( PDF ) Extração e estabilidade de corante azul de jenipapo (Genipa americana L.)

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Isis Rodrigues Toledo Renhe

EXTRAÇÃO E ESTABILIDADE DO CORANTE AZUL

DE JENIPAPO (Genipa americana L.)

Dissertação apresentada à

Universidade Federal de Viçosa, como

parte das exigências do Programa de

Pós-Graduação em Ciência e

Tecnologia de Alimentos, para

obtenção do título de Magister

Scientiae.

Viçosa

Minas Gerais – Brasil

2008

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Ficha catalográfica preparada pela Seção de Catalogação e

Classificação da Biblioteca Central da UFV

Renhe, Isis Rodrigues Toledo, 1981-

R412e Extração e estabilidade do corante azul de jenipapo

2008 (Genipa americana L.) / Isis Rodrigues Toledo Renhe.

– Viçosa, MG, 2008.

xi, 49f.: il. (algumas col.) ; 29cm.

Orientador: Paulo César Stringheta.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de

Viçosa.

Referências bibliográficas: f. 46-49.

1. Alimentos - Aditivos. 2. Jenipapo - Corantes.

3. Extração (Química) - Corantes. 4. Genipa americana L.

I. Universidade Federal de Viçosa. II.Título.

CDD 22.ed. 664.06

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iii

SUMÁRIO

LISTA DE TABELAS

LISTA DE FIGURAS

viii

RESUMO

ABSTRACT

Introdução Geral

Revisão Bibliográfica

2.1.

Cor no Alimento

2.2.

A cor e sua Avaliação Instrumental

2.3.

Jenipapo

2.3.1.

Caracterização

Físico

Química

do Fruto

2.3.2.

Extração de Corante de Jenipapo

Capítulo 1

–

feito do

pH, T

emperatura e Solventes

obre a

xtração de

orante

de Jenipapo

Introdução

Material e Mé

todos

Resultados e Discussão

Conclusão

Capítulo 2

–

nfluência de

pH, O

xigênio e Luz na

stabilidade da Cor dos

xtratos

Introdução

Material e Métodos

Resultados e discussão

3.1.

Estabilidade dos Extratos Obtidos com Etanol 50%

3.2.

Est

abilidade dos Extratos Obtidos com Etanol 95%

Conclusão

CONCLUSÃO GERAL

REFERÊNCIAS BIBLIOGR

ÁFICAS

LISTA DE TABELAS

REVISÃO BIBLIOGRÁFIC

Tabela 1

Composição química dos frutos de jenipapo verde, “de vez” e

maduro 15

CAPÍTULO 1

–

EFE

ITO DO

H, TEMPERATURA E SOLVENTES SOBRE A

EXTRAÇÃO DE CORANTE DE JENIPAPO

Tabela 1

Média dos valores quantitativos para características de cor dos

extratos obtidos nas diferentes condições de pH e temperatura

utilizados na extração 26

CAPÍTULO 2

–

INFLUÊNCIA DE

pH, OXIGÊNIO E LUZ NA

ESTABILIDADE DA COR DOS EXTRATOS OBTIDOS

Tabela 1

Médias dos desvios dos tratamentos ao longo do tempo de

armazenamento em semanas, em solvente etanol 50%, para diferentes

pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença

e ausência)

Tabela 2

Médias de croma ou saturação da cor dos tratamentos ao longo do

tempo de armazenamento em semanas, em solvente etanol 50%, para

diferentes pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz

(presença e ausência)

Tabela 3

Médias de

tonalidade

da cor dos tratamentos ao longo do tempo de

armazenamento em semanas, em solvente etanol 50%, para diferentes

pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença

e ausência)

Tabela 4

Médias de desvio da cor dos tratamentos ao longo do tempo de

armazenamento em semanas, em solvente etanol 95%, para diferentes

pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença

e ausência)

Tabe

la 5

Médias de croma e saturação da cor dos tratamentos ao longo do

tempo de armazenamento em semanas, em solvente etanol 95%, para

diferentes pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz

(presença e ausência)

Tabela 6

Médias de t

onalidade da cor dos tratamentos ao longo do tempo de

armazenamento em semanas, em solvente etanol 95%, para diferentes

pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença

e ausência)

LISTA DE FIGURAS

REVISÃO BIBLIOGRÁFIC

Figur

a 1

Sólido de Hunter

Figura 2

Estrutura química do ácido geniposídico

(A)

e do geniposídeo

(B)

Figura 3

Estrutura química da genipina

Figura 4

Reações cruzadas envolvendo genipina

CAPÍTULO 1

–

EFEITO DO

H, TEMPERATURA E SOLVENTES SO

BRE A

EXTRAÇÃO DE CORANTE DE JENIPAPO

Figura 1

Extratos de corante de jenipapo obtidos em diversas condições

Figura 2

Curva de superfície de resposta do desvio do extrato para as

variáveis pH e temperatura

Figura 3

Comportamento da coloração expressa em desvio na extração com

solvente etanol 50% em relação à temperatura 28

Figura 4

Comportamento da coloração expressa em desvio na extração com

solvente etanol 95% em relação à temperatura 28

Figura 5

Comportam

ento da coloração expressa em desvio na extração com

solvente água em relação à temperatura 29

Figura 6

Fruto verde de jenipapo normal

(A)

e com formação prévia de coloração

azul (B)

CAPÍTULO 2

–

INFLUÊNCIA DE

pH, OXIGÊNIO E LUZ NA ESTABILIDADE

DA COR DOS EXTRATOS OBTIDOS

Figura 1

Fluxograma representativo do experimento do estudo da estabilidade

dos extratos

Figura 2

Comportamento do desvio em relação ao padrão dos tratamentos

ao longo do tempo de armazenamento em semanas, em solvente

etanol 50%, para diferentes pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e

atmosfera inerte) e luz (presença e ausência) 36

Figura 3

Comportamento do desvio em relação ao padrão dos tratamentos ao

longo do tempo de armazenamento em semanas, em solvente etanol

95%, para diferentes pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e atmosfera

inerte) e luz (presença e ausência)

AGRADECIMENTOS

Aos meus pais que sempre me incentivaram, serviram de exemplo e que

compartilharam dos meus sonhos. Tudo que sou devo a vocês.

À minha família, em especial à minha irmã e avós, que sempre acreditaram que eu

podia ir além e que estão sempre torcendo por mim.

Ao Rafael pelo amor, companheirismo, apoio e paciência incondicionais, sem os

quais seria muito mais difícil chegar até aqui. Obrigada por fazer parte da minha vida.

À Universidade Federal de Viçosa e ao Departamento de Tecnologia de Alimentos

pela oportunidade de realização desse mestrado.

Ao Professor Paulo César Stringheta, por toda orientação e pela confiança

depositada em mim.

Ao Professor Fabyano Fonseca e Silva, pela prontidão com que sempre me atendeu

e pela ajuda na parte estatística, tornando sólida toda a discussão desse trabalho.

À Professora Nilda de Fátima Ferreira Soares por todas as críticas e sugestões, por

ajudar a enriquecer e melhorar esse trabalho.

À Aline Manke Nachtigall pela companhia e conselhos durante a execução desse

trabalho e, em especial, por todas as sugestões e correções apresentadas antes e durante a

defesa.

À Taila, que sempre esteve disposta a me ajudar e se comprometeu com essa tese

como se fosse sua. Obrigada pela companhia e amizade.

À Pollyanna por todas as dicas e pela amizade e a Priscila pela companhia e ajuda

no laboratório.

Ao Valério que sempre que possível me ajudou na execução desse trabalho e pela

disponibilidade em resolver todos os imprevistos e contratempos.

À Andréia que entendeu minha dificuldade e à sua mãe que se prontificou a

conseguir jenipapo para que essa tese se realizasse.

Ao Celso e o pessoal do horto que se empenharam em conseguir frutos para meus

primeiros testes.

A tantos amigos que fizeram parte da minha história em Viçosa e àqueles que

mesmo de longe sempre torceram por mim. Em especial aqueles que estiveram presentes no

vii

decorrer do mestrado: ao Dudu BQI e a Ana Carol por toda força e companhia, a Gabi, a

Marina e a Nathi pela acolhida na nossa velha república, a Aline que me deu paz quando

precisei, ao Tofe que sempre “tira o meu sossego”, e àqueles que sempre estiveram

presentes, como a Júnia, a Talita, a Vanessa, a Fafá, o Fellipe, o Jorginho, o Denis e o Fred.

Obrigada a todos que de alguma forma contribuíram para a execução e o

desenvolvimento dessa tese. Espero não ter esquecido ninguém.

viii

BIOGRAFIA

ISIS RODRIGUES TOLEDO RENHE, filha de Sylvio Renhe Júnior e Ione

Rodrigues Toledo Renhe, nasceu em Juiz de Fora, Minas Gerais, em 13 de janeiro de 1981.

Em 1999 formou-se Técnica em Laticínios pelo Instituto de Laticínios “Cândido

Tostes” em Juiz de Fora, Minas Gerais.

Graduou-se Engenheira de Alimentos em janeiro de 2005, pela Universidade

Federal de Viçosa, Minas Gerais.

Em outubro de 2007 ingressou no curso de mestrado em Ciência e Tecnologia de

Alimentos, na Universidade Federal de Viçosa, Minas Gerais, defendendo tese em abril de

2008.

RESUMO

RENHE, Isis Rodrigues Toledo, M.Sc., Universidade Federal de Viçosa, abril de 2008.

Extração e estabilidade do Corante azul de Jenipapo (Genipa americana L.).

Orientador: Paulo César Stringheta. Co-orientadores: Nilda de Fátima Soares e Tânia

Toledo de Oliveira.

O presente trabalho teve por objetivo a avaliação da potencialidade do fruto do jenipapo

como fonte de corante azul natural, objetivando torná-lo tecnicamente viável, bem como

identificar o solvente adequado para a extração dos pigmentos do jenipapo, avaliar o efeito

do pH e da temperatura na produção do corante, e estudar a estabilidade dos pigmentos

obtidos por diferentes solventes. Para a obtenção do corante o experimento foi conduzido

para três níveis de solvente (água, solução aquosa de etanol 50% e álcool etílico 95%); seis

níveis de pH (4,0; 5,0; 6,0; 7,0; 8,0 e 9,0); e cinco níveis de temperatura (35; 45; 55; 65 e

75°C), totalizando 90 tratamentos. Os corantes obtidos foram avaliados por colorimetria

quanto ao desvio em relação ao padrão sintético azul de indigotina, sendo considerados

melhores aqueles que apresentaram menor desvio. Visualmente observou-se um maior

escurecimento do azul, com tendência ao preto, quando a temperatura foi aumentada, sem,

entretanto, descaracterizar a cor. As melhores condições obtidas foram em pH 4,0 a 75°C.

O mesmo valor de temperatura foi considerado ótimo para os solventes etanólicos, porém o

ótimo para água foi de 55°C. Para os testes de estabilidade foram feitas extrações com os

solventes etanólicos (50% e 95%), pois foram os que apresentaram visualmente maior

poder extrator, originando extratos com maior intensidade da cor azul. A escolha dos

solventes alcoólicos em detrimento da água foi também fundamentada na viabilidade

econômica da obtenção dos corantes, uma vez que a eliminação de água torna o processo

demorado e caro. As extrações foram efetuadas nas condições ótimas definidas nos testes

de extração no capítulo 1: pH 4,0 e 75°C. Os parâmetros avaliados foram pH, oxigênio e

luz. Os extratos foram adicionados de solução tampão e anti-fúngico, colocados em vidros

fechados, e armazenados. As amostras foram divididas em duas soluções-tampão de pH

distintos (4,0 e 6,0) e as amostras foram novamente divididas em outros dois grupos, sendo

um das amostras que foram simplesmente lacradas e outro que recebeu nitrogênio antes de

ser lacrado. Antes do armazenamento houve uma nova divisão para avaliar o parâmetro luz,

onde um grupo foi protegido de qualquer luminosidade e outro ficou diretamente exposto a

luz UV. Para a solução de etanol 50%, o tratamento nas condições de pH 4,0 / oxigênio /

escuro foi aquele que apresentou melhor manutenção da cor e maior saturação. Para o

solvente etanol 95% observou-se uma menor estabilidade nos tratamentos em maior pH

(6,0), com pior desempenho quando o pH 6,0 estava associado à presença de oxigênio e

luz. Na saturação da cor o inverso foi observado, com melhor desempenho dos tratamentos

em pH 6,0 e destaque para as condições de pH 6,0 / oxigênio / escuro. Com esse trabalho

foi possível observar que o jenipapo é uma fonte potencial para a obtenção de corante azul

natural, apresentando inúmeras variações de tonalidade que podem ser obtidas alterando-se

as condições de extração, e exploradas de acordo com a intenção de aplicação. A obtenção

desse corante azul complementa a disponibilidade das cores primárias na forma de corantes

naturais, permitindo a combinação para obtenção das demais colorações para alimentos.

ABSTRACT

RENHE, Isis Rodrigues Toledo, M.Sc., Universidade Federal de Viçosa, April, 2008.

Extraction and estability of blue colorant from Jenipapo (Genipa americana L.).

Advisor: Paulo César Stringheta. Co-advisors: Nilda de Fátima Soares and Tânia Toledo

de Oliveira.

The aim of this present study was to evaluate the jenipapo fruit as a natural blue

colorant source to make it technical viable, as well as identify the best solvent to extract

jenipapo’s pigment, evaluate the pH and temperature effects on colorant production and

colorant stability obtained from different solvents. The colorant was obtaining using three

different solvents (water, alcohol water solution 50%, and alcohol 95%), six different pHs

(4,0; 5,0; 6,0; 7,0; 8,0 e 9,0); and five different temperatures (35; 45; 55; 65 e 75°C) in a

total of 90 treatments. These colorants were analyzed for color measurement. The best

condition of extraction was pH 4,0 at 75°C. The same temperature was the best to extract in

alcohol solvents but not to water. The best temperature to water extraction was 55°C. The

best conditions (pH 4,0 a 75°C) was used to obtain alcohol extracts and then analyzed the

stability. It was chose the alcohol extracts because they showed the best colors and it is less

expansive eliminated alcohol than water. The extracts were added with buffer and

antifungical solutions and then they were storage in recipients to observe the effect of pH,

oxygen and light. Samples were divided in two different pH buffer solution (4,0 and 6,0)

then it was split in two groups, one of them receiving nitrogen before be sealed and the

other still with the local atmosphere. After that another split was done and one group was

put out of light and the other was put directly into UV light to evaluate light influence.

There was a significant influence between conditions and time of storage in both of extract

solutions alcohol 50% and 95%. On alcohol 50%, the best conditions were pH 4,0 / oxygen

/ dark and was that one who was the best to maintain the color and saturation. On alcohol

95%, the smallest stability was observed in pH 6,0 and the worse condition was identified

when occurred presence of oxygen and light. It was observed the opposite in saturation

with the best saturation in pH 6,0. It was possible observe with this study that jenipapo is an

xii

interesting natural source of blue pigment because it is possible to obtain a lot of different

blue colors changing the extractions conditions.

1. INTRODUÇÃO GERAL

Os corantes vêm sendo empregados há milhares de anos. Em 5.000 a.C. há relatos

do uso de corantes em cosméticos e a partir de 1500 a.C os corantes naturais como a

cúrcuma, a páprica e o açafrão passaram a ser utilizados para colorir alimentos

(MASCARENHAS, 1998). Os corantes naturais foram os pioneiros na arte de colorir,

adquirindo maior poder tintorial e durabilidade pela adição de sais de alumínio e ferro.

A partir do século XIX passou-se a extrair e produzir corantes sintéticos, sendo

denominados também de artificiais, e utilizados nos alimentos para conferir cor ou repor a

cor natural perdida durante os processos de industrialização e/ou estocagem. A aparência e

a cor de um alimento estão relacionadas com a aceitação e o desejo do consumidor em

consumir um produto, afetando a reação inicial. Ela também está relacionada com a

qualidade de um alimento.

Os corantes podem ser adicionados ao alimento com o objetivo de reforçar a cor

presente no alimento, uniformizar a cor, restaurar a aparência original do alimento cuja cor

foi afetada pelo processamento e ainda, para colorir alimentos que normalmente não

possuem cor, como açúcar e refrigerante (HENRY, 1996).

Os corantes sempre geraram muita controvérsia entre os pesquisadores, órgãos

governamentais e consumidores. Há linhas que defendem a utilização dos corantes

sintéticos, outras defendem a sua substituição pelos corantes naturais e, ainda, há aqueles

que acham desnecessária sua aplicação. No entanto, há um consenso geral de que a busca

por alimentos mais saudáveis, por parte dos consumidores, tem levado a uma substituição

dos corantes sintéticos pelos naturais. Em alguns países o emprego dos corantes sintéticos é

até mesmo proibido como é o caso da Noruega e Suíça.

A busca por qualidade de vida e o desejo de uma vida saudáve l resultam na procura

por alimentos naturais. Os corantes naturais vão de encontro com esse desejo porque além

de conferirem cor aos alimentos, podem contribuir com propriedades sensoriais, além de

ser uma fonte importante de compostos antioxidantes e substâncias antimicrobianas. Dentre

os corantes naturais utilizados na indústria de alimentos, os principais são urucum,

cúrcuma, carmim, pápricas, antocianinas e clorofila (MASCARENHAS, 1998).

Nos últimos anos, a inocuidade dos corantes sintéticos começou a ser questionada,

levando à proibição de alguns deles em função da descoberta de suas toxicidades. Devido a

essa limitação e à tendência mundial de consumir produtos chamados “naturais”, o

interesse pelos corantes naturais tem crescido substancialmente (ROSA, 2004).

As indústrias que utilizam corantes sintéticos usam como justificativa o fato de os

corantes naturais apresentarem aplicação limitada devido a fatores como a reduzida

estabilidade à luz; estabilidade a uma faixa restrita de pH e temperatura; baixa

uniformidade entre os diferentes lotes; necessidade de purificação do extrato, que leva à

produção em quantidades bem menores do que as necessidades do mercado, e baixo poder

tintorial, quando comparados aos corantes sintéticos (HENRY, 1996).

Entretanto, os corantes naturais como as betalaína s, o carmim o β-caroteno, a

norbixina e a curcumina, por exemplo, muito utilizados pela indústria alimentícia, possuem

cores intensas e seu uso em alimentos, geralmente, resulta em doses ínfimas para obtenção

do efeito desejado. Henry (1996) faz uma comparação interessante entre as absortividades

de alguns corantes naturais com os corantes azo que possuem matizes bem similares. O

autor verificou que alguns corantes naturais, em condições idênticas de análise, são

consideravelmente mais intensos que os corantes sintéticos em questão.

Com a necessidade de substituir vários corantes artificiais, a indústria de alimentos

recorreu a uma série de pigmentos naturais, que vão desde partes comestíveis de animais e

insetos, sucos vegetais e até substâncias extraídas e purificadas. Uma enorme variedade de

novas fontes tem sido descoberta e pesquisada na natureza. Destacando-se a grande

biodiversidade das matas tropicais, o Brasil, com a Mata Atlântica e a Amazônia, consiste

em um país com grande potencial para pesquisas nesse campo.

No entanto, o grande problema da indústria alimentícia é encontrar uma fonte

natural de corante azul. Por se constituir de uma cor primária, conjuntamente com o

amarelo e o vermelho permite a produção de cor em todas as tonalidades requeridas pelas

indústrias de alimentos. Na natureza somente as antocianinas apresentam essa tonalidade

em determinadas substâncias, porém, não são estáveis. Por isso o uso de corantes sintéticos

se faz necessário em produtos onde se deseja a cor azul ou necessite desta cor pra dar

origem a outras tonalidades, como o roxo e o violeta. Isso gera outro problema, pois na

maioria das vezes esse corante sintético é utilizado em confeitos para crianças, agravando

as possibilidades de efeitos indesejáveis, como alergia e intoxicação. Essa dificuldade leva

a necessidade de pesquisas em cima de possíveis fontes para a produção de um corante azul

natural, que tendem a ser menos tóxicos, mas que também demandam pesquisas quanto a

sua segurança alimentar.

Uma dessas possíveis fontes que vem sendo pesquisada é o Streptomyces coelicolor,

um tipo de actinomiceto, que é capaz de sintetizar pigmentos azuis. Além do pigmento

azul, observou-se a presença de outro composto, denominado “actinorhodim”, um

antibiótico capaz de inibir bactérias gram positivas como Staphylococcus aureus (ZHANG

et al., 2006). O pigmento extraído deste microorganismo foi classificado como substância

não tóxica (LD

> 15.000 mg.kg

-1

). As boas características deste pigmento são um

indicativo de seu potencial como corante para ser empregado na indústria de processamento

de alimentos, notadamente em bebidas e bolos. Entretanto, por limitações culturais, alguns

povos podem se mostrar não favoráveis ao uso de um corante proveniente de

microrganismo. Além disso, o fato do microrganismo produzir um antibiótico pode gerar

discussões quanto a sua segurança.

Uma alternativa possível é a busca de matéria-prima vegetal capaz de fornecer um

corante azul. Apesar de haver relatos em literatura do uso de jenipapo como fonte de

corante azul, esse nunca foi explorado em relação a sua viabilidade técnica. Sendo assim, o

presente trabalho teve por objetivo a avaliação da potencialidade do fruto do jenipapo como

fonte de corante azul natural, objetivando torná-lo tecnicamente viável, bem como

identificar o solvente adequado para a extração dos pigmentos do jenipapo, avaliando o

efeito do pH e da temperatura na produção do corante, e estudar a estabilidade dos

pigmentos obtidos por diferentes solventes.

2. REVISÃO BIBLIOGRÁFICA

2.1. COR NO ALIMENTO

A primeira característica observada em um alimento é a cor, e essa pré-determina

expectativas de sabor e qualidade. A cor é um importante fator na escolha de um alimento.

Quando cor e sabor são corretamente correlacionados, isto é, a cor é característica do

produto, o sabor é imediatamente identificado na maioria dos casos (HENRY, 1996). A

memória leva, por exemp lo, à rejeição de alimentos que fogem do padrão como morangos

azuis, carne amarela e beterraba verde.

Desde sempre, corantes naturais, especiarias, ervas e vegetais têm feito parte da

dieta diária do homem. Eles vêm sendo consumidos por gerações, auxiliando a

identificação de alimentos e a avaliação do seu paladar. A cor define o valor estético do

alimento, determina a expectativa do consumidor quanto ao sabor e textura e regula o

apetite (STINTZING & CARLE, 2004). Para a indústria de alimentos a manutenção da

aparência do alimento o mais próxima do natural é o maior desafio, admitindo-se, que a cor

pode ser alterada pela ação da luz, temperatura, oxigênio, íons metálicos e enzimas

endógenas. Além disso, a cor de frutas e vegetais varia com as estações e condições de

cultivo, colheita e tratamentos pós-colheita. Consequentemente há uma necessidade

tecnológica de colorir o alimento com o objetivo de restaurar a cor natural do mesmo, e

compensar as variações naturais do produto e as alterações que ocorrem durante a produção

industrial (STINTZING & CARLE, 2004).

Não há dúvidas de que é tecnologicamente viável obter corantes naturais de plantas

e mic rorganismos, uma vez que há na natureza uma enorme quantidade de pigmentos que

não foram suficientemente estudados. Porém, deve-se avaliar a viabilidade para a sua

produção industrial. Assim, o cultivo deve ser em larga escala, de fácil colheita e

estocagem, e a extração tem que ser viável economicamente.

A cultura de tecidos tem sido colocada como uma boa alternativa para os cultivos

tradicionais. Porém essa técnica tem a desvantagem de não ser interessante

economicamente para a produção de pigmentos porque a taxa de crescimento celular da

planta é lenta. Em contrapartida, a produção microbiana tem a vantagem de produzir

grandes rendimentos, mas pode não ser aceita em sociedades não habituadas com seu

consumo em alimentos.

A grande variedade de cores nas plantas é devido à combinação de um número

relativamente pequeno de pigmentos. Na alimentação humana eles são consumidos em

grande quantidade proveniente do consumo direto das plantas e vegetais, mas são pouco

significativos quando vindos de adição em alimentos.

Várias espécies podem ser consideradas plantas corantes, como as especiarias

(urucum e cúrcuma), as hortaliças (beterraba e espinafre), plantas ornamentais (“mary-

gold”) frutíferas (uva e jenipapo), plantas fibrosas (vinagreira), dentre outras (KATO,

1998).

Como exemplo das possibilidades que grandes ecossistemas apresentam em termos

de biodiversidade, podemos citar algumas plantas da região amazônica que são utilizadas

para a obtenção de corantes ou que estão em estudo para avaliar seu potencial de uso e as

características de seus corantes. Dentre essas estão o urucum, a cúrcuma, o dendê, o cacau,

o açaí, o cará-roxo e o jenipapo. Há ainda algumas que necessitam estudos profundos, tais

como: anil verdadeiro, bartimão, baruti, carajuru, cumatê, guaraná, mucajá, pau terra,

pequi, pupunha, tajuba, tua, tucumã, umari e vinagreira (KATO, 1998).

Um aspecto importante a ser avaliado, e que deve evoluir com o uso dos corantes

naturais, são as embalagens. Há uma interação muito grande dos produtos com as

embalagens. O uso de embalagens ativas com barreiras a condições deletérias aos corantes

naturais torna o emprego desses mais viável, devido ao fato dos corantes naturais serem na

sua maioria degradáveis e sensíveis à luz, calor, oxigênio e a microrganismos (FURTADO,

2006). O aprimoramento nas embalagens complementa uma tendência de uso dos corantes

naturais em produtos de maior valor agregado, voltados para um público com poder

aquisitivo superior. Nesse caso, o consumo atinge praticamente toda a gama de corantes

naturais, da bixina do urucum, ao carmim de cochonilha, de coloração vermelha

(FURTADO, 2006).

2.2. A COR E SUA AVALIAÇÃO INSTRUMENTAL

Os objetos são coloridos porque absorvem mais certos comprimentos de onda da

radiação visível, enquanto outros são transmitidos ou refletidos. Um objeto azul, por

exemplo, apresenta tal cor porque, quando a luz branca composta do vermelho, laranja,

amarelo, verde, azul e violeta em definidas proporções, incide sobre o mesmo, a cor azul é

muito pouco ou nada absorvida, enquanto que as outras cores são essencialmente retidas,

ocorrendo assim, um distúrbio no equilíbrio de cores, e a solução adquire a coloração azul.

Quando ocorre a absorção de certo comprimento de onda de forma mais pronunciada que

em outros temos o que o observador humano reconhece como cor, fisicamente como o

comprimento de onda dominante ou fisiologicamente como tonalidade (PONTES, 2004).

Das cores que compõe a cor branca, algumas são ditas primárias enquanto outras

são denominadas complementares. Cores primárias (vermelho, azul e amarelo) são aquelas

que, por combinação adequada, rendem as demais cores do espectro do visível. Assim, a

combinação do azul com o amarelo produz o verde, do vermelho com o azul produz o

violeta, etc. Cores complementares por sua vez, são aquelas que, por mistura binária,

originam a cor branca. São cores complementares: o vermelho com o verde, o azul com o

laranja e o amarelo com o violeta. Todas as cores existentes no espectro podem ser

visualizadas pela adição e subtração de diferentes quantidades das cores amarela, azul,

vermelha, verde, laranja e violeta.

Quando se adiciona branco a qualquer uma das cores primárias, elas recebem mais

luz. Já a adição do preto subtrai sua luz. A combinação das cores primárias com

secundárias em partes iguais dá origem à cor cinza, que funciona como ponto médio de

todas as outras cores (MASCARENHAS, 1998).

A percepção das cores vai muito além da estrutura do pigmento, do comprimento de

onda e da subtração e adição dos raios luminosos. A percepção de cor pelos olhos depende

bem mais de fatores intrínsecos ao ser humano como a fisiologia do olho e do córtex

cerebral e a psicologia humana.

A visão é um processo complexo que envolve a passagem de luz pelas diversas

partes do olho, como a córnea, humor aquoso, pupila e humor vítreo, até que chega à retina

e às células fotossensíveis, gerando um processo que contribui para a sensação de visão.

Por isso, algumas vezes a cor não é considerada uma propriedade intrínseca do objeto, nem

da luz; ela corresponde ao efeito que um estímulo provoca na retina e no nervo ótico,

quando chega ao cérebro.

Todas as cores existentes no espectro podem ser criadas por subtração ou adição de

diferentes quantidades das cores amarela, azul, vermelha, verde, laranja e violeta, em graus

diferentes de intensidade. Já as cores dos pigmentos, presentes em flores, árvores, frutos,

etc, possuem sua estrutura química correspondente. Pode-se concluir que cada pigmento

possui ressonância própria e um determinado comprimento de onda correspondente a sua

cor, que são obtidos por subtração ou absorção de certas partes do espectro

(MASCARENHAS, 1998).

A principal diferença entre um corpo azul, iluminado por luz branca, e uma fonte

emissora de azul é que o corpo azul está absorvendo o verde e o vermelho refletindo apenas

azul enquanto que a fonte emissora de luz azul emite efetivamente apenas azul. Se o objeto

fosse iluminado por essa luz ele continuaria a parecer azul. Mas, se pelo contrário, ele fosse

iluminado por uma luz amarela (luz Vermelha + Verde) o corpo pareceria negro.

A colorimetria tricromática se baseia na suposição de que existe na visão um

sistema trireceptor. Não importa qual a composição espectral da radiação que chega na

retina, sua resposta será analisada segundo três parâmetros (LOZANO, 1978). Isso implica

num processo de integração. Quando o observador vê uma cor, ele pode discriminar sua

claridade, tonalidade e saturação, não podendo dizer nada sobre sua composição espectral.

A tonalidade é uma grandeza que caracteriza a qualidade da cor, como vermelho,

verde e azul dentre outros, permitindo que elas sejam diferenciadas e que está associada a

certo comprimento de onda do espectro visível. A saturação descreve a intensidade ou

quantidade de uma tonalidade, indicando a proporção em que ela está misturada com o

preto, branco ou cinza. Também chamada de pureza ou intensidade da cor, é a qualidade

que nos permite distinguir cores fortes de fracas. Luminosidade, por sua vez, é a qualidade

que caracteriza o grau de claridade da cor e está associada à sensação produzida por uma

superfície com essa cor, indicando se as cores são claras ou escuras. A luminosidade vai do

preto ao branco (PONTES, 2004; RAMOS & GOMIDE, 2007).

O princípio fundamental da colorimetria foi enunciado por Newto n em 1672, que

afirmou que qualquer cor pode ser igualada pela soma das três cores primárias

convenientemente escolhidas. Como existem infinitas nuances das cores primárias, é

necessário especificar quais são em cada caso. Por isso temos os estímulos de referência

(LOZANO, 1978). Dessa forma, para que se tenha uma representação numérica satisfatória

da cor, a curva espectrofotométrica deve ser reduzida a três números denominados valores

triestímulos ou valores cromáticos-padrão. O Comitê Internacional em Iluminação (CIE)

recomenda o uso do sistema-padrão fundamentado em um “observador-padrão”, que simula

o olho humano e consiste em três filtros primários de cor. A curva espectrofotométrica é

especificada em termos de X, Y e Z, em que X está relacionado com a cor vermelha, Y com

a Luminosidade e cor verde e Z com a cor azul.

Os valores de X, Y e Z foram calculados a partir das curvas-padrão observadas do

espectro visível. Várias escalas de cores foram desenvolvidas tendo como base o sistema

CIE XYZ e todas criadas para simular a resposta humana aos estímulos das cores. Em cada

sistema, a cor é alocada em um sólido de cor tridimensional, onde é quantificada. Deve-se

ressaltar que todas as escalas usualmente empregadas representam um sólido tridimensional

de cor e são matematicamente interconversíveis (PONTES, 2004).

Hunter desenvolveu um colorímetro fotoelétrico triestímulo que ganhou bastante

aceitação na indústria de alimentos. O equipamento consiste basicamente de três circuitos

separados, filtros cuidadosamente selecionados e fotocélulas que fornecem estreitas

aproximações de X, Y e Z, que são funções do sistema CIE. A coordenada L

(luminosidade) de Hunter está relacionada à grandeza Y do sistema CIE (Equação 1). A

coordenada a é mensurável em termos de intensidade de vermelho e verde (Equação 2), e a

coordenada b está relacionada com a intensidade de amarelo e azul (Equação 3). A Figura 1

mostra um sólido de Hunter, onde a coordenada a é função de X e Y, e a coordenada b, de

Z e Y.

YYxL /100= (1)

YYXX

// −

(2)

ZZYY

// −

(3)

Em que:

X, Y, Z são os valores triestímulos;

, Y

, Z

são valores triestímulos de padrões de iluminantes;

e K

são os coeficientes de cromaticidade para o iluminante usado;

Figura 1 – Sólido de Hunter.

De acordo com PONTES (2004) juntas, as coordenadas a e b podem gerar

parâmetros relacionados à tonalidade (h) (Equação 4) e saturação ou croma (c) (Equação 5).

As equações a seguir mostram as relações entre tais grandezas:

bac += (4)

)/arctan( abh =

(5)

Em que:

c é o índice de saturação da cor. Corresponde ao comprimento da projeção da localização

da cor no plano (a, b), ou seja, o comprimento do vetor.

h é o ângulo de tonalidade da cor. Utilizado para estimar a posição de uma amostra no

sólido de cor.

Por convenção, o ângulo 0° é fixado no eixo horizontal com +a (vermelho),

aumentando no sentido anti-horário. O sólido de cor é dividido em quadrantes, e a

interpretação das diferenças de tonalidade, no sólido como um todo, pode ser feita da

seguinte forma : vermelho (330° a 25°), laranja (25° a 70°), amarelo (70° a 100°), verde

(100° a 200°), azul (200° a 295°) e violeta (295° a 330°) (RAMOS & GOMIDE, 2007).

Entretanto, o valor obtido a partir da equação do ângulo de tonalidade encontra-se

no intervalo de -90 < h < 90, que representa posições no primeiro (valores positivos) e

quarto quadrantes (valores negativos). Para obter as posições nos demais quadrantes é

necessária uma observação conjunta com os valores de a e b. Quando a é negativo é

necessário soma r 180 ao valor de h. Da mesma forma, quando a amostra se encontra no

quarto quadrante (a positivo e b negativo), é necessário somar 360 ao valor de h (RAMOS

& GOMIDE, 2007).

Como descrito, os instrumentos foram desenvolvidos para reproduzir a resposta das

cores observadas pelo olho humano. São os sistemas de cores usados para descrevê-las em

termos matemáticos, numa linguagem sistematizada e aceita universalmente, que tem o

objetivo de uniformizar esse atributo, tornando mais objetiva sua aplicação industrial.

2.3. JENIPAPO

O jenipapo é o fruto do jenipapeiro, uma árvore da família das Rubiáceas,

pertencente à mesma família do café, e chamado cientificamente de Genipa americana. É

uma espécie nativa bastante comum em grande parte do Brasil, em várias formações

florestais situadas em várzeas úmidas ou encharcadas (LORENZI, 1998). As variedades

mais comuns de jenipapeiro são: jenipapeiro-pequeno, médio e grande, jenipapeiro com

caroço, jenipapeiro sem caroço, jenipapeiro sempreflorens (produz frutos o ano todo),

jenipapeiro macho e jenipapeiro fêmea (XAVIER & XAVIER, 1976; EPSTEIN, 2001). A

árvore floresce durante os meses de outubro a dezembro. Os frutos amadurecem nos meses

de novembro a dezembro, quase simultaneamente com a nova florada (LORENZI, 1998).

Fruteira indígena, o jenipapeiro tem importância ecológica para o repovoamento de

animais da fauna brasileira, sendo muito útil para plantio em áreas brejosas degradadas,

crescendo com mais facilidade em regiões de clima quente, como os Estados do Nordeste e

do Norte do Brasil (LORENZI, 1998; EPSTEIN, 2001). Devido às características

adaptativas ao ambiente ciliar, combinadas com o rápido crescimento e abundante produção

de sementes, a G. americana tem sido muito recomendada e utilizada na recuperação de

áreas degradadas (SEBBENN, 1997).

Na cultura popular o jenipapo tem indicações medicinais e, em alguns lugares, é

considerado afrodisíaco. Sua polpa é usada contra icterícia, afecções do estômago, baço e

fígado. Há referências de que a goma extraída do tronco do jenipapeiro tem efeito

antidiarréico e propriedades antigonorréicas. O chá de suas raízes é utilizado como

purgativo; as sementes esmagadas como vomitório; o chá das folhas como antidiarréico; o

fruto verde ralado é para asmáticos; as brotações são desobstruinte; e o suco do fruto

maduro é tônico para estômago e diurético (SANDRI, 1998; EPSTEIN, 2001).

Algumas dessas aplicações medicinais são reportadas e pesquisadas também

cientificamente. Gottlieb & Mors (1980) em um levantamento sobre o uso potencial de

extratos de árvores brasileiras cita alguns iridóides presentes em G. americana como

compostos ativos. Os ácidos genipico e genipinico foram considerados antimicrobianos

enquanto geniposídeos e ácido geniposídico apresentaram atividade purgativa (Figura 2).

Os iridóides são substâncias monoterpenoídicas formadas em plantas por uma ciclização

alternativa do pirofosfato de geranila. A estrutura química dessas substâncias é baseada no

esqueleto ciclopentano-[C]-pirano, iridóides carbocíclicos, e a clivage m oxidativa da

ligação 7,8 do anel ciclopentano fornece os chamados secoiridóides. Em

quimiossistemática, os iridóides representam um marcador importante em classificação

vegetal, filogenia e evolução (SAMPAIO-SANTOS & KAPLAN, 2001).

COOH

COOCH

Figura 2 – Estrutura química do ácido geniposídico (A) e do geniposídeo (B).

Ono et al. (2005) identificaram quatro novos iridóides glicosídicos de jenipapo, os

quais foram chamados de genamesídeos A-D, além dos já conhecidos ácido geniposídico,

geniposídeo, gardenosídeos e genipina-gentiobiosídeo. Na avaliação da atividade anti-

promotora de tumores dos iridóides de jenipapo, todos apresentaram essa atividade. O

geniposídeo foi menos ativo do que o ácido geniposídico, entretanto sua aglicona ge nipina

teve efeito notável. A genipina (Figura 3) além de ótima atividade também teve toxicidade

insignificante (UEDA & IWAHASHI, 1991). Esse composto também está relacionado com

a formação do corante azul. Segundo Butler et al. (2003) o geniposídeo, que dá origem a

genipina via hidrólise enzimática com ß-glicosidases, representa 4 a 6% do fruto seco.

Figura 3 – Estrutura química da genipina.

Na alimentação do homem, o fruto é comestível ao natural e empregado no preparo

de compota, doce cristalizado, refresco, suco, polpa, xarope, licor, vinho, álcool, vinagre e

aguardente. Já na indústria de madeira, a madeira de cor branca (marfim) é mole e elástica,

flexível, racha com facilidade, recebe bem o verniz e tem longa duração. É empregada em

construção naval e em construção civil, em marcenaria de luxo, em tanoaria, em fundições

(moldagem de peças) e em xilogravura, entre outros (EPSTEIN, 2001).

Outra aplicação é na alimentação de animais, onde folhas e frutos são cortados em

pedaços pequenos para alimentar bovinos, caprinos e suínos, e o curtimento de couros, pois

a casca do caule (cor cinza-claro) e o fruto verde são ricos em tanino (SANDRI, 1998;

EPSTEIN, 2001).

2.3.1. CARACTERIZAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA DO FRUTO

O jenipapo, como é conhecido na maior parte do território brasileiro, também é

chamado de jenipá ou jenipapinho no Pará, huito na fronteira entre Brasil e Peru, genipa na

Guiana Francesa, guayatil no Panamá, nandipáguazú na Argentina e jagua em outros países

de língua espanhola (SANDRI, 1998).

O jenipapo é uma baga ovóide com 5-12 cm de diâmetro, carnuda e comestível.

Quando verde é adstringente. Contém boa quantidade de açúcar e acidez pronunciada,

variando com a espécie e dependendo do clima e solo. Sua casca é mole e rugosa, de cor

amarelo-pardacenta, castanho-escura ou esverdeada. A polpa é aromática, vinosa, mole e

envolve numerosas sementes de consistência dura e fibrosa (XAVIER & XAVIER, 1976;

SANDRI, 1998; EPSTEIN, 2001).

Os frutos do jenipapeiro são comestíveis e muito apreciados. Qua ndo ainda verde

fornecem suco de cor azulada que é utilizado como corante. Deve ser colhido no ponto

certo de maturação para que possa ser aproveitado. Após a maturação fornece polpa

comestível aproveitada ao natural e na forma de doces. O suco fermentado transforma-se

em vinho e licor (LORENZI, 1998).

O jenipapo é caracterizado na literatura por sabor ácido e aromas frutais. Borges &

Rezende (2000) detectaram como voláteis majoritários os ácidos octanóico (34,1%), 2-

metilbutírico (9,1 %), hexanóico (18,2%) e os ésteres 2-metil- 2-(E)-butenoato de metila

(4,1%), octanoato de etila (3,2%) e 2-propilfurano (2,5%), sendo os ácidos butírico, 2-

metilbutírico e hexanóico responsáveis pelas notas pungente e ácida, e a característica frutal

foi atribuída à presença dos ésteres 2- e 3-metilbutirato de etila.

Alves (2004) encontrou resultados parecidos com os de Borges & Rezende (2000),

sendo as amostras caracterizadas pelo elevado número de ésteres e álcoois. Além disso,

foram identificados pela primeira vez em jenipapo vários álcoois, como etanol, 2-

metilpropanol, 2-pentanol, butanol, 2-metilbutanol, 3-metilbutanol, 2-heptanol, hexanol, 2-

butoxietanol, 2-nonanol e octanol, assim como alguns compostos carbonílicos como 2-

pentanona, 4-metil-2- pentanona, acetofenona, além dos ésteres 2-metilbutanoato de metila,

butanoato de metila, 2-metilenobutanoato de metila, (Z)-3-hexenoato de metila, (Z)-3-

octenoato de metila, benzoato de metila, 4-decenoato de etila e salicilato de metila, uma

lactona (capralactona) e um hidrocarboneto (ciclooctatetreno). O mesmo trabalho

determinou 27 compostos importantes para o aroma característico de jenipapo. O ácido

hexanóico, 2- metilbutírico, uma mistura de 2- e 3-metilbutanol e um composto não

identificado foram responsáveis pelo aroma ácido, de fermentado e queijo e também por

notas desagradáveis como chulé. Os compostos 2-metilbutanoato de metila, linalol,

octanoato de metila, e um outro composto não identificado foram responsáveis pelas notas

“frutal” e adocicada da fruta (ALVES, 2004).

O fruto apresenta quantidade considerável de polpa, sendo a relação de 12,05% de

casca, 47,81% de polpa e 40,61% de caroço (CRUZ & PEREIRA, 1985). A polpa do

jenipapo apresenta baixa acidez, alto conteúdo de umidade, baixo percentual de proteína e

lipídio, alto conteúdo de açúcares, regular teor de ferro, boa taxa de cálcio e fósforo, alto

conteúdo de taninos, e apenas traços de vitamina C e pectina (FIGUEIREDO et al., 1986a).

A Tabela 1 apresenta a composição dos frutos de jenipapo em diferentes estágios de

maturação.

Tabela 1: Composição química dos frutos de jenipapo verde, “de vez” e maduro

Determinações

Estágio de maturação

Verde “De vez” Maduro

pH 4,2 4,00 4,00

Acidez titulável total (% ácido cítrico) 0,93 0,98 0,94

Sólidos solúveis (°Brix) 14,00 20,00 20,00

Vitamina C (mg.100g

-1

) Traços Traços Traços

Taninos (mg.100g

-1

) 609,55 280,00 254,55

Umidade (%) 74,67 74,14 74,81

Cinza (%) 1,02 0,86 0,85

Proteína (% N x 6,25) 0,74 0,62 0,68

Lipídios (%) 0,27 0,32 0,35

Fibra (%) 1,8 2,03 2,03

Glicídios redutores (%) 8,46 8,00 11,39

Glicídios não redutores (%) 5,27 7,23 4,33

Amido (%) 6,44 5,62 4,62

Pectina (mg.100g

-1

) Traços Traços Traços

Cálcio (mg Ca.100g

-1

) 46,33 33,40 45,82

Ferro (mg Fe.100g

-1

) 0,79 0,73 0,80

Fósforo (mg P

.100g

-1

) 47,70 41,40 33,50

Fonte: FIGUEIREDO et al. 1986 (a)

Figueiredo et al. (1986a) avaliaram as características físicas e químicas do jenipapo

em diversos estágios de maturação. O teor de proteínas encontrado na polpa do fruto verde

foi superior aos encontrados para o fruto “de vez” e maduro, provavelmente devido às

diferenças no grau de reorganização de sistemas celulares no período climatérico. No teor

de amido houve uma diminuição à medida que o fruto amadureceu, provavelmente porque

muitos carboidratos solúveis, ao lado do amido, são completamente metabolizados com o

amadurecimento do fruto.

A polpa do fruto verde apresentou maior quantidade de cálcio e fósforo, enquanto a

do maduro mostrou-se superior em ferro. O teor de tanino diminui à proporção que o fruto

amadurece, pois durante o amadurecimento do fruto vários taninos monoméricos são

sintetizados, os quais se polimerizam durante o curso de seu desenvolvimento

(FIGUEIREDO et al., 1986a). O fruto do jenipapo absorve água facilmente e sua

durabilidade quando maduro é de no máximo 2 dias (CRUZ & PEREIRA, 1985).

Quanto à composição de ácidos graxos na fração lipídica da polpa do fruto, tem-se a

seguinte concentração: palmítico 37,20%; oléico 25,65%; esteárico 5,36 %; mirístico

5,26%; láurico e cáprico ambos com 2,25%. Com base nestes valores, dos ácidos graxos

identificados, verifica-se uma predominância dos ácidos graxos saturados (52,32%) sobre

os ácidos graxos insaturados (25,65%). Alguns ácidos graxos não foram identificados no

trabalho de Figueiredo et al. (1991). A farinha da polpa desengordurada de jenipapo

apresenta valores elevados de ácido aspártico, ácido glutâmico e leucina. Também é rica

em argina, aminoácido essencial para a engorda de frangos (CRUZ & PEREIRA, 1985).

Com relação à semente, a análise cromatográfica revelou 20,03% de ácidos graxos

saturados, palmítico e esteárico, e 79,97% de insaturados, oléico e linoléico, sendo esse

último predominante (FIGUEIREDO et al., 1991). Convém destacar o elevado percentual

de ácido linoléico (60,49%) presente no óleo da semente, uma vez que este se apresenta

superior ao encontrado em outros óleos vegetais considerados ricos em relação ao referido

ácido, como por exemplo, milho (55,00%), soja (53,00%), semente de algodão (51,50%) e

amendoim (26,00%) (FIGUEIREDO et al., 1991).

A exemplo da maioria das frutas tropicais, o jenipapo é altamente perecível,

deteriorando-se em poucos dias, fato que dificulta a sua comercialização, aumentando as

perdas. A industrialização surge, portanto, como alternativa para reduzir as perdas,

principalmente no pico da safra quando alcançam menores preços pelo excesso de oferta e

pela concorrência de outras frutas. O trabalho de Andrade et al. (2003) estudou a

viabilidade do uso de desidratação osmótica do jenipapo como um processo capaz de

contribuir tanto na conservação do produto, como nas características organolépticas do

mesmo. O estudo demonstrou um efeito benéfico do processamento sobre a conservação,

no que diz respeito à contagem de bolores e leveduras. Nesse trabalho, o uso de açúcar

como agente osmótico além de aumentar a aceitação do produto pelos consumidores,

também aumentou o valor energético do fruto.

Silva et al. (1998) observaram que os frutos de jenipapo perdem grande quantidade

de água durante o armazenamento, tanto em condições ambientais quanto sob refrigeração,

concomitantemente com o aumento no teor de sólidos solúveis totais. Porém, a refrigeração

se mostrou mais eficaz na manutenção da vitamina C em níveis comerciais, bem como na

manutenção da integridade física dos frutos durante o armazenamento, refletindo na

firmeza da polpa. De modo geral, a refrigeração a 10°C retarda acentuadamente as

alterações físico-químicas características do amadurecimento.

Numa avaliação de diferentes tipos de métodos de conservação de néctares de

jenipapo, empregando baixa temperatura (congelamento), alta temperatura (100°C por 15

minutos) e aditivos químicos (benzoato de sódio e metabissulfito de sódio), a conservação a

baixa temperatura apresentou melhor estabilidade durante 150 dias de estocagem. Os

néctares que foram preservados pelo calor e por aditivos químicos apresentaram

escurecimento gradual quando comparados com os mesmos produtos conservados por

congelamento. Com base nos resultados das análises microbiológicas, todos os métodos

aplicados foram eficientes. O néctar conservado por congelamento revelou maior grau de

aceitabilidade por parte da equipe de provadores, muito embora, estatisticamente ao nível

de 1% de significância, não tenha sido detectada diferença significativa entre os valores

atribuídos à cor e sabor dos diferentes tipos de tratamentos dados aos néctares

(FIGUEIREDO et al., 1986b).

2.3.2. EXTRAÇÃO DE CORANTE DE JENIPAPO

Desde épocas remotas os indígenas utilizam o suco do jenipapo obtido após

mastigação do fruto em pinturas corporais, de utensílios e no tingimento de tecidos,

imprimindo-lhes coloração negra (PENALBER et al., 1996). Penalber et al. (1996),

determinaram que o fruto de jenipapo ainda verde produz por oxidação um corante azul

escuro solúvel em água e etanol. Segundo Nazaré (1998), os frutos maduros submetidos à

extração com vários solventes fornecem um extrato amarelo cristalino, enquanto que a

extração com soluções diluídas de hidróxido de sódio resulta em um extrato de coloração

azul, cujo pigmento principal é um geniposídeo. Esse geniposídeo é semelhante à genipina,

corante natural usado em alimentos em países da Ásia. Os frutos de Gardênia jasminóides

fornecem extratos amarelos (geniposídeos), os quais quando submetidos à hidrólise em

presença de beta-glucosidase, reagem posteriormente com aminoácidos, dando formação ao

pigmento azul (NAZARÉ, 1998).

Segundo Penalber et al. (1996), o suco apenas retirado do fruto apresenta cor citrina,

que passa pouco a pouco ao verde, ao azul-violáceo, ao azul e, finalmente, ao azul-escuro,

atingindo o negro-verdoengo por envelhecimento. As cuias utilizadas pelos indígenas são

tingidas de um negro profundo, retirado do suco de jenipapo, que em contato com urina

durante vários dias, fermenta e fornece, por desdobramento da uréia, o carbonato de

amônio, facilitando a transformação da matéria corante e imprimindo-lhe maior intensidade

no colorido.

Penalber et al. (1996) fizeram uma avaliação da extração de corante de jenipapo e

verificaram que água e etanol extraíram corante de coloração azul intensa, que passou a

negro, principalmente em temperaturas superiores a 80°C. Não houve extração com

hexano, o que levou a conclusão de que o corante é polar. O trabalho também concluiu que

há variações quanto ao tamanho dos frutos e variações de cor em função do pH, e que o

extrato deve ser mantido protegido da ação do ar visando aumentar a estabilidade do

mesmo (PENALBER et al., 1996).

A importância dos compostos nitrogenados é melhor descrita por Touyama e

colaboradores (1994a) que descreveram a reação espontânea de aminas primárias, incluindo

proteínas, com genipina, um dos iridóides constituintes do jenipapo, formando um

pigmento azul. Essa reação não ocorre com aminas secundárias e terciárias, e o oxigênio é

indispensável para a formação de cor azul.

A reação da genipina com metilamina, uma amina primária simples, em meio

hidroalcóolico na presença de oxigênio atmosférico gera uma mistura de polímeros de alto

peso molecular, com coloração azul. Quando a mesma reação foi conduzida sob atmosfera

de nitrogênio, a mistura da reação primeiro ficou amarela e depois vermelho-amarronzada,

chegando finalmente a azul na presença de oxigênio no meio de reação (TOUYAMA et al.,

1994a). Nessas condições obtém-se um pigmento azul constituído por uma mistura de

polímeros de alto peso molecular que é solúvel em água, metanol e etanol, mas insolúvel

em outros solventes orgânicos como o clorofórmio. Essas observações quanto a

solubilidade corroboram as observações feitas por Penalber et al. (1996). Os compostos

amarelos foram considerados precursores dos compostos vermelho-amarronzados, e ambos

se mostraram como sendo intermediários da reação de formação dos pigmentos azuis

(TOUYAMA et al., 1994b). A formação desses pigmentos intermediários ocorre sob

atmosfera inerte e eles apresentam uma estrutura básica de 2-metil-4-carbometoxi-2-

piridine como esqueleto. A substância amarela isolada se mostrou altamente instável,

tornando-se facilmente vermelha durante os processos de isolação (TOUYAMA et al.,

1994b).

Considerando a formação do pigmento azul a partir de produtos intermediários com

a passagem de oxigênio pela solução de reação e a partir de genipina e metilamina em

solução hidroalcóolica, mesmo sob exclusão de oxigênio, sob irradiação ultra-violeta, o

pigmento azul deve ser formado através de polimerização induzida por um radical de

oxigênio e dehidrogenação dos pigmentos intermediários (TOUYAMA et al., 1994a).

Butler et al. (2003) descrevem a formação de reações cruzadas entre genipina e

biopolímeros contendo grupos de aminas primárias em duas etapas. Primeiramente, há uma

reação de substituição nucleofílica S

2, que envolve a substituição de um grupamento éster

na molécula de genipina por uma amida secundária. O nucleofílio nesse caso é um grupo de

amina primária. A segunda reação é a substituição nucleofílica do grupamento éster, que

ocorre tardiamente na reação. Na segunda parte, a reação começa com um ataque

nucleofílico inicial do carbono C3 da genipina, pelo grupo amino primário, formando um

grupo aldeído intermediário. A abertura do anel dihidropirano é seguida pelo ataque da

amina secundária formada na primeira etapa, ao grupo aldeído formado. Além dessas

reações cruzadas, há indícios de que a formação de pigmentos azuis envolve outras reações

mais complexas. A figura a seguir apresenta o esquema de reação da formação de reações

cruzadas envolvendo a genipina (Figura 4).

OCH

OHCH

OCH

OHCH

Esquema da reação 1

Esquema da reação 2

OCH

N R

OCH

NH R

OCH

R R

OCH

Figura 4 – Reações cruzadas envolvendo genipina (Adaptado de BUTLER et al. 2003).

CAPÍTULO 1 – EFEITO DO p

H, TEMPERATURA E SOLVENTES SOBRE A

EXTRAÇÃO DE CORANTE DE JENIPAPO

1. INTRODUÇÃO

O comportamento humano é influenciado pela aparência e a cor dos alimentos é um

considerável atributo de qualidade, não só servindo de base para a identificação e a

aceitação de grande variedade de produtos, mas também influenciando negativa ou

positivamente na percepção dos demais atributos sensoriais.

Os corantes naturais são um grupo variado de compostos, sendo difícil fazer

comentários gerais sobre sua natureza e desempenho. Apesar da grande variedade de cores

nas plantas, essa é devido à combinação de um número relativamente pequeno de

pigmentos. Na alimentação humana eles são consumidos em grande quantidade proveniente

do consumo direto das plantas e vegetais, mas são pouco significativos quando vindos de

adição em alimentos processados.

Dentre as desvantagens dos corantes naturais estão a sua baixa estabilidade

apresentada nos alimentos quando comparados com os sintetizados. São sensíveis ao calor,

pH e luz, mas para a maioria dos pigmentos e em determinadas condições é possível

minimizar esses efeitos. O conhecimento dos mecanismos existentes nas plantas que

naturalmente protegem a degradação das moléculas é a chave para se desenvolver métodos

para a manutenção da estabilidade dos pigmentos.

A busca por fontes alternativas leva a identificação de plantas pouco conhecidas na

biodiversidade brasileira e ao desenvolvimento de novas tecnologias de obtenção e

processamento. A estabilização depende da molécula a ser utilizada e das características

físico-químicas do alimento em que vai ser adicionado. Algumas descobertas recentes ainda

não são viáveis economicamente.

Na busca por novas fontes de corantes naturais, um aspecto importante é o estudo da

toxicidade destes compostos o que requer grandes investimentos em pesquisas. Mesmo

assim, acredita-se que nos próximos anos haverá uma expansão na lista dos corantes

naturais permitidos para uso em alimentos processados. Para o emprego efetivo desses

corantes deve-se considerar a necessidade de ajustes na legislação, bem como a informação

adequada do consumidor e a questão econômica.

Sob o ponto de vista técnico, são inegáveis as facilidades do emprego dos corantes

sintéticos nas indústrias de alimentos, considerando que os mesmos possuem baixo custo,

melhor poder tintorial, boa estabilidade e que fornecem grande faixa de coloração,

proporcionando infinita variação de tons e garantindo aos processadores de alimentos a

tonalidade adequada ao produto que se pretende colorir (MASCARENHAS, 1998).

O uso de pigmentos obtidos de vegetais como aditivos corantes para alimentos

industrializados não é mais uma aplicação potencial e sim uma realidade comercial. A

busca de matérias-primas para a produção de corantes naturais com propriedades adequadas

para uso na indústria de alimentos processados tem levado pesquisadores a investigar

praticamente toda a biosfera. Esses pigmentos são encontrados, principalmente, em

vegetais considerados componentes da dieta humana e incluem flores, frutos, folhas,

tubérculos e cereais.

Para que essas plantas sejam fontes de corante natural, são necessárias algumas

características desejáveis. O fato das atuais fontes de corantes serem frutas e suas cascas,

sementes ou raízes implica em uma variação da matéria prima e de seu fornecimento.

Deve-se salientar que as características do pigmento obtido de fontes naturais são afetadas

pelo procedimento de extração empregado.

Apesar da tendência de substituição dos corantes sintéticos pelos naturais, esses

ainda são bastante utilizados por questões econômicas e tecnológicas. Entretanto, há um

aumento dos questionamentos da segurança no consumo desses corantes, alegando-se sérias

conseqüências na saúde e a possibilidade do seu uso indiscriminado originar intoxicações.

Outro ponto muito criticado é o uso desses corantes apenas por questões culturais,

valorizando apenas a aparência do alimento. Essa atitude atinge principalmente o público

infantil, que é mais atraído pelas cores, sendo mais vulnerável a sua exposição.

Novas fontes de corantes estão surgindo e aumentando o número de opções para uso

e aplicação em alimentos. Porém, para se assegurar a sua utilização, é necessário o

desenvolvimento de estudos que investiguem seus aspectos toxicológicos associado a

outras características como: ser inócuo à saúde humana, de preferência ser consumido

desde longa data por alguma população; estabilidade à luz, ao pH, à oxidação; alto poder

corante; ter elevada concentração de pigmentos; ser matéria prima com elevada produção

por área a preços compatíveis; de fácil cultivo e colheita; baixo custo de extração e

purificação e capacidade de associação com outros compostos, como no caso da

copigmentação (KATO, 1998).

Como resposta aos riscos, que leva a crescente restrição aos sintéticos, os corantes

naturais ganham espaço. Trata-se, portanto, de uma conquista gradual. A definitiva

consolidação do uso de corantes naturais em alimentos passa por novas fontes e novos

métodos de extração dos pigmentos produzidos pelas plantas. A sua competitividade

depende, portanto, de investimentos em tecnologia e prospecção.

Com base nessa busca por novas alternativas, o objetivo deste experimento foi

estudar a influência de solventes hidro-alcoólicos e aquosos, considerando diferentes pHs e

diferentes temperaturas sobre a qualidade do corante azul extraído de frutos de jenipapo.

2. MATERIAL E MÉTODOS

O presente trabalho foi conduzido no laboratório de Pigmentos Naturais do

Departamento de Tecnologia de Alimentos da Universidade Federal de Viçosa-MG.

Foram utilizados frutos verdes de jenipapo (G. americana). Os frutos foram

colhidos na fazenda Sempre-Viva, no município de Camacan - BA. A obtenção dos frutos

foi feita diretamente no pé e a caracterização do estágio de maturação dos frutos se deu por

avaliação do tamanho e rigidez, uma vez que quando maduros são inadequados. Os frutos

foram colhidos nos meses de novembro e dezembro de 2006 e mantidos em freezer durante

todo o período de pós-colheita e realização da pesquisa. Foi feita uma seleção e

padronização do tamanho dos frutos para reduzir uma possível fonte de erro.

Nas extrações utilizou-se o envoltório polposo do jenipapo, que é a parte da polpa

que envolve as sementes, juntamente com as sementes, pois testes preliminares mostraram

que essa era a fração com maior intensidade de cor. A mesma fração foi utilizada nos

experimentos de Penalber et al. (1996).

O envoltório polposo e as sementes dos frutos verdes foram triturados na presença

dos solventes (água, solução aquosa de etanol 50% e álcool etílico 95%) com pH

previamente ajustado (4,0; 5,0; 6,0; 7,0; 8,0 e 9,0), na proporção de 1:2 (uma parte de fruto

para duas de solvente), e levados a aquecimento em chapas aquecedoras, sob agitação.

Quando atingida a temperatura desejada (35; 45; 55; 65 e 75°C), os frutos eram mantidos

na temperatura de análise por trinta minutos. Cada fruto representou uma unidade

experimental e a combinação de um solvente com um nível de pH e um nível de

temperatura caracterizou um tratamento de interesse. O ajuste de pH das soluções

extratoras foi feito com a adição de HCl e NAOH, fazendo uso de pHmetro Digimed,

Modelo DM20 (São Paulo, Brasil). A temperatura foi controlada por meio de termômetro e

o aquecimento sob agitação realizado em chapas aquecedoras com dispositivo para agitação

magnética Fisatom, Modelo 703A (São Paulo, Brasil).

O extrato obtido foi analisado por colorimetria em um colorímetro HunterLab,

modelo ColorQuest XE (Reston, USA), após ser filtrado com o auxílio de um dessorador e

ser estabilizado por cerca de 24 horas. Durante esse período de estabilização os extratos

foram armazenados sob refrigeração, em frascos âmbar com tampas. As condições de

análise no colorímetro foram iluminante D65 e Observer 10*. Os corantes obtidos foram

comparados a um padrão sintético, o corante azul de indigotina, por ser um dos mais

utilizados na indústria, juntamente com o azul brilhante, obtendo-se a leitura do desvio no

colorímetro. O padrão preparado foi indigotina 0,05%, solubilizada em cada um dos três

solventes utilizados para extração (água, solução aquosa de etanol 50% e álcool etílico

95%), resultando na obtenção de 3 padrões.

A variável analisada foi o desvio da cor em relação ao padrão azul de indigotina. O

desvio é a diferença total dada pela Equação 1, porém os valores foram obtidos diretamente

do aparelho.

222

DbDaDLDE ++= (1)

Em que:

DL = L

amostra

– L

padrão

Da = a

amostra

– a

padrão

Db = b

amostra

– b

padrão

Utilizou-se um delineamento casualizado com 3 repetições em esquema fatorial

3x6x5, sendo três níveis de solvente (água, solução aquosa de etanol 50% e álcool etílico

95%), seis níveis de pH (4,0; 5,0; 6,0; 7,0; 8,0 e 9,0), e cinco níveis de temperatura (35; 45;

55; 65 e 75°C), totalizando 90 tratamentos.

As análises foram realizadas no software estatístico SAS

(SAS, 1996) utilizando

um nível de 5% de significância.

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

A figura a seguir ilustra a amplitude de cores obtidas pelo corante de jenipapo

(Figura 1). A Tabela 1 mostra a média dos valores quantitativos para características de cor

dos extratos obtidos nas diferentes condições de extração.

Figura 1 – Extratos de corante de jenipapo obtidos em diversas condições.

Tabela 1 – Média dos valores quantitativos para características de cor dos extratos obtidos

nas diferentes condições de pH e temperatura utilizados na extração

Temperatura

Água

Etanol 50%

Etanol 95%

35°C

45.28

2.07

2.53

43.68

2.72

3.18

45.33

2.92

7.26

45°C

41.76

2.9

0.71

34.48

2.04

6.99

47.95

2.66

5.44

55°C

43.86

1.32

1.34

39.09

0.83

5.50

46.12

2.10

7.63

65°C

37.39

1.42

0.95

35.49

0.34

7.94

45.91

3.02

7.55

75°C

34.25

1.12

0.50

31.19

0.39

5.95

41.51

1.24

6.01

35°C

43.19

3.84

0.95

43.91

2.86

2.18

46.54

2.76

6.40

45°C

45.32

3.64

0.97

36.51

2.39

6.70

39.94

2.55

7.83

55°C

43.30

1.63

0.32

42.41

1.71

3.88

47.83

2.2

5.44

65°C

39.86

1.75

0.59

39.95

1.33

5.04

45.44

1.76

7.85

75°C

42.23

1.12

5.32

37.90

0.53

3.19

.79

2.13

3.09

35°C

47.97

1.23

4.86

46.09

2.74

2.31

53.04

3.54

5.74

45°C

46.79

2.88

0.25

38.02

2.33

5.19

46.35

3.08

6.66

55°C

40.35

2.72

1.23

35.17

0.97

7.40

50.49

2.41

4.21

65°C

41.22

2.18

0.77

39.08

0.52

3.79

43.75

1.67

75°C

38.88

0.37

3.94

34.39

0.13

3.62

37.14

1.10

5.69

35°C

41.98

3.92

2.01

47.97

3.62

2.31

42.47

2.60

8.65

45°C

41.44

3.82

1.76

43.47

2.33

2.90

47.56

3.00

5.76

55°C

41.73

2.30

0.44

43.25

1.88

4.85

48.22

2.19

5.97

65°C

41.

2.57

0.24

32.48

0.12

6.49

42.26

1.70

7.29

75°C

38.01

1.04

2.36

36.56

0.74

3.39

36.81

0.39

6.52

35°C

47.68

2.03

1.8

46.20

2.41

0.63

46.96

3.06

5.91

45°C

44.56

3.73

0.56

39.64

2.77

4.58

46.15

3.62

7.76

55°C

36.96

2.61

3.27

40.37

2.52

5.01

44.17

1.88

8.06

65°C

46.40

1.42

3.97

36.70

0.41

5.82

41.5

1.10

6.17

75°C

38.56

0.62

3.54

34.04

0.18

5.04

43.50

1.87

5.64

35°C

49.83

1.48

4.72

46.44

2.34

0.92

52.28

3.01

5.91

45°C

44.28

2.50

0.77

41.43

1.74

42.88

2.96

6.55

55°C

46.62

0.58

3.35

33.11

1.16

6.94

46.68

1.59

6.06

65°C

41.02

2.12

1.46

35.98

0.32

5.73

44.89

1.60

8.24

75°C

40.17

1.94

0.93

34.36

0.62

3.36

33.10

0.62

7.11

Pela análise de variância não foi verificada interação tripla entre os fatores solvente,

pH e temperatura (p ≤ 0,05), mostrando interação significativa apenas entre pH e

temperatura e entre solvente e temperatura. O desdobramento da interação pH e

temperatura através de uma superfície de resposta (Figura 2) indica uma tendência geral de

menor desvio em maior temperatura e menor pH, ou seja, nas condições de extração de pH

4,0 e temperatura de 75°C. O menor desvio significa uma maior proximidade com a cor do

padrão.

Figura 2 – Curva de superfície de resposta do desvio do extrato para as variáveis pH e

temperatura.

Esses resultados são coerentes com os encontrados por Penalber et al. (1996), que

relatam a variação de cor com o pH. Visualmente observou-se um maior escurecimento do

azul, com tendência ao preto, quando a temperatura foi aumentada, sem, entretanto,

descaracterizar a cor. Apesar disso, o desvio diminuiu, pois o azul de indigotina tem uma

cor bem escura e saturada, ou seja, à medida que se aumentava a temperatura, a intensidade

da cor também aumentava e essa ficava mais próxima do padrão, refletindo num menor

desvio. Esse resultado justifica-se pelo fato dos extratos não terem atingido o limite de

temperatura (80°C), o que possibilitou a manutenção da cor (PENALBER et al., 1996).

Os resultados são contraditórios aos relatados por Nazaré (1998) no que diz respeito

ao pH, que menciona o uso de solução diluída de NaOH, para a extração de corante de

jenipapo. Entretanto, como não há nenhuma avaliação das características da cor obtida ou

comparação com algum outro corante sintético, não é possível fazer comparações entre os

trabalhos.

No desdobramento da interação entre solvente e temperatura, os extratos etanólicos

tanto a 50% quanto a 95% apresentaram um comportamento similar (Figuras 3 e 4). Ambos

os solventes apresentaram diminuição linear do desvio em relação ao padrão azul de

indigotina quando a temperatura foi aumentada. O decréscimo do desvio significa que o

corante obtido está com as características de tonalidade e saturação mais próximas do

padrão. Dessa forma os resultados indicam que os corantes produzidos nas temperaturas

mais elevadas assemelham-se mais ao padrão. Esse resultado sugere que a reação é

acelerada pelo aumento da temperatura.

Figura 3 - Comportamento da coloração expressa em desvio na extração com solvente

etanol 50% em relação à temperatura.

Figura 4 - Comportamento da coloração expressa em desvio na extração com solvente

etanol 95% em diferentes temperaturas.

Em relação ao solvente água, notou-se um comportamento diferente. Enquanto as

soluções de etanol 50% e 95% mantiveram o comportamento obtido com o desdobramento

da interação pH x temperatura, com ótimo em temperatura de 75°C, a água apresentou um

comportamento de parábola, com ótimo em torno de 55°C (Figura 5). Além disso, a

amplitude da variação foi menor do que para os extratos etanólicos. Essa variação pode ser

justificada pelo padrão utilizado, uma vez que o azul de indigotina apresenta coloração

menos intensa quando dissolvido em água. A observação visual mostra um aumento na

intensidade da cor com o aumento da temperatura. Dessa forma, em temperaturas mais

baixas não se tem uma formação satisfatória de cor, e em temperaturas mais elevadas a cor

afasta-se do padrão em água, aumentando novamente o desvio.

Figura 5 - Comportamento da coloração expressa em desvio na extração com solvente água

em relação à temperatura.

Verificou-se visualmente uma grande variação no experimento de uma unidade

experimental para outra. Apesar de ter sido feita uma padronização do tamanho dos frutos

para evitar uma possível fonte de erro, uma vez que Penalber et al. (1996) já haviam

relatado a variação da intensidade do corante em função do tamanho dos frutos verdes, essa

não foi uma medida suficientemente eficaz na minimização do erro experimental. A

variação de fruto para fruto era muitas vezes percebida já no momento que esse era aberto,

quando alguns já apresentavam coloração azul (Figura 6). Essa variação talvez seja mais do

momento de maturação do fruto e/ou pela ocorrência de injúrias não perceptíveis, pois em

outra avaliação visual dos frutos percebeu-se que quando amassados esses apresentaram cor

azul na região injuriada.

Figura 6 – Fruto verde de jenipapo normal (A) e com formação prévia de coloração azul

(B).

4. CONCLUSÃO

Conforme relatado na literatura, o jenipapo mostrou-se fonte de corante azul. Foi

possível obter o corante tanto em água, como em solução aquosa de etanol a 50% e 95%,

sendo observada uma coloração mais intensa e escura nas soluções com etanol.

A extração foi afetada tanto pelo pH da solução solvente utilizada, quanto pela

temperatura empregada. Os corantes obtidos foram se aproximando dos padrões a medida

que o pH diminuía e a temperatura aumentava, sendo o ótimo em pH 4,0 e temperatura de

75°C. A temperatura ótima para as soluções etanólicas também foi a 75°C. O mesmo não

foi observado para a água, que apresentou melhor extração em 55°C.

B A

CAPÍTULO 2 – INFLUÊNCIA DE pH, OXIGÊNIO E LUZ NA ESTABILIDADE DA

COR DOS EXTRATOS

1. INTRODUÇÃO

A utilização dos corantes naturais requer o conhecimento químico de suas

moléculas para adaptá-las às condições de uso em processos, embalagens e distribuição.

Atualmente, permite-se o uso de sete corantes artificiais por diversas razões técnicas:

estabilidade, pureza, disponibilidade e superioridade tecnológica com relação aos corantes

naturais. Por outro lado, a utilização dos artificiais é limitada por diversos fatores:

imposições legais, publicidade adversa e interesse do consumidor por produtos naturais.

Vários fatores afetam a estabilidade da cor em alimentos pigmentados durante a

preparação, o processamento e a estocagem. Estes fatores incluem calor, pH, luz, presença

ou ausência de oxigênio, metais e outros químicos e atividade de água.

Com base no crescente interesse pelos corantes naturais em função dos possíveis

riscos associados aos sintéticos, elevou-se consideravelmente o volume de pesquisas em

pigmentos naturais, sua estrutura química, reações e estabilidade. Grande parte dessas

investigações foi voltada para a estabilização de pigmentos naturais mediante tratamentos

físicos ou químicos (PIMENTEL, 1995).

Essa tendência é ainda mais forte no exterior e aos poucos vem crescendo no Brasil.

Isso obriga as principais indústrias e centros de pesquisa a desenvolverem estudos para

permitir o uso mais intenso de corantes naturais. É um esforço concentrado e que se

aproveita da cautela mundial com os corantes sintéticos, contra os quais vários estudos ao

longo dos anos vêm apontando problemas de alergia e outros malefícios à saúde, como

hiperatividade, entre outros. A notoriedade que os corantes naturais vêm assumindo deve-se

não só à tendência mundial de consumo de produtos naturais, mas também às propriedades

funcionais atribuídas a alguns desses pigmentos. O apelo mercadológico estimula cada vez

mais o desenvolvimento de novos estudos com o intuito de superar as limitações

tecnológicas existentes.

A legislação brasileira, quanto à adoção de corantes e outros aditivos, está

respaldada nas recomendações do JECFA (Comitê FAO/OMS “Joint Experts in Food

Additives”), que elaborou, ao lado das especificações de identidade e pureza, as condutas a

serem observadas no trato dos estudos toxicológicos e as decisões sobre avaliações

toxicológicas.

Para os corantes naturais, a avaliação toxicológica deve ser considerada para três

grupos: a) corante isolado quimicamente inalterado de um alimento e usado no produto em

níveis normalmente nele encontrados, este corante é aceito como se fosse ingrediente

próprio do alimento, não sendo necessários dados toxicológicos; b) corante isolado

quimicamente inalterado de um alimento usado no produto em níveis superiores aos

normalmente nele encontrados, este corante deve ser avaliado como se fosse artificial; e c)

corante isolado de um alimento, porém quimicamente modificado durante a sua obtenção,

ou, então, extraído de outra fonte não-alimentar; este corante deve ser avaliado

toxicologicamente como se fosse corante artificial (PIMENTEL, 1995).

A instabilidade inerente aos pigmentos naturais não impede a sua utilização em

alimentos, uma vez que se tem demonstrado a sua viabilidade na indústria, em virtude de

certas modificações no processamento de determinados produtos, como por exemplo, a

adição do corante no final do processamento de doces cozidos e, acondicionamento em

embalagens adequadas para retardar o efeito da luz, principalmente em produtos líquidos

(PIMENTEL, 1995). A estabilidade inferior dos corantes naturais, em detrimento aos

artificiais, não é um fator que inviabilize sua utilização em produtos alimentícios, face às

adaptações no processamento e embalagem dos produtos, adotados pelas indústrias. Com

os avanços tecnológicos, a susceptibilidade à oxidação e a insolubilidade são problemas

superáveis (SILVA, 2001). Porém, as informações a respeito da toxicidade e de atividades

funcionais tanto de corantes naturais quanto artificiais são contraditórias, de certa forma, e

merecem maiores pesquisas.

Os pigmentos naturais são sensíveis a temperatura, luz, pH e oxigênio, os quais

interferem na estabilidade dos mesmos. Isso tem incentivado inúmeros estudos visando

detectar os limites de suscetibilidade a esses parâmetros que, se definidos, certamente

contribuirão para a sua aplicação em produtos alimentícios, farmacêuticos e outros

(SILVA, 2001).

Sendo assim, o presente experimento objetivou avaliar a influência do pH do meio,

da atmosfera parcialmente inerte e do efeito da luz na estabilidade dos pigmentos de

jenipapo obtidos por diferentes solventes.

2. MATERIAL E MÉTODOS

O presente trabalho foi conduzido no laboratório de Pigmentos Naturais do

Departamento de Tecnologia de Alimentos da Universidade Federal de Viçosa-MG.

Frutos verdes de jenipapo foram colhidos na fazenda Sempre-Viva, no município de

Camacan - BA. A coleta dos frutos foi feita diretamente no pé e a caracterização de fruto

como verde se deu por avaliação do tamanho e rigidez dos frutos, uma vez que quando

maduros são inadequados para a produção de pigmentos. Os frutos foram colhidos nos

meses de novembro e dezembro de 2006 e mantidos em freezer durante todo o período de

pós-colheita e realização da pesquisa.

Para os testes de estabilidade foram feitas extrações com os solventes etanólicos

(50% e 95%), pois foram os que apresentaram visualmente maior poder extrator,

originando extratos com maior intensidade da cor azul. A escolha dos solventes alcoólicos

em detrimento da água foi também fundamentada na viabilidade econômica da obtenção

dos corantes, uma vez que a eliminação de água torna o processo demorado e caro. As

extrações foram efetuadas nas condições ótimas definidas no s testes de extração no capítulo

1: pH 4,0 e 75

Os extratos obtidos foram submetidos a diferentes condições de armazenamento,

visando avaliar o efeito dos parâmetros pH (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e atmosfera

inerte) e luz (presença e ausência) na estabilidade dos mesmos. Dessa forma foram obtidos

8 tratamentos distintos, caracterizados pela combinação dos parâmetros a serem avaliados.

Os tratamentos são descritos a seguir e ilustrados na Figura 1: T1? pH 4,0 / oxigênio / luz;

T2? pH 4,0 / oxigênio / escuro; T3? pH 4,0 / nitrogênio / luz; T4? pH 4,0 / nitrogênio /

escuro; T5? pH 6,0 / oxigênio / luz; T6? pH 6,0 / oxigênio / escuro; T7? pH 6,0 /

nitrogênio / luz; T8? pH 6,0 / nitrogênio / escuro.

Figura 1 – Fluxograma representativo do experimento do estudo da estabilidade dos

extratos.

Para avaliar o efeito do pH diluíram-se 15 mL do extrato em 30 mL de solução

tampão de ácido cítrico (C

) / bifosfato de sódio (Na

HPO

) em pH 4,0 e 6,0. Os

valores de pH foram definidos por representarem a faixa utilizada em alimentos.

Para o estudo da estabilidade à luz foram utilizados frascos de cor âmbar e frascos

transparentes de 60 mL, providos de tampa de borracha auto-selante e lacre de alumínio. A

cada frasco foram adicionados 45 mL da solução do extrato de jenipapo com a solução

tampão. Aos extratos foi adicionado sorbato de potássio, na concentração de 0,01%, para

evitar o crescimento fúngico.

Uma parte desses frascos foi colocada em um suporte de madeira posicionado entre

duas lâmpadas fluorescentes de 40 w, 2.500 lux, correspondente à luz do dia, a uma

distância de 40 cm dos frascos em temperatura ambiente. O restante dos frascos

permaneceu, à mesma temperatura, porém no escuro. Metade dos frascos antes de serem

lacrados, foi submetida a um fluxo de nitrogênio, para a redução do oxigênio residual.

O extrato obtido foi analisado por colorimetria em um colorímetro HunterLab,

modelo ColorQuest XE (Reston, USA). As condições de análise no colorímetro foram

iluminante D65 e Observer 10*. As leituras colorimétricas dos desvios em relação ao

padrão foram feitas a cada 7 dias por um período de 6 semanas. Os padrões eram as

amostras no tempo zero, ou seja, lo go após a extração. Dessa forma foram estabelecidos

quatro padrões, pois o parâmetro luz não tinha como ser aplicado previamente.

As variáveis analisadas foram o desvio da cor em relação ao padrão, a tonalidade e a

saturação, sendo essas últimas obtidas a partir dos valores de a e b fornecidos pelo

colorímetro e aplicados nas fórmulas de c e h (Equações 1 e 2).

bac += (1)

)/arctan( abh =

(2)

Em que:

c é o índice de saturação da cor.

h° é o ângulo de tonalidade da cor.

Utilizou-se um delineamento casualizado com 3 repetições em esquema fatorial

8x6, sendo oito níveis de tratamentos (T1? pH 4,0 / oxigênio / luz; T2? pH 4,0 / oxigênio

/ escuro; T3? pH 4,0 / nitrogênio / luz; T4? pH 4,0 / nitrogênio / escuro; T5? pH 6,0 /

oxigênio / luz; T6? pH 6,0 / oxigênio / escuro; T7? pH 6,0 / nitrogênio / luz; T8? pH

6,0 / nitrogênio / escuro) e seis níveis de tempo (1, 2, 3, 4, 5 e 6 semanas).

As análises foram realizadas no software estatístico SAS

(SAS, 1996) utilizando

um nível de 5% de significância.

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

As Tabelas 1 e 4 apresentam os testes de comparação de médias para a variável

desvio, considerando os solventes etanol 50% e 95%, respectivamente. Neste caso foi

adotado o teste de Tukey, embora os tratamentos sejam identificados por níveis

quantitativos (tempos). Este procedimento foi adotado porque não era de interesse avaliar o

efeito de tempos intermediários não estudados, ou seja, não era de interesse realizar análise

de regressão. Além disso, o comportamento das variáveis analisadas ao longo do tempo não

permitiu o ajuste de nenhum modelo de regressão (Figuras 2 e 3).

Figura 2 – Comportamento do desvio em relação ao padrão dos tratamentos ao longo do

tempo de armazenamento em semanas, em solvente etanol 50%, para diferentes pHs (4,0 e

6,0), oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença e ausência).

Figura 3 – Comportamento do desvio em relação ao padrão dos tratamentos ao longo do

tempo de armazenamento em semanas, em solvente etanol 95%, para diferentes pHs (4,0 e

6,0), oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença e ausência).

Todos os resultados apresentados nas Tabelas 1 e 4 indicam que existem diferenças

entre os tempos considerados, embora a amplitude dos valores das médias seja pequena.

De forma geral, para obtenção de resultados de ordem técnica e laboratorial, mesmo

a amplitude dos desvios sendo de pequena magnitude, é interessante discutir as diferenças

significativas entre as médias, pois as mesmas podem ser usadas para aprimorar a

elaboração de experimentos futuros.

3.1. ESTABILIDADE DOS EXTRATOS OBTIDOS COM ETANOL 50%

A análise de variância para o solvente etanol a 50 % mostrou interação significativa

entre tratamentos e tempo, o que significa que houve diferença entre os tratamentos durante

o tempo de estocagem.

De modo geral os tratamentos apresentaram comportamento bem similar, alterando-

se apenas as intensidades dos desvios em relação ao padrão, com picos de máximo no

tempo 2 e no tempo 5, que correspondem a duas e cinco semanas de estocagem

respectivamente. O tratamento 5 (pH 6,0 / oxigênio / luz) apresentou um comportamento

um pouco diferente dos demais.

Aplicando-se o teste de Tukey ao nível de 5% de significância para comparar os

tratamentos em cada tempo, não houve diferença significativa entre os tratamentos na

primeira semana, tempo 1 (Tabela 1). Com o passar do tempo, de modo geral, o tratamento

1 (pH 4,0/ oxigênio/ luz) foi o que apresentou pior desempenho, tempos 2, 3, 4 e 5,

caracterizado por maior desvio, e o tratamento 2 (pH 4,0/ oxigênio/ escuro) foi o que

apresentou menor desvio na maior parte do tempo, tempos 3, 4 e 6, ou seja, uma menor

variação da cor durante a estocagem. Em alguns momentos, tempos 2 e 5, T5 (pH 6,0 /

oxigênio / luz) apresentou menor desvio, mas quando isso foi observado, não houve

diferença significativa entre as médias de T5 (pH 6,0 / oxigênio / luz) e T2 (pH 4,0 /

oxigênio / escuro), permitindo assim apontar T2 como o melhor.

Tabela 1 – Médias dos desvios dos tratamentos ao longo do tempo de armazenamento em

semanas, em solvente etanol 50%, para diferentes pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e

atmosfera inerte) e luz (presença e ausência).

Tempo 1

Tempo 2

Tempo 3

Tempo 4

Tempo 5

Tempo

1.90

1.85

1.62

1.71

1.84

2.31

1.14

1.73

1.46

1.48

1.77

2.23

1.10

1.66

1.41

1.29

abc

1.76

1.38

1.06

1.51

abc

1.13

1.27

abc

1.68

.23

1.03

1.45

abc

1.05

bcd

1.65

abc

0.99

0.41

1.32

abc

0.85

0.89

1.44

bcd

0.85

0.37

1.28

0.82

0.89

1.27

0.63

0.31

1.09

0.66

0.76

1.08

0.57

*Médias na mesma coluna seguidas pela mesma letra não apresentam diferença significativa ao nível de 5%

de probabilidade, pelo teste de Tukey.

Apesar da diferença entre T1 (pH 4,0 / oxigênio / luz) e T2 (pH 4,0 / oxigênio /

escuro) indicar uma melhor conservação em ambiente sem luz, o mesmo não se observa

quando analisadas as médias dos outros tratamentos cuja diferença é somente a presença ou

ausência de luz, como é o caso dos tratamentos T3 e T4, T5 e T6, T7 e T8. Esses

tratamentos apresentaram comportamentos bem similares ao longo do tempo e sem

diferença significativa (p > 0,05). Essa não diferenciação dos tratamentos no claro e no

escuro também foi observada no trabalho de Butler et. al (2003), que não observaram

diferenças qualitativas entre misturas de quitosana e genipina deixadas no escuro ou sob

luz. Esse comportamento justifica-se principalmente se considerarmos que essa é uma

reação de polimerização e que, uma vez iniciada, tem seu desenvolvimento contínuo.

Os resultados sugerem uma relação entre o pH e a presença ou ausência de

oxigênio, com tendência ao favorecimento do desvio pela presença de oxigênio. Quando

observados separadamente os tratamentos que estavam sob oxigênio atmosférico dos que

receberam nitrogênio, os tratamentos em maior pH (pH 6,0) apresentaram os menores

desvios. Nos tempos 2 e 5 não houve diferença significativa (p > 0,05) pelo teste de Tukey

entre os tratamentos. Nos outros tempos verificaram-se diferenças entre os grupos de maior

e menor pH, com menor desvio nos de maior pH. A presença de hidroxilas na molécula de

genipina pode ser a responsável por essa diferença, uma vez que em menor pH as hidroxilas

devem estar mais desprotonadas e isso pode afetar na coloração do pigmento. O trabalho de

Butler et al. (2003) também relata uma influência significativa da exposição ao ar da

mistura de quitosona e genipina no desenvolvimento da coloração azul, com maior

formação de cor próxima à superfície. Entretanto, vale ressaltar que quando usados outros

agentes para a formação de géis, a formação da cor foi uniforme. Esse fato demonstra a

importância de outros fatores na formação e manutenção da cor, como o substrato.

Ao se utilizar o teste de Tukey para comparar a saturação de cor dos tratamentos em

cada tempo, confirma-se a superioridade do tratamento 2 (pH 4,0 / oxigênio / escuro ), uma

vez que este mostra-se estatisticamente diferente dos demais nos tempos 1, 3, 4 e 6. Porém,

nos tempos 2 e 5 este tratamento apresentou o mesmo efeito que T4 (pH 4,0 / nitrogênio /

escuro) (p > 0,05) (Tabela 2). Esse resultado sugere a importância do pH 4,0 e do escuro na

obtenção de um corante com boa estabilidade e maior saturação, bem como a pouca

interferência da aplicação de nitrogênio. Isso ressalta o indício de que o oxigênio atua

apenas como catalisador da reação de formação do pigmento.

Tabela 2 – Médias de croma ou saturação da cor dos tratamentos ao longo do tempo de

armazenamento em semanas, em solvente etanol 50%, para diferentes pHs (4,0 e 6,0),

oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença e ausência).

Tempo 1

Tempo 2

Tempo 3

Tempo 4

Tempo 5

Tempo 6

3.03

2.74

2.48

2.33

2.37

2.07

2.44

2.05

2.02

1.6

2.02

1.54

2.00

1.44

1.35

1.4

1.52

1.90

1.34

1.23

1.46

1.83

1.27

1.18

1.35

*Médias na mesma coluna seguidas pela mesma letra não apresentam diferença significativa ao nível de 5%

de probabilidade, pelo teste de Tukey.

No que se refere à tonalidade da cor, o comportamento dos tratamentos também foi

similar, com picos observados nos tempos 3 e 4. Os tratamentos 5 (pH 6,0 / oxigênio / luz )

e 1 (pH 4,0 / oxigênio / luz) apresentaram as maiores tonalidades, alternando o melhor

desempenho entre eles e em alguns momentos não apresentando diferença significativa

(p<0,05) (Tabela 3). Entretanto, esses maiores valores podem não ser muito interessantes,

uma vez que estão muito próximos ao final da faixa da tonalidade azul (200° a 295°) e

entrando na tonalidade violeta, saindo em alguns momentos da tonalidade azul.

Tabela 3 – Médias de tonalidade da cor dos tratamentos ao longo do tempo de

armazenamento em semanas, em solvente etanol 50%, para diferentes pHs (4,0 e 6,0),

oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença e ausência).

Tempo 1

Tempo 2 Tempo 3

Tempo 4

Tempo 5

Tempo 6

288

285

295

294

289

284

294

289

288

283

290

291

286

288

281

289

290

285

287

280

289

284

280

279

287

286

283

279

284

281

*Médias na mesma coluna seguidas pela mesma letra não apresentam diferença significativa ao nível de 5%

de probabilidade, pelo teste de Tukey.

3.2. ESTABILIDADE DOS EXTRATOS OBTIDOS COM ETANOL 95%

Assim como para o etanol 50%, verificaram-se diferenças entre os tratamentos ao

longo do tempo de estocagem para a variável desvio, com detalhe para uma menor

uniformidade dos comportamentos.

Nos tempos 1 e 5 não houve diferença significativa entre as médias ao nível de 5%

de probabilidade pelo teste de Tukey. De modo geral não foi verificado um tratamento que

tenha se destacado como melhor, entretanto, o tratamento 5 (pH 6,0/ oxigênio/ luz)

apresentou maior média na maior parte do tempo, tempos 2, 3, 4 e 5, o que indica um maior

desvio e conseqüentemente uma maior alteração da cor durante o armazenamento (Tabela

4).

Não se verificou diferenças significativas ao longo do tempo (p<0,05) entre os

tratamentos armazenados em pH 4,0 (T1, T2, T3 e T4).

Tabela 4 – Médias de desvio da cor dos tratamentos ao longo do tempo de armazenamento

em semanas, em solvente etanol 95%, para diferentes pHs (4,0 e 6,0), oxigênio (presença e

atmosfera inerte) e luz (presença e ausência).

Tempo 1

Tempo 2

Tempo

Tempo 4

Tempo 5

Tempo 6

1.86

2.09

2.51

1.63

1.7

2.09

1.41

1.6

1.4

abc

2.34

1.16

1.10

1.6

1.16

1.06

1.17

1.28

0.91

1.01

0.73

1.0

*Médias na mesma coluna seguidas pela mesma letra não apresentam diferença significativa ao nível de 5%

de probabilidade, pelo teste de Tukey.

Comparando os tratamentos armazenados na ausência e presença de oxigênio

percebeu-se menor estabilidade naqueles estocados em maior valor de pH (pH 6,0),

resultado contrário ao obtido em etanol 50%. No grupo dos submetidos à atmosfera com

oxigênio, o tratamento 5 (pH 6,0/ oxigênio/ luz) foi o que apresentou pior desempenho.

Nesse caso, a presença maior de álcool pode contribuir para a alteração do pH e

conseqüentemente da estabilidade.

Já no grupo dos tratamentos armazenados em atmosfera inerte verificou-se uma

separação nos tempos 3 e 4 entre os tratamentos de pH iguais: T3 (pH 4,0 / nitrogênio / luz)

e T4 (pH 4,0 / nitrogênio / escuro); T5 (6,0 / oxigênio / luz) e T6 (pH 6,0 / oxigênio /

escuro), com melhor desempenho, ou seja maior estabilidade verificada nos tratamentos

submetidos a valores inferiores de pH: T3 (pH 4,0 / nitrogênio / luz) e T4 (pH 4,0 /

nitrogênio / escuro).

No que se refere à saturação de cor dos tratamentos, num primeiro momento há um

melhor desempenho dos tratamentos de maior pH (6,0), com destaque para o tratamento 6

(pH 6,0/ oxigênio/ escuro), como mostrado na Tabela 5. A partir do tempo 5 não há mais

essa nítida distinção entre os tratamentos, e a diferença estatística entre os mesmos passa a

ser não significativa (p > 0,05), mesclando os dois grupos de pH.

Tabela 5 – Médias de croma e saturação da cor dos tratamentos ao longo do tempo de

armazenamento em semanas, em solvente etanol 95%, para diferentes pHs (4,0 e 6,0),

oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença e ausência).

Tempo 1

Tempo 2

Tempo 3

Tempo 4

Tempo 5

Tempo 6

.86

1.4

*Médias na mesma coluna seguidas pela mesma letra não apresentam diferença significativa ao nível de 5%

de probabilidade, pelo teste de Tukey.

A Tabela 6 apresenta a variação da tonalidade de cor ao longo do tempo de

armazenamento. Os comportamentos são similares, com exceção do tratamento 6 (pH 6,0 /

oxigênio / escuro) que apresenta uma curva menos acentuada e com menores valores, e de

T5 que apresenta um comportamento diferente. Esse comportamento similar é confirmado

pelo teste Tukey que só não apresentou grandes grupos de diferença de médias não

significativas (p < 0,05) nos tempos 2 e 4, onde T5 apresentou maior tonalidade, mas, do

mesmo modo que no solvente a 50%, essa maior tonalidade não é interessante pois saiu da

faixa de tonalidade do azul.

Tabela 6 – Médias de tonalidade da cor dos tratamentos ao longo do tempo de

armazenamento em semanas, em solvente etanol 95%, para diferentes pHs (4,0 e 6,0),

oxigênio (presença e atmosfera inerte) e luz (presença e ausência).

Tempo 1

Tempo 2

Tempo 3

Tempo 4

Tempo 5

Tempo 6

285

287

293

303

287

291

283

292

283

288

282

280

290

289

283

284

282

280

289

283

284

281

279

288

287

282

284

278

279

284

286

281

283

277

276

282

283

280

268

271

270

*Médias na mesma coluna seguidas pela mesma letra não apresentam diferença significativa ao nível de 5%

de probabilidade, pelo teste de Tukey.

Esses dados sugerem uma homogeneidade de tonalidade ao longo do tempo de

armazenamento, ao empregar etanol 95% como solvente extrator dos pigmentos de

jenipapo.

4. CONCLUSÃO

Houve interação significativa entre tratamentos e tempo, o que significa que houve

diferença entre os tratamentos durante o tempo de estocagem.

Para a solução de etanol 50%, o tratamento nas condições de pH 4,0 / oxigênio /

escuro foi aquele que apresentou menores desvios, caracterizando como o de melhor

desempenho. Este mesmo tratamento foi o que apresentou maior saturação da cor. Já o

tratamento em pH 4,0 / oxigênio / luz foi o que teve os maiores desvios, conseqüentemente

aquele de pior desempenho. No entanto, foi o que apresentou a maior tonalidade,

juntamente com o tratamento nas condições de pH 6,0 / oxigênio / luz, mas que em alguns

momentos sairam da faixa de tonalidade do azul.

Para o solvente etanol 95% observou-se uma menor estabilidade nos tratamentos em

maior pH (6,0), com pior desempenho quando o pH 6,0 estava associado à presença de

oxigênio e luz. Na saturação da cor o inverso foi observado, com melhor desempenho dos

tratamentos em pH 6,0 e destaque para as condições de pH 6,0 / oxigênio / escuro. Houve

ainda uma tendência de uniformização da tonalidade.

Os resultados indicam que houve alterações mais intensas nos tratamentos quando

utilizada solução de etanol 50% como solvente extrator.

CONCLUSÃO GERAL

O jenipapo mostrou-se fonte de corante azul, sendo possível obter o corante tanto

em água, como em solução aquosa de etanol a 50% e 95%, sendo observada uma coloração

mais intensa e escura nas soluções com etanol.

A extração foi afetada tanto pelo pH da solução solve nte utilizada, quanto pela

temperatura empregada, obtendo-se melhor extração em pH 4,0 e temperatura de 75°C.

Entretanto, a água apresentou melhor extração em 55°C.

Houve interação significativa entre os tratamentos e o tempo de armazenamento nas

soluções extraídas em etanol 50% e 95%. Para a solução de etanol 50%, o tratamento nas

condições de pH 4,0 / oxigênio / escuro foi aquele que apresentou melhor manutenção da

cor e maior saturação. Já o tratamento em pH 4,0 / oxigênio / luz foi o que teve pior

desempenho.

Para o solvente etanol 95% observou-se uma menor estabilidade nos tratamentos em

maior pH (6,0), com pior desempenho quando o pH 6,0 estava associado à presença de

oxigênio e luz. Na saturação da cor o inverso foi observado, com melhor desempenho dos

tratamentos em pH 6,0 e destaque para as condições de pH 6,0 / oxigênio / escuro.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

ANDRADE, S. A. C.; METRI, J. C.; BARROS NETO, B. de; GUERRA, N. B.

Desidratação osmótica do jenipapo (Genipa americana L.). Ciência e Tecnologia de

Alimentos, n. 23, v. 2, p. 276-281, 2003.

ALVES, G. L. Compostos voláteis importantes para o aroma de jenipapo (Genipa

americana L.) e murici (Byrsonima crassifolia L. RICH). 2004. 136 f. Tese (Doutorado)

– Faculdade de Engenharia de Alimentos, Universidade Estadual de Campinas, Campinas.

ARAÚJO, J. M. A. Corantes Naturais. In: Química de Alimentos – Teoria e Prática. 2. ed.

Viçosa: UFV, 2001. p. 359 – 363.

BORGES, E. S.; REZENDE, C. M. Main aroma constituents of genipap (Genipa

americana L.) and bacuri (Platonia insignis M.). Journal of Essential Oil Research, n. 12,

p. 71-74, 2000.

BUTLER, M. F.; YIU-FAI, NG.; PUDNEY, P. D. A. Mechanism and Kinetics of the

Crosslinking Reaction between Biopolymers Containing Primary Amine Groups and

Genipin. Journal of Polymer Science: Part A: Polymer Chemistry, v. 41, p. 3941 –

3953, 2003.

CRUZ, P. E. N.; PEREIRA, S. S. Estudo de frutos do estado do Maranhão – oiti, murici e

jenipapo. Encontro de Profissionais de Química da Amazônia 5., 1985, São Luiz. Anais.

São Luiz, 1985.

EPSTEIN, L. Cultivo e aproveitamento do jenipapo. Bahia Agrícola, v. 4, n. 3, p. 23-24,

2001.

a) FIGUEIREDO, R. W. de; MAIA, G. A.; HOLANDA, L. F. F. de; MONTEIRO, J. C. S.

Características Físicas e químicas do Jenipapo. Pesquisa Agropecuária Brasileira, v. 21,

n. 4, p. 421-428, 1986.

b) FIGUEIREDO, R. W. de; MAIA, G. A.; HOLANDA, L. F. F. de; MONTEIRO, J. C. S.

Processamento e estabilidade de néctares de jenipapo submetidos a diferentes métodos de

conservação. Pesquisa Agropecuária Brasileira, v. 21, n. 10, p. 1077-1084, 1986.

FIGUEIREDO, R. W. de; MAIA, G. A.; MONTEIRO, J. C. S.; FIGUEIREDO, E. A. T. de

Composição de ácidos graxos na fração lipídica da polpa e sementes do jenipapo ( Genipa

americana, L.). Boletim do CEPPA, v. 9, n. 2, p. 149-154, 1991.

FURTADO, M. Indústria de alimentos adere aos corantes naturais. Revista Química e

Derivados, São Paulo, mar. 2003. Disponível em: <http://www.quimica.com.br/revista/

qd421/corantes1.htm >. Acesso em: 6 fev. 2006.

GOTTLIEB, O. R.; MORS, W. B. Potential Utilization of Brazilian Wood Extractives.

Journal of Agricultural and Food Chemistry, v. 28, n. 2, p. 196-215, 1980.

HENRY, B. S. Natural food colours. In: HENDRY, G. A. F.; HOUGHTON, J.D. Natural

Food Colorants. 2. ed. Great Britain: Chapman & Hall, 1996. p. 40-79.

HUNTER: HunterLab User`s Manual. Reston, Virginia. 2000.

KATO, O. R.; OLIVEIRA, V. P. de; FARIA, L. J.G. de. Plantas corantes da Amazônia. In:

FARIA, L. J.G. de.; COSTA, C. M. L. Tópicos Especiais em Tecnologia de Produtos

Naturais. Belém: Universidade Federal do Pará, 1998. cap. 3, 41-55.

LORENZI, H. Árvores Brasileiras : manual de identificação e cultivo de plantas arbóreas

do Brasil. v. 1. 2ª ed. São Paulo: Plantarum, 1998. p. 302.

LOZANO, R. D. La medición psicofísica del color. In: El color y su medición. 1 ed.

Buenos aires: Américalee S.R.L., 1978. p. 187-204.

MASCARENHAS, J. M. O. Corantes em Alimentos: Perspectivas, Uso e Restrições.

1998. 150 f. Tese (Mestrado em Ciência e Tecnologia de Alimentos) – Faculdade de

Engenharia de Alimentos, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa.

NAZARÉ, R. F. de. Obtenção e aplicação de corantes naturais. In: FARIA, L. J.G. de.;

COSTA, C. M. L. Tópicos Especiais em Tecnologia de Produtos Naturais. Belém:

Universidade Federal do Pará, 1998. cap. 4, 56-73.

ONO, M.; UENO, M.; MASUOKA, C.; IKEDA, T.; NOHARA, T. Iridoid glucosides from

the fruit of Genipa americana. Chemical and pharmaceutical bulletin, v. 10, n. 53, p.

1342-4344. 2005.

PENALBER, T. J. de A.; SADALA M. A. C.; CASTRO, M. S.; FARIA, L. J. G. de.

Ensaios de extração e aplicação de corantes do fruto do jenipapeiro (Genipa americana).

Revista Brasileira de corantes Naturais, v.2, n. 1, p. 129-135, 1996.

PIMENTEL, F. A. Avaliação de métodos de obtenção e da estabilidade de pigmentos

de sementes de Urucum (Bixa orellana L.). 1995. 109 f. Tese (Mestrado em Ciência e

Tecnologia de Alimentos) – Faculdade de Engenharia de Alimentos, Universidade Federal

de Viçosa, Viçosa.

PONTES, L. V. Avaliação sensorial e instrumental da cor de misturas em pó para

refresco, bebida isotônica e gelatina utilizando corantes naturais. 2004. 86 f. Tese

(Mestrado em Ciência e Tecnologia de Alimentos) – Faculdade de Engenharia de

Alimentos, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa.

RAMOS, E. M.; GOMIDE, L. A. de M. Avaliação Objetiva da Cor. In: Avaliação da

Qualidade de Carnes – Fundamentos e Metodologias. 1. ed. Viçosa: UFV, 2007. p. 287 –

374.

ROSA, L. C. C. Corantes Naturais em Alimentos: Preferência do Consumidor e

Aplicação Industrial. 2004. 104 f. Tese (Mestrado em Ciência e Tecnologia de Alimentos)

– Faculdade de Engenharia de Alimentos, Universidade Federal de Viçosa, Viçosa.

SALGADO, S. M. de A. Estudo da estabilidade da betalaína extraída da beterraba-

vermelha de mesa (Beta vulgaris L.). 1997. 48 f. Tese (Mestrado em Ciência e Tecnologia

de Alimentos) – Faculdade de Engenharia de Alimentos, Universidade Federal de Viçosa,

Viçosa.

SAMPAIO-SANTOS, M. I.; KAPLAN, M. A. C. Biosynthesis significance of iridoids in

chemosystematics. Journal of the Brazilian Chemical Society, v.12, n.2, p.144-153.

2001.

SANDRI, S. Jenipapo. Globo Rural, v.13, n.147, p. 60-63, 1998.

SAS: Statistical Analysis System Users Guide. Haley, North Carolina. 1996.

SEBBENN, A. M. Estrutura Genética de Subpopulações de Genipa americana L.

(Rubiaceae) a partir de Isoenzimas. 1997. 107 f. Tese (Mestrado em Ciências Florestais)

– Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz”, Universidade de São Paulo,

Piracicaba.

SILVA, A. G. Extração e estabilidade dos carotenóides obtidos de tomate processado

(Lycopersicon esculentum Mill). 2001. 94 f. Tese (Mestrado em Ciência e Tecnologia de

Alimentos) – Faculdade de Engenharia de Alimentos, Universidade Federal de Viçosa,

Viçosa.

SILVA, A. P. da; LIMA, C. L. C. de; VIEITES, R. L. Caracterização química e física do

jenipapo (Genipa americana) armazenado. Scientia Agrícola, v. 55, n. 1, p. 29-34, 1998.

STINTZING, F. C.; CARLE, R. Functional properties of anthocyanins and betalains in

plants, food, and human nutrition. Food Science & Technology, n. 15, p. 19-38, 2004.

a) TOUYAMA, R.; TAKEDA, Y.; INOUE, K.; KAWAMURA, I.; YATSUZUKA, M.;

IKUMOTO, T.; SHINGU, T.; YOKOI, T.; INOUYE, H. Studies on the Blue Pigments

Produced from Genipin and Methylamine. I. Structures of the Brownish-Red Pigments,

Intermediates Leading to the Blue Pigments. Chemical and Pharmaceutical Bulletin, v.

42, n. 3, p. 668-673, 1994.

b) TOUYAMA, R.; INOUE, K.; TAKEDA, Y.; YATSUZUKA, M.; IKUMOTO, T.;

MORITOME, N.; SHINGU, T.; YOKOI, T.; INOUYE, H. Studies on the Blue Pigments

Produced from Genipin and Methylamine. II. On the Formation Mechanisms of Brownish-

Red Intermediates Leading to the Blue Pigment Formation. Chemical and

Pharmaceutical Bulletin, v. 42, n. 8, p. 1571-1578, 1994.

UEDA, S.; IWAHASHI, Y. Production of anti-tumor-promoting iridoid glucosides in

Genipa Americana and its cell cultures. Journal of Natural Products, v. 54, n. 6, p. 1677-

1680.1991.

XAVIER, M.; XAVIER, A.T.T.N. Jenipapo: uma espécie indígena para reflorestar.

Cerrado, v.8, n. 34, p. 20-23, 1976.

ZHANG, H.; ZHAN, J.; SU, K.; ZHANG, Y. A kind of potential food additive produced by

Streptomyces coelicolor: Characteristics of blue pigment and identification of a novel

compound, ?-actinorhodin. Food Chemistry, n. 95, p. 186–192, 2006.

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