained 22% protein). The rats were either submitted to exercise or not

(sedentary, swimming with and without load) and divided into nine groups (n=12): S,

sedentary-standard diet; E, exercised-standard diet; EL, exercised with load-standard diet; S-5,

sedentary-diet supplemented with 5% whey protein; E-5, exercised-diet supplemented with 5%

whey protein; EL-5, exercised with load-diet supplemented with 5% whey protein; S-10,

sedentary-diet supplemented with 10% whey protein; E-10, exercised-diet supplemented with

10% whey protein; EL-10, exercised with load-diet supplemented with 10% whey protein. The

following factors were determined: weight gain, food intake, carcass fat, urea, creatinine,

alanine (ALT) and aspartate aminotransferase (AST). Results: Both exercise and protein

supplementation promoted a significant increase in food intake, which was more pronounced in

the groups exercised with load. There was a change in weight in the groups exercised with

load (EL, EL5 and EL10), which had significantly lower weight than the remaining groups.

There was an interaction between diet and exercise with regard to reduced weight gain. The E,

E5 and E10 groups exhibited a significant increase in body fat regardless of the diet consumed.

EC5 and EC10 exhibited a significant increase in urea blood levels when compared to the

sedentary groups, such that exercise and diet had a significant affect on the increase in urea.

The supplemented diets (5% and 10%) promoted a significant increase in creatinine levels

regardless of the intensity of exercise. AST underwent a significant increase in all groups

submitted to exercise with load (EL, EL5 and EL10) and was intensified by the

supplementation of 10% whey protein. The behavior of ALT in relation to physical exercise

was similar in the three diets, with a significant increase in the groups exercised with load (EL,

EL5 and EL10) in comparison to the other groups. The results lead to the following

conclusions: the ingestion of an adequate diet is of summary importance to practitioners of

physical activities; a revision of the concept of supplements is necessary; it is also necessary to

alert the public as to diets that present risks or are inefficient, respecting an intake of up to

2.0g /kg of body weight/day. The monitoring and regulation of the commercialization and

publicity of supplements by the Health Ministry is fundamental, as is the involvement of

nutritionists in the prescription and follow-up of supplement use. Whey protein proved to have

little effect on the improvement body composition and is contraindicated for sedentary

individuals. Regarding biochemical parameters, both supplementation and exercise may have

promoted an imbalance in the metabolism, which could be harmful to health.

Keywords: protein, whey protein, supplementation, protein supplements, physical exercise,

rats.

I. APRESENTAÇÃO

O uso de suplementos é altamente disseminado na população em geral, principalmente

dentre os praticantes de exercício físico. Muito contribui para este consumo o fato de que,

diariamente, novos produtos são colocados no mercado, com uma nova promessa de aumentar a

massa muscular, queimar o excesso de gordura corporal ou aumentar o desempenho. O que é

muito estimulado pela ausência de recomendações nutricionais específicas para pessoas que

praticam exercícios.

Por outro lado, a crescente valorização do físico, enfatizada pelos meios de comunicação

de massa, indicando como modelo ideal de corpo e de masculinidade aquele inflado de músculos,

pode estar contribuindo para que um número crescente de jovens consuma mais suplementos

nutricionais ou de outro tipo, na intenção de rapidamente desenvolver a massa muscular e alcançar

o “corpo ideal”, nesta busca pela perfeição física deixam de considerar os danos à saúde que esta

prática pode acarretar. Nos últimos tempos tem assumido grande destaque o consumo de

suplementos nutricionais sob a forma de aminoácidos e isolados protéicos (whey protein).

Deste modo este trabalho foi dividido em duas etapas, correspondendo a dois artigos

científicos: revisão da literatura e artigo original. A primeira etapa, revisão sistemática da

literatura, foi realizado em periódicos especializados impressos e eletrônicos. Na segunda etapa

investigou-se a efetividade da suplementação com o “Nutri Whey Protein®”, na melhoria da

composição corporal e sua interferência em alguns parâmetros bioquímicos sobre duas distintas

maneiras; adicionados à dieta convencional e substituindo parte da proteína convencional pelo

whey protein.

Os artigos foram elaborados com base nas exigências das revistas às quais foram

submetidos e se apresentam no idioma nativo e, no caso do segundo artigo, também em inglês,

língua do periódico no qual será publicado.

II. JUSTIFICATIVA

O número de adolescentes e adultos envolvidos em práticas de atividades físicas vem

aumentando, consumidores em potencial dos suplementos nutricionais, colocados à venda em

número sempre crescente, com base em alegações aparentemente benéficas: aumento da massa

muscular, queima da gordura corporal, melhoria da performance, etc.

Não obstante a adição de suplementos nutricionais protéicos à dieta daqueles que fazer

exercícios físicos, adolescentes e adultos, constituir atualmente um procedimento largamente

utilizado, são ainda escassas as informações acerca de vários aspectos envolvidos na adoção desta

prática: eficácia do suplemento, adequação das dosagens, possíveis danos à saúde, dentre outros.

A falta de consenso e as controvérsias acerca dos possíveis benefícios decorrentes da

ingestão de suplementos protéicos pelo praticante de exercício físico justificam a realização de

pesquisas que possam contribuir para esclarecer aspectos ainda pouco discutidos e/ou elucidados.

Assim, considera-se relevante e pertinente estudar, em ratos jovens, os efeitos da ingestão

de suplemento nutricional protéico e seu papel na prática de natação.

III. OBJETIVOS

GERAL

Investigar, em ratos jovens praticantes de exercício físico (natação), a influência da

ingestão de alimentos nordestinos adicionados de suplemento protéico.

ESPECÍFICOS

• Estudar, em ratos jovens, os efeitos da ingestão de Nutri Whey Protein

• Detectar a possível ocorrência de modificações na composição corporal dos animais

• Identificar os efeitos metabólicos desencadeados pela ingestão desse suplemento

• Comparar as proporções do suplemento Nutri Whey Protein a serem adicionadas à

mistura alimentar.

IV. REVISÃO DA LITERATURA

Trabalho enviado para a Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas, em 30/05/2007.

Encontra-se na segunda revisão (27/12/07), aguardando aceitação para a publicação.

SUPLEMENTAÇÃO NUTRICIONAL PARA MELHORAR A MASSA MAGRA DE

PRATICANTES DE EXERCÍCIO FÍSICO: O QUE É MAIS EFETIVO?

Luciana Gonçalves Wanderley

*; Francisca Martins Bion

Doutoranda em Nutrição pela Universidade Federal de Pernambuco, Nutricionista da Petrobras -

Petróleo Brasileiro S.A.

Doutora em Ciências dos Alimentos pela Universidade de São Paulo – USP, Professora Adjunta

IV do Departamento de Nutrição, Centro de Ciências da Saúde – Universidade Federal de

Pernambuco.

RESUMO

Objetivo: investigar os efeitos da suplementação nutricional na melhoria da composição corporal

e suas implicações na saúde. Metodologia: revisão sistemática da literatura em periódicos

especializados impressos e eletrônicos. Resultados: Peso e gordura corporal abaixo dos níveis

mínimos acarretam distúrbios, como perda de massa muscular e óssea, aumento do risco de fadiga

e disfunção sexual. Isto pode levar a conclusões equivocadas, de que é necessário consumir mais

nutrientes do que o recomendado, e à busca de suplementos para ganho de massa muscular, ainda

relativamente pouco estudados e com segurança de uso questionada. Dentre os suplementos

destacam-se os nutricionais, como: minerais, aminoácidos e whey protein. Conclusão: é de suma

importância, para praticantes de atividades físicas, a ingestão de uma alimentação adequada; sendo

necessária a revisão do conceito de suplementos, como também alertar sobre os que apresentam

risco ou ineficiência, devendo-se respeitar uma ingestão até 2,0g de proteína/kg de peso corporal

por dia. É imprescindível a fiscalização, regulação da comercialização e publicidade dos

suplementos pelo Ministério da Saúde.

Unitermos: whey protein, suplementação, suplementos protéicos, proteínas, atividade física.

INTRODUÇÃO

Nos últimos anos, tem se acentuado o interesse pelos estudos sobre a nutrição adequada à

prática desportiva, ressaltando a importância da alimentação e do exercício físico na manutenção

de níveis adequados de saúde física e psíquica. Concomitantemente, as modificações sociais

decorrentes da expansão dos meios de comunicação têm enfatizado o culto à forma física, à boa

aparência, à preservação da saúde, o que contribui para um maior interesse e atenção acerca do

assunto (WOLFE, 2000; IRIART; ANDRADE, 2002; CARVALHO et al., 2003).

Segundo o American College of Sports Medicine (2000), a dieta consumida pelos

praticantes de exercício físico reflete diretamente na saúde, no peso e na composição corporal.

Peso e gordura corporal abaixo dos níveis mínimos adequados levam a distúrbios de saúde, além

da perda de massa muscular, diminuição da densidade óssea, aumento do risco de fadiga e

disfunção sexual. É assim evidente que a adequação das necessidades energéticas constitui uma

prioridade nutricional importante para os que praticam exercícios físicos.

No entanto, esta afirmação pode levar a conclusões equivocadas, por parte de leigos,

como, por exemplo, que é necessário consumir mais nutrientes do que o recomendado, fato

confirmado pela tendência cada vez mais comum, dentre os praticantes de exercício físico, de

utilizar substâncias ou nutrientes, os chamados “suplementos ou auxílios ergogênicos”, com o

objetivo de “reforçar as condições orgânicas, melhorar a forma física e, conseqüentemente, a

performance” (BURKE; READ, 1993; GOMES; TIRAPEGUI, 2000; MENDES; TIRAPEGUI,

2002; CARVALHO et al., 2003; DUARTE et al., 2007).

Dentre os suplementos nutricionais, apenas as vitaminas e os minerais são considerados

controlados (CLARKSON; COLEMAN; ROSEMBLOOM, 2002). Quanto aos suplementos

protéicos, quando utilizados conforme a indicação do fabricante são aparentemente seguros,

faltando esclarecer aspectos relativos ao uso de Aminoácidos de Cadeia Ramificada (BCAA)

(ROGERO; TIRAPEGUI, 2007) e do whey protein, que vêm sendo destacados como compostos

importantes no ganho de massa magra (TIPTON et al., 1999; SHIMOMURA et al., 2004;

GLEESON, 2005; SHIMOMURA et al., 2006).

Este trabalho apresenta uma revisão sistemática abordando a evolução dos conhecimentos

sobre o tema, adotando a metodologia de busca documental no Pubmed, Bireme: Medline, Lilacs,

Scielo; Periódicos Capes e periódicos físicos nas bibliotecas especializadas, com o objetivo de

elucidar dúvidas, facilitar a tomada de decisões por parte do nutricionista e subsidiar informações

àqueles que buscam conhecer o assunto.

SUPLEMENTO NUTRICIONAL

Entende-se por suplemento nutricional os produtos destinados a suplementar a dieta com a

finalidade de melhorar a saúde, os quais não se apresentam como alimentos convencionais e não

constituem um só item dessa dieta. São considerados suplementos nutricionais: as vitaminas, os

minerais, os aminoácidos, as proteínas, bem como ervas ou outros vegetais (HALTED, 2000).

São comercializados sob forma de pílulas, cápsulas, tabletes, pós ou líquidos rotulados como

“suplementos dietéticos” (DSHEA, 1994). Nos Estados Unidos, além dos produtos descritos, são

considerados e comercializados como suplementos nutricionais: drogas novas aprovadas,

antibióticos ou produtos biológicos licenciados e medicamentos antes da aprovação (DSHEA,

1994).

Estes produtos são difíceis de classificar, por não haver uniformidade quanto ao fator em

que se deve basear esta classificação. Alguns os classificam considerando seu principal nutriente

(carboidratos, proteínas, multivitamínicos, etc.) (BUCCI, 1994); outros, de acordo com a função

exercida (repositores energéticos, anticatabólicos, etc.) (GRAHAN; RUSH; VAN SOEREN,

1994).

Burke e Read (1993) propõem uma divisão em duas grandes categorias: suplementos

dietéticos e auxílios ergogênicos. No primeiro caso, o composto deve conter os nutrientes em

quantidades similares àquelas encontradas nos alimentos e atender as recomendações diárias.

Portanto, deve complementar a dieta, para satisfazer as necessidades fisiológicas e nutricionais

decorrentes da prática do exercício, podendo ou não melhorar a performance. Ainda deve ser de

fácil ingestão, particularmente durante a prática de exercícios ou durante as competições.

No grupo de auxílios ergogênicos estão incluídos os produtos que melhoram a

performance e não são enquadrados como suplementos (BURKE; READ, 1993).

No Brasil, a Secretaria de Vigilância Sanitária do Ministério da Saúde, através da portaria

no 222, de 24 de março de 1998, classifica esses produtos como: repositores eletrolíticos,

alimentos protéicos, alimentos compensadores, entre outros; no entanto, não especifica claramente

suas funções (BRASIL, 1998).

O uso de suplementos é altamente disseminado na população em geral, atingindo cerca de

35 a 40% (DUARTE et al., 2007). Entretanto, Maughan e Burke (2004) afirmam que

aproximadamente 50% dos atletas consomem suplementos, fato que se intensifica em relação ao

fisiculturismo, em que os praticantes, em sua quase totalidade, os utilizam. Foram catalogados 624

diferentes produtos, destinados unicamente ao consumo de fisiculturistas (GRUNEWALD;

BALLEY, 1993).

Muito contribui para o aumento deste consumo o fato de que, “diariamente, novos

produtos são colocados no mercado, com uma nova promessa de aumentar a massa muscular,

queimar o excesso de gordura corporal ou aumentar o desempenho” (CLARKSON; COLEMAN;

ROSEMBLOOM, 2002). Contribuem também para este aumento do consumo a ausência de

recomendações nutricionais específicas para pessoas que praticam exercícios (BURKE; READ,

1993; CARVALHO et al., 2003), bem como a motivação individual para melhorar a performance

em treinamento ou competição (BURKE; GOLLAN; READ, 1991; CARVALHO et al., 2003),

característica também observada em indivíduos não atletas (SHORT, 1994; CARVALHO et al.,

2003), assim como a pressão do grupo social, independente de o indivíduo ser atleta ou não

(BURKE; READ, 1993; APPLEGATE; GRIVETTI, 1997).

Do mesmo modo, a crescente valorização do físico, enfatizada pelos meios de

comunicação de massa, indicando como modelo ideal de corpo e de masculinidade aquele inflado

de músculos, pode estar contribuindo para que um número crescente de jovens consuma mais

suplementos nutricionais ou de outro tipo, na intenção de rapidamente desenvolver a massa

muscular e alcançar o “corpo ideal”, sem considerar os efeitos colaterais que esta prática pode

acarretar (WOLFE, 2000; IRIART; ANDRADE; 2002; CARVALHO et al., 2003; DUARTE et

al., 2007). Vale ressaltar que esta prática acarreta um grande risco, decorrente da ingestão de

doses extremamente elevadas, ultrapassando as necessidades dietéticas normais, conforme as

evidências demonstram em relação a boa parte dos desportistas (BURKE; READ, 1993; BURKE;

DESBOROW; MINEHAN, 2000; CARVALHO et al., 2003; DUARTE et al., 2007).

Têm assumido grande destaque no consumo de suplementos nutricionais os aminoácidos e

isolados protéicos (whey protein), que constituem um outro tipo de suplementação com posição

de destaque no marketing da nutrição esportiva, devido à qualidade de seus constituintes.

Estudos recentes demonstraram a capacidade dos isolados protéicos ou misturas de

aminoácidos com composição semelhante à do whey protein em desenvolver um corpo saudável

(CROSS; GILL, 2000; SHAH, 2000), síntese protéica muscular, melhor perfil de lipídios

plasmáticos (ALJAWAD; FRYER; FRYER, 1991), entre outros efeitos benéficos (HÁ; ZEMEL,

2003).

Na análise relativa à utilização de um suplemento, alguns aspectos devem ser

considerados: quantidade a ser ingerida, horário de administração, finalidade e segurança para a

saúde (MAUGHAN; BURKE, 2004). Como os suplementos são muito variados e pouco

controlados, faz-se necessário considerar outros fatores para garantir mais segurança no que

concerne à escolha daqueles que vão ser ingeridos. A Sociedade Brasileira de Medicina do

Esporte determina que um suplemento só pode ser considerado de uso seguro se atender os

seguintes requisitos: nenhum de seus ingredientes apresentar risco significativo ou razoável de

provocar doença ou lesão sob as condições-padrão de uso; seus ingredientes não constituírem

perigo, em se tratando de uso esporádico, quando não há registro a este respeito, no rótulo; não

conter nenhum novo ingrediente para o qual não exista informação suficiente, garantindo sua

segurança; ser liberado, pelo órgão responsável, como produto que não representa risco para a

saúde pública (CARVALHO et al., 2003).

PROPOSTAS DE DISTRIBUIÇÃO PROTÉICA

As controvérsias sobre a recomendação protéica adequada para indivíduos fisicamente

ativos ainda são numerosas (BURKE; READ, 1993; CARVALHO et al., 2003). Diversos estudos

sugerem faixas variadas de consumo de proteínas, enquanto outros enfatizam as implicações, para

a saúde, decorrentes do consumo em excesso (LEMON, 1991; LEMON et al., 1992; WOLFE,

2000; HÁ; ZEMEL, 2003; PHILLIPS, 2004; TARNOPOLSKY, 2004).

Recente revisão sobre requerimentos protéicos e suplementação em esportes de endurance

ou de resistência menciona que, nos atletas, há uma otimização do metabolismo protéico

(PHILLIPS, 2004), sendo apenas necessário manter o aporte protéico recomendado para

indivíduos normais, 12 a 15% da energia diária (AMERICAN COLLEGE OF SPORTS

MEDICINE, 2000), ao invés de aumentar a ingestão, ultrapassando a recomendação.

O American College of Sports Medicine, a American Dietetic Association e a Dietitians

of Canada (2000) recomendam a ingestão de 1,2 a 1,4g/kg de peso corporal, por dia, para atletas

de endurance, com o que concordam alguns autores (GONTZEN; ZUTZECI; DUMITRACHE,

1974; LEMON, 1991); e 1,6 a 1,7g/kg de peso corporal, por dia, para atletas de resistência,

conforme afirmam alguns estudiosos (FERN; BEILINSKI; SCHULTZ, 1991; LEMON et al.,

1992). Esta ingestão pode atingir até 2,0g/kg peso corporal/dia, sem riscos à saúde (LEMON,

1997).

A Sociedade Brasileira de Medicina do Esporte recomenda 1,2 a 1,6g/kg de peso corporal,

por dia, para atletas de endurance, e 1,4 a 1,8 g/kg de peso corporal, por dia, para atletas de

resistência (CARVALHO et al., 2003).

Tarnopolsky et al. (1992) demonstraram, em indivíduos submetidos a treinamento de

resistência, aumento da síntese protéica com um consumo de proteína na proporção de

1,4g/kg/dia, sendo que o consumo anterior era de 0,9g/kg/dia. Numa segunda etapa, o aumento

desta ingestão, para 2,4g/kg/dia, não induziu ganho adicional de massa muscular. Reforçando,

desta forma, a idéia de que a ingestão de proteínas, quando em excesso, não constitui fator

determinante do ganho de massa muscular; contudo, pode ser um fator limitante quando oferecida

em quantidades inadequadas ou como parte de uma dieta hipocalórica ou pobre em carboidratos.

É relevante salientar que não ocorrem patologias hepáticas ou renais quando o consumo

protéico é inferior a 2,0g/kg/dia (LEMON, 1991), nem o agravamento dessas patologias, quando

já estão instaladas (MAUGHAN, BURKE, 2004). O fato pode ser explicado porque um consumo

elevado de proteínas acarreta: maior consumo de colesterol e de gordura saturada, associado ao

aumento da ingestão de produtos de origem animal; maior risco para o indivíduo com história

familiar de problemas hepáticos ou renais; maior chance do aparecimento de gota; ingestão de

uma dieta energeticamente desbalanceada.

O consumo de dietas com mais de 30% de proteínas pode provocar alterações no pool de

aminoácidos plasmáticos, por meio de mecanismos de transaminação hepática, reduzindo a

disponibilidade de alguns aminoácidos essenciais para a síntese protéica no músculo esquelético,

comprometendo o trabalho de hipertrofia (GOLDSPINK; GARLICK; NCMURLAN, 1983;

WADDEN et al., 1983). Outro aspecto a observar é que a ingestão de proteínas por “atletas bem

treinados” deve ser inferior a 2,8g/kg de peso corpóreo/dia, dependendo da necessidade

específica. Ingestões superiores a esta recomendação podem ocasionar prejuízo aos rins (LEMON

et al., 1992; AMERICAN COLLEGE OF SPORTS MEDICINE, 2000; CLARKSON;

COLEMAN; ROSEMBLOOM, 2002; TARNOPOLSKY, 2004).

SUPLEMENTOS NUTRICIONAIS PARA GANHO DE MASSA MAGRA

Vários tipos de suplementos são oferecidos no mercado, para promover ganho de massa

magra, como: minerais; creatina, ribose, aminoácidos e suplementos protéicos.

Em relação aos minerais, ainda não há comprovação, na literatura, sobre seus possíveis

efeitos na composição corporal. Os trabalhos sobre o tema são escassos, muitas dúvidas ainda

persistem. Lukaski (2004) afirma que a ingestão de cromo, sulfato de vanádio e boro exerce efeito

positivo no ganho de massa muscular, fato não observado por outros autores (JENNINGS et al.,

1997; KREIDER, 1999; VOLPE et al., 2001). Tem-se dado destaque à ingestão de piruvato de

cálcio, pela sua aparente capacidade de reduzir o peso e a gordura corporal, em indivíduos com

sobrepeso, associada à musculação (KOH-BANERJU et al., 2005) e ao exercício aeróbico

(KALMAN, 1998; KALMAN et al., 1999; HÁ; ZEMEL, 2003); a ingestão de 6g/dia promove um

efeito positivo; no entanto, quando aumenta para 10g/dia ocorre elevação dos triglicerídeos e do

LDL e diminuição do HDL (KOH-BANERJU et al., 2005), sem que haja melhoria da composição

corporal, podendo, assim, ocasionar danos à saúde; no caso do cromo, pesquisas revelam melhoria

na composição corporal com o consumo de altas (200 a 400 µg/dia) ou baixas dosagens (17,8

µg/dia), concomitante ou não à prática de exercício físico (KAATS et al., 1996; JENNINGS et

al., 1997; CAMPBELL et al., 1999). Fato não corroborado por estudos mais recentes, como os

de Baylis, Cameron-Smithe, Burke (2001) e Volpe et al. (2001), os quais evidenciaram que a

melhoria na composição corporal foi decorrente da prática do exercício físico e não do consumo

do suplemento.

Outra substância recentemente estudada para verificar sua ação na melhoria da composição

corporal é a ribose (GAMMEREN; FALK; ANTONIO, 2002; KERKSICK et al., 2005). Embora

ainda sejam escassos os trabalhos sobre o tema, esta suplementação parece não ter efeito sobre a

composição corporal. Falk et al. (2003) associaram ribose com creatina e glutamina, durante oito

semanas de treinamento de resistência muscular em 28 homens, verificando um aumento

significativo na força e resistência muscular, redução significativa no peso corporal em termos de

massa magra, inclusive no grupo placebo. Vale ressaltar que a creatina promove aumento de

massa magra (MENDES, 2002); contudo, há dúvidas se este efeito não seria apenas decorrente de

uma maior retenção de água (CLARKSON; RAWSON, 1999; CLARKSON; COLEMAN;

ROSEMBLOOM, 2002; MENDES; TIRAPEGUI, 2002).

A proteína é, talvez, a suplementação mais utilizada, atualmente, por pessoas fisicamente

ativas, para ganho de massa magra (APPLEGATE; GRIVETTI, 1997; DUARTE et al., 2007).

Está muito em voga a utilização de aminoácidos de cadeia ramificada (BCAA) e do whey protein.

(WOLFE, 2000; CLARKSON; COLEMAN; ROSEMBLOOM, 2002; HARAGUCHI; ABREU;

PAULA, 2006; SHIMOMURA et al., 2006; ROGERO; TIRAPEGUI, 2007).

Este entendimento sobre a ação benéfica da suplementação com alguns aminoácidos

suplementos parece justificável face à necessidade de maior consumo em situações de estresse

metabólico, como acontece no exercício físico; no entanto, ainda é um assunto controvertido. As

modificações orgânicas após esforço agudo ou crônico podem ser moduladas pelo uso de

aminoácidos específicos durante este período (DECOMBAZ, 2004; ROGERO; TIRAPEGUI,

2007).

Este efeito positivo na recuperação e no desenvolvimento muscular pressupõe a ocorrência

concomitante de dois processos: síntese protéica, a partir de aminoácidos e, inversamente,

diminuição da degradação de proteínas. No caso do aporte protéico, para otimizar seu efeito é

necessário consumir carboidratos, o que garante um balanço energético positivo e uma síntese

protéica mais eficiente e também potencializa um balanço nitrogenado positivo (WOLFE, 2000;

HÁ; ZEMEL, 2003; DECOMBAZ, 2004; ROGERO; TIRAPEGUI, 2007).

Os BCAA (leucina, valina e isoleucina) são relevantes para a manutenção da proteína

corporal; além de constituírem fontes de nitrogênio para a síntese de alanina e glutamina, regulam

os processos anabólicos e têm efeitos terapêuticos, uma vez que podem atenuar a perda de massa

magra durante a redução de peso corporal, favorecer o processo de cicatrização, melhorar o

balanço protéico muscular em idosos e propiciar efeitos benéficos no tratamento de patologias

hepáticas e renais (ROGERO; TIRAPEGUI, 2007).

A utilização destes aminoácidos na nutrição esportiva baseia-se na premissa de que podem

promover anabolismo protéico muscular, ao mesmo tempo em que diminuem o grau de lesão

induzido pelo exercício físico e promovem o aumento ou manutenção do glicogênio hepático e

muscular (GLEESON, 2005; SHIMOMURA et al., 2006; ROGERO; TIRAPEGUI, 2007).

Estudo divulgado em 2004 constatou que a suplementação de BCAA antes e após o exercício é

efetiva na diminuição das demandas musculares induzidas pelo exercício e na promoção da síntese

protéica (SHIMOMURA et al., 2004). No entanto, outro estudo, em 2005, sobre a relação entre a

atividade física e BCAA, não encontrou evidências científicas suficientes para garantir que esta

suplementação tenha efeito anticatabólico, antes ou após o exercício, ou que possa levar a um

reparo muscular, pós-exercício (GLEESON, 2005).

Os BCAA constituem 26% do Whey protein, um produto extraído normalmente do soro

do leite durante o processo de fabricação do queijo, com alta qualidade protéica e boa proporção

de aminoácidos de cadeia ramificada (SHIMOMURA et al., 2006; ROGERO; TIRAPEGUI,

2007), também apresentam alto teor de cálcio e de peptídeos bioativos do soro (HARAGUCHI;

ABREU; PAULA, 2006). Entre outras funções, promovem a regulação e a iniciação da síntese

protéica muscular (WOLFE, 2000; HÁ; ZEMEL, 2003; SHIMOMURA et al., 2006; ROGERO;

TIRAPEGUI, 2007), a redução da gordura corporal, modulação da adiposidade, melhora do

desempenho físico, apresentando ainda efeito hipotensivo, antioxidante e hipocolesterolêmico

(HARAGUCHI; ABREU; PAULA, 2006).

A composição de aminoácidos do whey protein é semelhante, em quantidade e qualidade,

à da célula muscular, e favorece uma rápida absorção intestinal de seus aminoácidos (CRIBB et

al., 2007), o que constitui um ponto positivo; no entanto, a concentração desses aminoácidos na

corrente sangüínea diminui rapidamente, podendo prejudicar a síntese protéica, diferentemente da

caseína, cuja absorção é mais lenta (WOLFE, 2000; HÁ; ZEMEL, 2003).

Ressalta-se, ainda, que uma alimentação contendo whey protein provê um maior balanço

pós-prandial de leucina e ganho líquido protéico, em homens jovens e idosos, quando comparado

com uma alimentação com a mesma composição de nitrogênio, proveniente da caseína. Contudo,

alguns estudos (COLKER et al., 2000; ANDERSEN et al., 2005; CRIBB, et al., 2007) têm

evidenciado maior ganho de força e/ou massa corporal magra com whey protein, quando

comparados com grupos que receberam carboidratos ou caseína durante o treinamento com

exercício de resistência. Cribb et al. (2007) afirmam que nenhum estudo verificou as adaptações

do músculo esquelético à resposta do treinamento com exercício de resistência e suplementação

com whey protein.

São poucos e controvertidos os estudos a respeito do whey protein, deixando claro o

quanto é importante o aprofundamento das pesquisas neste campo, a fim de possibilitar, à

população praticante de exercícios físicos, em diferentes faixas etárias, um consumo seguro, que

não acarrete danos à saúde.

Na tabela I são especificadas algumas características acerca da utilização de suplementos

protéicos e aminoácidos; verifica-se que os efeitos são diferentes, poder-se-ia considerar até

mesmo controvertidos, conforme os autores, em relação ao tipo de exercício, tipo de suplemento,

dosagem, forma e tempo de utilização. Os suplementos se apresentam sob distintas formas de

administração, variando de pó (COLKER et al., 2000; ANDERSEN et al., 2005), barras

(BROWN, 2004), até soluções (WILLIAMS et al., 2001; TIPTON et al., 2003), sem evidências

consistentes de efetividade.

No caso da proteína, o whey protein tem efeito positivo sobre a composição corporal

quando consumido em barras; no entanto, a soja também apresentou o mesmo efeito (BROWN,

2004). Quando associado whey protein à BCAA, também melhorou a massa magra (COLKER et

al., 2000) e sua associação com carboidrato não apresentou melhor efeito (ANDERSEN et al.,

2005) que no seu uso exclusivo, em que já havia melhorado a hipertrofia muscular. Apesar do

exercício predominante ser a musculação, este pode não ser efetivo no estímulo à rápida

diminuição da gordura corporal, já que esta modificação da composição depende dos dois

processos, aumento da proteína e diminuição da gordura corporal, podendo ser interessante sua

associação com um trabalho aeróbico.

TABELA I: Características da utilização de aminoácidos e suplementos protéicos para a modificação da composição corporal,

segundo alguns autores

Autores Suplemento Grupo estudado Exercício Dosagem Forma de uso Tempo de uso Efeito

ANDERSEN

et al. (2005)

Carboidrato

e proteína

22 homens

saudáveis/não

atletas

23,2 ± 0,6 anos

Musculação

3vezes/semana

Carboidrato (25g

maltodextrina) e 25g

proteína (16,6g whey

protein, 2,8g caseína,

clara de ovo e glutamina,

cada)

Pó dissolvido em ½

litro de água, ingerido

imediatamente após o

treino

98 dias Proteínas:

↑ função mecânica muscular

↑ hipertrofia muscular

Carboidratos:

= função mecânica muscular

= hipertrofia muscular

BROWN et

al. (2004)

Whey

Protein e

soja

27 homens

universitários em

treinamento de

força

20,36 ± 0,34 anos

Musculação 33g por dia 3 barras/dia whey

protein ou soja

56 dias

Ambos: ↑ massa magra

Soja: ↑ antioxidante

COLKER et

al. (2000)

Só Whey

Protein ou

associada a

BCAA e

glutamina

16 homens

atletas adultos

33,1 ± 9,0 anos

Musculação

3vezes/semana

1 hora /dia

40g de whey protein ou

adicionada de 3g de

BCAA e 5g de glutamina

Pó 1 vez ao dia 70 dias

Whey Protein só:

= Composição corporal

= performance

Associado:

↑ composição corporal

↑ performance

TIPTON et

al.(2003)

Aminoácidos

essenciais e

leite

concentrado

3 homens

4 mulheres

26,7 ± 1,0 anos

Exercício de

resistência

30 g/dia 2×15g de aminoácidos

essenciais diluídos em

350ml de água, antes e

após o treino

2 períodos de

24 horas:

a) repouso,

b) exercício e

suplemento

↑ síntese protéica

↑ balanço da proteína muscular

WILLIAMS

et al. (2001)

Aminoácido 6 homens

6 mulheres

não treinados

19 a 41 anos

Musculação

5 dias/semana

Glicose: 0,8g/kg

Aminoácidos: 0,2g/kg

após o treino em dias

alternados

17,1g glutamina, 11g

leucina, 10,3g ácido

aspártico

70 dias

↓ força muscular

CRIBB, et

al. (2007)

whey protein

creatina e

carboidrato

33 homens

fisiculturistas

Exercício de

resistência

1 hora/dia

4 grupos:

• whey protein,

• creatina e whey

protein

• creatina e carboidrato

• só carboidrato

1,5g/kg/dia de cada

suplementação para

cada grupo

77 dias

↑ força

↑ hipertrofia nos grupos nos 3

primeiros grupos

Legenda: = permaneceu, ↓ diminuiu, ↑ aumentou

É unânime, atualmente, entre os especialistas em nutrição de indivíduos fisicamente ativos

ou atletas, que a necessidade de maior aporte de nutrientes pode ser suprida pela ingestão de dieta

equilibrada, sem suplementação. Esta deve ser indicada apenas para aqueles que não conseguem

ingerir a quantidade suficiente de nutrientes ou sua alimentação não os contenha, não

conseguindo, assim, suprir suas necessidades. Isto é válido tanto para exercícios de resistência

quanto de endurance, cujos praticantes necessitam de um aporte nutricional adequado. A ingestão

insuficiente de energia e/ou carboidratos implica em consumo de massa muscular (BIGARD,

1996; DECOMBAZ, 2004; PHILLIPS, 2004; TARNOPOLSKY, 2004; ANDERSEN et al.,

2005).

Ao utilizar um suplemento nutricional é necessário observar a forma sob a qual a proteína

se apresenta, de que depende o tempo ou período para ser digerida, degradada, hidrolisada,

absorvida, e posteriormente transportada e utilizada pelas células.

A digestão de proteínas de “rápida absorção” (whey protein) não é necessariamente

superior à de outro tipo considerada de “absorção lenta”, como a caseína (BOIRIE et al., 1997).

Os autores observaram que, mesmo com a absorção mais rápida dos aminoácidos da whey protein,

seu nível no plasma permaneceu elevado por curtos períodos, fato que pode ser questionado,

considerando que o estudo foi feito em indivíduos submetidos a jejum 10 horas antes do

experimento (BOIRIE et al., 1997).

Foi também observado que a concentração de aminoácidos sangüíneos e intracelulares

influi no aumento da síntese protéica (BOHÉ et al., 2003), achado que explica o comportamento

do whey protein no estudo referido (BOIRIE et al., 1997).

No caso de treinamento regular de resistência, a necessidade crescente de proteínas

decorre da aquisição de maior massa muscular. Neste sentido, considerando a quantidade de

aminoácidos como fator limitante do processo de síntese protéica, entende-se por que o

suprimento inadequado desses nutrientes pode comprometer o crescimento muscular. No entanto,

a ingestão de proteínas está, na maioria das vezes, superdimencionada, podendo atingir valores da

ordem de 4,0-6,2g/kg/dia (MAUGHAN; BURKE, 2004), aparentemente um absurdo, uma vez

que não há necessidade de consumir esta quantidade exorbitante (BIGARD, 1996; LEMON, 1997

AMERICAN COLLEGE OF SPORTS MEDICINE, 2000; PHILLIPS, 2004; TARNOPOLSKY,

2004).

CONCLUSÕES

A ingestão de uma alimentação adequada por indivíduos praticantes de atividades físicas,

atletas ou não, é condição sine qua non para a saúde. Os dados coletados neste trabalho

comprovam os acertos de renomadas organizações, que recomendam uma seleção apropriada de

alimentos e líquidos, bem como a escolha correta de suplementos, só quando necessários, para

manter uma saúde perfeita e um ótimo desempenho.

Na análise relativa à utilização de um suplemento, alguns aspectos devem ser

considerados: quantidade a ser ingerida, horário de administração, condições específicas do

exercício que se quer otimizar e segurança para a saúde. E, ainda, como os suplementos são muito

variados e pouco controlados, faz-se necessário considerar outros fatores, como

biodisponibilidade e interação entre nutrientes, para garantir mais segurança no que concerne à

escolha daqueles que vão ser ingeridos.

Há necessidade de proceder a uma revisão do conceito e classificação dos suplementos

nutricionais, a fim de garantir sua qualidade e adequação ao que se propõem. É oportuno alertar

que alguns destes produtos têm princípios ativos contrários aos nutrientes presentes em sua

composição e apresentam limitados ou nenhum efeito fisiológico.

O Ministério da Saúde deve exercer uma efetiva fiscalização dos suplementos oferecidos

no mercado, bem como regular sua comercialização e publicidade.

Devido à necessidade de um maior aporte de nutrientes por parte de indivíduos fisicamente

ativos, de modo a não prejudicar a saúde dos que fazem uso de suplementação, principalmente

quando é proveniente de proteínas, deve-se respeitar uma ingestão de 1,2 a 2,0g de proteína por

kg de peso corporal por dia. É importante ressaltar que a suplementação deverá completar a

ingestão diária apenas quando o consumo de alimentos convencionais não for suficiente para

atingir as necessidades nutricionais.

ABSTRACT

SUPPLEMENTATION FOR THE LEAN MASS AMELIORATION IN PHYSICAL

EXERCISE PRACTITIONERS: WHICH ONE IS MORE EFFECTIVE?

Purpose: to investigate the nutritional supplementation effects in the amelioration of the body

composition and its implications on health. Methodology: systematic literary review of specialized

printed and electronic periodicals. Results: Body weight and body fat below minimum levels

leading to disorders, such as the loss of bone mass and muscular mass and the increase in fatigue

risk and sexual dysfunction. This may lead to wrong conclusions that it is necessary to consume

more nutrients than those recommended and the search for supplements in order to gain muscle

mass, still relatively little studied, and with its safety of use being questioned. Among the

supplements, we can point out the nutritional ones, such as minerals, amino acids and whey

protein. Conclusion: it is extremely important for those who practice physical activities the

ingestion of an adequate diet, being necessary to review the concept of supplements, as well as to

warn of those which present some risk or inefficiency, should a daily ingestion of up to 2,0g of

protein/kg be regarded for the body weight. The inspection, trade regulation and advertising of

such supplements from the Health Department is essential. As well as the work of a nutritionist in

the prescription and follow-up of its use.

Keywords: whey protein, supplementation, protein supplements, proteins, physical activity.

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V. ARTIGO ORIGINAL

Trabalho enviado para o periódico The Journal of Nutrition, em 14/04/08.

Encontra-se na primeira submissão aguardando aceitação para publicação

SUPPLEMENTED WHEY PROTEIN IN REPLACEMENT TO PROTEIN FROM

CONVENTIONAL FOOD FOR LEAN MASS GAIN AT DIFFERENT LEVELS OF

PHYSICAL ACTIVITY

Universidade Federal de Pernambuco-UFPE

Luciana Gonçalves Wanderley

; Francisca Martins Bion

2-4

; Edeones Tenório de França

; Artur

Bibiano de Melo Filho

PETROBRAS - Petróleo Brasileiro S.A. – Shared Services – Safety, Environment and Health,

Recife, PE.

2-4

Department of Nutrition - Universidade Federal de Pernambuco, Recife, PE.

Address for correspondence: Luciana Gonçalves Wanderley, Universidade Federal de

Pernambuco, Centro de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, Laboratório de Nutrição

Experimental, Rua Professor Nelson Chaves, s/n, Cidade Universitária, Recife, Pernambuco, CEP

50670-901, Tel. (81) 21268470. E-mail: lugw@ufpe.br

ABSTRACT

The propose of this work was investigated the effectiveness of supplementation with Whey

Protein for the improvement in body composition and affects on biochemical parameters. 108 rats

were submitted to three diets: standard (17% protein); supplemented with 5% and 10% whey

protein (22% total protein). Three exercise were used (sedentary, swimming, swimming with

load), (n=12), animals swam for 30 minutes/day, five days/week for four weeks. They had been

determined: weight gain, food intake, carcass fat, urea, creatinine, alanine aminotransferase and

aspartate aminotransferase. Interaction occurred between the diet and exercise, with a reduction in

weight gain, which was lower in the groups exercised EL, EL5 and EL10. In the groups exercised

E, E5 and E10, there was in increase in body fat, undergoing an influence only from the exercise;

values were different from those in EL, EL5 and EL10, which were similar to the groups S, S5

and S10. Regarding urea, there was an interaction between diet and exercise, with the highest

values in EL5 and EL10. Creatinine increased in the two supplemented diets regardless of the

exercise intensity; this increase was highest in EL, EL5 and EL10. AST and ALT increased in EL,

EL5 and EL10, with the highest values using the 10% supplementation. In conclusion: Whey

protein had little effect on the improvement of body composition and is contraindicated for

sedentary individuals. Regarding the biochemical variables, both supplementation and exercise may

have led to an imbalance in the metabolism, which could be harmful to health.

INTRODUCTION

The close relationship between eating habits, physical activity and health is well known. “Weight

and body fat below the minimum adequate levels lead to health disorders related to the insufficient

intake of energy and nutrients. Besides loss in muscle mass, a low intake of nutrients can cause a

reduction in bone density, an increase risk of fatigue and sexual dysfunction as well as other health

problems. It is therefore evident that adequateness of energy needs is an important nutritional

priority for those who practice physical exercise” (1). This statement may lead to erroneous

conclusions on the part of lay persons, such as the idea that, with regular exercise, there is a need

to consume more nutrients than normally recommended (2-5). This notion receives greater value

when aligned with the striving for the perfect esthetics and a body bulging with muscles. This is

observed in the increasingly common tendency among practitioners of physical exercise to use

“supplements” with the aim of “reinforcing organic conditions, improving the physical form and,

consequently, improving performance” (2-6).

However, scientific data on supplements are scarce and a large number of questions remain

regarding the safety of their use (4,7). Only minerals and vitamins are considered safe, whereas

protein supplements may trigger health problems if consumed in dosages above the recommended

amounts. Such protein supplements are produced from the most diverse sources, all with a good

balance of essential amino acids, such as soy, eggs and whey protein, which is a compound

removed from milk serum in the manufacturing of cheese (8). Whey protein, in particular, is an

ideal source for muscle building, as its protein is rapidly digested and absorbed, resulting in a rapid

increase in amino acids in the blood and a high concentration of branched chain amino acids

(BCAA) and glutamine (9, 10). Whey has been used in the clinical treatment of diseases such as

cancer, acquired immune deficiency syndrome (Aids), hepatitis B, cardiovascular disease and

osteoporosis. It has also been used as an antimicrobial agent. These varied cases are due to its

antioxidant, anti-hypertensive, anti-tumor, antiviral, antibacterial and lipid-lowering action (9). In

sports nutrition, whey protein stands out for promoting benefits in performance and body

composition (11-13).

Another relevant point brought up in the specialized literature refers to the composition of the

supplement in relation to both the amount of protein and the presence of other nutrients, such as

carbohydrates, as well as the amount of energy ingested. Together, these factors have a direct

influence over lean mass gain, promoting an increase in protein synthesis and a reduction in its

catabolism (12, 14).

The aim of the present study was to assess the effectiveness of supplementation with “Nutri Whey

Protein®” in the improvement of body composition and biochemical parameters in animal models.

MATERIALS AND METHODS

Animals and experimental protocol

One hundred eight (108) male mice from the wistar lineage (Rattus norvergicus, albinos variety),

aged 60 days, mean weight 283 ± 25g, from the colony belonging to the Department of Nutrition

of the Universidade Federal de Pernambuco (UFPE) were randomly distributed (Figure 1) and

maintained in individual cages under standard lighting conditions (12 h light/12 h darkness),

temperature (22º C) and humidity (65%) (15). The animals were divided into nine groups

(n=12/group): 1) S, sedentary-standard diet; 2) E, exercised-standard diet; 3) EL, exercised with

load-standard diet; 4) S-5, sedentary-diet supplemented with 5% whey protein; 5) E-5, exercised-

diet supplemented with 5% whey protein; 6) EL-5, exercised with load-diet supplemented with

5% whey protein; 7) S-10, sedentary-diet supplemented with 10% whey protein; 8) E-10,

exercised-diet supplemented with 10% whey protein; and 9) EL-10, exercised with load-diet

supplemented with 10% whey protein. All groups received water and chow ad libitum for four

weeks. The animals were treated in compliance with the ethical principles of the Brazilian College

of Animal Experimentation (Cobea). The project received approval from the Ethics Committee on

Animal Experimentation (Ceea – UFPE) under process nº 23076.002385/2008-27.

Diets

The experimental design following that established for the AIN-93G diet (16) in a balanced,

normal protein form (17%). Table 1 displays the composition of the diets. Chicken and Nutri whey

protein® were used as the protein sources. The standard diet was made up of basic foods of

northeastern Brazil, obtained in the local market, using varieties with the lowest prices: common

bean (Phaseolus vulgaris L.), common cultivated rice (Oryza sativa I.), manioc flour (Manihot

esculenta Crantz), chicken, and vegetable oil. The beans and chicken were cooked separately in

water for a period of 40 to 60 minutes, dried in a kiln (60ºC) for 24 hours and pulverized in a

grinder (FLOOR GRID MILL-CHUO BOEKI KAISHA); the resulting products were sifted

through a 60-mesh sieve, weighed and blended, thereby obtaining the meal that composed the

chow.

The supplemented diets were composed of the same components as the standard diet, but with the

addition of the protein supplement (Nutri Whey Protein®) in different proportions. The 5% whey

protein diet received 5% more protein from the supplement, to reach an overall protein content of

22%. The 10% whey protein diet received 10% of the supplement – 5% used in substitution of the

conventional protein (chicken) and 5% corresponding to the supplementations. Both

supplemented diets were hyper-protein diets (22%), with normal lipidic and glycidic levels. Table

1 displays the chemical composition of the three diets.

Biological Methods

Body weight was determined weekly using an Ohaus brand scale with a capacity for 2610 g.

Weight gain and food intake were calculated.

Chemical methods

The centesimal composition analysis of the diets was performed by the Laboratory of

Experimentation and Food Analysis of the UFPE in compliance with the methodology

recommended by the Association of Official Analytical Chemists (17).

Biochemical Methods

After four weeks, the animals were submitted to deep anesthesia with ethylic ether until euthanasia

and blood samples were removed through a heart puncture. Samples were centrifuged and the

serum was separated for laboratory analysis of urea, creatinine, alanine aminotransferase and

aspartate aminotransferase. The samples were taken to the Laboratory of Clinical Analyses at the

Pharmacy Department of the UFPE for analysis using the Labtest® commercial kit (Labtest

Diagnósticos S.A.) and readings on a Coleman SP35-D spectrophotometer.

Serum parameters

In the urea analysis, the Bergmeyer enzymatic method was used (18). The colorimetric

complexation reaction was used for the creatinine analysis (19). In the analyses of aspartate

aminotransferase and alanine aminotransferase (AST and ALT, respectively), the Reitman and

Frankel method was used (20).

Carcass fat

The percentage of carcass fat was determined using the Soxhlet extraction method (21). After the

animals were sacrificed, evisceration was performed, preserving the fat; the carcass was weighed,

frozen and shredded and one aliquot was removed.

Exercise protocol

The animals were submitted to swimming exercises for four weeks in 30-minute sessions, five days

a week, with a two-day rest period between weeks. Exercises were performed in a collective tank

kept at 30-32ºC (22), always by the morning. In the first week, adaptation of the animals to the

exercise was performed, consisting of swimming for 10 minutes on the first day, increased by five

minutes on each subsequent day and remaining at 30 minutes per day in the following weeks

(Figure 1).

The rats exercised with load received a lead weight equivalent to 8% of their body weight,

attached to the body with an elastic band (23). The weights were used throughout the adaptation

and experimentation period.

Statistical analysis

All data were analyzed by the Statistical Analysis System program (SAS version 8). Two-way

ANOVA was performed with treatment group, followed by the Tukey test for paired comparisons,

with the level of significance set at P<0.05 for all statistical tests. Values in the text are means

±SEM.

RESULTS

Food, protein and caloric intake

Analyzing the results of consumption (Table 2), all the groups ingested significantly more food,

protein and calories (p<0.0001) when compared to the sedentary-standard diet group (S), with the

exception of the exercised-standard diet group (E). Both exercise and supplementation promoted

a significant increase in food consumption (p=0.0350), which was more pronounced in the groups

exercised with load, regardless of the diet. There was a difference in protein and caloric intake

with both supplemented diets when compared to the standard diet; this increase in consumption

underwent a influence regardless of the type of diet or exercise (p<0.0001), with no interaction

between diet and exercise.

Weight curve, weight gain and carcass fat

The animals submitted to the experiment began with no significant differences in weight

(p=0.9272) (Figure 2). This changed after the first week of experimentation (adaptation period), in

which the animals submitted to exercise without load (E, E5 and E10) differed significantly from

the other groups (p=0.0014) (but not between each other), presenting the lowest body weight; in

the second week, these animals differed (p<0.0184) only from the sedentary animals (S, S5 and

S10); with no differences in the third week (p=0.5546). By the end of the experiment, there was a

change in weight among the animals exercised with load (EL, EL5 and EL10), which was

significantly lower than the other groups (p<0.0010), but not differing from each other.

Exercise with load caused less weight gain, which was even lower in the animals who consumed

the standard diet (without supplementation) (p<0.0001). There was a significant increase in weight

gain in the supplemented sedentary groups, regardless of the type of supplementation (p=0.0025).

An interaction occurred (p=0.0467) between diet and exercise, leading to a reduction in weight

gain (Figure 3).

The groups exercised without load (E, E5 and E10) presented a significant gain in body fat values

when compared to the S group, regardless of the diet consumed; there was an influence only from

exercise (p=0.0013), but these groups differed from those exercised with load (EL, EL5 and

EL10), regardless of the diet to which they were submitted. However, the fat percentages of the

groups submitted to exercise with load (EL, EL5 and EL10) did not differ from the sedentary

groups (S, S5 and S10), regardless of diet (p=0.1395) (Figure 3).

Serum parameters

The mice on supplemented diets and submitted to exercise with load (EL5 and EL10) exhibited a

significant increase in the serum concentration of urea (U) (p<0.0001) (Table 3) when compared

to the S group. A similar result occurred when the supplemented diets were analyzed separately. It

was also observed that both exercise and diet had a significant influence on the increase of this

parameter (p<0.0001).

Regarding creatinine (CR) (Table 3), the two supplemented diets (5% whey protein and 10%

whey protein) promoted a significant increase in this metabolite, regardless of the intensity of the

exercise (p<0.0001). In relation to the type of exercise, a significant increase was observed in the

groups exercised with load (EL, EL5 and EL10) (p<0.0001), which did not differ from each

another.

AST (Table 3) underwent a significant increase in the groups submitted to exercise with load (EL,

EL5 and EL10) (p<0.0001), intensified by the supplementation of 10% whey protein. Therefore,

an interaction occurred between exercise and diet, with repercussions for this parameter

(p<0.0001).

Regarding ALT (Table 3), the behavior in relation to physical exercise was similar for the three

diets, with a significant increase in the groups exercised with load (EL, EL5 and EL10) when

compared to the other groups (p<0.0001). The diet supplemented with 10% whey protein

promoted a significant increase in ALT when compared to the standard diet (p=0.0143),

regardless of the intensity of the exercise; there was no interaction between diet and exercise for

this parameter (p=0.1004).

DISCUSSION

Based on the experimental schema used, there was an initial adaptation to the exercise. In the EL

groups, the load promoted an increase in exercise intensity, leading the animals to the point in

which there is a greater concentration serum lactic acid (anaerobic state). This remained practically

constant, causing minimal muscle breakdown and promoting the anaerobiosis characteristic of

resistance exercise (steady state of lactate) (23).

After the third week, there was a reduction in body weight in the animals that practiced anaerobic

exercises, which differs from findings described by Morifuji et al. (12). Furthermore, intense

physical exercise (below the anaerobic threshold) reduced weight gain. This is similar to findings

in another study by Morifuji et al. (24),

in which the effect of two types of diet (20% casein and

whey protein) was studied on mice submitted to an intensive, prolonged swimming exercise

regimen for two weeks. The mice exhibited a reduction in lipogenic hepatic enzyme activity and an

increase in body weight. However, based on the parameters investigated in the study, there was no

increase in lean body mass, as might be expected (25).

There was an increase in weight gain in the supplemented animals that did not practice exercise,

but no significant increase in lean mass. This indicates that, regardless of the form of

supplementation, there was a greater accumulation of body fat, which is not desired (the ideal

would be an increase in lean body mass). Therefore, the use of this type of product is

contraindicated for sedentary individuals. In the case of replacing chicken protein with whey

protein, the behavior was similar, indicating that this type of replacement has little effect and is

therefore not justified due to the higher cost of whey protein.

The mechanism by which physical exercise affects fat oxidation is complex and is influenced by the

type of exercise (greater during running than cycling), intensity, the availability of energy

substrates and the degree of organic adaptation. Multiple adaptations are induced by endurance

training, resulting in an increase in lipid oxidation, with a higher rate of oxidation during in

intensive exercise from 59 to 64% VO2

Max

for trained individuals and 47 to 52% VO2

Max

for

untrained individuals (mild to moderate intensity). Regarding available substrates, carbohydrate

intake prior to or during exercise significantly reduces the fat oxidation rate. The ingestion of a

diet rich in fat following exercise causes a reduction in oxidation rate as a result of the reduction in

glycogen stocks and due to the degree of muscle adaptations (26).

There is a tendency toward a reduction in body weight in animals submitted to exercise with load.

The continuation of the exercise for a longer period of time than that in the present study could

favor a reduction in body fat, with the maintenance of lean mass. It appears that sedentary animals

or those under a mild to moderate aerobic exercise regimen do not need supplementation, as the

excess protein and greater efficiency of the metabolism lead to an accumulation of body fat (25).

In the groups submitted to exercise with load (EL, EL5 and EL10), the supplement also promoted

a greater accumulation of fat (10, 30 and 40%, respectively), but at a lower proportion than in the

mild to moderate intensity aerobic exercise.

This type of supplementation in both sedentary individuals and practitioners of mild to moderate

aerobic exercise promoted weight gain predominantly in the form of body fat, which was

accentuated among the exercise groups. This may have occurred due to the practice of regular

exercise stimulating a greater efficiency in body metabolism, including muscle metabolism,

rendering excess protein unnecessary for lean mass gain (25, 27). The same behavior of weight

gain and percentage of body fat occurred in both supplementations. This indicates that, regardless

of the type of protein, its excess promoted the increase, as the blend was modified with the

proportion of supplement in the feeds, remaining at the same protein content (5% whey protein

and 10% whey protein) and maintaining the proportions of nutrients and energy.

It appears that exercise alone promoted the increase in food intake, which provides a greater

charge of nutrients and energy, thereby favoring protein anabolism. However, it is very important

for consumption to occur in within 48h following exercise in order to ensure that there is a

reduction in protein degradation and an increase in its synthesis (25, 27).

Tipton et al. studied the ingestion of intact proteins (casein and whey protein) following physical

exercise to stimulate the synthesis of muscle protein in humans. Individuals were divided into three

groups, consuming one of three drinks: placebo (n=7), 20 g of casein (n=7) and 20 g of whey

protein (n=9); the exercise was leg extensions. The authors concluded that the intake of the

proteins following exercise resulted in a similar muscle protein balance, in which the synthesis of

muscle protein exhibited different patterns of response from the pool of serum amino acids (13).

This type of conclusion was also drawn in a literature review by Rennie and Tipton in the year

2000 (25).

Another parameter analyzed was creatinine, which was directly affected by the supplementation,

regardless of the content used. As expected due to the greater protein content, the supplemented

diets promoted a greater consumption of protein as an energy source, indicating an excess of this

type of nutrient. This was intensified in the groups exercised with load due to the greater muscle

work. This may be the reason for the rise in serum creatinine (CR), which depends directly on

protein catabolism (28). This increase was also directly affected by the intensity of the exercise, as

the increase in this metabolite only occurred in the animals submitted to exercise with load.

The supplemented mice submitted to exercise with load exhibited greater protein catabolism,

thereby increasing the concentration of urea (U) in the blood. This indicates that both exercise and

the greater protein intake promoted an increase in protein degradation and the use of amino acids

as an energy source (25). With the recommended protein content, there was no significant increase

in serum urea, regardless of the intensity of exercise. Analyzing supplementation regardless of

content, there was a significant increase in the groups submitted to exercise with load, nearly

tripling the concentration of urea. This can be explained by the fact the both physical exercise and

a higher protein content promote an increase in the consumption of amino acids as an energy

source, whether due to the greater availability or the intensity of the exercise (25). The fact that

mild to moderate aerobic exercise with 5% supplement did not lead to a greater formation of urea

may have occurred due to the use of chicken as the predominant protein source, despite the excess

protein. This was different from the diet with 10% whey protein, which received double the

supplement in replacement to chicken and possibly made available predominantly ureogenic amino

acids, such as BCAAs (leucine, valine and isoleucine). These types of amino acids are important to

the maintenance of body protein (29) They are also sources of nitrogen for the synthesis of alanine

and glutamine; they regulate anabolic processes and have therapeutic and nutritional effects, as

they can attenuate the loss of leas mass during body weight reduction and stimulate protein

synthesis through leucine (29, 30). BCAAs supply 10 to 15% of the total energy spent in the final

stage of prolonged, high-intensity exercise (31).

Aminotranferases (ALT and AST) – indicators of liver and muscle injuries – were also studied.

ALT is found in high concentrations only in the cytoplasm of the liver, which makes its increase in

the bloodstream a more specific indicator of liver damage. However, it can be increased in

conjunction with AST in severe myopathies (muscle diseases). It should be pointed out that there

is little information in the literature on the role of these enzymes when uniting protein

supplementation and physical exercise. Furthermore, no articles were found using the experimental

schema employed in the present study.

Exercise with load promoted an increase in AST, which was intensified by supplementation with

10% whey protein. This is indicative of muscle damage, as there was also an increase in ALT,

even with no combined action of diet and exercise, modified separately for each of the variables

studied. The highest values were in the animals submitted to the diet with 10% supplement, with

the indication of strong transamination, possibly due to the greater availability of alanine from the

supplement and not due to the amount of protein in the diet, as the 5% diet had the same protein

content (22%). This may be explained by the greater formation of urea mentioned above, thereby

influenced by the action of the type of pool of amino acids available from the diet consumed.

Regarding the intensity of the exercise, only the animals submitted to exercise with load exhibited

a significant increase in AST, indicating a greater use of protein as an energy source and thereby

promoting greater transamination for neoglicogenesis (25).

According to Morifuji et al., supplementation with BCAA reduces the consumption of hepatic

glycogen during intense exercise, as a consequence of the reduction in the activity of the pyruvate

dehydrogenase complex (24). This led the authors to suggest that the beneficial effects of whey

protein on hepatic glycogen stocks are determined by its composition of amino acids. However,

the mechanism involved in this behavior is not yet completely clarified. In the same study, the

authors demonstrated that casein and whey protein caused significant increases in the levels of

various amino acids, especially alanine, as well as hepatic changes in alanine aminotransferase

(ALT) activity. Transamination is the first step for the catabolism of amino acids and allows the

carbon skeletons of the amino acids to be converted into oxaloacetate and subsequently into

pyruvate to be used in the neoglycogenesis. As in the present study, the authors came to the

conclusion that the BCAAs may have been converted into alanine in the muscle and then

transported to the liver for conversion into pyrubate, however, reducing the need to metabolize

hepatic glycogen and produce additional glucose. The authors also suggest that their study is in

agreement with this sequence of reactions and whey protein, along with the increase in serum

alanine levels, also increases the activity of hepatic alanine aminotransferase. This increase in ALT

indicates changes in the glucogenolysis stemming from the alanine.

An increase in muscle mass is a normal response to physical training and may occur due to

hypertrophy, hyperplasy or both, resulting from the increase in synthesis as well as the reduction in

protein catabolism (25, 32).

The profile of amino acids in the serum proteins may favor muscle anabolism (8, 9). Furthermore,

Há and Zemel stress that the amino acid profile of serum proteins is very similar to skeletal muscle

proteins, providing nearly all the amino acids in a similar proportion and classifying them as an

effective anabolic supplement (10). Burke et al. observed significant muscle mass gain in young

adults supplemented with serum proteins and submitted to an exercise program with weights when

compared to a non-supplemented group, thereby confirming the theory of the effect of serum

proteins on muscle mass gain (33). However, this effect does not appear to have been shown

under the conditions investigated in the present study.

CONCLUSIONS

The data analyzed allow the conclusion that whey protein had little effect over improving body

composition. It is suggested that sedentary individuals should not consume this type of supplement

for lean mass gain, as it promoted an increase in body fat.

Regarding biochemical parameters, both supplementation and exercise alike may have promoted

an imbalance in the metabolism, raising these parameters, which may be harmful to health and lead

to a reduction in quality of life.

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Figure 1: Experimental Schema 2

S, sedentary-standard diet; E, exercised-standard diet; EL, exercised with load-standard diet; S-5, sedentary-diet 3

supplemented with 5% whey protein; E-5, exercised-diet supplemented with 5% whey protein; EL-5, exercised with 4

load-diet supplemented with 5% whey protein; S-10, sedentary-diet supplemented with 10% whey protein; E-10, 5

exercised-diet supplemented with 10% whey protein; EL-10, exercised with load-diet supplemented with 10% whey 6

protein.

Adaptation

day - 10 minutes

day- 15 minutes

day - 20 minutes

day - 25 minutes

day - 30 minutes

days - rest

5 days - 30 minutes

2 days - rest

Repeat 3 times

Sacrifice

Exercised with load

n=12 – EL

n=12 – EL-5

n=12 – EL-10

Exercised

n=12 – E

n=12 – E-5

n=12 – E-10

108 male rats

Without load Load = 8% of body weight

Training

1 day - rest - 12 hours fasting

Sedentary*

n=12 – S

n=12 – S-5

n=12 – S-10

28 days without

exercise

Figure 2 Weight behavior of the animals at the end of each period (week)

(*): ANOVA. Data are expressed as mean ± SEM, n=12. Means in columns with different superscript letters present

significant difference. Distinct lowercase letters indicate significant difference between forms of exercise or between

combinations of diet and exercise; and distinct uppercase letters indicate significant difference between diets, P<

0.05.

250

270

290

310

330

350

370

390

410

Initial 123 4

Week

Weight (g)

S S-5 S-10

E E-5 E-10

E EL-5 EL-

Figure 3 Weight gain and fat percentage in animals with different levels of whey protein

supplementation and physical exercise

(*): ANOVA. Data are expressed as mean ± SEM, n=12. Means in columns with different superscript letters present

significant difference. Distinct lowercase letters indicate significant difference between forms of exercise or between

combinations of diet and exercise; and distinct uppercase letters indicate significant difference between diets, P<

0.05.

Sedentar

Exercise Exercise

with

Sedentar

whe

-5%

Exercise

whe

-5%

Exercise

with

load

whe

-5%

Sedentar

whe

-10%

Exercise

whe

-10%

Exercise

with

load

whe

-10%

Weigh gain (g/30d) Fat (%)

*bc ba c a ba bc a ba a

TABLE 1 Chemical Composition of the Diets (g.kg

-1

)

Normal Diet 5% Whey protein 10% Whey protein

Q* P C Fa Fi E Q P C Fa Fi E Q P C Fa Fi E

COMPONENT

(g) (g) (g) (g) (g) Kcal (g) (g) (g) (g) (g) Kcal (g) (g) (g) (g) (g) Kcal

Nutri whey

protein®

- - - - - - 200 50 137 2 - 766 400 100 274 4 - 1532

Chicken 110 78 14 5 - 413 140 99 18 6 - 522 90 64 11 4 - 336

Beans 280 64 173 4 12 984 220 50 136 3 9 771 190 43 118 3 8 671

Rice 380 29 335 1 0 1465 280 21 247 0 0 1072 200 15 177 0 0 768

Oil 30 0 0 30 - 270 30 0 0 30 - 270 30 0 0 30 - 270

Manioc Flour 200 3 166 1 - 685 130 2 108 1 - 449 90 1 75 0 - 304

Total

1000 174 688 41 12 3817 1000 222 646 42 9 3850 1000 223 655 41 8 3881

*Q = Quantity; P = Protein; C = Carbohydrate; Fa = Fat; Fi = Fiber; E = Energy

TABLE 2 Food, protein and caloric intake of the groups studied *

Group

Food Protein Caloric

(g/30d) (g/30d) (kcal/30d)

S 482 ± 48

(d)

84 ± 8

(b,A)

1840

184

(b,A)

E 521 ± 68

(dc)

91 ± 12

(b,A)

1987

261

(b,A)

EL 623 ± 62

(ba)

108 ± 11

(a,A)

2377

236

(a,A)

S-5 587 ± 47

(bac)

130 ± 10

(b,B)

2260

179

(b,B)

E-5 574 ± 57

(bc)

127 ± 13

(b,B)

2208

218

(b,B)

EL-5 628 ± 90

(ba)

139 ± 20

(a,B)

2417

346

(a,B)

S-10 563 ± 23

(bc)

126 ± 5

(b,B)

2187

(b,B)

E-10 604 ± 29

(ba)

135 ± 7

(b,B)

2345

114

(b,B)

EL-10 654 ± 54

(a)

146 ± 12

(a,B)

2537

211

(a,B)

ANOVA

Diet P

(1)

< 0.0001* P

(1)

< 0.0001* P

(1)

< 0.0001*

Exercise P

(2)

< 0.0001* P

(2)

< 0.0001* P

(2)

< 0.0001*

Diet X exercise P

(3)

= 0.0350* P

(3)

= 0.1225 P

(3)

= 0.1225

(*): ANOVA, P

(1)

for comparison between diets; P

(2)

for comparisons between exercises; P

(3)

for verification of diet x exercise hypothesis. Data are expressed as

mean ± SEM, n=12. Means in columns with different superscript letters present significant difference. Distinct lowercase letters indicate significant difference

between forms of exercise or between combinations of diet and exercise; and distinct uppercase letters indicate significant difference between diets, P< 0.05.

TABLE 3 Serum parameters

Group Urea Creatinine AST ALT

(g/dl) (g/dl) (g/dl) (g/dl)

S 17.25

4.34

(d)

0.48

0.14

(b.B)

35.75

10.73

(c)

28.67

8.56

(b.B)

E 13.01

2.48

(d)

0.53

0.14

(b.B)

24.92

7.28

(c)

25.58

4.50

(b.B)

EL 19.04

4.20

(d)

0.70

0.12

(a.B)

116.25

21.48

(b)

153.08

146.50

(a.B)

S-5 20.48

5.18

(cd)

0.68

0.22

(b.A)

28.17

14.30

(c)

29.67

14.77

(b.AB)

E-5 16.12

2.28

(d)

0.61

0.15

(b.A)

31.42

10.33

(c)

28.67

8.70

(b.AB)

EL-5 43.58

16.93

(a)

0.98

0.35

(a.A)

138.25

32.09

(b)

179.17

45.74

(a.AB)

S-10 30.07

5.73

(cb)

0.65

0.11

(b.A)

31.50

14.49

(c)

30.42

13.41

(b.A)

E-10 30.45

7.46

(b)

0.83

0.31

(b.A)

36.25

8.88

(c)

35.33

7.88

(b.A)

EL-10 41.45

7.63

(a)

0.99

0.28

(a.A)

171.67

21.47

(a)

181.50

21.72

(a.A)

ANOVA

Diet P

(1)

< 0.0001* P

(1)

< 0.0001* P

(1)

< 0.0001* P

(1)

= 0.0143*

Exercise P

(2)

< 0.0001* P

(2)

< 0.0001* P

(2)

< 0.0001* P

(2)

< 0.0001*

Diet X exercise P

(3)

< 0.0001* P

(3)

= 0.2321 P

(3)

< 0.0001* P

(3)

= 0.1004

(*): ANOVA, P

(1)

for comparison between diets; P

(2)

for comparisons between exercises; P

(3)

for verification of diet x exercise hypothesis. Data are expressed as

mean ± SEM, n=12. Means in columns with different superscript letters present significant difference. Distinct lowercase letters indicate significant difference

between forms of exercise or between combinations of diet and exercise; and distinct uppercase letters indicate significant difference between diets, P< 0.05.

VI. CONCLUSÕES

Com base nos resultados do presente trabalho, pode-se concluir que:

o O whey protein foi pouco efetivo na melhoria da composição corporal. Pode-se inferir que

sedentários não devem consumir este tipo de suplemento para o ganho de massa magra,

pois o mesmo promoveu aumento de gordura corporal.

o Independentemente do tipo de proteína, o excesso, por si só, promoveu o aumento do

ganho de peso e do percentual de gordura corporal, já que a mistura foi modificada com a

proporção do suplemento das rações, permanecendo com o mesmo teor protéico (whey

protein 5% e whey protein 10%), sendo mantidas as demais proporções de nutrientes e

energia.

o Tanto a suplementação quanto o exercício promoveram um desequilíbrio no metabolismo,

elevando as taxas bioquímicas (U, CR, ALT e AST). O que pode acarretar danos à saúde e

consequentemente diminuir a qualidade de vida.

o Confrontando os resultados obtidos a partir das suplementações com 5 e 10% de whey

protein observou-se comportamento semelhante em ambas e pode-se concluir que: a

suplementação com 5% de suplemento aliado ao exercício de leve a moderado intensificou

o aumento da gordura corporal, e quanto aos parâmetros bioquímicos a suplementação

com 10% interferiu mais efetivamente de forma prejudicial, embora ambas tenham

promovido elevação em todos os parâmetros.

De um modo geral, os achados levam a concluir que a substituição da proteína

convencional por suplemento pode acarretar riscos para a saúde.

VII. RECOMENDAÇÕES

• O consumo de suplementos por praticantes de exercícios, em todas as faixas etárias, deve

ser supervisionado por uma equipe multidisciplinar, devido aos riscos decorrentes da

ingestão inadequada destes produtos.

• É oportuno alertar que alguns destes suplementos têm princípios ativos contrários aos

nutrientes presentes em sua composição e apresentam limitado ou nenhum efeito

fisiológico.

• O Ministério da Saúde deve exercer um importante papel no controle da comercialização

destes produtos através de uma efetiva fiscalização dos suplementos oferecidos no

mercado, o que inclui ações para regular sua comercialização e publicidade.

• É fundamental a atuação do profissional nutricionista na prescrição e acompanhamento do

uso de suplementos nutricionais por atletas profissionais e recreacionais.

VIII. PERSPECTIVAS

Ainda há muito o que investigar com relação ao consumo e suplementos nutricionais para

ganho de massa magra em praticantes de exercício físico, como proposta enumeramos alguns

pontos que podem ser estudados.

• Ampliar a investigação sobre os suplementos nutricionais para ganho de massa magra;

• Investigar o consumo do suplemento protéico por um período de tempo maior;

• Estudar o ganho de massa magra em praticantes de exercício físico com o consumo de

alimentação balanceada;

• E ainda, pode ser ampliado o uso deste protocolo em outras etapas fisiológicas como em

idosos, por exemplo, como também, modificar o protocolo de exercício.

IX. ANEXOS

Anexo A - Recibo de envio do Artigo de Revisão

REVISTA BRASILEIRA DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS

Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences

RECIBO

Nº de Registro: 064/07

Acusamos o recebimento do trabalho para publicação na Revista Brasileira de Ciências

Farmacêuticas/ Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences.

Autoria: WANDERLEY, L. G.; BION, F. M.

Título do artigo: “Exercício físico com suplementação para melhorar a massa magra: O que é mais

efetivo?”.

São Paulo, 30 de maio de 2007.

Profa. Elizabeth Igne Ferreira

Editoria Científica

Anexo B - Recibo de envio do Artigo Original

MS ID#: NUTRITION/2008/091470

MS TITLE: SUPPLEMENTED WHEY PROTEIN IN REPLACEMENT TO PROTEIN FROM CONVENTIONAL

FOOD FOR LEAN MASS GAIN AT DIFFERENT LEVELS OF PHYSICAL ACTIVITY

Dear Luciana Wanderley;

The file(s) you uploaded for manuscript NUTRITION/2008/091470 has been

successfully converted to PDF format.

Please return to the "Author Area" on

(http://submit.nutrition.org/submission/submit?msid=NUTRITION/2008/091470)

to proof and approve your submission.

Thank you for submitting to The Journal of Nutrition.

Best regards,

The Journal of Nutrition Editorial Office

Anexo C- Versão em português do artigo Original

WHEY PROTEIN SUPLEMENTADO E EM SUBSTITUIÇÃO À PROTEINA DE

ALIMENTOS CONVENCIONAIS PARA GANHO DE MASSA MAGRA EM

DIFERENTES NÍVEIS DE ATIVIDADES FÍSICAS

Universidade Federal de Pernambuco-UFPE

Luciana Gonçalves Wanderley

; Francisca Martins Bion

2-4

; Edeones Tenório de França

; Artur

Bibiano de Melo Filho

PETROBRAS - Petróleo Brasileiro S.A. - Serviços Compartilhados – Segurança, Meio

Ambiente e Saúde, Recife, PE.

2-4

Departamento de Nutrição da Universidade Federal de Pernambuco, Recife, PE.

Endereço para correspondência: Luciana Gonçalves Wanderley, Universidade Federal de

Pernambuco, Centro de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, Laboratório de Nutrição

Experimental, Rua Professor Nelson Chaves, s/n, Cidade Universitária, Recife, Pernambuco, CEP

50670-901, Tel. (81) 21268470. E-mail: lugw@ufpe.br

RESUMO

Objetivo: investigar a efetividade da suplementação com o “Nutri Whey Protein®”, na melhoria

da composição corporal e interferência sobre alguns parâmetros bioquímicos. Metodologia: 108

ratos wistar foram submetidos a três dietas: padrão, constituída por feijão carioca, arroz polido,

farinha de mandioca, frango e óleo (com 17% de proteínas) e suplementadas com 5 e 10% de

whey protein (ambas com 22% de proteínas); e três intensidades de exercício (sedentários, natação

sem e com carga), divididos em nove grupos (n=12). Determinou-se: ganho de peso, ingestão

alimentar, gordura da carcaça, uréia, creatinina, alanina e aspartato aminotransferases (ALT e

AST). Os animais nadaram 30 minutos/dia, 5 dias/semana, e dois de repouso, por quatro semanas.

Resultados: Ocorreu interação entre dieta e exercício, com diminuição do ganho de peso, que foi

menor em exercitados com carga (EC, EC5 e EC10). Nos grupos exercitados sem carga (E, E5 e

E10), houve aumento da gordura corporal, sofrendo interferência apenas do exercício, porém

foram diferentes de EC, EC5 e EC10, que não diferiram dos sedentários (S, S5 e S10). No caso

da uréia, houve interação do exercício e da dieta, e se elevou mais em EC5 e EC10. A creatinina

aumentou nas duas dietas suplementadas, independentemente da intensidade do exercício,

aumento este ainda maior em EC, EC5 e EC10. A AST e a ALT aumentaram em EC, EC5 e

EC10, fato intensificado pela suplementação a 10%. Conclusões: o whey protein foi pouco

efetivo na melhoria da composição corporal, sendo contra-indicado para sedentários. Quanto aos

parâmetros bioquímicos, tanto a suplementação quanto o exercício podem ter promovido um

desequilíbrio no metabolismo, podendo causar danos à saúde.

Palavras-chave: proteína, whey protein, suplementos protéicos, exercício físico.

ABSTRACT

Objective: Investigate the effectiveness of supplementation with “Nutri Whey Protein®” for the

improvement in body composition and affects on biochemical parameters. Methodology: 108

wistar mice were submitted to three diets: 1) standard, made up of common beans, common rice,

manioc flour, chicken and vegetable oil (with 17% protein); 2) supplemented with 5% whey

protein (22% total protein); and 3) supplemented with 10% whey protein (22% total protein).

Three exercise intensities were used (sedentary, swimming, swimming with load), divided into nine

groups (n=12). The following variables were determined: weight gain, food intake, carcass fat,

urea, creatinine, alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST). The

animals swam for 30 minutes/day, five days/week and two day of rest for four weeks. Results:

Interaction occurred between the diet and exercise, with a reduction in weight gain, which was

lower in the groups exercised with load (EL, EL5 and EL10). In the groups exercised without

load (E, E5 and E10), there was in increase in body fat, undergoing an influence only from the

exercise; values were different from those in EL, EL5 and EL10, which were similar to the

sedentary groups (S, S5 and S10). Regarding urea, there was an interaction between diet and

exercise, with the highest values in EL5 and EL10. Creatinine increased in the two supplemented

diets regardless of the exercise intensity; this increase was highest in EL, EL5 and EL10. AST and

ALT increased in EL, EL5 and EL10, with the highest values using the 10% supplementation.

Conclusion: Whey protein had little effect on the improvement of body composition and is

contraindicated for sedentary individuals. Regarding the biochemical variables, both

supplementation and exercise may have led to an imbalance in the metabolism, which could be

harmful to health.

Key words: protein, whey protein, protein supplements, physical exercise.

INTRODUÇÃO

É bastante conhecida a estreita relação entre alimentação, atividade física e saúde. “Peso e

gordura corporal abaixo dos níveis mínimos adequados levam a distúrbios de saúde, relacionados

com a insuficiência de ingestão de energia e nutrientes. Além da perda de massa muscular, a baixa

ingestão de nutrientes pode ocasionar diminuição da densidade óssea, aumento do risco de fadiga

e disfunção sexual, dentre outros agravos à saúde. É assim evidente que a adequação das

necessidades energéticas constitui uma prioridade nutricional importante para os que praticam

exercícios físicos.” (1). Esta afirmação pode levar a conclusões equivocadas, por parte de leigos,

como, por exemplo, de que quando há a pratica regular de exercícios é necessário consumir mais

nutrientes do que o recomendado.(2-5). Fato que recebe maior valor quando aliado à busca da

estética perfeita e do corpo inflado de músculos, e que pode ser constatado pela tendência cada

vez mais comum, dentre os praticantes de exercício físico, de utilizar os chamados “suplementos”,

com o objetivo de “reforçar as condições orgânicas, melhorar a forma física e, conseqüentemente,

a performance” .(2-6).

Contudo, os dados científicos sobre os suplementos são escassos, muitas dúvidas ainda

persistem sobre a segurança de seu uso (4,7). Dentre eles, apenas os minerais e vitamínicos são

considerados seguros. Já os suplementos protéicos podem acarretar problemas à saúde se

consumidos em dosagens superiores às recomendadas. Os quais são produzidos a partir de fontes

as mais diversas, todas com um bom balanço de aminoácidos essenciais, como: soja, ovo, ou whey

protein, que é um composto retirado do soro do leite na fabricação do queijo (8). O whey protein,

em particular, constitui uma fonte ideal para a construção muscular, pois sua proteína é

rapidamente digerida e absorvida, resultando em rápido aumento dos níveis sanguíneos de

aminoácidos e ainda, em elevada concentração de aminoácidos de cadeia ramificada (BCAA) e

glutamina (9, 10). Vem sendo utilizado no tratamento clínico de doenças como câncer, Síndrome

da Imuno Deficiência Adquirida (Aids), hepatite B, doenças cardiovasculares, osteoporose, e

como agente antimicrobiano. Estes casos variados são devido à sua ação: antioxidante,

antihipertensiva, antitumoral, antiviral, antibacteriana e hipolipemiante (9). Na nutrição esportiva o

whey protein assume destaque por promover benefícios na performance e na composição corporal

(11-13).

Outro ponto relevante, apontado na literatura especializada, refere-se à composição do

suplemento, não somente em relação à quantidade de proteína, mas também à presença de outros

nutrientes, como os carboidratos e, ainda, à quantidade de energia ingerida. Juntos, interferem

diretamente no ganho de massa magra, promovendo aumento na síntese protéica e diminuição de

seu catabolismo (12, 14).

Com base nestas considerações, o trabalho tem como objetivo estudar em animais a

efetividade da suplementação com o “Nutri Whey Protein®”, na melhoria da composição

corporal e de alguns parâmetros bioquímicos.

METODOLOGIA

Animais e protocolo experimental

Foram utilizados 108 ratos machos da linhagem wistar (Rattus norvergicus, variedade

albinus), com idade de 60 dias e peso médio 283 ± 25g, provenientes da colônia do Departamento

de Nutrição da Universidade Federal de Pernambuco (UFPE), distribuídos aleatoriamente (Figura

1) e mantidos em gaiolas individuais, sob condições padrão de iluminação (ciclo claro/escuro,

12/12 horas), temperatura (22º C) e umidade (65%) (15). Os animais foram divididos em nove

grupos (n=12/grupo): S, sedentário-dieta padrão; E, exercitado-dieta padrão; EC, exercitado com

carga-dieta padrão; S-5, sedentário-dieta suplementada com 5% de whey protein; E-5, exercitado-

dieta suplementada com 5% de whey protein; EC-5, exercitado com carga-dieta suplementada

com 5% de whey protein; S-10, sedentário-dieta suplementada com 10% de whey protein; E-10,

exercitado-dieta suplementada com 10% de whey protein; EC-10, exercitado com carga-dieta

suplementada com 10% de whey protein. Todos receberam, por quatro semanas, água e ração ad

libitum. Os animais foram tratados de acordo com os princípios éticos do Colégio Brasileiro de

Experimentação Animal (Cobea) e o trabalho foi aprovado pela Comissão de Ética em

Experimentação Animal (Ceea – UFPE) – Protocolo nº 23076.002385/2008-27.

Dietas

O desenho experimental seguiu o que preconiza a AIN-93G (16), de forma balanceada,

normo-protéica (17%). A tabela 1 apresenta a composição das dietas. O frango e o Nutri whey

protein® foram usados como fontes protéicas. A dieta padrão foi constituída por alimentos

básicos do Nordeste brasileiro, obtidos no mercado local, utilizando-se as variedades de menor

preço: feijão carioca (Phaseolus vulgaris L.); arroz polido (Oryza sativa I.); farinha de mandioca

(Manihot esculenta Crantz); frango; óleo. Os grãos e o frango, após cozimento em água,

separadamente, por um período de 40-60 minutos, foram dessecados em estufa (60ºC), por 24

horas, e pulverizados em moinho (FLOOR GRID MILL-CHUO BOEKI KAISHA), sendo os

produtos resultantes passados em peneira de 60 mesh e, a seguir, pesados e misturados, obtendo-

se as farinhas que compuseram a ração.

As dietas suplementadas a 5 e 10% (“whey protein 5%” e “whey protein 10%”) foram

elaborados com os mesmos componentes da dieta padrão, acrescidos de suplemento protéico

(Nutri Whey Protein®) em diferentes proporções: a dieta “whey protein 5%” recebeu 5% a mais

de proteína advinda do suplemento, atingindo o teor protéico de 22%, e a “whey protein 10%”

permaneceu com esta concentração, com a adição de 10% do suplemento, sendo 5% utilizado em

substituição à proteína convencional (frango) e 5% correspondente à suplementação, ambas hiper-

protéicas (22%), normo-lipídicas e normo-glicídicas. A composição química das três dietas pode

ser verificada na tabela 1.

Métodos Biológicos

Semanalmente, registrou-se o peso corporal, utilizando uma balança de marca Ohaus, com

capacidade para 2.610g. Foram calculados o ganho de peso e a ingestão alimentar.

Métodos Químicos

A análise da composição centesimal das dietas foi realizada pelo Laboratório de

Experimentação e Análises de Alimentos, da UFPE, de acordo com a metodologia recomendada

pela Association of Official Analytical Chemists (17).

Métodos Bioquímicos

Após quatro semanas de experiência, os animais foram submetidos a anestesia profunda com

éter etílico, até a eutanásia, e retiradas, por punção cardíaca, amostras de sangue, centrifugadas e

separados os soros para análise laboratorial de uréia, creatinina, alanina e aspartato

aminotransferases. As amostras foram levadas ao Laboratório de Análises Clínicas do

Departamento de Farmácia da UFPE para a realização das análises, utilizando kits comerciais da

Labtest® (Labtest Diagnósticos S.A.) e leitura em espectrofotômetro Coleman SP35-D.

Parâmetros séricos

Nas análises de uréia utilizou-se o método enzimático de Bergmeyer (18) e, para creatinina,

reação colorimétrica de complexação (19). Nas análises de aspartato aminotransferase e alanina

aminotransferase (AST ou TGO e ALT ou TGP, respectivamente) foi utilizado o método de

Reitman e Frankel (20).

Gordura da carcaça

O percentual de gordura da carcaça foi determinado pelo método de extração de Soxhlet

(21). Após o sacrifício dos animais procedeu-se à evisceração, preservando-se a gordura; a

carcaça foi pesada, congelada e triturada, sendo retirada uma alíquota.

Protocolo de exercício

Os animais foram submetidos ao exercício da natação, durante quatro semanas, em sessões

de 30 minutos, 5 dias por semana, intercalados com dois dias de repouso, em tanque coletivo com

água mantida a 30-32ºC

(22)

, sempre pela manhã. Na primeira semana foi feita a adaptação dos

animais ao exercício, que consistiu de nado por 10 minutos, no primeiro dia, aumentado em cinco

minutos a cada dia subseqüente, permanecendo 30 minutos diários nas demais semanas, seguindo

o protocolo experimental (Figura 1).

Os ratos exercitados com carga receberam um peso de chumbo equivalente a 8% do seu

peso corporal, atado ao corpo com um elástico (23), desde o início da adaptação.

Análise estatística

Os dados foram analisados usando two-way Anova, seguida do teste de comparações

pareadas de Tukey, com significância de 0,05. O programa utilizado para a obtenção dos cálculos

estatísticos foi o Statistical Analysis System (SAS) na versão 8.

RESULTADOS

Ingestão alimentar, protéica e calórica

Ao analisar os resultados dos consumos (Tabela 2) foi possível notar que todos os grupos

ingeriram significativamente mais alimentos, proteínas e calorias (p<0,0001), quando comparados

com o grupo sedentário dieta padrão (S), com exceção do grupo exercitado mantido sob a mesma

dieta (E), que não diferiu do S. Tanto o exercício quanto a suplementação promoveram aumento

significativo no consumo alimentar (p=0,0350) sendo mais pronunciado nos grupos exercitados

com carga, independentemente da dieta. Em ambas as dietas suplementadas houve diferença no

consumo protéico e calórico quando comparadas à dieta padrão; este aumento no consumo sofreu

interferência em separado do tipo de dieta e do exercício (p<0,0001), não havendo interação entre

eles.

Curva ponderal, ganho de peso e gordura da carcaça

Os animais submetidos ao experimento partiram de um peso sem diferenças significativas

(p=0,9272) (Figura 2), comportamento que foi modificado após a primeira semana de

experimentação (período de adaptação), em que os animais submetidos ao exercício sem carga (E,

E5 e E10) diferiram significativamente dos demais grupos (p=0,0014), mas não entre si,

apresentando os menores pesos corporais; na segunda semana diferiram (p<0,0184) apenas dos

sedentários (S, S5 e S10), passando a não mais haver diferenças na terceira semana (p=0,5546).

Ao final do experimento, houve alteração nos pesos dos exercitados com carga (EC, EC5 e

EC10), que se apresentaram significativamente menores (p<0,0010) que os demais grupos, não

diferindo entre si.

O exercício que provocou o menor ganho de peso foi o com carga, o que foi ainda menor

nos animais que consumiram a dieta padrão, ou seja, sem a suplementação (p<0,0001). No caso

dos grupos sedentários suplementados houve aumento significativo no ganho de peso,

independentemente do tipo de suplementação (p=0,0025). Ocorreu interação (p=0,0467) entre a

dieta e o exercício no sentido de diminuição no ganho de peso (Figura 3).

Todos os grupos exercitados sem carga (E, E5 e E10), quando comparados ao grupo S

apresentaram aumento significativo nos valores da gordura corporal, independentemente da dieta

consumida, sofrendo interferência apenas do exercício (p=0,0013), porém diferiram de todos os

exercitados com carga (EC, EC5 e EC10), independentemente da dieta a que se submeteram. No

entanto, os percentuais de gordura dos grupos submetidos ao exercício forçado (EC, EC5 e

EC10) não diferiram dos sedentários (S, S5 e S10), independente da dieta (p=0,1395) (Figura 3).

Parâmetros séricos

Os ratos submetidos ao exercício forçado nas dietas suplementadas (EC5 e EC10),

apresentaram uma elevação significativa na concentração sérica da uréia (U) (p<0,0001) (Tabela

3), quando comparados ao grupo S. Comportamento semelhante ocorreu quando as dietas

suplementadas foram analisadas em separado. Observou-se, ainda, que ambos, exercício e dieta,

interferiram significativamente no aumento deste parâmetro (p<0,0001).

Quanto à creatinina (CR) (Tabela 3), foi verificado que as duas dietas suplementadas (whey

protein 5% e whey protein 10%) promoveram aumento significativo neste metabólito,

independentemente da intensidade do exercício executado (p<0,0001). Com relação ao tipo de

exercício constatou-se aumento significativo nos grupos exercitados com carga (EC, EC5 e EC10)

(p<0,0001), os quais não diferiram entre si.

A AST (Tabela 3) apresentou aumento significativo em todos os grupos submetidos ao

exercício com carga (EC, EC5 e EC10) (p<0,0001), intensificado pela suplementação de 10% do

whey protein. Ocorreu, portanto, uma interação entre o exercício e a dieta, repercutindo sobre

este parâmetro (p<0,0001).

No caso da ALT (Tabela 3), o comportamento em relação ao exercício físico foi

semelhante nas três dietas, verificando-se aumento significativo nos grupos exercitados com carga

(EC, EC5 e EC10) em comparação aos demais (p<0,0001). A dieta suplementada a 10% (whey

protein 10%) promoveu aumento significativo na ALT, quando comparado à dieta padrão

(p=0,0143), independentemente da intensidade do exercício físico, não revelando interação entre

dieta e exercício (p=0,1004).

DISCUSSÃO

Segundo o esquema experimental utilizado, inicialmente ocorreu uma adaptação ao exercício,

e, no caso dos animais submetidos a sobrecarga, a carga promoveu um aumento na intensidade do

mesmo, levando o animal ao ponto no qual há a maior concentração de ácido lático sanguíneo,

estado anaeróbio, que permanece praticamente constante, acarretando o mínimo de lesão muscular

e promovendo a anaerobiose característica do exercício de resistência, o steady state of lactato

(23).

Após a terceira semana pôde-se observar redução do peso corporal nos animais que

praticaram exercício anaeróbico, diferente dos achados de Morifuji et al. (12). Por outro lado, em

relação ao ganho de peso o exercício físico intenso (dentro do limiar anaeróbio) o reduziu,

semelhante ao que foi retratado por Morifuji et al. (24)

em outro trabalho, no qual estudaram a

interferência do consumo de dois tipos de dietas (normoprotéicas a 20%– caseína e whey protein)

e em ratos que nadaram, durante duas semanas, de forma aguda e prolongada, os quais

apresentaram uma diminuição da atividade das enzimas lipogênicas hepáticas, e aumento de peso

corporal. Contudo, de acordo com os parâmetros estudados neste trabalho, não houve aumento da

massa corporal magra, como era de se esperar (25).

Quando observados os animais suplementados que não praticaram exercício verificou-se

aumento no ganho de peso, porém não significativo na massa magra, indicando que,

independentemente da forma de suplementação adotada, ocorreu maior acúmulo de gordura

corporal, o que não é desejado, pois o ideal seria aumentar a massa corporal magra, tornando o

uso deste tipo de produto contra-indicado para sedentários. No caso da substituição da proteína

do frango pelo whey protein o comportamento foi semelhante, indicando que este tipo de

substituição tem pouco efeito e, portanto, não se justifica, vez que o custo é mais elevado.

O mecanismo pelo qual o exercício físico afeta a oxidação de gordura é complexa sofrendo

interferência do tipo de exercício, maior durante a corrida que no ciclismo, por exemplo, da

intensidade, a disponibilidade de substratos energéticos e o nível de adaptação orgânica. Que

quando observa-se o treinamento de endurance, nota-se que o mesmo induz a múltiplas

adaptações que resultam no aumento da oxidação lipídica, ocorrendo a maior taxa de oxidação em

exercício de intensidade entre 59 e 64% do VO2

Máx.

para pessoas treinadas, e 47 a 52% do

VO2

Máx.

para não treinados; ou seja, em exercícios de intensidade leve a moderada. No caso dos

substratos disponíveis, a ingestão de carboidratos, antes ou durante o exercício, reduz

significativamente a taxa de oxidação da gordura. No caso da ingestão de uma dieta rica em

gordura, após o exercício, ocorre redução da taxa de oxidação como um resultado da diminuição

de estoques do glicogênio e devido ao nível das adaptações musculares (26).

Há uma tendência, nos animais em exercício forçado, a redução do peso corporal; a

continuidade do exercício, por um período de tempo maior que deste trabalho, pode favorecer a

redução da gordura corporal, com a manutenção da massa magra. Ao que parece, os animais

sedentários ou em exercício aeróbico de leve a moderado não precisam de suplementação, pois o

excesso protéico e a maior eficiência do metabolismo proporcionam o acúmulo de gordura

corporal, segundo Rennie e Tipton (25). No caso dos grupos submetidos á exercício forçado (EC,

EC5 e EC10) o suplemento também promoveu maior acúmulo de gordura, da ordem de 10, 30 e

40%, respectivamente, só que em menor proporção do que no exercício aeróbico de intensidade

leve a moderada.

Este tipo de suplementação, tanto em sedentários quanto em praticantes de exercício

aeróbico leve a moderado, promoveu aumento de peso, predominantemente da gordura corporal,

o que se acentuou nos exercitados. Fato este que pode ter ocorrido devido à prática de exercício

habitual estimular uma maior eficiência do metabolismo corporal, incluindo o muscular, sendo

desnecessário excesso de proteína para ganho de massa magra (25, 27). Em ambas as

suplementações ocorreu o mesmo comportamento sobre o ganho e o percentual de gordura

corporais, indicando que, independentemente do tipo de proteína, o excesso, por si só, promoveu

o aumento de ambos já que a mistura foi modificada com a proporção do suplemento das rações,

permanecendo com o mesmo teor protéico (whey protein 5% e whey protein 10%), sendo

mantidas as demais proporções de nutrientes e energia.

No caso do consumo alimentar, parece que o exercício por si só promove o seu aumento, o

qual propicia maior aporte de nutrientes e energia, favorecendo o anabolismo protéico. No

entanto, é muito importante que o consumo ocorra em até 48h após o exercício para garantir que

haja redução da degradação protéica e aumento de sua síntese

(25, 27).

Tipton et al. (13) estudaram a ingestão de proteínas intactas (caseína e whey protein) após o

exercício físico, para estimular a síntese protéica muscular, em humanos. Os indivíduos foram

distribuídos em três grupos, que consumiram uma das três bebidas: placebo (n=7), 20g caseína

(n=7) e 20g de whey protein (n=9); o exercício foi de extensão da perna. Os autores concluíram

que a ingestão de ambas as proteínas após o exercício resultou em aumento similar no balanço

protéico muscular, em que a síntese de proteína muscular apresentou diferentes padrões de

respostas do pool de aminoácidos sanguíneos. Este tipo de conclusão vem sendo levantada desde

2000, por Rennie e Tipton (25), em seu trabalho de revisão.

Outro parâmetro analisado foi a creatinina, que sofreu interferência direta da

suplementação, independente do teor utilizado. Neste caso, como era esperado, devido a um

maior aporte protéico, as dietas suplementadas proporcionaram um consumo maior de proteínas

como fonte energética, indicando um excesso deste tipo de nutriente, intensificado nos grupos

com exercício forçado, devido ao maior trabalho muscular. Por este motivo pode ter ocorrido

elevação da creatinina (CR) sanguínea, a qual depende diretamente do catabolismo protéico (28).

Esta elevação também sofreu interferência direta da intensidade do exercício, uma vez que

somente nos animais submetidos ao exercício forçado ocorreu aumento deste metabólito.

Quanto à uréia (U), verificou-se que os ratos suplementados sob exercício forçado

apresentaram maior catabolismo protéico, aumentando sua concentração no soro, indicando que

tanto o exercício como a ingestão maior de proteína promoveram aumento da degradação protéica

e utilização de aminoácidos como fonte energética (25). Com o teor protéico recomendado,

independentemente do exercício, não houve aumento significativo da ureogênese. Quando

analisada a suplementação, independentemente do seu teor, houve aumento significativo nos

grupos com exercício forçado, quase que triplicando a concentração da uréia. O que pode ser

explicado pelo fato de que tanto o exercício físico quanto um maior aporte protéico promovem

aumento no consumo de aminoácidos como fonte energética, seja por sua maior disponibilidade

ou pela intensidade do exercício (25). O fato do exercício aeróbico leve à moderado com 5% de

suplemento não ter apresentado uma maior formação de uréia pode ter ocorrido pela utilização do

frango como a fonte predominante de proteínas, apesar do excesso protéico. Diferente da dieta

com 10% de whey protein, que recebeu o dobro do suplemento em substituição a este

constituinte, o que possivelmente tornou disponível aminoácidos predominantemente ureogênicos,

como os BCAAs (leucina, valina e isoleucina), relevantes para a manutenção da proteína corporal

(29); além de constituírem fontes de nitrogênio para a síntese de alanina e glutamina, regulam os

processos anabólicos e têm efeitos terapêuticos e nutracêuticos, uma vez que podem atenuar a

perda de massa magra durante a redução de peso corporal, entre outros (29) e estimulam a síntese

protéica, através da leucina (30). Os BCAAs são responsáveis em fornecer 10 a 15% da energia

total gasta na etapa final do exercício de alta intensidade prolongado (31).

Ainda foram estudadas as aminotransferases (ALT e AST), indicadoras de lesões no fígado e

músculos. A ALT é encontrada em altas concentrações apenas no citoplasma do fígado, o que

torna o seu aumento sanguíneo um indicativo mais específico de lesão hepática; no entanto, pode

estar aumentada em conjunto com a AST em miopatias (doenças musculares) severas. Vale

salientar que, na literatura científica, são escassas as informações a respeito do papel destas

enzimas, conjugando a suplementação protéica e o exercício físico, tampouco foram encontrados

artigos utilizando o esquema experimental aqui estudado.

O exercício forçado promoveu aumento na AST, fato que foi intensificado pela

suplementação de 10% do whey protein, sendo indicativo de dano muscular, pois também houve

elevação da ALT, mesmo não tenha sofrido a ação conjunta de dieta e exercício e, sim, modificou-

se, em particular, para cada uma das variáveis estudadas. Apresentando seus maiores teores nos

animais submetidos à dieta com 10% do suplemento, havendo indicação de forte transaminação,

possivelmente pela maior disponibilidade de alanina do suplemento e não pela quantidade de

proteínas da dieta; uma vez que a dieta a 5% tinha o mesmo teor protéico (22%). Fato que

também pode ser explicado pela maior formação de uréia, já comentado anteriormente. Sofrendo,

assim, a ação do tipo de pool de aminoácidos disponíveis provenientes da dieta consumida.

Considerando a intensidade do exercício, só os animais submetidos ao nado forçado, apresentaram

aumento significativo da AST, indicando uma maior utilização de protína como fonte de energia,

promovendo assim maior transaminação para a neoglicogênese (25).

Segundo Morifuji et al. (24), a suplementação com BCAA reduz o consumo de glicogênio

hepático durante o exercício agudo, como uma conseqüência da diminuição da atividade do

complexo piruvato desidrogenase, levando-os à considerar que os efeitos benéficos sobre os

estoques de glicogênio hepático do whey protein são determinados por sua composição de

aminoácidos. No entanto, o mecanismo involvido neste comportamento ainda não está

completamente esclarecido. Ainda neste trabalho os autores mostraram que caseína e whey protein

causaram aumentos significativos nos níveis de vários aminoácidos, especialmente alanina, como

também mudanças hepáticas na atividade da alanina aminotransferase (ALT). A transaminação é o

primeiro passo para o catabolismo de aminoácidos e permite que os esqueletos de carbono dos

aminoácidos sejam convertidos em oxaloacetato e, subseqüentemente, em piruvato, para ser

utilizado na neoglicogênese. Do mesmo modo que neste trabalho, os autores chegaram à

conclusão de que possivelmente os BCAAs podem ter sido convertidos a alanina no músculo e,

então, transportados ao fígado, para a conversão em piruvato, contudo reduzindo a necessidade

de metabolizar glicogênio hepático e produzir glicose adicional. E ainda sugerem que seu estudo

está de acordo com esta seqüência de reações, bem como, whey protein, em adição ao aumento

dos níveis de alanina no soro, também aumenta a atividade da alanina aminotransferase hepática.

Este aumento na ALT indicou mudanças na glicogenólise procedidas pela alanina.

O aumento da massa muscular constitui uma resposta normal ao treinamento físico, o que

pode ocorrer por hipertrofia, hiperplasia, ou ambos, resultantes tanto do aumento da síntese

quanto da diminuição do catabolismo protéico (25, 32).

O perfil de aminoácidos das proteínas do soro pode favorecer o anabolismo muscular (8,9).

Além disso, Há e Zemel (10) destacam que o perfil de aminoácidos das proteínas do soro é muito

similar ao das proteínas do músculo esquelético, fornecendo quase todos os aminoácidos em

proporção semelhante, classificando-as como um efetivo suplemento anabólico. Em outro estudo,

Burke et al. (33) observaram, igualmente, ganho de massa muscular significativo em adultos

jovens suplementados com proteínas do soro e submetidos a um programa de exercícios com

pesos, quando comparado a um grupo não suplementado, confirmando a teoria do efeito das

proteínas do soro sobre o ganho de massa muscular. Efeito este que parece não ter sido efetivo

nas condições ora estudadas.

CONCLUSÕES

Os dados analisados permitem concluir que o whey protein foi pouco efetivo na melhoria da

composição corporal. E pode-se inferir que sedentários não devem consumir este tipo de

suplemento para o ganho de massa magra, pois o mesmo promoveu aumento de gordura corporal.

Quanto aos parâmetros bioquímicos, tanto a suplementação quanto o exercício podem ter

promovido um desequilíbrio no metabolismo, elevando-os, podendo causar danos à saúde e

diminuindo a qualidade de vida.

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Figura 1: Esquema experimental

(*) S, sedentário-dieta padrão; E, exercitado-dieta padrão; EC, exercitado com carga-dieta padrão; S-5, sedentário-

dieta suplementada com 5% de whey protein; E-5, exercitado-dieta suplementada com 5% de whey protein; EC-5,

exercitado com carga-dieta suplementada com 5% de whey protein; S-10, sedentário-dieta suplementada com 10%

de whey protein; E-10, exercitado-dieta suplementada com 10% de whey protein; EC-10, exercitado com carga-dieta

suplementada com 10% de whey protein.

Adaptação

dia - 10 minutos

dia - 15 minutos

dia - 20 minutos

dia - 25 minutos

dia - 30 minutos

e 8

dias - repouso

5 dias - 30 minutos

2 dias - repouso

Repete 3 vezes

Sacrifício

Exercitado com carga

n=12 – EC

n=12 – EC-5

n=12 – EC-10

Exercitado

n=12 – E

n=12 – E-5

n=12 – E-10

108 Ratos machos

Sem carga Carga = 8% do peso corporal

Treino

1 dia – repouso - 12 horas de jejum

Sedentário*

n=12 – S

n=12 – S-5

n=12 – S-10

28 dias

sem exercício

250

270

290

310

330

350

370

390

410

Inicial 1 2 3 4

Semana

Peso (g)

S S-5 S-10

E E-5 E-10

EC EC-5 EC-10

Figura 2: Comportamento Ponderal Dos Animais Em Cada Fim De Período (Semanal)

(*) Diferença significante a 0,05. ANOVA, análise de variância; S, sedentário-dieta padrão; E, exercitado-dieta

padrão; EC, exercitado com carga-dieta padrão; S-5, sedentário-dieta suplementada com 5% de whey protein; E-5,

exercitado-dieta suplementada com 5% de whey protein; EC-5, exercitado com carga-dieta suplementada com 5%

de whey protein; S-10, sedentário-dieta suplementada com 10% de whey protein; E-10, exercitado-dieta

suplementada com 10% de whey protein; EC-10, exercitado com carga-dieta suplementada com 10% de whey

protein. Os dados são expressos em média ± desvio padrão. As médias nas colunas que mostram letras diferentes

apresentaram diferença significativa. Letras minúsculas distintas indicam diferença significativa entre as dietas ou

entre as combinações de dietas e exercícios; e letras maiúsculas, diferença significativa entre as formas de

exercícios.

Sedentário Exercitado Exercitado

com carga

Sedentário

whey-5%

Exercitado

whey-5%

Exercitado

com carga

whey-5%

Sedentário

whey-10%

Exercitado

whey-10%

Exercitado

com carga

whey-10%

Ganho de peso (g/30d) Gordura (%)

Figura 3: Ganho de peso e percentual de gordura de animais submetidos a diferentes níveis

de suplementação com whey protein e de exercício físico.

(*) Diferença significante a 0,05. Anova, análise de variância; Os dados são expressos em média ± desvio padrão.

As médias nas colunas que mostram letras supra-escritas diferentes apresentaram diferença significativa. Letras

minúsculas distintas indicam diferença significativa entre as formas de exercícios ou entre as combinações de

dietas e exercícios; e letras maiúsculas, diferença significativa entre as dietas.

*bc ba c a ba bc a ba a

Tabela 1

Composição química das dietas (g.kg-1)

Dieta normal Whey protein 5% Whey protein 10%

Q* P C G F E Q P C G F E Q P C G F E

COMPONENTE

(g) (g) (g) (g) (g) Kcal (g) (g) (g) (g) (g) Kcal (g) (g) (g) (g) (g) Kcal

Nutri whey

protein®

- - - - - - 200 50 137 2 - 766 400 100 274 4 - 1532

Frango 110 78 14 5 - 413 140 99 18 6 - 522 90 64 11 4 - 336

Feijão 280 64 173 4 12 984 220 50 136 3 9 771 190 43 118 3 8 671

Arroz 380 29 335 1 0 1465 280 21 247 0 0 1072 200 15 177 0 0 768

Óleo 30 0 0 30 - 270 30 0 0 30 - 270 30 0 0 30 - 270

Farinha de

mandioca

200 3 166 1 - 685 130 2 108 1 - 449 90 1 75 0 - 304

Total

1000 174 688 41 12 3817 1000 222 646 42 9 3850 1000 223 655 41 8 3881

*Q = Quantidade; P = Proteína; C = Carboidrato; G = Gordura; F = Fibra; E = Energia

Tabela 2

Ingestão alimentar, protéica e calórica*

Grupo

Alimentar Protéica Calórica

(g/30d) (g/30d) (kcal/30d)

S 482 ± 48

(d)

84 ± 8

(b,A)

1840

184

(b,A)

E 521 ± 68

(dc)

91 ± 12

(b,A)

1987

261

(b,A)

EC 623 ± 62

(ba)

108 ± 11

(a,A)

2377

236

(a,A)

S-5 587 ± 47

(bac)

130 ± 10

(b,B)

2260

179

(b,B)

E-5 574 ± 57

(bc)

127 ± 13

(b,B)

2208

218

(b,B)

EC-5 628 ± 90

(ba)

139 ± 20

(a,B)

2417

346

(a,B)

S-10 563 ± 23

(bc)

126 ± 5

(b,B)

2187

(b,B)

E-10 604 ± 29

(ba)

135 ± 7

(b,B)

2345

114

(b,B)

EC-10 654 ± 54

(a)

146 ± 12

(a,B)

2537

211

(a,B)

ANOVA

Dieta p

(1)

< 0,0001* p

(1)

< 0,0001* p

(1)

< 0,0001*

Exercício p

(2)

< 0,0001* p

(2)

< 0,0001* p

(2)

< 0,0001*

Dieta X exercício p

(3)

= 0,0350* p

(3)

= 0,1225 p

(3)

= 0,1225

(*) Diferença significante a 0,05. p (1): Para a comparação entre dieta; p (2): Para a comparação entre exercícios; p (3): Para a verificação da hipótese dieta x

exercícios. Anova, análise de variância; S, sedentário-dieta padrão; E, exercitado-dieta padrão; EC, exercitado com carga-dieta padrão; S-5, sedentário-dieta

suplementada com 5% de whey protein; E-5, exercitado-dieta suplementada com 5% de whey protein; EC-5, exercitado com carga-dieta suplementada com 5%

de whey protein; S-10, sedentário-dieta suplementada com 10% de whey protein; E-10, exercitado-dieta suplementada com 10% de whey protein; EC-10,

exercitado com carga-dieta suplementada com 10% de whey protein. Os dados são expressos em média ± desvio padrão. As médias nas colunas que mostram

letras supra-escritas diferentes apresentaram diferença significativa. Letras minúsculas distintas indicam diferença significativa entre as formas de exercícios ou

entre as combinações de dietas e exercícios; e letras maiúsculas, diferença significativa entre as dietas.

Tabela 3

Parâmetros séricos

Grupo Uréia Creatinina AST ALT

(g/dl) (g/dl) (g/dl) (g/dl)

S 17,25

4,34

(d)

0,48

0,14

(b,B)

35,75

10,73

(c)

28,67

8,56

(b,B)

E 13,01

2,48

(d)

0,53

0,14

(b,B)

24,92

7,28

(c)

25,58

4,50

(b,B)

EC 19,04

4,20

(d)

0,70

0,12

(a,B)

116,25

21,48

(b)

153,08

146,50

(a,B)

S-5 20,48

5,18

(cd)

0,68

0,22

(b,A)

28,17

14,30

(c)

29,67

14,77

(b,AB)

E-5 16,12

2,28

(d)

0,61

0,15

(b,A)

31,42

10,33

(c)

28,67

8,70

(b,AB)

EC-5 43,58

16,93

(a)

0,98

0,35

(a,A)

138,25

32,09

(b)

179,17

45,74

(a,AB)

S-10 30,07

5,73

(cb)

0,65

0,11

(b,A)

31,50

14,49

(c)

30,42

13,41

(b,A)

E-10 30,45

7,46

(b)

0,83

0,31

(b,A)

36,25

8,88

(c)

35,33

7,88

(b,A)

EC-10 41,45

7,63

(a)

0,99

0,28

(a,A)

171,67

21,47

(a)

181,50

21,72

(a,A)

ANOVA

Dieta p

(1)

< 0,0001* p

(1)

< 0,0001* p

(1)

< 0,0001* p

(1)

= 0,0143*

Exercício p

(2)

< 0,0001* p

(2)

< 0,0001* p

(2)

< 0,0001* p

(2)

< 0,0001*

Dieta X exercício p

(3)

< 0,0001* p

(3)

= 0,2321 p

(3)

< 0,0001* p

(3)

= 0,1004

(*) Diferença significante a 0,05. p (1): Para a comparação entre dieta; p (2): Para a comparação exercícios; p (3): Para a verificação da hipótese dieta x

exercícios. Anova, análise de variância; S, sedentário-dieta padrão; E, exercitado-dieta padrão; EC, exercitado com carga-dieta padrão; S-5, sedentário-dieta

suplementada com 5% de whey protein; E-5, exercitado-dieta suplementada com 5% de whey protein; EC-5, exercitado com carga-dieta suplementada com 5%

de whey protein; S-10, sedentário-dieta suplementada com 10% de whey protein; E-10, exercitado-dieta suplementada com 10% de whey protein; EC-10,

exercitado com carga-dieta suplementada com 10% de whey protein. Os dados são expressos em média ± desvio padrão. As médias nas colunas que mostram

letras supra-escritas diferentes apresentaram diferença significativa. Letras minúsculas distintas indicam diferença significativa entre as formas de exercícios ou

entre as combinações de dietas e exercícios; e letras maiúsculas, diferença significativa entre as dietas. AST - Aspartato aminotransferase e ALT - Alanina

aminotransferase.

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