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Ana Carolina Prado Ribeiro
ARAÇATUBA - SP
2008
Estu
do clínico, morfológico e
imunoistoquímico de carcinomas
espinocelulares em boca.
Análise comparativa entre pacientes
jovens e idosos.
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Livros Grátis
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Ana Carolina Prado Ribeiro
Estudo clínico, morfológico e imunoistoquímico
de carcinomas espinocelulares em boca. Análise
comparativa entre pacientes jovens e idosos.
Orientadora: Prof.ª Adj. Ana Maria Pires Soubhia
ARAÇATUBA – SP
2008
Dissertação apresentada à Faculdade de
Odontologia do Câmpus de Araçatuba –
Unesp, para a obtenção do Grau de
“Mestre em Odontologia” – Área de
Estomatologia.
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Catalogação-na-Publicação
Serviço Técnico de Biblioteca e Documentação – FOA / UNESP
Ribeiro, Ana Carolina Prado
R484e Estudo clínico, morfológico e imunoistoquímico de carcinoma
espinocelular em boca : análise comparativa entre pacientes jovens
idosos / Ana Carolina Prado Ribeiro. – Araçatuba : [s.n.], 2008
55 f. : il. ; tab. + 1 CD-ROM
Dissertação (Mestrado) – Universidade Estadual Paulista,
Faculdade de Odontologia, Araçatuba, 2008
Orientador: Profa. Dra. Ana Maria Pires Soubhia
1. Carcinoma de células escamosas 2. Imunoistoquímica
4. Grupos etários 5. Língua
Black D6
CDD 617.63
Dedicatória
Dedicatória
Aos meus p
ais
,
An
tônio José Gracino Ribeiro e Renata Prado Ribeiro
, pelo
amor, compreensão e apoio incondicional em todos os momentos da minha
vida. A eles o meu muito obrigado por sempre acreditarem em mim!
Aos meus irmãos, Juliana Prado Ribeiro e Marcelo Prado Ribeir
o, pelos
momentos de alegria, amizade e amor, que, apesar das diferenças, sempre nos
tornaram cúmplices.
Ao Alan Roger dos Santos Silva, exemplo de profissionalismo e
competência, incessante na busca de conhecimento. Com ele espero sempre
dividir minha vida pessoal e profissional, com amor, companheirismo e em
regime de mútuo incentivo.
Agradecimentos
Especiais
Agradecimentos Especiais
À minha orientadora
,
Prof.ª Dr.ª Ana Maria Pires Soubhia,
que desde a
graduação me apóia e me incentiva. Nestes quatro anos de estreita convivência
foram preciosos os seus ensinamentos, exemplos e atitudes, permitindo-me
apropriar o real significado da pesquisa e da docência.
Agradecimentos
Agradecimentos
À Faculdade de Odontologia de Araçatuba
-
UNESP,
por meio do de seu
atual Diretor, Prof. Dr. Pedro Felício Estrada Bernabé, e de sua Vice-Diretora,
Prof.ª Dr.ª Ana Maria Pires Soubhia.
Ao Programa de Pós
-
Graduação em O
dontologia da Faculdade de
Odontologia de Araçatuba – UNESP, por meio de seu Coordenador, Prof. Dr.
Idelmo Rangel Garcia Junior.
Aos docentes do Departamento de Patologia e Propedêutica Clínica da
Faculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP, Prof.ª Dr.ª Ana Cláudia
Okamoto, Prof. Dr. Antonio Augusto Ferreira de Carvalho, Prof. Dr. Éder
Ricardo Biasoli, Prof. Dr. Élerson Gaetti Jardim Júnior, Prof. Dr. Gilberto
Aparecido Coclete, Prof. Dr. Marcelo Macedo Crivelini, Prof. Dr. Norberto Perri
Moraes e Prof.ª Dr.ª Renata Callestini Felipini, pela agradável convivência e
conhecimentos transmitidos.
Aos funcionários do Departamento de Patologia e Propedêutica Clínica da
Faculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP, Maria Aparecida Martins da
Silva, Elaine Cristina Francischini Ferreira, José Marcelo Tramarin, João Batista
Vieira, Katsuko Aparecida Anze Inoue, Marli Barbosa dos Santos, Mariana Bento
Barbosa, Miriam Regina Mouro Ferraz Lima e Luzia Maria de Oliveira
Francischini, pelo apoio, amizade, carinho e momentos de descontração que
tornaram a realização deste trabalho muito mais agradável.
Às funcionárias do Centro de Oncologia Bucal (Unidade Auxiliar) da
Faculdade de Odontologia do Câmpus de Araçatuba – UNESP, Jane Fátima
Mendes Fernandes da Silva, Juliana Benevenuto Reis, Nair Ramos Macedo
Cardoso e Shirleni Cantieri Cavazana, pela alegria, atenção e competência com
que sempre me atenderem.
Aos funcionários da Seção de Pós
-
Graduação da Faculdade de Odontologia
de Araçatuba – UNESP, Diogo Luís Reatto, Marina Midori Sakamoto Kawagoe e
Valéria de Queiroz Marcondes Zagatto, pela atenção e paciência em todos os
momentos.
Aos funcionários da Biblioteca da Faculdade de Odontologia do Câmpus de
Araçatuba – UNESP, Ana Cláudia Martins Grieger Manzatti, Cláudio Hideo
Matsumoto, Cláudio Maciel Júnior, Fernando Fukunish, Isabel Pereira de Matos,
Ivone Rosa de Lima Munhoz, Izamar da Silva Freitas, Luzia Anderlini e Maria
Cláudia de Castro Benez, pela atenção e carinho com que sempre atenderam às
minhas solicitações.
Aos colegas pós
-
graduandos, Adriana Demathé, Ellen Cristina Gaetti Jardim,
Evanice Menezes Marçal Vieira, Felipe Camargo Munhoz, Henrique José Baldo
de Toledo, Iracy Costa, João Batista Vieira, Leandro Toyoji Kawata, Paulo de
Tarso Coelho Jardim, Sâmira Âmbar Lins e Tereza Aparecida Delle Vedove
Semenoff
,
meu
reconhecimento
pelo convívio, pela amizade e pela troca de
experiências.
À Prof.ª Dr.ª Mar
ia Lucia Marçal Mazza Sundefeld,
responsável pela análise
estatística desse trabalho.
Ao Prof. Dr.
Glauco Issamu Miyahara pelos ensinamentos e conselhos
,
fundamentais para a minha formação.
Ao Prof. Dr. Alvimar Lima de Castro, pelo aprendizado e oportunidade de
convivência.
À Prof.ª
Dr.
ª
Leda Maria Pescinini Salzedas
,
exemplo de dedicação e
competência.
Ao Prof. Dr. Décio dos Santos Pinto e a Prof.ª
Dr.
ª Suzana C. Orsini
Machado de Sousa, da disciplina de Patologia Bucal, da Faculdade de
Odontologia da Universidade de São Paulo - USP, por terem cedido,
gentilmente, o material biológico, os anticorpos e, ainda, por terem permitido a
utilização do laboratório de imunoistoquímica viabilizando a execução desta
dissertação.
Aos funcionários da
d
isciplina de Patologia Bucal
,
da Faculdade de
Odontologia da Universidade de São Paulo - USP, Beatriz Costa, Elisa dos Santos,
Nair Pereira e Neia Barbosa e Zilda Alves, pelo apoio e auxílio durante a
realização deste trabalho.
Aos meus avós
,
Alice Silva, Heitor Prado, Drausio Ribeiro e Ladayr Ribeiro
(in memorian), que tornaram a minha infância cheia de sorrisos; não importa
onde estejam, sei que olham por mim.
Aos meus tios
,
Carmem Ribeiro Mingoci e Roberto Mingoci, Ana Paula
Prado Lorenção e Gustavo Lorenção, e aos meus primos, Rodrigo Ribeiro
Mingoci, Guilherme Lorenção e Théo Lorenção, que me acolheram em suas casas
com muito carinho.
Ao
Prof.
Eurípides Alves da Silva
e Prof.ª
Maria Batista dos Santos Silva que
me acolheram em sua família com muito amor, sempre me incentivando e
apoiando, assim como à Michelle dos Santos Silva e ao Cícero Luiz Reis Silva, à
Vivian Lara dos Santos Silva Rossignolo e ao João Adriano Rossignolo e à
pequena Catarina Silva Rossignolo, que tanto nos faz sorrir.
À Família Pires
-
Soubhia, da qual eu já me considero um membro
,
Dr. Silvio
Soubhia, Silvinho, Mariana e Ana Silva, com o meu reconhecimento pelo carinho
e amizade.
Aos meus amigos,
Ana Cristina Murakawa, Carla de Sá, Daniel Galera
Bernabé, Fátima Regina Nunes de Souza, Juliana Cristina Graça, Lívia Bino
Marques, Melaine de Almeida Lawall, Rafael Akira Murawama,
Thiago
Macedo
Marques e Valentim Adelino Ricardo Barão, por todo incentivo, carinho e
amizade.
À minha amiga “dentista”, Valéria Cecília Albertone Durão, exemplo de
responsabilidade, profissionalismo e competência em tudo que faz na vida.
À minha amiga Lucia
na Estevam Simonato, pessoa imprescindível em minha
vida, com a qual divido meus momentos de alegrias e minhas tristezas; vibro
com suas conquistas como se fossem minhas. Admiro sua perseverança e
profissionalismo. Agradeço ainda por ter incorporado em nossas vidas o querido
amigo Rodrigo Borges de Oliveira. Obrigada!
À FAPESP
-
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo
,
pelo
auxílio financeiro que viabilizou a realização desse trabalho de pesquisa.
Aos pacientes, que tornaram este trabalho r
ealidade, a minha lembrança e
gratidão.
A todos que colaboraram direta ou indiretamente para a concretização
deste sonho, meus sinceros agradecimentos.
Ribeiro, ACP. Estudo clínico, morfológico e imunosistoquímico de carcinomas
espinocelulares em boca. Análise comparativa entre pacientes jovens e idosos
[dissertação]. Araçatuba: Faculdade de Odontologia da Universidade Estadual
Paulista; 2008.
Resumo
A incidência mundial de câncer em jovens tem aumentado e estudos
recentes mostram que o câncer de boca também segue esta tendência. O
objetivo deste trabalho foi avaliar e comparar as características clínicas,
histopatológicas e imunoistoquímicas entre pacientes jovens, com idade igual
ou inferior a 40 anos, e pacientes idosos, com idade igual ou superior a 65
anos, diagnosticados com carcinoma espinocelular em língua. Foram
selecionados 19 casos de pacientes jovens e 19 casos de pacientes idosos e
coletados dados clínicos dos prontuários. A gradação histológica foi realizada
utilizando os critérios de classificação de Bryne et al (1992), na região do fronte
tumoral. Também foi analisada a expressão imunoistoquímica das proteínas
Bcl-2, Cerb-b2 e Ki-67. Neste estudo foi observado maior número de
carcinomas espinocelulares moderadamente e pobremente diferenciados no
grupo de pacientes jovens enquanto que no grupo de idosos houve maior
prevalência de carcinomas bem diferenciados. Houve também no grupo de
pacientes jovens um aumento do infiltrado linfoplasmocitário. A expressão
imunoistoquímica das proteínas Bcl-2, Cerb-b2 e Ki-67 não mostrou diferenças
significantes no fronte tumoral entre pacientes jovens e idosos. Na amostra
estudada, foram detectadas diferenças morfológicas entre o grupo de pacientes
jovens e idosos, no entanto, estas diferenças não foram expressas de forma
significativa na análise imunoistoquímica.
Palavras-chave: Carcinoma de células escamosas. Imunoistoquímica. Grupos
etários. Língua.
Ribeiro, ACP. Clinical, morphological and immunohistochemical study of oral
squamous cell carcinoma. Comparative analysis between young and old
patients[dissertation]. Araçatuba: UNESP – São Paulo State University; 2006.
Abstract
The worldwide incidence of cancer in young is increasing and recent
studies show that the oral cancer also follows this trend. The objective of this
study was to evaluate and to compare the clinical, histopathological and
immunohistochemical features between young patients, with 40 years old or
less, and elderly patients, with 65 years old or a superior age, diagnosed with
tongue squamous cell carcinoma. Nineteen cases of young patients and 19
cases of elderly patients were selected and clinical data were collected from
medical records. The histological grading was carried out using the criteria of
classification of Bryne et al (1992) in the tumoral front region. The
immunohistochemical expression of the proteins Bcl-2, Cerb-b2 and Ki-67 was
also analyzed. In the present study, the group of young patients presented a
higher number of moderately and poor differentiated squamous cell carcinomas
whereas the elderly group had a greater prevalence of well differentiated
carcinomas. The group of young patients also showed an increase in the
lympho-plasmacytic infiltration. The immunohistochemical expression of the
proteins Bcl-2, Cerb-b2 and Ki-67 did not show significant differences in the
tumoral front region between young and elderly patients. In the studied sample,
morphological differences between the group of young and elderly patients
were detected, however, these differences were not expressed in in the
immunohistochemical analysis.
Keywords: Squamous cell carcinoma. Immunohistochemistry. Age
Groups. Tongue.
Lista de Figuras
Figura 1
Fotomicografias mostrando as características morfológicas
e marcações imunoistoquímicas na região do fronte
tumoral em pacientes jovens e idosos. A. Aspectos
morfológicos em HE (200X) – pacientes jovens. B.
Aspectos morfológicos em HE (200X) – pacientes idosos.
C. Bcl-2 (200X) – pacientes jovens. D. Bcl-2 (200X) –
pacientes idosos. E. Cerb-b2 (200X) – pacientes jovens. F.
Cerb-b2 (200X) – pacientes idosos. G. Ki-67 (400X) –
pacientes jovens. H. Ki-67 (400X) – pacientes idosos.
3
2
Lista de Tabelas
Tabela 1
Anticorpos e protocolos utilizados no estudo.
26
Tabela 2
Distribuição de sexo e raça.
30
Tabela 3
Distribuição dos fatores histopatológicos.
3
1
Lista de Abreviaturas
µm - Micrômetro
Bcl-2 - B-cell lymphoma-2
Cerb-b2 - Epidermal Growth Factor Receptor
CEC - Carcinoma espinocelular
Ki-67 - Kiel 67.ª culture dishe, monoclonal antibody which recognizes a labile
epitope on a nuclear antigen in cycling cells
IgG - Imunoglobulina
DAB – Diaminobenzidina
LSAB –
Labeled Streptavidin Biotin
EDTA - Ethylenediamine tetraacetic acid
Sumário
1 Introdução
20
2 Proposição
22
3 Material e Método
24
4 Resultados
29
5 Discussão
34
6 Conclusões
39
Referências
41
Anexos 44
Introdução
___________________________________________________________________
Introdução
*Normalização segundo as Normas para publicação da Revista Journal Of Oral Pathology & Medice (Anexo B)
20
1. Introdução*
O câncer de boca é a oitava neoplasia maligna mais freqüente em todo o
mundo (1). No Brasil, estimam-se mais de 14.160 novos casos para o ano de
2008 (2).
O carcinoma espinocelular (CEC) bucal acomete principalmente homens
entre a sexta e sétima décadas de vida, sendo raro em pacientes jovens, com
idade inferior a 40 anos (3-7).
Apenas 4 a 6% de todos os casos de carcinomas espinocelulares bucais
são relatados em pacientes jovens (8-10). No entanto, um aumento na
incidência do câncer bucal em jovens vem sendo relatado em todo o mundo e
tem sido sugerido que esta é uma entidade distinta, pelo seu aparente
comportamento biológico mais agressivo (4, 11,12).
A gradação histopatológica de CECs bucais vem sendo usada na tentativa
de avaliar o comportamento biológico do tumor. O CEC possui populações
celulares distintas e acredita-se que as células do fronte tumoral tenham
características próprias quando comparadas a diversas áreas do mesmo tumor
e que poderiam expressar, de forma mais precisa, o comportamento clínico do
tumor (13,14). No entanto, são poucos os estudos na literatura que comparam
pacientes jovens e idosos acometidos por CEC bucal no que diz respeito às
diferenças histopatológicas e imunoistoquímicas no fronte tumoral.
Proposição
________________________________________________________ Proposição
22
2. Proposição
O objetivo deste trabalho foi avaliar e comparar as características
clínicas, histopatológicas e imunoistoquímicas entre pacientes jovens, com
idade igual ou inferior a 40 anos, e pacientes idosos, com idade igual ou
superior a 65 anos diagnosticados com carcinoma espinocelular em língua.
Material e
Métodos
__________________________________________________________
Material e Métodos
24
3. Material e Métodos
Amostras estudadas
Foi realizada uma análise retrospectiva nos arquivos do Serviço de
Histopatologia Bucal da Faculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP e
da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo – FOUSP. Foram
selecionados 19 casos de pacientes jovens, com idade igual ou inferior a 40
anos, e 19 casos de pacientes idosos, com idade igual ou superior a 65 anos,
com o diagnóstico de carcinoma espinocelular em língua. Dos prontuários de
cada paciente selecionado foram coletados os seguintes dados: sexo, raça e
idade.
Avaliação Histopatológica
Após a seleção dos casos, foram realizados novos cortes de 5 µm de
espessura do material arquivado. As lâminas obtidas foram coradas pelo
método de Hematoxilina e Eosina e submetidas à reavaliação por estudo
morfológico em microscopia de luz por dois observadores distintos, que
aplicaram os critérios da classificação de Bryne et al (1992)
13
na região do
fronte tumoral. Cinco parâmetros foram avaliados individualmente:
ceratinização, pleomorfismo nuclear, número de mitoses (campo de 400X),
padrão de invasão e infiltrado linfoplasmocitário.
Análise Imunoistoquímica
A fim de realizar as reações imunoistoquímicas para os anticorpos Bcl-2,
Cerb-b2 e Ki-67, foi utilizada a técnica da estreptavidina-biotina. Foram obtidos
__________________________________________________________
Material e Métodos
25
cortes de 3µm de espessura e os fragmentos colocados sobre lâminas
previamente tratadas com 3-aminopropil-trietoxi-silano (Sigma Chemical
Company, EUA). Os cortes foram desparafinizados, reidratados em soluções
com concentrações decrescentes de etanol, e realizada a remoção de
pigmentos formólicos por meio da incubação em hidróxido de amônia a 10%
em solução alcoólica (etanol 95%) por 10 minutos. Realizou-se recuperação
antigênica e, ao final, os cortes foram imediatamente lavados em água corrente
por 10 minutos. Em seguida foram levados para a etapa de desbloqueio da
peroxidase endógena tecidual, realizada pela incubação em dois banhos de 15
minutos cada em solução de 1:1 de peróxido de hidrogênio a 6% e etanol.
Repetida a lavagem em água, os cortes foram imersos em solução de
Tris pH 7,6, acrescidos de albumina bovina a 1%, e os anticorpos primários
foram incubados sobre os cortes por 30 minutos. As reações foram reveladas
pela diaminobenzidina (DAKO, Liquid DAB+) através da incubação por 10
minutos. Na seqüência os cortes foram contra-corados com hematoxilina de
Mayer.
Os anticorpos primários, o clone, a diluição, o complexo terciário
utilizado para incubação do anticorpo de ligação, o tratamento realizado, a
marca comercial e a origem dos anticorpos utilizados no estudo podem ser
observados na tabela 1.
Todos os passos, desde a utilização dos anticorpos primários até a
contra-coloração, foram realizados automaticamente com o auxílio do
equipamento Autostainer DAKO (DAKO, Carpenteria, CA, USA).
__________________________________________________________
Material e Métodos
26
Tabela 1. Anticorpos e protocolos utilizados no estudo.
Anticorpo
primário
Clone
Diluição
Complexo
Tratamento
Marca
Bcl-2 100 1:100 LSAB Ácido cítrico
95ºC, 30
min.
DakoCytomation
Cerb-2
(Neu)
Policlonal
1:100 LSAB Ácido cítrico,
95ºC, 30
min.
Santa Cruz
Biotecnology
Ki-67 MIB-1 1:75 LSAB EDTA, 95ºC,
30 min.
DakoCytomation
Análise dos Resultados
Após a realização das reações imunoistoquímicas os resultados foram
analisados em microscopia de luz. No caso de marcação citoplasmática do Bcl-
2 e Cerb-b2, as marcações imunoistoquícas foram analisadas por dois
observadores distintos na região do fronte tumoral mediante um aumento de
200 X e agrupadas nas seguintes categorias: reação negativa e reação
positiva.
A quantificação das células com positividade nuclear para Ki-67 foi
realizada utilizando-se o software LEICA Qwin (Leica Imaging Systems Ltda,
Cambridge, England). O índice de positividade foi obtido por meio da leitura
dos resultados na região do fronte tumoral (aumento de 400x). Um mínimo de
quinhentas células, considerando as células positivas e as células negativas,
de cada caso, foram contadas manualmente e os resultados foram expressos
em porcentagem de positividade.
Analise estatística
Para avaliar o grau de concordância entre os observadores durante a
análise da gradação histológica e a intensidade de marcação imunoistoquímica
no fronte tumoral, foi aplicado o teste Kappa com o auxílio do programa SAS
v.8.2. Para analisar a correlação entre os grupos de pacientes jovens e idosos
utilizaram-se os testes Qui-quadrado ou Exato de Fisher. Para análise do
__________________________________________________________
Material e Métodos
27
índice Ki-67 foi utilizado um teste de proporção entre os grupos estudados. O
nível de significância considerado foi de 5%.
Resultados
____________________________________________________________________
Resultados
29
4. Resultados
No grupo de pacientes jovens encontramos 13 (68,42%) homens e 6
(34,58%) mulheres, enquanto que no grupo de pacientes idosos encontramos
12 (63.18%) homens e 7 (36.84%) mulheres. A média de idade no grupo
jovem foi de 34,6 anos, com idade mínima de 20 anos. Com relação à raça,
tanto no grupo de jovens quanto no de idosos, predominou a raça branca como
mostrado na tabela 2.
A análise histopatológica do fronte tumoral utilizando os critérios de
classificação de Bryne et al (1992)
13
mostrou que no grupo de pacientes jovens
10,53% dos carcinomas foram considerados bem diferenciados, 57,89%
moderadamente diferenciados e 31,58% pobremente diferenciados, enquanto
que no grupo de idosos 52,63% foram bem diferenciados, 21,05%
moderadamente diferenciados e 26,32% pobremente diferenciados. Esta
diferença foi estatisticamente significante (p < 0,05). A análise individual dos
fatores em cada grupo revelou aumento do infiltrado linfoplasmocitário em
pacientes jovens (p < 0,05), como é mostrado na tabela 3.
O padrão de marcação imunoistoquímica para a proteína Bcl-2 revelou
negatividade em 18 entre 19 pacientes jovens e em 15 entre 19 pacientes
idosos; quando comparados estatisticamente, estes resultados não se
mostraram significantes (p>0,05). Com relação à proteína Cerb-b2, foi
observado positividade em 15 entre 19 amostras de pacientes com idade igual
ou inferior a 40 anos e em 9 entre 19 amostras de pacientes com idade igual ou
superior a 65 anos; estes resultados não foram estatisticamente significantes
(p>0,05). O índice de marcação para o Ki-67 mostrou proliferação celular
discretamente mais acentuada no grupo de pacientes idosos. No entanto o
____________________________________________________________________
Resultados
30
teste de proporção aplicado mostrou não haver diferenças estatisticamente
significantes (p > 0,05) (Figura 1).
Tabela 2. Distribuição de sexo e raça.
Número (%) de cada grupo
Pacientes ≤ 40 anos Pacientes ≥ 65 anos
Sexo
Masculino 13 (68.42) 12 (63.18)
Feminino 6 (34.58) 7 (36.84)
Raça
Branca 12 (63.18) 16 (84.21)
Outras 7 (36.84) 3 (15.79)
____________________________________________________________________
Resultados
31
Tabela 3. Distribuição dos fatores histopatológicos
*
Fatores
Histopatológicos
Número (%) de cada grupo
Pacientes ≤ 40 anos Pacientes ≥ 65 anos
Valor-P
Diferenciação
Bem 2 (10,53) 10 (52,63)
0,0130
Moderadamente 11 (57,89) 4 (21,05)
Pouco 6 (31,58) 5 (26,32)
Ce
ratinização
5 (26,32) 4 (21,05)
Grau 1 4 (21,05) 5 (26,32) ns
+
Grau 2 4 (21,05) 5 (26,32)
Grau 3 6 (31,58) 5 (26,32)
Grau 4
Pleomorfismo Nuclear
Grau 1 0 (0) 3 (15,79)
Grau 2 9 (47,37) 9 (47,37) ns
Grau 3 9 (47,37) 7 (36,84)
Grau 4 1 (5,26) 0 (0)
Mitose
Grau 1 13 (68,42) 14 (73,68)
Grau 2 5 (26,32) 3 (15,79) ns
Grau 3 1 (5,26) 2 (10,53)
Grau 4 0 (0) 0 (0)
Padrão de Invasão
Grau 1 0 (0) 3 (15,79)
Grau 2 11 (57,89) 7 (36,84) ns
Grau 3 7 (36,84) 6 (31,58)
Grau 4 1 (5,26) 3 (15,79)
Infiltrado
Linfoplasmocitário
Grau 1 3 (15,79) 8 (42,11)
Grau 2 8 (42,11) 2 (10,53) 0,0184
Grau 3 5 (26,32) 9 (47,37)
Grau 4 3 (15,79) 0 (0)
* Bryne et al (1992)
+
ns: não significativo (Testes Qui-quadrado ou Fischer)
____________________________________________________________________
Resultados
32
Figura 1. Fotomicrografias mostrando as características morfológicas e
marcações imunoistoquímicas na região do fronte tumoral em pacientes jovens
e idosos. A. Aspectos morfológicos em HE (200X) – pacientes jovens. B.
Aspectos morfológicos em HE (200X) – pacientes idosos. C. Bcl-2 (200X) –
pacientes jovens. D. Bcl-2 (200X) – pacientes idosos. E. Cerb-b2 (200X) –
pacientes jovens. F. Cerb-b2 (200X) – pacientes idosos. G. Ki-67 (400X) –
pacientes jovens. H. Ki-67 (400X) – pacientes idosos.
Discussão
_____________________________________________________________________
Discussão
34
5. Discussão
Um aumento na incidência de câncer bucal está sendo relatado em todo o
mundo. Sugere-se que tanto a etiologia quanto a patogênese do CEC bucal
diferem entre pacientes jovens e idosos, principalmente devido ao curto
período de exposição a agentes carcinogênicos, à provável ausência de lesões
potencialmente malignas preexistentes e ao seu aparente comportamento
biológico mais agressivo (3-5,11,15).
O CEC bucal ocorre mais freqüentemente em homens do que em mulheres
(12,16). Entretanto, quando analisamos os dados da literatura relacionados à
distribuição de sexos em pacientes jovens com câncer de boca, encontramos
divergências. Kuriakose et al (1992)
11
encontraram uma maior prevalência em
mulheres, com uma proporção de 1 para 1,2 em um grupo de pacientes com
idade igual ou inferior a 35 anos. No presente estudo, 68,42% dos casos de
CEC em pacientes jovens foram observados em homens e 34,58%
diagnosticados em mulheres, achados semelhantes aos de Sasaki et al
(2005)
12
que observaram uma maior incidência no sexo masculino em
amostras de pacientes com até 40 anos.
Kuriakose et al (1992)
11
sugerem que o CEC bucal em pacientes jovens
tende a ser menos diferenciado histologicamente quando comparado ao CEC
bucal, que acomete pacientes idosos. No presente estudo, ao analisar o fronte
tumoral, observou-se que no grupo de pacientes jovens o maior número das
amostras foi classificado como moderadamente diferenciado (57,89%) e
pobremente diferenciado (31,58%). No entanto, no grupo de pacientes idosos
52,63% foram classificadas como bem diferenciados, 21,05% moderadamente
diferenciados e 26,32% pobremente diferenciados (p < 0,05). Regezi et al
_____________________________________________________________________
Discussão
35
(1999)
15
, ao analisarem os padrões morfológicos de uma amostra de pacientes
com idade inferior a 35 anos e compará-los aos padrões morfológicos de
pacientes com idade superior a 75 anos, não obtiveram diferenças
estatisticamente significantes; o mesmo ocorreu no estudo de Sasaki et al
(2006)
12
ao analisarem uma amostra de pacientes jovens com idade inferior a
40 anos e compará-la com idosos. Esses achados reforçam a importância de
se desenvolver novos estudos que busquem compreender melhor a
patogênese do CEC bucal em jovens, a fim de se obter resultados mais
confiáveis em relação às possíveis diferenças de classificação morfológica
entre os dois grupos. A análise individual dos critérios estabelecidos por Bryne
et al (1992)
13
na região do fronte tumoral, em cada um dos grupos constatou
um aumento do infiltrado linfoplasmocitário no grupo de pacientes jovens (p <
0,05). Este achado pode sugerir uma menor diferenciação celular neste grupo,
pois recentes estudos de Suwa et al (2006)
17
e Keberle et al (2003)
18
sugerem
que pacientes acometidos por CECs bucais com intenso infiltrado
linfoplasmocitário apresentem maior incidência de metástase regional para
linfonodos cervicais.
A carcinogênese pode estar relacionada não apenas ao aumento da
proliferação celular, mas, também, à diminuição da morte celular (apoptose)
(Loro et al 1999
19
). Uma das proteínas que tem sido relacionada à
carcinogênese por prevenir a morte celular e aumentar a taxa de divisão celular
é a Bcl-2 (20,21). Popovic et al (2007)
21
e Loro et al (1999)
19
, ao analisarem
casos de câncer bucal, encontraram uma associação entre a baixa expressão
da Bcl-2 e um melhor prognóstico. Entretanto, Lo Muzio et al (2003)
22
observaram que a baixa expressividade da Bcl-2 foi diretamente relacionada a
_____________________________________________________________________
Discussão
36
um pior prognóstico do paciente. No presente estudo, observou-se 18
pacientes jovens e 15 pacientes idosos com ausência da expressão da
proteína Bcl-2. Embora estes resultados não tenham sido estatisticamente
significantes, houve uma menor expressão de Bcl-2 no grupo de pacientes
jovens, o que poderia estar relacionado com o maior número de carcinomas
pobremente diferenciados neste grupo.
O Cerb-b2 é um dos membros da família de crescimento epidermal (ErbB)
de receptores transmembrânicos com atividade tirosino quinase. Todos os
membros desta família estão envolvidos na regulação do crescimento,
diferenciação ou migração celular. A expressão aumentada do Cerb-b2 está
sendo associada a um pior comportamento clínico em vários cânceres
humanos, incluindo o carcinoma espinocelular bucal (23-27). Ulanovski et al
(2004)
25
, ao analisarem 27 amostras de CECs de língua encontraram
correlação entre a positividade do Cerb-b2 e carcinomas pobremente
diferenciados. Observou-se, neste estudo, positividade para o Cerb-b2 em 15
pacientes jovens e em 9 pacientes idosos, embora estes achados não tenham
sido estatisticamente significantes. Assim como na imunomarcação para o Bcl-
2, estes resultados poderiam relacionar-se ao maior número de carcinomas
pobremente diferenciados no grupo de jovens.
O antígeno Ki-67 é uma proteína nuclear expressa, principalmente, durante
as fases S e G2 do ciclo celular. Somente as células em proliferação
expressam Ki-67, ao contrário das células quiescentes (fase GO do ciclo
celular) que não produzem esta proteína (14,27-29). Elevados índices de Ki-67
são observados em CECs e correlacionados com a progressão da doença e
com um pior prognóstico (14). Surpreendentemente, neste estudo observou-se
_____________________________________________________________________
Discussão
37
uma marcação discretamente mais acentuada no grupo de pacientes idosos.
Este fato contrasta com os achados anteriores, que relacionavam o grupo de
pacientes jovens a uma menor diferenciação celular e sugeriam maior
proliferação.
Derka et al (2006)
28
, ao realizarem um estudo experimental em
carcinogênese bucal em hamsters, constataram um aumento do índice de Ki-
67 nos estágios iniciais da oncogênese e uma diminuição em carcinomas
menos diferenciados. Estes achados são contrastantes com outros vários
estudos da literatura (14, 27, 29), que relataram um aumento da expressão do
Ki-67 acompanhando, a progressão da displasia epitelial para o CEC bucal.
Esta discrepância pode ser atribuída, em parte, ao pequeno número de casos
das amostras estudadas.
Conclusões
___________________________________________________________________
Conclusões
39
6. Conclusões
1. No grupo de pacientes jovens com carcinoma espinocelular de língua
estudado houve maior prevalência em homens da raça branca, não
diferindo do grupo de pacientes idosos.
2. Embora o grupo de pacientes jovens com carcinoma espinocelular bucal
tenha apresentado menor diferenciação celular, o grupo de pacientes
idosos apresentou uma tendência maior para proliferação celular;
3. Não foram detectadas diferenças significantes entre a expressividade
das proteínas Bcl-2, Cerb-b2 e Ki-67 no fronte tumoral de pacientes
jovens e idosos;
4. Diferenças morfológicas entre o grupo de pacientes jovens e idosos
foram detectadas, no entanto não foram expressas de forma
significativa na análise imunoistoquímica.
Referências
___________________________________________________________________
Referências
41
Referências*
01. Massano J, Regateiro FS, Januário G, Ferreira A. Oral squamous cell
carcinoma: review of prognostic and predictive factors. Oral Surg Oral
Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2006; 102: 67-76.
02. Brasil. Ministério da Saúde. Secretaria de Atenção à Saúde. Instituto
Nacional de Câncer. Coordenação de Prevenção e Vigilância.
Estimativa 2008: Incidência de Câncer no Brasil. Rio de Janeiro: INCA;
2007.
03. Llewellyn CD, Johnson NW, Warnakulasuriya KA. Risk factors for
squamous cell carcinoma of the oral cavity in young people--a
comprehensive literature review. Oral Oncol. 2001; 37: 401-18.
04. Llewellyn CD, Johnson NW, Warnakulasuriya KAAS. Risk factores for
oral cancer in newly diagnosed patients aged 45 years and younger: a
case-control study in Southern England. J Oral Pathol Med, 2004; 33:
525-32.
05. Chitapanarux I, Lorvidhaya V, Sittitrai P et al. Oral cavity cancers at a
young age: analysis of patient, tumor and treatment characteristics in
Chiang Mai University Hospital. Oral Oncol. 2006; 42: 83-8.
06. Warnakulasuriya S, Mak V, Möller H. Oral cancer survival in young
people in South East England. Oral Oncol. 2007; 43: 982-6.
07. Garavello W, Spreafico R, Gaini RM. Oral tongue cancer in young
patients: A matched analysis. Oral Oncol. 2007; 43: 894-7.
08. Iamaroon A, Pattanaporn K, Pongsiriwet S et al. Analysis of 587 cases
of oral squamous cell carcinoma in northern Thailand with a focus on
young people. Int J Oral Maxillofac Surg. 2004; 33: 84-8.
09. Siriwardena BS, Tilakaratne A, Amaratunga EA, Tilakaratne WM.
Demographic, aetiological and survival differences of oral squamous cell
carcinoma in the young and the old in Sri Lanka. Oral Oncol. 2006; 42:
831-6.
10. Siriwardena BS, Tilakaratne A, Amaratunga EA et al. Analysis of
histopathological and immunohistochemical differences of oral
squamous cell carcinoma in young and old patients in Sri Lanka. J Oral
Pathol Med. 2007; 36: 357-62.
11. Kuriakose M, Sankaranarayanan M, Nair MK et al. Comparison of oral
squamous cell carcinoma in younger and older patients in India. Eur J
Cancer B Oral Oncol. 1992; 28B: 113-20.
12. Sasaki T, Moles DR, Imai Y, Speight PM. Clinico-pathological features
of squamous cell carcinoma of the oral cavity in patients <40 years of
age. J Oral Pathol Med. 2005; 34: 129-33.
13. Bryne M, Koppang HS, Lilleng R, Kjaerheim A. Malignancy grading of
the deep invasive margins of oral squamous cell carcinomas has high
prognostic value. J Pathol. 1992; 166: 375-81.
14. Kurokawa H, Zhang M, Matsumoto S et al. The relationship of the
histologic grade at the deep invasive front and the expression of Ki-67
antigen and p53 protein in oral squamous cell carcinoma. J Oral Pathol
Med. 2005; 34: 602-7.
15. Regezi JA, Dekker NP, McMillan A, Ramirez-Amador V, Meneses-
Garcia A, Ruiz-Godoy Rivera LM, et al. p53, p21, Rb, and MDM2
___________________________________________________________________
Referências
42
proteins in tongue carcinoma from patients < 35 versus > 75 years. Oral
Oncol. 1999; 35: 379-83.
16. Bsoul SA, Huber MA, Terezhalmy GT. Squamous Cell Carcinoma of
the Oral Tissues: A Comprehensive Review for Oral Healthcare
Providers. J Contemp Dent Pract. 2005;15: 1-16.
17. Suwa T, Saio M, Umemura N et al. Preoperative radiotherapy
contributes to induction of proliferative activity of CD8+ tumor-infiltrating
T-cells in oral squamous cell carcinoma. Oncol Rep. 2006; 15: 757-63.
18. Keberle M, Ströbel P, Marx A, Hahn D, Hoppe F. CT determination of
lymphocytic infiltration around head and neck squamous cell carcinomas
may be a predictor of lymph node metastases. Eur Arch
Otorhinolaryngol. 2003; 260: 558-64.
19. Loro LL, Vintermyr OK, Liavaag PG, Jonsson R, Johannessen AC. Oral
squamous cell carcinoma is associated with decreased bcl-2/bax
expression ratio and increased apoptosis. Hum Pathol. 1999; 30: 1097-
105.
20. Loro LL, Johannessen AC, Vintermyr OK. Decreased expression of bcl-
2 in moderate and severe oral epithelia dysplasias. Oral Oncol. 2002;
38: 691-8.
21. Popovi
ć B, Jekić B, Novaković I et al. Bcl-2 expression in oral squamous
cell carcinoma. Ann N Y Acad Sci. 2007; 1095: 19-25.
22. Lo Muzio L, Mignogna MD, Pannone G et al. Expression of bcl-2 in oral
squamous cell carcinoma: an immunohistochemical study of 90 cases
with clinico-pathological correlations. Oncol Rep. 2003; 10: 285-91.
23. Angiero F, Del Sordo R , Dessy E et al. Comparative analysis of c-erbB-
2 (HER-2/neu) in squamous cell carcinoma of the tongue: does over-
expression exist? And what is its correlation with traditional diagnostic
parameters? J Oral Pathol Med. 2008 (impress).
24. Kazkayasi M, Hücümenoğlu S, Siriner GI, Hücümenoğlu M. Over-
expression of p53 and c-erbB-2 oncoproteins in laryngeal carcinoma.
Eur Arch Otorhinolaryngol. 2001; 258: 329-35.
25. Ulanovski D, Stern Y, Roizman P, Shpitzer T, Popovtzer A, Feinmesser
R. Expression of EGFR and Cerb-B2 as prognostic factors in cancer of
the tongue. Oral Oncol. 2004; 40: 532-7.
26. Shiga H, Rasmussen AA, Johnston PG et al. Prognostic value of c-
erbB2 and other markers in patients treated with chemotherapy for
recurrent head and neck cancer. Head Neck. 2000; 22: 599-608.
27. Silva SD, Agostini M, Nishimoto IN et al. Expression of fatty acid
synthase, ErbB2 and Ki-67 in head and neck squamous cell carcinoma.
A clinicopathological study. Oral Oncol. 2004; 40: 688-96.
28. Derka S, Vairaktaris E, Papakosta V et al. Cell proliferation and
apoptosis culminate in early stages of oral oncogenesis. Oral Oncol.
2006; 42: 540-50.
29. Myoung H, Kim M-J, Lee J-H, Ok Y-J, PaengJ-Y, Yun P-Y. Correlation
of proliferative markers (Ki-67 and PCNA) with survival and lymph node
metastasis in oral squamous cell carcinoma: a clinical and
histopathological analysis of 113 patients. Int J Oral Maxillofac Surg.
2006; 35: 1005–1010.
Anexos
________________________________________________________________________
Anexos
44
ANEXO A - Certificado do Comitê de Ética em Pesquisa
________________________________________________________________________
Anexos
45
ANEXO B – Normas para publicação da Revista
Journal of Oral Pathology &
Medicine.
Journal of Oral Pathology & Medicine
Edited by:
Erik Dabelsteen
Print ISSN: 0904-2512
Online ISSN: 1600-0714
Frequency: Ten times a year
ISI Journal Citation Reports® Ranking: 2006: 20/49 (Dentistry, Oral Surgery & Medicine); 36/65
(Pathology)
Impact Factor: 1.530
Guide for Authors
1. General
Journal of Oral Pathology & Medicine publishes manuscripts of high scientific quality
representing original clinical, diagnostic or experimental work in oral pathology and oral
medicine. Papers advancing the science or practice of these disciplines will be welcomed,
especially those which bring new knowledge and observations from the application of
techniques within the spheres of light and electron microscopy, tissue and organ culture,
immunology, histochemistry, immunocytochemistry and molecular biology. Review papers on
topical and relevant subjects will receive a high priority and articles requiring rapid publication
because of their significance and timeliness will be included as brief reports not exceeding three
printed pages. Please note that as of 1st September 2007, Journal of Oral Pathology &
Medicine no longer accepts submission of case reports. All submitted manuscripts falling
within the overall scope of the Journal will be assessed by suitably qualified reviewers, but
manuscripts in an incorrect format will be returned to the author without review.
Please read the instructions below carefully for details on the submission of manuscripts, the
journal's requirements and standards as well as information concerning the procedure after a
manuscript has been accepted for publication in Journal of Oral Pathology & Medicine. Authors
are encouraged to visit Blackwell Publishing Author Services for further information on the
preparation and submission of articles and figures.
2. Ethical Guidelines
Journal of Oral Pathology & Medicine adheres to the below ethical guidelines for
publication and research.
2.1. Authorship and Acknowledgements
Authors submitting a paper do so on the understanding that the work has not been published
before, is not being considered for publication elsewhere and has been read and approved by
all authors.
________________________________________________________________________
Anexos
46
Journal of Oral Pathology & Medicine adheres to the definition of authorship set up by The
International Committee of Medical Journal Editors (ICMJE). According to the ICMJE authorship
criteria should be based on substantial contributions to conception and design of, or acquisition
of data or analysis and interpretation of data, and drafting the article or revising it critically for
important intellectual content.
It is a requirement that all authors have been accredited as appropriate upon submission of the
manuscript. Contributors who do not qualify as authors should be mentioned under
Acknowledgements.
Acknowledgements: Under acknowledgements please specify contributors to the article other
than the authors accredited. Acknowledge only persons who have made substantive
contributions to the study. Authors are responsible for obtaining written permission from
everyone acknowledged by name because readers may infer their endorsement of the data and
conclusions.
2.2. Ethical Approvals
Experimentation involving human subjects will only be published if such research has been
conducted in full accordance with ethical principles, including the World Medical Association
Declaration of Helsinki (version, 2002 www.wma.net/e/policy/b3.htm) and the additional
requirements, if any, of the country where the research has been carried out. Manuscripts must
be accompanied by a statement that the experiments were undertaken with the understanding
and written consent of each subject and according to the above mentioned principles. A
statement regarding the fact that the study has been independently reviewed and approved by
an ethical board should also be included. Editors reserve the right to reject papers if there are
doubts as to whether appropriate procedures have been used.
When experimental animals are used the methods section must clearly indicate that adequate
measures were taken to minimize pain or discomfort. Experiments should be carried out in
accordance with the Guidelines laid down by the National Institute of Health (NIH) in the USA
regarding the care and use of animals for experimental procedures or with the European
Communities Council Directive of 24 November 1986 (86/609/EEC) and in accordance with
local laws and regulations.
2.3. Clinical Trials
Clinical trials should be reported using the CONSORT guidelines available at www.consort-
statement.org. A CONSORT checklist should also be included in the submission material.
Journal of Oral Pathology & Medicine encourages authors submitting manuscripts reporting
from a clinical trial to register the trials in any of the following free, public clinical trials registries:
www.clinicaltrials.gov, http://clinicaltrials-dev.ifpma.org/, http://isrctn.org/. The clinical trial
registration number and name of the trial register will then be published with the paper.
2.4. Conflict of Interest
All sources of institutional, private and corporate financial support for the work within the
manuscript must be fully acknowledged, and any potential grant holders should be listed.
Please see Conflicts of Interest for generally accepted definitions on conflict of interest? Please
enclose this information under the heading “Conflict of Interest Stament”.
2.5. Appeal of Decision
Authors who wish to appeal the decision on their submitted paper may do so by emailing the
editor with a detailed explanation for why they find reasons to appeal the decision.
________________________________________________________________________
Anexos
47
2.6. Permissions
If all or parts of previously published illustrations are used, permission must be obtained from
the copyright holder concerned. It is the author's responsibility to obtain these in writing and
provide copies to the Publishers.
2.7. Copyright Assignment
Authors submitting a paper do so on the understanding that the work and its essential
substance have not been published before and is not being considered for publication
elsewhere. The submission of the manuscript by the authors means that the authors
automatically agree to assign exclusive copyright to Blackwell Publishing if and when the
manuscript is accepted for publication. The work shall not be published elsewhere in any
language without the written consent of the publisher. The articles published in this journal are
protected by copyright, which covers translation rights and the exclusive right to reproduce and
distribute all of the articles printed in the journal. No material published in the journal may be
stored on microfilm or videocassettes or in electronic database and the like or reproduced
photographically without the prior written permission of the publisher.
Upon acceptance of a paper, authors are required to assign the exclusive licence to publish
their paper to Blackwell Publishing. Assignment of the exclusive licence is a condition of
publication and papers will not be passed to the publisher for production unless licence has
been assigned. (Papers subject to government or Crown copyright are exempt from this
requirement; however, the form still has to be signed). A completed Exclusive Licence Form
must be sent to the address specified on the Exclusive Licence Form, before any manuscript
can be published. Authors must send the completed original Exclusive Licence Form by regular
mail upon receiving notice of manuscript acceptance, i.e., do not send the Exclusive Licence
form at submission. Faxing or e-mailing the Exclusive Licence Form does not meet
requirements.
For questions concerning copyright, please visit Blackwell Publishing's Copyright FAQ.
3. Manuscript Submission Procedure
Manuscripts should be submitted electronically via the online submission site
http://mc.manuscriptcentral.com/jopm. The use of an online submission and peer review site
enables immediate distribution of manuscripts and consequentially speeds up the review
process. It also allows authors to track the status of their own manuscripts. Complete
instructions for submitting a paper is available online and below. For further instructions, please
contact Editorial Assistant Anne-Marie Engel at am[email protected].
3.1. Getting Started
Launch your web browser (supported browsers include Internet Explorer 5.5 or higher, Safari
1.2.4, or Firefox 1.0.4 or higher) and go to the journal's online Submission Site:
http://mc.manuscriptcentral.com/jopm.
• Log-in or, if you are a new user, click on "register here".
• If you are registering as new user.
- After clicking on "register here", enter your name and e-mail information and click
"Next". Your e-mail information is very important.
- Enter your institution and address information as appropriate, and then click "Next."
- Enter a user ID and password of your choice (we recommend using your e-mail address
as your user ID), and then select your areas of expertise. Click "Finish".
• If you are registered as user, but have forgotten your log in details, enter your e-mail address
under "Password Help". The system will send you an automatic user ID and a new temporary
password.
• Log-in and select "Author Centre".
________________________________________________________________________
Anexos
48
3.2. Submitting Your Manuscript
• After you have logged into your "Author Centre", submit your manuscript by clicking the
submission link under "Author Resources".
• Enter data and answer questions as appropriate. You may copy and paste directly from your
manuscript and you may upload your pre-prepared covering letter.
• Click the "Next" button on each screen to save your work and advance to the next screen.
• You are required to upload your files.
- Click on the "Browse" button and locate the file on your computer.
- Select the designation of each file in the drop down next to the Browse button.
- When you have selected all files you wish to upload, click the "Upload Files" button.
• Review your submission (in HTML and PDF format) before completing your submission by
sending it to the Journal. Click the "Submit" button when you are finished reviewing.
3.3. Manuscript Files Accepted
Manuscripts should be uploaded as Word (.doc) or Rich Text Format (.rft) files (not write-
protected) plus separate figure files. GIF, JPEG, PICT or Bitmap files are acceptable for
submission, but only high-resolution TIF or EPS files are suitable for printing. The files will be
automatically converted to HTML and PDF on upload and will be used for the review process.
The text file must contain the entire manuscript including title page, abstract, text, references,
acknowledgements and conflict of interest statement, tables, and figure legends, but no
embedded figures. In the text, please reference figures as for instance "Figure 1", "Figure 2" etc
to match the tag name you choose for the individual figure files uploaded. Manuscripts should
be formatted as described in the Author Guidelines below. Please note that any manuscripts
uploaded as Word 2007 (.docx) will be automatically rejected. Please save any .docx file as
.doc before uploading.
3.4. Blinded Review
All manuscripts submitted to Journal of Oral Pathology & Medicine will be reviewed by two
experts in the field. Journal of Oral Pathology & Medicine uses single blinded review. The
names of the reviewers will thus not be disclosed to the author submitting a paper.
3.5. Suggest a Reviewer
Journal of Oral Pathology & Medicine attempts to keep the review process as short as possible
to enable rapid publication of new scientific data. In order to facilitate this process, the name
and current email address of a potential international reviewer whom you consider capable of
reviewing your manuscript is requested. Additionally, you may mention non-preferred reviewers
as well.
3.6. Suspension of Submission Mid-way in the Submission Process
You may suspend a submission at any phase before clicking the "Submit" button and save it to
submit later. The manuscript can then be located under "Unsubmitted Manuscripts" and you can
click on "Continue Submission" to continue your submission when you choose to.
3.7. E-mail Confirmation of Submission
After submission you will receive an e-mail to confirm receipt of your manuscript. If you do not
receive the confirmation e-mail after 24 hours, please check your e-mail address carefully in the
system. If the e-mail address is correct please contact your IT department. The error may be
caused by some sort of spam filtering on your e-mail server. Also, the e-mails should be
received if the IT department adds our e-mail server (uranus.scholarone.com) to their whitelist.
3.8. Manuscript Status
You can access Manuscript Central any time to check your "Author Centre" for the status of
your manuscript. The Journal will inform you by e-mail once a decision has been made.
________________________________________________________________________
Anexos
49
3.9. Submission of Revised Manuscripts
To submit a revised manuscripts please locate your manuscript under "Manuscripts with
Decisions" and click on "Submit a Revision". Please remember to delete any old files uploaded
when you upload your revised manuscript.
4. Manuscript Types Accepted
Original Research Articles: of high scientific quality representing original clinical, diagnostic or
experimental work in oral pathology and oral medicine. Papers advancing the science or
practice of these disciplines will be welcomed, especially those which bring new knowledge and
observations from the application of techniques within the spheres of light and electron
microscopy, tissue and organ culture, immunology, histochemistry, immunocytochemistry and
molecular biology.
Review Papers: Journal of Oral Pathology & Medicine commissions review papers and also
welcomes uninvited reviews. Reviews should be submitted via the online submission site:
http://mc.manuscriptcentral.com/jopm and are subject to peer-review.
Case Reports: Please note that as of 1st September 2007, Journal of Oral Pathology &
Medicine no longer accepts submission of case reports.
Brief Reports: Original research material requiring rapid publication because of their
significance and timeliness will be included as Brief Reports. They should not exceed three
pages.
Letters to the Editor: Letters, if of broad interest, are encouraged. Letters should not be
confused with Brief Reports. Letters may deal with material in papers published in Journal of
Oral Pathology & Medicine or they may raise new issues, but should have important
implications.
5. Manuscript Format and Structure
5.1. Page Charge
Articles exceeding 6 published pages (excluding figures and tables) are subject to a charge of
USD163.00 per additional page. One published page amounts approximately to 5,500
characters (excluding figures and tables).
5.2. Format
Language: The language of publication is English. Authors for whom English is a second
language may choose to have their manuscript professionally edited before submission to
improve the English. A list of independent suppliers of editing services can be found at
www.blackwellpublishing.com/bauthor/english_language.asp. All services are paid for and
arranged by the author, and use of one of these services does not guarantee acceptance or
preference for publication.
Abbreviations, Symbols and Nomenclature: Use only standard abbreviations (Vancouver
System). All units will be metric. Use no roman numerals in the text. In decimals, a decimal
point, and not a comma, will be used. Avoid abbreviations in the title. The full term for which an
abbreviation stands should precede its first use in the text unless it is a standard unit of
measurement. Useful is Baren DN, ed. Units, symbols, and abbreviations. A guide for biological
and medical editors and authors. 4. ed. London: Royal Society of Medicine.
Font: When preparing your file, please use only standard fonts such as Times, Times New
Roman or Arial for text, and Symbol font for Greek letters, to avoid inadvertent character
substitutions. In particular, please do not use Japanese or other Asian fonts. Do not use
automated or manual hyphenation.
________________________________________________________________________
Anexos
50
5.3. Structure
All papers submitted to Journal of Oral Pathology & Medicine should include: title page,
abstract, main text, references and tables, figures, figure legends and conflict of interest
statement where appropriate. Manuscripts must conform to the journal style. Manuscripts not
complying with the journal format will be returned to the author(s).
Title Page: Should be part of the manuscript document uploaded for review and include: The
title of the article, a running title of no more than 50 letters and spaces, 2-5 keywords, complete
names and institution for each author, corresponding author's name, address, email address
and fax number.
Abstract: is limited to 250 words in length and should contain no abbreviations. The abstract
should be included in the manuscript document uploaded for review as well as inserted
separately where specified in the submission process. The abstract should convey the essential
purpose and message of the paper in an abbreviated form. For original articles the abstract
should be structured with the following headings in accordance with Index Medicus (Medical
Subject Headings): background, methods, results and conclusions. For other article types,
please choose headings appropriate for the article.
Main Text of Original Articles: should be divided into introduction, material and methods,
results and discussion.
Introduction: should clearly state the purpose of the article. Give only strictly pertinent
references. Exhaustive literature reviews are inappropriate.
Materials and Methods: must contain sufficient detail such that, in combination with the
references cited, all clinical trials and experiments reported can be fully reproduced. As a
condition of publication, authors are required to make materials and methods used freely
available to academic researchers for their own use. This may for example include antibodies
etc. Other supporting data sets must be made available on the publication date from the authors
directly.
(i) Clinical trials: Clinical trials should be reported using the CONSORT guidelines
available at www.consort-statement.org. A CONSORT checklist should also be
included in the submission material.
Journal of Oral Pathology & Medicine encourages authors submitting manuscripts
reporting from a clinical trial to register the trials in any of the following free, public
clinical trials registries: www.clinicaltrials.gov, http://clinicaltrials-dev.ifpma.org/,
http://isrctn.org/. The clinical trial registration number and name of the trial register
will then be published with the paper.
(ii) Experimental subjects: Experimentation involving human subjects will only be
published if such research has been conducted in full accordance with ethical
principles, including the World Medical Association Declaration of Helsinki (version,
2002 www.wma.net/e/policy/b3.htm) and the additional requirements, if any, of the
country where the research has been carried out. Manuscripts must be
accompanied by a statement that the experiments were undertaken with the
understanding and written consent of each subject and according to the above
mentioned principles. A statement regarding the fact that the study has been
independently reviewed and approved by an ethical board should also be included.
Editors reserve the right to reject papers if there are doubts as to whether
appropriate procedures have been used.
When experimental animals are used the methods section must clearly indicate that
adequate measures were taken to minimize pain or discomfort. Experiments should
be carried out in accordance with the Guidelines laid down by the National Institute
of Health (NIH) in the USA regarding the care and use of animals for experimental
________________________________________________________________________
Anexos
51
procedures or with the European Communities Council Directive of 24 November
1986 (86/609/EEC) and in accordance with local laws and regulations.
(iii)
Suppliers: Suppliers of materials should be named and their location (town,
state/county, country) included.
Results: Present your results in logical sequence in the text, tables, and illustrations. Do not
repeat in the text all the data in the tables, illustrations, or both: emphasize or summarize only
important observations.
Discussion: Emphasize the new and important aspects of the study and conclusions that follow
from them. Do not repeat in detail data given in the Results section. Include in the Discussion
the implications of the findings and their limitations and relate the observations to other relevant
studies.
Main Text of Review Articles comprise an introduction and a running text structured in a
suitable way according to the subject treated. A final section with conclusions may be added.
Acknowledgements: Under acknowledgements please specify contributors to the article other
than the authors accredited. Acknowledge only persons who have made substantive
contributions to the study. Authors are responsible for obtaining written permission from
everyone acknowledged by name because readers may infer their endorsement of the data and
conclusions. See also above under Ethical Guidelines.
Conflict of Interest Statement: All sources of institutional, private and corporate financial
support for the work within the manuscript must be fully acknowledged, and any potential grant
holders should be listed. Please see Conflicts of Interest for generally accepted definitions on
conflict of interest? See also above under Ethical Guidelines.
5.4. References
References should be kept to the pertinent minimum and numbered consecutively in the order
in which they appear in the text. Identify references in text, tables, and legends by Arabic
numerals (in parentheses). References cited only in the tables or figure legends should be
numbered in accordance with a sequence established by the first identification of that figure or
table in the text. Use the style of the examples below, which are based on the formats used in
Index Medicus. Try to avoid using abstracts as references. Include manuscripts accepted, but
not published; designate the abbreviated title of the journal followed by (in press). Information
from manuscripts not yet accepted, should be cited in the text as personal communication. The
references must be verified by the author(s) against the original documents. Titles should be
abbreviated in accordance with the style used in Index Medicus and the Vancouver System.
We recommend the use of a tool such as EndNote or Reference Manager for reference
management and formatting. EndNote reference styles can be searched for here:
www.endnote.com/support/enstyles.asp . Reference Manager reference styles can be searched
for here: www.refman.com/support/rmstyles.asp
Examples of the Journal's reference style:
(1) Standard journal article
(List all authors when 6 or less; when 7 or more, list only the first 3 and add et al.)
BUCHNER A, SCIUBBA JJ. Peripheral epithelial odontogenic tumors: a review. Oral Surg
Oral Med Oral Pathol 1987; 63: 688-97.
HEINIC GS, GREENSPAN D, MACPHAIL LA, et al. Oral Histoplasma capsulatum infection
in association with HIV infection: a case report. J Oral Pathol Med 1992; 21: 85-9.
________________________________________________________________________
Anexos
52
(2) Corporate author
European Collaborative Study. Risk factors for mother-to-child transmission of HIV-1.
Lancet 1992; 339: 1007-12.
(3) No author given
Anonymous. `The importance of being early' [leader]. Br Dent J 1991; 170: 167.
(4) Journal supplement
MØLLER-PETERSEN J. Evaluation of diagnostic tests. Design and phases. Scand J Clin
Lab Invest 1992; 52: suppl. (208): 35-50.
CROSS SS, SCHOLFIELD JH, KENNEDY A, COTTON DWK. Measuring the fractal
dimension of tumour borders. J Pathol 1992; 168: 117A (abstr).
(5) Journal paginated by issue
HILLAM C. Dentistry in Europe in the 1790's. Dent Historian 1992; 22: (May): 31-4.
(6) Book
PINDBORG JJ. Atlas of diseases of the oral mucosa. Copenhagen: Munksgaard, 1992: 50-
66.
(7) Chapter in a book
VAN DER WAAL I. Salivary gland neoplasms. In: PRABHU SR, WILSON DF, DAFTARY
DK, JOHNSON NW, eds. Oral diseases in the tropics. Oxford: Oxford Medical, 1992; 478-
86.
(8) Published proceedings paper
DRINNAN AJ. Review of the literature: educational aspects of oral medicine. In: MILLARD
HD, MASON DK, eds. World workshop on oral medicine. Chicago: Year Book Medical,
1989; 5-11.
(9) Agency publication
MUIR C, WATERHOUSE J, MACK T, POWELL J, WHELAN S. Cancer incidence in five
continents: Vol. 5. Lyon: International Agency for Research on Cancer, 1987; IARC
Scientific Publications No. 88.
(10) Dissertation or thesis
CHUNGPANICH S. The diagnostic and prognostic potential of nucleolar organizer regions
in oral epithelial dysplasia. MMedSci Thesis, University of Sheffield, 1989.
a. Tables, Figures and Figure Legends
Tables: should be numbered consecutively with Arabic numerals. Type each table on a
separate sheet, with titles making them self-explanatory. Due regard should be given to the
proportions of the printed page.
________________________________________________________________________
Anexos
53
Figures: All figures should clarify the text and their number be kept to a minimum. Text on
figures should be in CAPITALS. Line drawings should be professionally drawn; half-tones
should exhibit high contrast.
All figures and artwork must be provided in electronic format. Please save vector graphics
(e.g. line artwork) in Encapsulated Postscript Format (EPS) and bitmap files (e.g. half-
tones) or clinical or in vitro pictures in Tagged Image Format (TIFF). Detailed information on
our digital illustration standards can be found at
www.blackwellpublishing.com/bauthor/illustration.asp
Unnecessary figures and parts (panels) of figures should be avoided: data presented in
small tables or histograms, for instance, can generally be stated briefly in the text instead.
Figures should not contain more than one panel unless the parts are logically connected.
Figures divided into parts should be labeled with a lower-case, boldface, roman letter, a, b,
and so on, in the same type size as used elsewhere in the figure. Lettering in figures should
be in lower-case type, with the first letter capitalized. Units should have a single space
between the number and unit, and follow SI nomenclature common to a particular field.
Unusual units and abbreviations should be spelled out in full or defined in the legend. Scale
bars should be used rather than magnification factors, with the length of the bar defined in
the legend rather than on the bar itself. In general visual cues (on the figures themselves)
are preferred to verbal explanations in the legend (e.g. broken line, open red triangles etc).
Preparation of Electronic Figures for Publication: Although low quality images are
adequate for review purposes, print publication requires high quality images to prevent the
final product being blurred or fuzzy. Submit EPS (lineart) or TIFF (halftone/photographs)
files only. MS PowerPoint and Word Graphics are unsuitable for printed pictures. Do not
use pixel-oriented programmes. Scans (TIFF only) should have a resolution of 300 dpi
(halftone) or 600 to 1200 dpi (line drawings) in relation to the reproduction size (see below).
EPS files should be saved with fonts embedded (and with a TIFF preview if possible).
For scanned images, the scanning resolution (at final image size) should be as follows to
ensure good reproduction: lineart: >600 dpi; half-tones (including gel photographs): >300
dpi; figures containing both halftone and line images: >600 dpi.
Further information can be obtained at Blackwell Publishing's guidelines for figures:
www.blackwellpublishing.com/bauthor/illustration.asp.
Check your electronic artwork before submitting it:
www.blackwellpublishing.com/bauthor/eachecklist.asp.
Permissions: If all or parts of previously published illustrations are used, permission must
be obtained from the copyright holder concerned. It is the author's responsibility to obtain
these in writing and provide copies to the Publishers.
Figure Legends: should be a separate section of the manuscript, and should begin with a
brief title for the whole figure and continue with a short description of each panel and the
symbols used: they should not contain any details of methods.
b. Supplementary Material
Supplementary Material, such as data sets or additional figures or tables, that will not be
published in the print edition of the journal, but which will be viewable via the online edition,
can be submitted.
It should be clearly stated at the time of submission that the Supplementary Material is
intended to be made available through the online edition. If the size or format of the
Supplementary Material is such that it cannot be accommodated on the journal's Web site,
________________________________________________________________________
Anexos
54
the author agrees to make the Supplementary Material available free of charge on a
permanent Web site, to which links will be set up from the journal's Web site. The author
must advise Blackwell Publishing if the URL of the Web site where the Supplementary
Material is located changes. The content of the Supplementary Material must not be altered
after the paper has been accepted for publication.
The availability of Supplementary Material should be indicated in the main manuscript by a
paragraph, to appear after the References, headed "Supplementary Material" and providing
titles of figures, tables, etc. In order to protect reviewer anonymity, material posted on the
authors Web site cannot be reviewed. The Supplementary Material is an integral part of the
article and will be reviewed accordingly.
6. After Acceptance
Upon acceptance of a paper for publication, the manuscript will be forwarded to the
Production Editor who is responsible for the production of the journal.
6.1 Proof Corrections
Proofs will be sent via e-mail as an Acrobat PDF (portable document format) file. The e-mail
server must be able to accept attachments up to 4 MB in size. Acrobat Reader will be
required in order to read this file. This software can be downloaded (free of charge) from the
following Web site: www.adobe.com/products/acrobat/readstep2.html.
This will enable the file to be opened, read on screen, and printed out in order for any
corrections to be added. Further instructions will be sent with the proof. Proofs will be
posted if no e-mail address is available; in your absence, please arrange for a colleague to
access your e-mail to retrieve the proofs.
Proofs of the paper should be corrected, signed and returned without delay. Please ensure
that you can be contacted during this time. As changes to proofs are costly, we ask you to
only correct typesetting errors. Please note that the author is responsible for all statements
made in his work, including changes made by the copy editor.
6.2 Early Online Publication Prior to Print
Journal of Oral Pathology & Medicine is covered by Blackwell Publishing's OnlineEarly
service. OnlineEarly articles are complete full-text articles published online in advance of
their publication in a printed issue. OnlineEarly articles are complete and final. They have
been fully reviewed, revised and edited for publication, and the authors' final corrections
have been incorporated. Because they are in final form, no changes can be made after
online publication. The nature of OnlineEarly articles means that they do not yet have
volume, issue or page numbers, so OnlineEarly articles cannot be cited in the traditional
way. They are therefore given a Digital Object Identifier (DOI), which allows the article to be
cited and tracked before it is allocated to an issue. After print publication, the DOI remains
valid and can continue to be used to cite and access the article.
6.3 Online Production Tracking
Online production tracking is available for your article through Blackwell's Author Services.
Author Services enables authors to track their article - once it has been accepted - through
the production process to publication online and in print. Authors can check the status of
their articles online and choose to receive automated e-mails at key stages of production.
The author will receive an e-mail with a unique link that enables them to register and have
their article automatically added to the system. Please ensure that a complete e-mail
address is provided when submitting the manuscript. Visit
www.blackwellpublishing.com/bauthor for more details on online production tracking and for
a wealth of resources including FAQs and tips on article preparation, submission and more.
________________________________________________________________________
Anexos
55
6.4 Author Material Archive Policy
Please note that unless specifically requested, Blackwell Publishing will dispose of all
hardcopy or electronic material submitted two months after publication. If you require the
return of any material submitted, please inform the editorial office or production editor as
soon as possible.
6.5 Offprints
A PDF offprint of the online published article will be provided free of charge to the
corresponding author, and may be distributed subject to the Publisher's terms and
conditions. Additional paper offprints may be ordered online. Please click on the following
link, fill in the necessary details and ensure that you type information in all of the required
fields: Offprint Cosprinters If you have queries about offprints please email
offprint@cosprinters.com
6.6 Author Services
For more substantial information on the services provided for authors, please see Blackwell
Publishing Author Services.
Livros Grátis
( http://www.livrosgratis.com.br )
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