( PDF ) Avaliação da interface osso/implante após o uso do copolímero de PLA/PGA associado a osso autógeno em coelhos: estudo biomecânico e imunohistoquímico

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UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA FILHO”

CÂMPUS DE ARAÇATUBA

FACULDADE DE ODONTOLOGIA

Avaliação

da interface

osso/implante

após

uso

do copolímero

de PLA/PGA

associado a

osso

autógeno em coelhos.

Estudo

bio

mecânico

imunohis

toquímico

Tese de doutorado apresentada à

Faculdade de Odontologia do “Campus de

Araçatuba

– UNESP”, como parte do

programa para obtenção do grau de

Doutor em Odontologia (Área de

Concentração em Cirurgia e Traumatologia

Buco

Maxilo

Facial)

Araçatuba

–

2008

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Livros Grátis

http://www.livrosgratis.com.br

Milhares de livros grátis para download.

UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA FILHO”

CÂMPUS DE ARAÇATUBA

FACULDADE DE ODONTOLOGIA

Avaliação da interface osso/implante

após

uso do copolímero de PLA/PGA associado a

osso autógeno em coelhos.

Estudo

bio

mecânico

imunohistoquímico

Tese de doutorado apresentada à

Faculdade de Odontologia do “Campus de

Araçatuba

– UNESP”, como parte do

programa para obtenção do grau de

Doutor em Odontologia (Área de

Concentração em Cirurgia e Traumatologia

Buco

Maxilo

Facial)

rientada:

Liliane Scheidegger da Silva Zanetti

Orientador:

Prof. Dr. Idelmo Rangel Garcia Júnior

Araçatuba

–

2008

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DADOS CURRICULARES

LILIANE SCHEIDEGGER DA S

LVA ZANETTI

Nascimento:

05/03/74

Vitória

–

Filiação:

Ivonete Scheidegger da Silva

Joel Henrique da Silva

1993/1997:

Graduação:

Curso de Odontologia da

Universidade do Federal do Espírito

Santo

UFES

1999/2001:

Pós

graduação:

Mestrado em Clínica Odontológica

Área de Concentração em Cirurgia

Faculdade de Odontologia de

Piracicaba

–

Unicamp/SP.

2005/2008

Pós

graduação:

Doutorado em Odontologia

Área de

Concentração em Cirurgia e

Traumatologia Buco

Maxilo

Facial

–

Faculdade de Odontologia de

Araçatuba

–

esp

/SP.

DEDICATÓRIA

OS MEUS QUERIDOS

JOEL,

IVONETE

GLA

UCO

PELO AMOR

DEDICADO SEMPRE

AGRADECIMENTO ESSENCIAL

DEUS

AUTOR E CONSUMADOR

DA MINHA FÉ

AGRADECIMENTOS

Prof. Dr. IDELMO RANGEL GARCIA JÚNIOR, meu orientador, pelos

ensinamentos prestados, pela sua paciência, tranqüilidade e liderança com

que rege todo este sistema de ensino e atenção à saúde, com tanto

entusiasmo, excelência e dedicação. Seu exemplo de profissionalismo

é,

sem

dúvida para nós

, modelo singular.

Profa. Dra. IVETTE BECCALLI, responsável pela minha formação

bási

ca na Cirurgia na UFES e minha iniciação na docência. Seu exemplo de

vida e profissionalismo me incentivou a seguir o caminho da área de Cirurgia

BMF. Agradeço imensamente pela confiança que sempre me dedicou, pelo

seu exemplo de vida e acima de tudo pela

fiel amizade.

Prof. Dr. JOSÉ RENATO COSTA, por me acompanhar desde a

minha iniciação na Cirurgia na UFES, pelos ensinamentos e incentivo. Meus

sinceros agradecimentos pelo apoio na realização do Mestrado e incentivo a

completar minha formação docente.

Aos Professores da Área de Cirurgia e Traumatologia BMF da F.

Piracicaba/Unicamp,

Prof. Dr. MÁRCIO DE MORAES

Prof. Dr. ROGER WILLIAM

FERNANDES MOREIRA

Prof. Dr. RENATO MAZZONETTO

Prof. Dr. LUIS AUGUSTO

PASSERI

e Prof. Dr. JOSÉ RICARDO DE ALBERGARIA BARBOSA, responsáveis pela

minha formação no Mestrado. Meus sinceros agradecimentos pelos

ensinamentos que fundamentaram minha formação clínica e docente

Prof. Dr.

RICARDO

LUIZ

CARVALHO GOTTARDI agradeço pela

confiança depositada em min na disciplina de Cirurgia BMF II da UFES,

sempre

com igualdade e respeito profissional, agradeço pelo apoio e incentivo dado na

realização do doutorado.

Profa. Dra. ROBERTA OKAMOTO, agradeço pela orientação e

participação direta nas fases da realização deste trabalho, pela competência e

paciência nos seus ensinamentos e extrema delicadeza e humanidade prestados

aos alunos da pós

graduação da FOA

Unesp.

Prof. Dr. OSWALDO MAGRO FILHO pelos ensinamentos e

dedicação

permitindo sempre um convívio agradável nas atividades do curso, estreitando os

laços de proximidade com

os alunos da pós

graduação

Aos colegas da Pós-

graduação:

JÉSSICA GULINELLI, LEANDRO DE

CARVALHO CARDOSO, MARCELO KAIATT, PAULO

DOMINGOS

, FLÁVIA PEREIRA,

MARCOS HEIDY

ALBANIR BORRASCA, pela convivência agradável durante o

período que estive em Araçatuba. Agradeço pelo apoio em diversos momentos

que precisei.

Em especial aos amigos

FRANCISLEY

SOUZA

THALLITA

QUEIROZ

agradeço pelo profundo respeito, profissionalismo e dedicação

demonstrados

realização dos experimentos, tendo sido fundamentais e verdadeiros

companheiros em todos os momentos.

À THAÍS RODRIGUES, por ter me acolhido em sua casa, tendo convivido

de maneira cordial e alegre sempre. Agradeço pela confiança e hospitalidade

que semp

re demonstrou.

À amiga CAMILA BENEZ RICIERI

agradeço

por permitir uma amizade

que a distância não apagará, tenho certeza será duradoura.

Agradeço

pelos

momentos alegres, e desejo que tenhamos muitos outros

ESFA

-Santa Tereza/ES

pela

compreensão e confiança durante

períodos de minha ausência, pela cordialidade e respeito demonstrados pelos

diretores, coordenadores, professores e funcionários. Em especial ao Prof. Dr.

CARLOS ROBERTO ROLDI

agradeço

pela confiança e

por

todo apoio dado

sempre. Tenho orgu

lho em fazer parte desta instituição!

Aos colegas Professores Dr. ANDRÉ ALBERTO CÂMARA PUPPIN

Dr.

AGUIMAR BOURGUIGNON, Dr. CARLOS TIMÓTEO e Dr. FABIANO GIESEN

minha

gratidão

pelo respeito e profissionalismo, e por tornarem agradáveis o ambiente

de trabal

ho.

Aos meus queridos amigos e colegas: BRUNO CARVALHO

PATRÍCIA

BIANCHI, LILIANA P. BARROS, CAROLINA B. CARVALHO, GABRIELA DUARTE e

RENATO MARANO, agradeço o convívio agradável, amizade e tempo dedicados,

tendo sido

fundame

ntais no cumprimento de mais es

etapa profissional.

A amiga do coração DIANA ARANTES SAD RAMALHO, pela amizade

sincera em todas as circunstâncias e pelos momentos alegres vividos. Meu desejo

é tê

la sempre perto.

A grande amiga

MARTHA

SALIM

pela lealdade e companheirismo, sem

a qual chegar até aqui não teria sido possível, estando sempre disposta a ajudar.

Minha retribuição sempre será o meu maior agradecimento.

Prof. Dr. ÉLCIO MARCANTÔNIO J

ÚNIO

R agradeço a disponibilidade

em permitir a utilização do Laboratório EXAKT

da Faculdade de Odontologia de

Araraquara/Unesp, e

RAFAEL FAEDA

pelo

tempo dispensado

CONEXÃO

SISTEMAS DE PRÓTESES, pela disponibilidade em colaborar

com este trabalho cedendo os implantes e chaves utilizadas na fase

experimental, contribuindo na formação de profissionais e para o avanço nas

pesquisas nacionais.

AGRADECIMENTOS ESPECIAIS

GLAUCO

meu sincero e profundo agradecimento pelo amor,

paciência, serenidade, confiança e apoio prestados em todos os

momentos. Obrigada por insistir em fazer parte da minha vida, e por

permitir estar ao seu lado sempre. Agradeço por ter permitido a realização

de um sonho!!!

Aos meus queridos e amados pais

JOEL

IVONETE

por me

apoiarem em todos os momentos, mesmo tendo que estar distante por

tantas vezes. Obrigada pelos ensinamentos fundamentados numa vida

cristã. Agradeço a Deus todos os dias por tê

los presentes em minha vida!

Aos meus amados irmãos LARISSA, FILIPE e

ANDRÉ

, pelo amor e

carinho de sempre, pelo enorme prazer da convivência em família e por

fazerem exi

stir

VITOR

HENRIQUE

nossas maiores alegrias. Obrigada por

existirem em minha vida.

Aos queridos e amados tios

MARLI

e NEIVALDO SCHEIDEGGER

pela dedicação e carinho prestados no dia a dia. Agradeço pela

convivência,

paciência e por servirem de exemplo de família e vida

espiritual

Aos meus cunhados amados:

AGNES,

ADRIANA

ALINE

, CRISTIANE,

ELIANE

ALDARI

, CLETO, CLEBER e VLADIMIR, pela alegria e convivência

fraternal. Obrigada por me acolherem como família, vocês são muito

especiais.

EPÍGRAFE

"Todo aquele que se dedica ao estudo da ciência

chega a convencer-se de que nas leis do universo

se manifesta um espírito sumamente superior ao

do homem, e perante o qual nós, com nossos

poderes limitados, devemos humilhar-nos."

Albert Einstein

Ficha Catalográfica elaborada pela Biblioteca da FOA / UNESP

Zanetti, Liliane Scheidegger da Silva

Z28a

Avaliação da interface osso/implante após o uso do copolímero

de PLA/PGA associado a osso autógeno em coelhos :

Estudo biomecâ

nico e imuno

histoquímico

/Liliane Scheidegger da Silva Zanetti.

Araçatuba :

[s.n.], 2008

f. : il. ; tab. + 1 CD

ROM

Tese (Doutorado)

–

Universidade Estadual Paulista, Faculdade de

Odontologia, Araçatuba, 2008

Orientador: Prof. Dr.

Idelmo

Rangel Garcia Júnior

Implante dentário osseointegrado 2. Enxerto ósseo

Ácido

poliglicólico.

Black D7

CDD 617.64

SUMÁRIO

RESUMO

ABSTRACT

LISTA

ABREVIATURAS

SIGLAS

LISTA

ILUSTRAÇÕES

LISTA

TABELAS

GRÁFICOS

INTRODU

ÇÃO GERAL

Referências bibliográficas

INTRODUÇÃO

PROPOSIÇÃO

MATERIAL E MÉTODO

3.1

Copolímero PLA/PGA

3.2

Procedimento Cirúrgico

3.3

Eutanásia e preparo das amostras para análise

microscópia

3.3.1 Imunohistoquímica

3.3.1.1 Histologia

3.4

Preparo da amostra para análise biomecânica

RESULTADOS

4.1

Análise

Macroscópica

4.2

Análise

Biomecânica

4.2.1Análise M

orfométrica

por MEV

4.3

Análise Imunohistoquímica

4.3.1 Análise Histológica

qualitativa

DISCUSSÃO

CONCLUSÃO

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

ANEXO 1: NORMAS DE PUBLICAÇÃO

ANEXO 2: TABELAS, GRAFICOS E ILUSTRAÇOES

ANEXO 3: CERTIFICADO DO COMITÊ DE ÉTICA EM PESQUISA

RESUMO

ZANETTI, LSS. Avaliação da interface osso/implante após

uso do

copolímero de PLA/PGA associado a osso autógeno em coelhos. Estudo

biomecânico

imunohistoquímico

[Tese]. Araçatuba: Universidade

Estadual Paulista; 2008.

(1) Proposição: Este estudo avaliou o uso do copolímero de ácido

poliláctico e poliglicólico (PLA/PGA) associado ao osso autógeno raspado,

reparo ósseo ocorrido ao redor de implantes inseridos em leitos

sobrefresados, em tíbias de coelhos. (2) Material e métodos: Foram

incluídos no estudo 20 coelhos e inseridos 40 implantes, divididos em dois

grupos: Controle (C) e PLA/PGA adicionado a osso autógeno (G). Após

fresagem controlada para simular a perda da estabilidade primária, cada

implante foi inserido no leito preparado, tendo sido adicionado a sua

superfície o copolímero PLA/PGA associado a osso autógeno raspado

obtido manualmente. O grupo controle consistiu do implante com o

espaço do leito preenchido por coágulo sangüíneo. Os animais

foram

sacrificados

nos períodos de

15,

40 e 60 dias pós-

operatórios

, e foram

realiz

adas as análises biomecânica e Imunoistoquímica. As tíbias onde

estavam inseridos os implantes foram removidas, descalcificadas,

crioprotegi

das e obtidos cortes que foram submetidos à reação

imunoistoquímica mediante a utilização de anticorpos primários pa

ra RANK

L, OPG e OC. No período de 60 dias pós-

operatórios

a analise

biomecânic

a de t

orque

reverso

foi realizada antes da descalcificação. (3)

Resultados: Os resultados obtidos demonstraram que o copolímero

PLA/PGA misturado ao osso autógeno

apresentou

biocompatível

bioabsorvivel

e permitiu a neoformação óssea em contato com o

implante

, revelada pela análise da expressão das proteínas que regulam o

ganho e a perda de massa óssea. E, houve predominância significante de

deposição óssea e estabilidade

reve

lada pela análise de torque

reverso

= 0,05

(4)

Conclusões: O copolímero de PLA/PGA pode ser utilizado no

preenchimento de defeitos sobrefresados ao redor de implantes em tíbias

de coelhos

quando adicionado ao osso autógeno raspado, pois apresenta

car

acterísticas de biocompatibilidade e biodegradação, sendo

totalmente reabsorvido e substituído por osso, permitindo a formação de

osso de qualidade na interface osso/implante.

Palavras

chave

mplante dentário osseointegrado

, e

nxerto ósseo

, a

cido

poliglic

ólico.

ABSTRACT

ZANETTI, LSS. Evaluation of the bone/implant interface after use of the

polylactic and polyglycolic acid copolymer (PLA/PGA) associated to the

bone harvest in rabbits. B

iomechanical

and imunohistochemistry study.

[Thesis]. Araçatuba: S

ão Paulo State University; 2008.

(1)

Purpose

: This study evaluated the polylactic and polyglycolic acid

copolymer (PLA/PGA) with scraped bone harvest in the bone repair

occ

urrence of implant

placed

in large stream beds, in rabbit tibia.

(2)

Materials and Met

hods

Twenty

rabbits had been enclosed in the study and

implants, in two groups: Control (C), PLA/PGA with the autologous bone

scraped (G

After controlled drilled to simulate the loss of the

prim

ary

stability, each implant was placed in the prepared stream bed, having

been added to its surface the PLA/PGA copolymer

with

autologous bone

scraped

manually (G

The control group consisted of the implant placed in

the space filled by blood. The animals had been sacrificed in the periods

15, 40 and 60 postoperative days, where the analyses had been carried

through biomechanics and imunohistochemistry. The tibias where the

implants were inserted had been removed, decalcified, frozen and getting

cuts that had been submitted the imunoistochemistry reaction by means of

the use of primary antibodies for RANK L, OPG and OC. In the 60 days

period

postoperative

the

against

-torque biomechanics was carried through

before the decalcified.

(3)

Results: The gotten results had disclosed that the

copol

ymer PLA/PGA with bone graft showed biocompatibility,

bioabsorption

and allowed bone growing in contact with the imp

lant

disclosed by expression of the proteins that regulate the profit and

mass

bone loss. And, had

gnificant predominance of bone

depositio

n and

stability disclosed by

against

torque

( = 0,05).

(4)

Conclusions

The

PLA/PGA copolymer can be used filling defects drilled around implants in

tibia of rabbits, when added bone harvest scraped, therefore it presents

characteristics like biocompatibility and biodegradation, being total

resorpted and substituted by bone,

allowing

the

bone

formation

with

quality in the interface bone/implant

Key

words

: osseointegrated dental implant,

bone graft

polyglycolic acid

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

AS =

Azul de Stevenel

Grupo controle

CEEA =

Comissão de Ética em Experimentação Animal

DAB =

iaminobenzidina

EDTA =

Ácido etileno

diamino

tetracético

G =

Grupo tratado

GMC =

Programa para análise estatística

HA =

Hidroxiapatita

HE =

Hematoxilina e eosina

Kg =

Kilogramas

milímetros

mL =

mililítros

MEV =

Microscopia eletrônica de varredura

MMA =

Metil metacrilato

OC =

Osteocalcina

OPG =

Osteoprotegerina

PBS =

ampão fosfato de sódio

PGA =

Ácido Poliglicólico

PLA =

Ácido Poliláctico

PLA/PGA =

Copolímero de ácido polilático

e poliglicólico

PMMAL=

Polimetil

–

metacrilato lento

PVP

I =

Polivinil pirrolidona iodo

RANKL =

Receptor Ativador Nuclear Kappa

B Ligante

VA =

Vermelho de Alizarina

VA/AS =

Vermelho de Alizarina

e Azul de Stevenel

µm =

Micrometros

LISTA DE ILUSTRAÇÕES

Figura 1:

Anti

sepsia.

Figura 2:

Incisão.

Figura 3:

Retalho cirúrgico descolado.

Figura 4:

Fresagem do leit

o receptor.

Figura 5:

eito receptor.

Figura 6:

Col

eta de osso raspado (G

Figura 7:

Polímero PLA/PGA adicionado à superfície do implante (G

Figura 8: Implante instalado após adição do pol

íme

ro misturado ao osso

autógeno r

aspado (G).

Figura 9:

Implante após 60 dias de instalação (G

Figura 10: Preparo do tecido ósseo para encaixe de chave para

torquímetro manual

Figura 11:

Remoção do implante por torq

reverso

(G)

Figura 12: Negativo da área onde foi instalado o implante após sua

remoção

(G)

Figura 13:

Soro de burro para o processamento imun

ohistoquímico.

Figura 14:

Soro Dunkey

Figura 15:

Coloração das lâminas por DAB.

Figura 16:

Álcoois e corantes para coloração HE.

Figura 17: Bloco ósseo (tíbia) contendo o implante incluído em resina

Metil Metacrilato.

Figura 18: Desgaste da peça incluída em resina em aparelho abrasivo

Exakt

Figura 19:

Adesão do corpo de prova na lâmina no aparelho do Sistema

Exakt

Figura 20:

Corte da peça em aparelho do Sistema Exakt

Figura 21: Corantes VA/AS utilizados na coloração das lâminas cortadas

pelo

Sistema Exakt

Figura 22: Microscópio acoplado ao computador onde foram

capturadas as imagens de todas as lâminas obtidas das amostras

Figura 23: Tecido ósseo neoformado celularizado acompanhando toda

a interface.

HE, 40X, 40 dias (G).

Figura 24

Not

a-se a presença de tecido ósseo em neoformação, além

de restos do biomaterial (PLA/PGA) visualizado no canto superior direito

da lâmina. HE, 400X, 15 dias (G).

Figura 25: Aspecto da interface no grupo controle apresentando-

com tecido ósseo apenas na cortical superior e tecido conjuntivo

adjacente à interface

. HE, 40X, 15 dias (C).

Figura 26

Aspecto da interface no grupo controle. Tecido ósseo apenas

na cortical inferior e tecido imaturo preenchendo a interface. HE, 40X,

15 dias (C).

Figura 27:

Teci

do ósseo neoformado na interface óssea. HE, original

100X, 40 dias (G).

Figura 28: Tecido ósseo neoformado e tecido imaturo (conjuntivo) entre

a interface e o osso. HE, 40X, 40 dias (C).

Figura 29: Camada de tecido ósseo na interface próxima a cortical

uperior no grupo controle. HE, 40X, 40 dias (C).

Figura 30: Tecido ósseo na região ocupada pelo pico e vale do

implante no grupo tratado. Nota-se as áreas de osso compacto

acompanhando a interface e ausência do biomaterial. HE, original

400X, 60 dias (G).

Figura 31: Tecido ósseo neoformado, celularizado, corado pelo VA, em

contato com a superfície do implante na área da cortical superior

VA/AS, 400X, 60 dias (G

Figura 32: Tecido ósseo neoformado, celularizado, corado pelo VA, em

contato com a superfície do implante na área das espiras do im

plante.

VA/AS, 100X, 60 dias (G

Figura 33: Tecido ósseo em neoformação celularizado, corado pelo VA

e áreas de tecido conjuntivo coradas pelo AS em contato com a

superfície do implante. VA/AS, 400X, 60 dias Grup

o Controle (C).

Figura 34: Tecido ósseo corado pelo VA contendo inúmeros osteócitos.

VA/AS, 400X, 60 dias Grupo Controle (C).

Figura 35: Quadro contendo as imagens das lâminas do grupo tratado

(G) para análise qualitativa das imunomarcações.

Figura

: Quadro contendo as imagens das lâminas do grupo controle

Figura 37:

MEV. Grupo controle (C). Período 60 dias. Observa

se algumas

áreas contendo osso aderido à superfície do implante. (originais de

56X).

Figura 38: MEV. Grupo controle (C). Período 60 dias. Observa-se a

presença de algum tecido ósseo aderido à superfície do implante.

(originais de 200X).

Figura 39: MEV. Grupo tratado (G2). Período 60 dias. Observa-se a

presença de osso em contato em toda a superfície do implante.

(originais de 56X).

Figura 40: MEV. Grupo tratado (G2). Período 60 dias. Numa vista mais

aproximada observa-se a presença de tecido ósseo em intimo contato

com as espiras do implante. (originais de 500X).

LISTA DE TABELAS E

GRÁFICOS

Tabela 1: Dados dos valores obtidos na análise de torque-reverso nos

grupos controle (C) e tratado (G) no período de 60 dias.

Tabela 2: Teste estatístico paramétrico utilizando amostras

independentes para análise de torque-reverso nos grupos controle (C) e

tratado(G).

Tabela 3: Análise semi-

quan

titativa. Médias percentuais das

imunomarcações obtidas nas diferentes regiões nos períodos de 15 e 40

dias nos grupos C e G.

Gráfico 1: Média das amostras de torque reverso dos grupos C e G no

período

de 60 dias

a =

0,05 >)

Gráfico 2: Somas percentuais dos valores das imunomarcações das

regiões analisadas no grupo controle (C). Período de 15 e 40 dias.

Gráfico 3: Somas percentuais dos valores das imunomarcações das

regiões analisadas no grupo trat

ado (G). Período de 15 e 40 dias.

Gráfico 4: Somas percentuais dos valores obtidos das imunomarcações

nas diferentes regiões analisadas nos períodos de 15 e 40 dias.

INTRODUÇÃO GERAL

A previsibilidade dos resultados encontrados nos estudos

relacionado

s à osseointegração desde as pesquisas iniciadas na década

de 60, tem permitido o desenvolvimento de novas técnicas que visam o

aperfeiçoamento da reabilitação com implantes osseointegrados

Resultados positivos em relação a esses estudos como índices de sucesso

superiores a 90% sendo utilizados na reabilitação com implantes levaram a

obtenção do conceito definido como osseintegração, a conexão direta

estrutural e funcional entre o tecido ósseo normal viável e o implante em

função

Microscopicamente a osseointegração representa o contato

direto entre o tecido ósseo e a superfície do implante, sem interposição de

tecido mole. Achados de microscopia eletrônica revelaram que existe

uma

fina

camada de fibras colágenas organizadas entre o tecido ósseo e

a superfície de titânio

3, 4

. Os conceitos atuais revelam que a

osseointegração vai existir quando ocorrer fixação do implante de forma

que ele permaneça imóvel e assintomático clinicamente após a

incidência de carga mastigatória. Segundo os autores que iniciaram os

estudos na implantodontia os fatores que determinam a osseointegração

podem ser a biocompatibilidade do material, o desenho do implante, o

tipo de superfície do implante, a qualidade do leito ósseo receptor, a

realização de uma técnica cirúrgica criteriosa e a ausência da incidência

de forças durante o período pós-

operatório

1, 2, 4, 5

. Segundo o protocolo

proposto para a utilização de implantes a incidência de força

foi

preconizada

ser instituída após um período de 3 a 6 meses

. Embora,

estudos post

eriores

concluíram que pode haver osseointegração quando

se utiliza carga mastigatória sobre o implante recém instalado

7, 8, 9

A estabilidade primária após o procedimento da colocação de

implantes é um dos fatores responsáveis pela osseointegração dos

plantes dentários. Altos índices de fracasso e perda de implantes tê

sido

atribuídos a achados associados a implantes em osso de qualidade

ruim e conseqüentemente estabilidade primária diminuída

10, 11, 12

. A

estabilidade

primária ocorre no momento da instalação do implante e

está relacionada ao nível de contato ósseo primário

, que é influenciado

principalmente pela qualidade do trabeculado, além do comprimento,

geometria e superfície do implante

Os métodos existentes para aumentos ósseos dos rebor

dos

alveolares antes da instalação de implantes dentários podem ser:

implantes ou

enxerto

s ósseos autógenos, alógenos, xenógenos ou

aloplásticos/biomateriais;

a aplicação de fatores de crescimento;

regeneração óssea guiada; a

distração

osteogênica;

combinações

entre essas técnicas

Osteogênese é definida como células ósseas vivas transplantadas

e com capacidade de formar novo tecido ósseo no leito hospedeiro, e

Osso autógeno.

Osseoindução é a habilidade em induzir o osso do hospedeiro a

produz

ir novo tecido ósseo. Ex: Osso autógeno e fatores de crescimento.

Osseocondução guia e conduz o desenvolvimento de novo

tecido ósseo através de sua matriz de suporte (arcabouço). Ex:

Osso

autógeno

e materiais aloplásticos/Biomateriais.

O enxerto autógeno é retirado do próprio paciente. É alta

mente

osteogênico, osseoindutor e osseocondutor. Tem menor reabsorção e

morbidade. Os tipos existentes são os intra-orais ou extra-orais. As áreas

doadoras intra-orais mais comuns são

retro

-molar, tuberosidade, ramo

scendente,

sínf

ise mandibular, processo coronóide e tórus. Os enxertos

extra

-orais podem ser retirados da crista ilíaca, calota craniana, tíbia e

outras

Os enxertos alógenos formam osso por osseoindução ou

osseocondução,

obtido de cadáveres e armazenado em bancos de

osso

s. Podem ser mineralizados ou desmineralizados. A desmineralização

renova a fase mineral e expõe o colágeno e os fatores de crescimento do

osso

16, 17

enxerto

xenógeno é o obtido de outra espécie animal,

geralmente bovina, e têm sido largamente utilizado em implantodontia. A

sua preparação envolve procedimentos de desmineralização,

congela

mento e secagem. Pode ser utilizado puro ou associado aos

enxertos ósseos autógenos

Os enxertos aloplásticos

/biomateriais

são feitos de mater

ial

sintético ou natural, sendo apenas

oss

eocondutores, funcionando como

um material de preenchimento.

Um exemplo são as c

erâmicas como

a HA,

são seguras e bem toleradas, mas tem pouco potencial para formar nova

inserções, diminuindo as chances de incorporação óssea. Podem ser

sintética

s como

fosfato de cálcio e naturais como o coral.

Os fatores de crescimento ósseo são substâncias osseopromotoras

utilizadas para estimular a formação óssea e acelerar o processo de

integração entre osso e implante. As proteínas morfogenéticas, por

exemplo, têm sido utilizadas para estimular a proliferação e especialização

de células

tronco

na reconstituição do

tecido ósseo bucal.

A regeneração óssea guiada é um recurso cirúrgico realizado

pela

aplicação de barreiras

físi

cas como membranas no tratamento de

defeitos ósseos periodontais ou

periimplantares

, com o objetivo de

possibilita

r a

neoformação óssea

dentro do defeito.

A distração osteogênica é um processo biológico que

desencadeia

neoformação óssea resultante da ação do deslocamento

gradual e controlado de duas extremidades ósseas criadas por meio d

uma fratura de baixa energia realizada por uma osteotomia subperiosteal

. Esse deslocamento é realizado por um fixador externo que cria

mecanicamente um

espaço

onde o novo osso se regenera entre as duas

margens

. À medida que o osso é alongado, o tecido conjuntivo associado

é estirado

, acompanhando o alongamento ósseo

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

Branemark PI, Adell R, Breine U, Hansson BO, Lindstrom J, Ohlsson A.

intra

-osseous anchorage of dental prostheses. i. Experimental

Studies.

and J Plast Reconstr Surg. 1969;

3:81

100.

Adell R, Lekholm U, Rockler B, Branemark PI. A 15-year study of

osseointegrated implants in the treatment of the edentulous jaw.

Int J Oral Su

rg. 1981;

10:387

416.

Albrektsson T, Lekholm U. Osseointegration: Current state of the art.

Dent Clin North Am. Review. 1989

;

33:537

54.

Albrektsson T, Zarb G. A current interpretations of the

osseointegrated response: Clinical significance. Int J Pros

thodont.

1993;

6:95

105.

Branemark Pi, Hansson BO, Adell R, Breine U, Lindstrom J, Hallen O,

Ohman A. Osseointegrated implants in the treatment of the

edentulous jaw. Experience from a 10-year period. Scand J Pl

ast

Reconstr Surg Suppl. 1977;

16:1

132.

Branemark PI Osseointegration and its experimental background.

J Prosthet Dent. 1983;

50:399

410.

Schnitman PA, Wohrle PS, Rubenstein JE. Immediate fixed interim

prostheses supported by two-stage threaded implants:

methodology and results.

J Oral Implantol. 1990;

16:96

105

Sagara M, Akagawa Y, Nikai H, Tsuru H. The effects of early

occlusal loading on one-stage titanium alloy implants in beagle

dogs: a pilot study.

J Prosthet Dent. 1

993;

69:281

Schnitman PA, Wöhrle PS, Rubenstein JE, DaSilva JD, Wang NH.

Ten

-year results for Brånemark implants immediately loaded with

fixed prostheses at implant placement. Int J Oral Maxillofac

Implants. 1997

;

12:495

503

10.

Albrektsson T, Zarb G, Worthington P, Eriksson ar. The long-

term

efficacy of currently used dental implants: a review and proposed

criteria of success. Int

J Oral Maxillofac Imp

lants. 1986; 1

:11

25.

11.

Buser D, Weber Hp, Bragger U, Balsiger C. tissue integration of one-

stage

ITI

implants: 3-year results of a longitudinal study with hollow-

cylinder and hollow-screw implants. Int J Oral Maxillofac Impl

ants.

1991

;6:405

12.

Deporter DA, Watson PA, Pilliar RM, Pharoah M, Smith DC,

Chipman M, Locker D, Rydall A. A prospective clinical study in

humans of an endosseous dental implant partially covered with a

powder

-sintered porous coating: 3- to 4-year results. Int J Oral

Maxillofac Implants. 1996

;

11:87

95.

13.

Cochran DL, Senk RK, Lussi A, Higginbottom FL, Buser D. Bone

response to unloaded and loaded titanium implants with a

sandblasted and acid-etched surface: a histometric study in the

canine ma

ndible. J Biomed Mater Res.

1998

; 40:1

11.

14.

Meredith.1998

Meredith N. Assessment of implant stability as a

prognostic determinant.

Int J Prosthodont. 1998;

11:491

501.

15.

Garg AK. The use of a bone harvest system for autogenous bone

grafts during implant procedures. Dent Implantol Update. 1998;

9:81

16.

Petrungaro PS, Amar S. Localized ridge augmentation with

allogenic block grafts prior to implant placement: case reports

and histologic evaluations.

Implant Dent. 2005;

14:139

48.

17.

Piattelli A, Scarano A, Piattelli M. Microscopic and histochemical

evaluation of demineralized freeze-dried bone allograft in

association with implant placement: a case report. Int J

Periodontics Restorative Dent

. 1998;

18:355

18.

Young C, Sandstedt P, Skoglund A. A comparative study of

anorganic xenogenic bone and autogenous bone implants for

bone regeneration in rabbits. Int J Oral Maxillofac Implants.

1999

;14:72

-6.

19.

Aronson J, Shen XC, Skinner RA, Hogue WR, Badger TM, Lumpkin

CK Jr. Rat model of distraction osteogenesis. J Orthop Res. 1997;

15:221

INTRODUÇÃO

A qualidade e quantidade ósseas insuficientes nos rebordos

alveolares é uma das principais causas de falha na instalação de

implantes dentários. Atualmente as dificuldades em se obter osso para

reconstruir rebordos têm intensificado a procura

por

soluções que venham

melhorar o prognóstico desses implantes. Diversas formas que venham

melhorar a qualidade e

quantidade

ósseas, para suportar os imp

lantes

de maneira satisfatória têm sido

propostas

1, 2, 3

As deficiências intra-ósseas como as deixadas por periimplantites,

alvéol

os recém extraídos ou as relacionadas ao procedimento de

instalação de implantes, algumas vezes vão requerer tratamento utilizando

um substituto ósseo. A necessidade de reconstrução desses defeitos levou

ao desenvolvimento de diferentes técnicas de obtenção e a diversos tipos

de substitutos ósseos, dentre eles os enxertos autógenos, alógenos,

xenógenos e aloplásticos

3, 4, 5, 6

. O principal objetivo desses materiais é

atuar como osseoindutor ou osseocondutor, e na prevenção mecânica da

invasão de células de tecido conjuntivo no meio do defeito ósseo

interferindo no processo de reparo

Os materiais aloplásticos têm sido largamente utilizados no

tratamento desses tipos de defeitos, em função da facilidade em sua

obtenção. Atualmente, o fosfato de cálcio e a hidroxiapatita (HA) são os

substitutos ósseos aloplásticos mais frequentemente utilizados. Esses

materiais apresentam vantagens e desvantagens. Materiais bioabsorvíveis

como o fosfato de cálcio, normalmente tem altas propriedades

osseocondutoras, embora o

período de sua biodegradação possa ser mais

rápido do que a possibilidade de aposição óssea dentro do defeito

. Por

outro lado, a implantação de materiais não absorvíveis como a HA

apresenta baixa atividade osseocondutora, embora esses materiais

permaneç

am no meio do defeito criando uma base de sustentação para

neoformação óssea

. Entretanto, a invasão de tecido conjuntivo que

frequentemente ocorre ao redor dos grânulos de HA interfere na

neoformação óssea, podendo se tornar uma dificuldade de difícil

solução.

Sendo assim, a maior parte dos estudos nas áreas de biomateriais

que possam ser substitutos ósseos está voltada para a descoberta de um

material que apresente um bom potencial osseoindutor ou osseocondutor

e que sofra bioabsorção em um curto período de tempo. Os polímeros

sintéticos reabsorvíveis desenvolvidos durante as últimas décadas tem sido

largamente

utilizados como materiais aloplásticos em diversas áreas da

medicina e

odontologia. Entre eles, destacamos os do ácido láctico e

do ácido gl

icólico

que são utilizados isoladamente ou, mais

frequentemente, associados para constituir copolímeros, como os de

ácido poliláctico-poliglicólico (

PLA/PGA

). Estas substâncias são muito

utilizada

s na composição de dispositivos cirúrgicos destinados à ciru

rgia

bucomaxilofacial e ortopédica

10, 11, 12

. Suas propriedades de

biocompatibilidade e biodegradação fazem com que a sua aplicação

seja

bem tolerada, não sendo necessária a sua remoção

24, 25

. Estudos

experimentais demonstraram que, o período da degradação destes

dispositivos cirúrgicos poliméricos como mini-placas, parafusos, fios de

sutura ou

malhas

de osteosíntese, está correlacionado com os fatores

locais e com a densidade específica do material, que é dependente do

seu grau de

polimerização e pe

so mo

lecular

13, 24

Fatores como a baixa densidade

copolímero de PLA/PGA,

fazem com que a sua biodegradação ocorra de forma

lenta,

podendo

ocorrer de

posição

óssea

simultânea

. A

bio

degradação

de alguns desses

copolímeros

ocorre por hidrólise e o

período

de tempo que isto ocorre é

dependente de sua densidade, podendo

deixa

r no seu lugar uma

porcentagem elevada de tecido

Desta forma, justifica-se o uso de

materiais constituídos por estas substâncias para a sutura dos tecidos, a

construção de dispositivos para a fixação de fraturas ósseas e para

materiais

de reparação dos tecidos moles

15, 16

Além

da ação mecânica de barreira, a aplicação de

copolímeros do ácido poliláctico-poliglicólico demonstrou, em casos de

descontinuidade da parede óssea de diferentes partes do esqueleto, uma

ação favorável à regeneração de novo tecido ósseo, sugerindo ser um

biomaterial osseocondutor

17, 18, 19, 20, 21

Em odontologia, o copolímero de PLA/PGA tem sido utilizado em

diferentes formulações (esponja, pó e gel), como mantenedor de espaço,

individualmente ou como suporte de membranas reabsorvíveis ou não.

Relatos da literatura afirmam que a total reabsorção dessas formulações

ocorre em curto espaço de tempo, porém o suficiente para permanecer

nos tecidos e ser substituído por tecido ósseo

. Esse período de tempo

está na dependência da densidade do material, da

quantidade

implantada, do metabolismo indi

vidual e

circulação sanguínea na zona

aplicação, não

constituindo um obstáculo aos processos

regenerativos dos

tecidos circundantes

PROPOSIÇÃO

Este estudo avaliou o uso do copolímero de ácido poliláctico e

poliglicólico (PLA/PGA) associado ao osso autógeno raspado no

reparo

ósseo ocorrido ao redor de implantes inseridos em leitos sobrefresados, em

tíbias

de coelhos. Foram realizadas as análises biomecânica e

imuno

istoquímica.

MATERIAL E MÉTODO

Este protocolo de pesquisa foi submetido e aprovado pela

Comissão de Ética em Experimentação Animal (CEEA) dos Cursos de

Odontologia e Medicina Veterinária da Universidade Estadual Paulista

“Júlio de Mesquita Filho”, Campus de Araçatuba (UNESP)

(ANEXO 1)

A amostra foi constituída de 20 coelhos machos brancos da raça

Nova Zelândia, todos apresentando aproximadamente 5 meses de idade

e peso corporal variando entre 3 a 4 Kg, procedentes da Faculdade de

Odontologia de Araraquara (UNESP). Os animais foram mantidos durante

todo o experimento em gaiolas unitárias, sob temperatura ambiente,

alimentados com ração sólida e água à vontade. Todos os coelhos

receberam 2 implantes na metáfise tibial de um dos lados, direito e

esquerdo escolhidos aleatoriamente em cada animal. Os grupos foram

constituídos da seguinte forma: grupo controle onde o defeito ósseo foi

preenchido apenas por coágulo sanguíneo (C); grupo tratado onde o

def

eito ósseo

foi

preenchido com copolímero de

PLA/PGA

misturado a

osso autógeno raspado manualmente (G). Foram instalados 40 implantes

de titânio comercialmente puro, de superfície lisa com altura de 6 mm e

diâmetro de 2,6mm, esterilizados por radiações gama (CONEXÃO -

Sistemas de Prótese

)

Vinte implantes constituíram o grupo controle (C) e

20 o grupo tratado (G).

3.1

Copolímero PLA

PGA

O copolímero consistiu em uma mistura de ácido láctico e ácido

glicólico (PLA/PGA) na proporção de 50:50. Controlamos o pH da solução

adicionando hidróxido de sódio. Foi utilizado o método dos precursores

poliméricos ou mais conhecido

como

método Pechini,

que

é uma técnica

que pode ser aplicada no desenvolvimento de materiais avançados. O

processo é baseado na capacidade que certos ácidos orgânicos, tais

como os ácidos cítrico

lático

e o glicólico, possuem de formarem quelatos.

Estes quelatos podem esterificar quando aquecidos com um polialcool e

polimerizar a temperaturas mais elevadas formando uma resina

3.2

Procedimento Cirúr

gico

Os animais foram mantidos em jejum 8h antes do procedimento

cirúrgico quando foram anestesiados via parenteral. A medicação

consistiu de injeção intramuscular de 3mg/Kg de Ketamina (Francotar –

Vibrac do Brasil Ltda, São Paulo, Brasil) e 0,22ml de cloridrato de tiazina

(Rompum

– Bayer AS – Saúde Animal, São Paulo, Brasil). Como

complementação anestésica e hemostática foi utilizada infiltração de

Hidroclorito de Mepivacaína (0,3mL/Kg, Scandicaíne 2%) c/ Adrenalina

(1:100.000).

Durante todo procedimento cirúrgico foram respeitados as

normas de biossegurança para o controle de infecções, estando todo o

instrumental e materiais esterilizados. Após tricotomia e anti-sepsia da

região anterior da tíbia utilizando PVP-I 10%

degermante,

foi realizada

infiltraçã

o do anestésico local e uma incisão dermo-periosteal de

aproximadamente 6cm de comprimento, com lâmina nº15 montada em

cabo nº3, seguida de divulsão do tecido mole com descolador de

periósteo (Molt n

9) e exposição óssea

(Fig. 1

Cada animal recebeu 2 implantes, na porção medial do osso

uma

s tíbias, para tanto, foi utilizado um motor elétrico para confecção

dos defeitos ósseos que receberam os implantes (Fig.4-

. Um contra-

ângulo redutor de 1:20 foi utilizado, sob irrigação intensa com solução

alina,

inic ia nd o-se o p re p a ro d o leito re c e p tor d o imp lante c om

um a fresa la nç a , d elimita nd o-se a loc a liza ç ã o d os imp la ntes

respeitando

-se uma distância de 5mm entre os mesmos. Em seguida foram

utilizadas as fresas de diâmetros 2 e 3mm, seqüencialmente, na

velocidade

máxima de perfuração de 1200 rpm, com irrigação por meio de solução

salina durante toda a preparação do leito receptor. Feito isto foram

instalados os 2 implantes de diâmetro e comprimento iguais (2,6 x 6 mm)

que

instalados no defeitos de 3mm fresados, permaneceram sem

estabilidade inicial. Os implantes instalados constituíram os grupos: C e G.

Portanto, o primeiro defeito

ósseo

sendo preenchido apenas por coágulo

sanguíneo

(C); e o segundo defeito ósseo preenchido com

PLA/PGA

misturado a osso autógeno raspado manualmente (G), obtido da região

próxima às perfurações (Fig. 6, 7 e 8).

Os tecidos foram reposicionados e suturados por planos

empregando

-se fio reabsorvível (poliglactina 910 – Vycril 4.0) com pontos

contínuos no plano profundo e com fio monofilamentar (Nylon,

Mononylon) com pontos interrompidos no plano mais externo.

No pós-operatório imediato os animais receberam administração

subcutânea de 100mg de Ampicilina Benzatina (30mg/kg), com a

finalidade de prevenir infecção pós-

operatória

e administração

intramuscular de 0,1ml de Dipirona Sódica a c

ada 6 horas durante 3 dias

3.3

Eutanásia e preparo das am

ostras para análise microscópica

3.3.1

Imunoistoquímica:

Os 20 animais foram anestesiados e

eutanasiados

nos períodos

pós

-operatórios de 15, 40 e 60 dias. Sendo 5 coelhos no período de 15 dias,

5 no período de 40 dias e 10 no período de 60 dias pós-operatórios. A

técnica

de eutanásia consistiu da perfusão no ventrículo esquerdo com

solução salina

tamponada

por 5 minutos, e em seguida com formald

eído

(Acros Organics) durante 40 minutos utilizando bomba perfusora

Masterflex

LS (Cole-

Parm

er Instrument Company). Finalizada a perfusão, a

tibia onde foram instalados os implantes foi removida e pré-fixada em

formaldeído 4% durante 6 horas a temperatura de 4

C (Celsius), lavadas

em solução tampão (PBS) e imersas em solução descalcificadora (EDTA).

Após fixação das peças, o tecido ósseo ao redor do leito

receptor foi reduzido com margens de 0,5cm ao redor de todo o negativo

do implante. As amostras teciduais foram descalcificadas em EDTA na

concentração de 5%, pH 7,0, dissolvido em água MiliQ,

por

aproximadamente 60 a 80 dias. Em seguida, as secções teciduais foram

crioprotegidas com sacarose a 30%

(Merck),

para posterior corte em

criostato, a 14 m de e

spessura

, montadas em lâminas previamente

gelatinizadas

A atividade da peroxidase endógena foi inibida com peróxido

de hidrogênio, e em seguida realizado o bloqueio das reações

inespecíficas utilizando o soro da espécie hospedeira onde foi produzido o

ticorpo secundário (Fig. 13). Os anticorpos primários utilizados eram

contra a osteoprotegerina (OPG), RANK L e osteocalcina (OC) (Santa Cruz

Biotechnology

). Foi utilizado o método de detecção por imunoperoxidase

e a reação foi revelada utilizando a 3,3 diaminobenzidina (DAB-

Sigma

)

como cromógeno (Fig. 14). Procedimentos de controle sem anticorpos

primários (controle negativo) e de controle positivo

foram

realizados, para

avaliar a especificidade e a reatividade das reações. As células positivas

para seus respectivos anticorpos foram coradas em marrom. A

porcentagem de células positivas para as proteínas analisadas foram

avaliadas por meio de um microscópio óptico, pela contagem manual das

células marcadas em áreas previamente determinadas. Os dados foram

tabulados para posterior análise estatística. A coloração em hematoxilina

e eosina também foi realizada para dar referência para a citoarquitetura

dos cortes analisados. As análises foram realizadas qualitativamente e

semi

-quantitativamente em microscópico

óptico

com objetiva de

aumento 20X Leica Aristoplan Microsystems (Leitz, Benshein, Alemanha),

acoplado a uma câmera de captura de imagem (Leica

DFC 300FX, Leica

Microsystems, Heerburgg, Switzerland) (Fig. 22)

3.3.1.1

Histologi

tíbias

de 5 animais do

período

de 60 dias foram removidas e

após a fixação foram levadas direto a uma seqüência de álcoois de

concentração crescente com troca de solução a cada 24 horas, seguido

de um banho de acetona por 24 horas. Após o banho de acetona as

peças foram emersas em polimetil metacrilato lento (

PMMAL

) com trocas

diárias durante 3 dias. A seguir, as peças receberam 2 banhos de Metil

Metacrilato

(MMA). Na seqüência do processamento, foi realizada a

inclusão das peças em

MMA

associado ao catalisador, Peróxido de

Benzoíla 1%,

aguardando

se o período de polimerização da resina

(Fig

17).

Após obtenção dos blocos em resina acrílica contendo as peças, estas

foram levadas ao micrótomo (Exakt

Cutting Systen Apparatebau, Gmbh,

Hamburgo, Alemanha) e obtidos assim cortes com espessura em média de

µm

(Fig. 17 a 20)

. As lâminas foram coradas usando

os corantes

vermelho

de alizarina

(VA)

e azul de Stevenel

(AS) (Fig. 21)

3.4

Preparo da amostra para an

álise biomecânica

Os 5 coelhos restantes do período de 60 dias foram submetidos

ao teste mecânico de torque-

reverso

antes da perfusão. As tíbias

foram

expostas, e os

implantes

reabertos para realização da análise

biomecânica

Neste procedimento o tecido mole e ósseo que se

encontrava sobre a cabeça dos implantes foi cuidadosamente removido

(Fig. 9 e 10). Em seguida utilizando-se de uma chave de encaixe ao

implante, estes foram conectados a montadores para que um aparelho

de torque-reverso (

-BTG,Tonich, Japan) fosse utilizado (Fig.11). Os

implantes foram submetidos à força gradual do aparelho registrados em

Ncm,

foram anotados os valores de força do momento da ruptura da

interface do implante com o osso

(Fig.12)

implantes removidos nesta etapa, foram submetidos à avaliação

em microscópio eletrônico de varredura (Jeol JSM – T220A, Peabody, USA).

Fotomicrografias

para análise foram obtidas do corpo dos implantes nos

aumentos de 60X, 100X, 200X, 500X e 1000X.

RESULTADOS

4.1.

Análise macrosc

pica

Aos 60 dias após a reabertura das tíbias para a realização do

teste biomecânico

foi observado

e os implantes apresentaram-

estáveis e recobertos com osso neoformado em ambos os grupos

grupo tratado (G) os implantes

apresentaram

-se numa posição

tridimensional mais próxima da posição de in

stalação.

Entretanto, alguns

implante

s do grupo controle (C) apresentaram-

inclinados em relação à

superfície óssea.

4.2.

Análise biomecânica

Para a análise biomecânica foram considerados os valores de

torque

-reverso obtidos dos grupos controle (C) e tratado (G), dos 5 animais

do período de 60 dias (Tabela 1). Os valores dos grupos avaliados foram

levados à análise estatística por meio de teste

paramétrico

utilizando

amos

tras independentes para os grupos avaliados, e para tanto foi

utilizado o programa estatístico GMC (Tabela 2). Podemos observar que

houve uma predominância de estabilidade nas amostras do grupo

tratado(G) em relação ao grupo controle (C) apresentando diferença

estatística entre os grupos

(> 0,05)

(Gráfico 1).

4.2.1.

Análise

morfométrica por microscopia eletrônica por varredura

(MEV)

Após

60 dias foram observadas de forma qualitativa as áreas de

tecido

ósse

o aderidas à superfície dos implantes removidos, em ambos os

grupos, por vezes isoladas ou recobrindo boa parte dos mesmos ou quase

totalmente

cobertas por tecido ósseo em toda a sua extensão (Fi

g.37

40).

4.3.

Análise imunohistoquímica

Foram realizadas reações imunoistoquímicas utilizando anticorpos

contra as proteínas RANK L, Osteoprotegerina (OPG) e Osteocalcina (OC),

com o objetivo de obter marcações para análise qualitativa e semi-

quantitativa que representariam a expressão dessas proteínas

caracterizando reabsorção e neoformação óssea nos diferentes períodos

e grupos estudados. Essas expressões foram obtidas em porcentagens para

os grupos analisados, cruzando-se as variáveis proteínas e períodos de

avaliação. Na tabela 3 estão representadas as médias percentuais de

expressão de proteínas de acordo com o período de avaliação para os

grupos analisados nas áreas da cortical superior, medular e cortical inferior.

Foram obtidos quadros contendo as imagens obtidas das lâminas de cada

proteína e períodos, individualmente para cada grupo, onde a análise

semi

-quantitativa foi realizada por 3 avaliadores distintos. Os avaliadores

anotavam os escores padronizados em 20, 30, 60 e 90% de acordo com a

quantidad

e de imunomarcações visualizadas. Os escores foram tabulados

e submetidos à análise estatística pelo programa GMC. Os resultados

obtidos podem ser visualizados pelos Gráficos 2, 3 e 4.

A análise qualitativa das marcações imunohistoquímicas para

identifi

cação da proteína RANK L indicou marcações específicas nos

grupos analisados, onde foram observadas células com citoarquitetura da

linhagem de osteoblastos nas corticais superior e inferior em grande

expressão aos 40 dias. Podemos observar que neste período as marcações

da OPG, entre os grupos analisados está predominante no grupo tratado,

isto pode ser por encontrar-se solúvel na matriz óssea indicando que o

metabolismo nesta fase estava ativado. A RANKL assim como a OPG

apresentou

-se bem marcada neste período em ambos os grupos já que

esta proteína é responsável pelo início da remodelação óssea. Entretanto,

no período de 15 dias podemos encontrar marcações celulares mais em

laminas coradas para RANKL do que para OPG no grupo tratado, já que

aquela proteína está presente mais nas células do que na matriz. A

osteocalcina (OC) é responsável por indicar o índice de maturação do

osso, podendo se expressar após a mineralização óssea, sinalizando a

maturação, tanto na matriz quanto na célula. Podemos observar que a

expressão da OC, no período de 40 dias, em todos os grupos analisados,

observado na soma das médias percentuais das regiões analisadas, o que

se torna um indicativo de que o tecido ósseo sofreu deposição de cálcio,

ocorrendo sua mineralização (Gráfico 4

4.3.1.

Análise

histológica qualitativa

Foram analisadas de forma qualitativa

áreas

de contato entre

tecido

ósseo

e implante e entre pré-osso e

implante

, nas lâminas coradas

com HE e VA/AS para observação da citoarquitetura dos tecidos

lâminas foram levadas à microscopia óptica convencional, onde foi

realizada uma análise

histológica

qualitativa. A área de osso calcificado e

de tecido conjuntivo (pré-osso) foi identificado utilizando-se de um

microscópio óptico com objetiva de aumento de 10/0,25 (Axiolab, ZEISS) e

câmera de vídeo (JVC, RGB color vídeo – TK1270) acoplada a esse

microscópio e conectada a um microcomputador com um software

digitalizador de imagens (Fig. 22). Foram avaliadas as áreas de tecido

ósseo presentes correspondentes às regiões das roscas, ao módulo de

rebordo e ao ápice dos implantes, para todos os grupos

No período de 60

dias não foram observados remanescentes do biomaterial

impla

ntado,

indicando

a total bioabsorção do mesmo. Em determinadas áreas

adjacentes ao implante foi observado tecido conjuntivo celularizado em

contato direto com o osso formado, sugerindo sua posterior maturação em

tecido ósseo. O tecido ósseo neoformado em contato com a superfície do

implante

apresentou

-se bastante celularizado com a presença de

osteócitos em

grande número.

Aos 15 dias n

ota

se a presença de tecido ósseo em

neoformação

na área correspondente às espiras do implante no grupo

tratado

em toda

a extensão da interface (G)(Fig. 23) além de restos do biomaterial

(PLA/PGA)

(Fig. 24), e no grupo controle aspecto da interface

apresentando

-se com tecido ósseo em formação predominantemente na

cortical superior e tecido conjuntivo adjacente à interface (Fig. 25-

26)

Aos

40 dias no grupo tratado (G) nota-se a presença de osteócitos e

osteoblastos bem marcados na região ocupada pelo pico e vale do

implante (Fig. 27), e no grupo controle (C) presença de tecido ó

sseo

predominantemente na cortical superior e tecido compatível com

conjuntivo

preenchendo a interface (Fig. 28-

29)

Aos 60 dias no grupo

tratado (G) foi observada ausência do biomaterial além de áreas de osso

maduro

acompanhando o formato das espiras do implante

(Fig. 30)

Observamos na área medular, neoformação óssea na região dos

picos e vales das roscas dos

implantes,

pela

presença

tecido conjuntiv

(corado pelo

) em contato com a superfície, preenchendo a região dos

vales das roscas em determinadas áreas no grupo controle (C) (Fig. 31-

32)

No período de 60 dias no grupo tratado (G) as interfaces revel

aram

presença de tecido ósseo neoformado celularizado (corado pelo

) em

contato com a superfície do implante, principalmente na área de

assentamento da cabeça do implante (módulo de rebordo), em função

ua localização em osso cortical (Fig. 33

34).

DISCUSSÃO

O que se tem esperado como resultado da utilização de um

biomaterial que será utilizado como substituto ósseo é que o mesmo

apresente características como biocompatibilidade, bioabsorção e

principalmente potencial de osseoindução ou osseocondução. Entretanto,

as pesquisas nas áreas de biomateriais têm demonstrado as dificuldades

em se obter todas essas características em um único material, indicando

que os melhores resultados são encontrados quando se utilizam os enxertos

ósseos autógenos, em função de se apresentar como um substituto ósseo

completo sendo além de tudo osseocondutor, osseoindutor e osteogênico

Entretanto, as dificuldades encontradas na obtenção desses tipos

de enxerto têm estimulado os pesquisadores em busca de alternativas

como os materiais aloplásticos. Neste grupo de materiais encontra-se o

copolímero de PLA/PGA, biomaterial utilizado no presente estudo. Este

copolímero foi manipulado para apresentar propriedades como o baixo

peso molecular, que permite ser totalmente degradado em um curto

período de tempo, dependendo da quantidade de material empregado

e da reatividade do organismo. O processo de absorção e

biodegradação desse biomaterial se dá no ciclo de Krebs, por meio de

reações bioquímicas, que resultam na formação de água (H

O) e dióxido

de carbono (CO

) como produtos finais do metabolismo do ácido

poliláctico, e etileno glicol da degradação enzimática do ácido

poliglicólico

. Isso indica que esses materiais podem sofrer

biodegradação sem causar transtornos ao organismo ao gerarem seus

produtos finais de metaboli

smo.

Os produtos da degradação desses

copolímeros

apresentam baixa toxicidade. Em virtude da reduzida massa

dos polímeros implantados e à lentidão do processo de degradação ou

transformação dos polímeros em monômeros,

estes

encontram

-se em

quantidades toxicologicamente insignificantes no organismo

Além disso

tratam

-se de substâncias que podem ser normalmente encontradas no

organismo humano e animal, que são degradadas mediante mecanismos

fisiológicos de controle metabólico. A implantação do copolímero não

desequilibra o organismo porque os seus componentes já estão

fisiologicamente presentes no mesmo

As análises empregadas no presente estudo revelaram que a

degradação e reabsorção do copolímero, permitiram uma progressiva e

ordenada reconstrução do tecido ósseo. Este processo de regeneração

óssea

apresenta

-se especialmente importante podendo ser empregado

a reparação de defeitos

sobre fresados ao redor de implantes ou quando

é necessário obter um aumento ósseo na zona ao redor da implantação.

Uma boa regeneração de tecido ósseo na interface osso/implante é de

fato a condição indispensável para a duração e, portanto, para o sucesso

na instalação de implantes dentais

Encontramos na literatura o copolímero de PLA/PGA sendo

utilizado na forma gel para preenchimento de defeitos periodontais, em

procedimentos endodônticos periapicais e até em levantamento de seio

maxilar prévio à instalação de implantes dentais

1, 7

. Isto em função de sua

consistência e plasticidade semelhante à de um silicone de uso hidr

áulico.

Portanto,

pode ser introduzido na cavidade alveolar e agir na membrana

do seio

levantando

de modo atraumático, reduzindo o risco de

laceração

membrana, risco associado às manobras de levantamento

com instrumentos metálicos. Após elevada a membrana, é possível

introduzir junto com o gel, outros materiais que sejam considerados

necessários

como osso aut

ógeno

. Contudo, o gel, mesmo individualmente,

estabiliza a membrana depois de

elevada, pois

logo que entra em contato

com o sangue, que apresenta

solubilidade

aquosa,

sofre hidrólise

e assume

o aspecto e a consistência de um gesso macio e poroso, que constitui

estrutura ideal para a estabilização de um coágulo, o qual originado do

periósteo

fica isolado entre o assoalho do seio e a membrana,

poster

iormente

transformando

se em osso

Em relação ao comportamento do copolímero neste estudo, este

demonstrou ser biocompatível, bioabsorvível e apresentou características

de osseocondução, atuando como um arcabouço para neoformação

óssea na interface osso/implante. Um estudo preliminar foi realizado

utilizando a mesma metodologia empregada nesta pesquisa, onde o

copolímero de PLA/PGA foi utilizado puro nos defeitos sobre fresados em

tíbias de coelho, sem qualquer estabilidade primária

. Foi observada

dep

osição óssea na interface/osso implante no grupo tratado com o

PLA/PGA, indicando que o biomaterial pode ser utilizado como

preenchimento de espaços entre as espiras de um implante instalado sem

estabilidade primária em tíbias de coelho. Isso pode ser em função da

simples permanência do biomaterial impedindo a invasão de tecido

conjuntivo na superfície do implante durante um tempo suficiente para

ocorrer deposição óssea culminando com uma interface óssea

intimamente aderida à superfície do implante.

A análise da expressão das proteínas nos grupos analisados

contribuiu para a avaliação principalmente qualitativa dos mecanismos de

reabsorção e neoformação óssea nos períodos estudados. Embora, para

obtermos resultados conclusivos do experimento, a união de todas as

análises tenha sido de fundamental importância, dentre as formas de

análise existentes utilizadas para avaliação da osseointegração, a análise

imunoistoquímica vem ganhando credibilidade há algum tempo em

virtude das descobertas na área da biologia ó

ssea

26,

. A identificação de

mecanismos de regulação e do crescimento celular de osteoblastos,

osteoclastos e osteócitos, dentre outras células envolvidas no processo de

remodelação óssea, tornou de grande importância a utilização dessas

técnicas para avaliação de eventos ocorridos durante o processo

reparo

Outro fator importante a ser evidenciado é a

influ

ência da

densidade óssea, ou seja, da qualidade do trabeculado disponível em um

sítio edêntulo. A densidade óssea é o parâmetro mais imp

ortant

e para a

estabilidade

inicial do implante permitindo a ausência de movimento

durante o primeiro estágio de cicatrização cirúrgica. A quantidade óssea

disponível descrita como a arquitetura externa ou volume da área

edêntula considerada para os implantes, vai influenciar no resultado final

da estabilidade primária. Além disso, considerando a espessura, largura,

comprimento e angulação da área edêntula, uma quantidade óssea

suficiente é a condição primária para a

colocação do implante no correto

posicionament

o ósseo

Os resultados favoráveis obtidos neste estudo na

análise de torque reverso revelaram estabilidade nos implantes mesmo em

um leito sobre fresado. Alguns fatores podem ter contribuído para esses

resultados como o biomaterial ou a presença de osso autógeno associado

ao copolímero, já que quando utilizamos essas associações os resultados

obtidos são favoráveis. Entretanto, devemos salientar que, o tratamento de

superfície que também pode influenciar e acelerar o processo de

deposição óssea na interfac

29, 30

, neste estudo não exerceu influência,

em função de o implante utilizado ter sido de superfície usinada.

Como vantagens da utilização do polímero PLA/PGA na forma

empregada associado a osso autógeno, podemos incluir, a mínima

invasão de células do tecido conjuntivo que poderiam interferir na

osseointegração, além da utilização de um substituto ósseo com

propriedades osseoindutoras, osseocondutoras e osteogênicas, que não

exige área doadora localizada fora da área receptora, sendo possível a

remoção

de pequena quantidade de osso raspado da própria região. Isso

diminui a morbidade dos procedimentos, conseqüentemente reduz o

desconforto trans e pós-operatório do paciente. A técnica consistiu-se de

um procedimento simples e com boa previsibilidade.

NCLUSÃO

Baseados nos resultados obtidos pu

mos concluir que

copolímero

de PLA/PGA adicionado ao osso autógeno raspado pode ser

utilizado no preenchimento de defeitos sobrefresados ao redor de

implantes em tíbias de coelhos, pois apresenta características de

biocompatibilidade, biodegradação e osseocondução, sendo totalmente

substituído por osso de qualidade e estabilidade na interface

osso/implante.

REFERÊNCIAS

Scarano A, Degidi M, Iezzi G, Pecora G, Piattelli M, Orsini G, Caputi

S, Perrotti V, Mangano C, Piattelli A. Maxillary sinus augmentation

with different biomaterials: a comparative histologic and

histom

orphometric study in man.

Implant Dent.

2006;

15:197

207.

Aguirre Zorzano LA, Rodríguez Tojo MJ, Aguirre Urizar JM.

Maxillary

sinus lift with intraoral autologous bone and B

tricalcium

phosphate: histological and histomorphometric clinical study.

Med

Oral Patol Oral Cir Bucal

. 2007,

12:E532

Abushahba F, Renvert S, Polyzois I, Claffey N. Effect of grafting

materials on osseointegration of dental implants surrounded by

circumferential bone defects. An experimental study in the dog.

Clin Oral Implants Res

. 2008;

19:329

34.

Raghoebar GM, Batenburg RH, Vissink A, Reintsema H.

Augmentation of localized defects of the anterior maxillary ridge

with autogenous bone before insertion of implants. J Oral

Maxillofac Surg. 1996,

54:1180

5; discussion 1185

Terheyden H, Jepsen S, Möller B, Tucker MM, Rueger DC.

Sinus floor

augmentation

with simultaneous placement of dental implants

using a combination of deproteinized bone xenografts and

recombinant human osteogenic protein-1. A histometric study in

miniature pigs. Clin Oral Implants Res.

1999,10

:510

21.

Molly L, Vandromme H, Quirynen M, Schepers E, Adams Jl, Van

Steenberghe D. Bone Formation Following Implantation Of Bone

Biomaterials Into Ex

traction Site

s. J periodontol. 2008, 79

:1108

15.

Katanec D, Pavelic B, Ivasovic Z.

Efficiency of

polylactide/p

olyglycolide copolymers bone replacements in bone

defects healing measured by densitometry. Coll Antropol. 2004,

28:331

Hara K, Shimizu M. Reconstruction for vertical bone defects by

Synthograft application. J Oral Implantol. 1985;12:68

79.

Barkhordar RA, Meyer JR. Histologic evaluation of a human

periapical defect after implantation with tricalcium phosphate.

Oral Surg Oral Med Oral Pathol. 1986 Feb;6:201

10.

Athanasiou KA, Niederauer GG, Agrawal CM. Sterilization, toxicity,

biocompatibility and clinical applications of polylactic

acid/polyglycolic acid copolymers. Biomaterials. 1

996

Jan;17(2):93

102.

11.

Nordström P, Pihlajamäki H, Toivonen T, Törmälä P, Rokkanen P.

Tissue response to polyglycolide and polylactide pins in cancellous

bone.

Arch Orthop Trauma Surg. 1998;117(4

5):197

204.

12.

Waris E, Ashammakhi N, Happonen H, Raatikainen T, Kaarela O,

Törmälä P, Santavirta S, Konttinen YT. Bioabsorbable miniplating

versus metallic fixation for metacarpal fractures. Clin Orthop Relat

Res. 2003 May;(410):310

13.

Heidemann W, Fischer JH, Koebke J, Bussmann C, Gerlach KL.

[In

vivo study of degradation of poly-

(D,L

-) lactide and poly-

lactide

-glycolide) osteosynthesis material] Mund Kiefer

Gesichtschir

. 2003,

7:283

14.

Serino G, Biancu S, Iezzi G, Piattelli A. Ridge preservation following

tooth extraction using a polylactide and polyglycolide sponge as

space filler: a clinical and histological study in humans. Clin Oral

Implants Res

. 2003,

14:651

-8.

15.

Päivärinta U, Böstman O, Majola A, Toivonen T, Törmälä P,

Rokkanen P. Intraosseous cellular response to biodegradable

fracture fixation screws made of polyglycolide or polylactide.

Arch

thop Trauma Surg

. 1993,

112:71

16.

Suuronen R. Biodegradable fracture-fixation devices in

maxillofacial surgery.

Int J Oral Maxillofac Surg. 1993 Feb;22(1):50

17.

Hollinger JO. Preliminary report on the osteogenic potential of a

biodegradable copolymer of polyactide (PLA) and polyglycolide

(PGA).

J Biomed Mater Res

. 1983,

17:71

82.

18.

Lundgren B, Holst A, Tärnholm A, Rolfsen W. Cellular reaction

following cataract surgery with implantation of the heparin-

surface

-modified intraocular lens in rabbits with experimental

uveitis.

J Cataract Refract Surg

. 1992,

18:602

19.

Meikle MC, Papaioannou S, Ratledge TJ, Speight PM, Watt-

Smith

SR, Hill PA, Reynolds JJ. Effect of poly DL-

lactide

glycolide

impla

nts and xenogeneic bone matrix-derived growth factors on

calvarial bone repair in the rabbit.

Biomaterials

. 1994,

15:513

21.

20.

Miyamoto S, Takaoka K. Bone induction and bone repair by

composites of bone morphogenetic protein and biodegradable

synthetic polymers.

Ann Chir Gynaecol Suppl

. 1993,

207:69

75.

21.

Winet H, Hollinger JO. Incorporation of polylactide-polyglycolide in

a cortical defect: neoosteogenesis in a bone chamber. J Biomed

Mater Res

. 1993,

27:667

76.

22.

Rimondini L, Nicoli-Aldini N, Fini M, Guzzardella G, Tschon M,

Giardino R. In vivo experimental study on bone regeneration in

critical bone defects using an injectable biodegradable PLA/PGA

copolymer.

Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod

2005,

99:148

54.

23.

Rissolo AR, Bennett J. Bone grafting and its essential role in implant

dentistr

y. Dent Clin North Am. 1998,

42:

116.

24.

Vert M, Mauduit J, Li S. Biodegradation of PLA/GA polymers:

increasing complexity.

Biomaterials

. 1994 D

ec,

15:1209

13.

25.

Queiroz, TP, Vieira, EH, Okamoto, R, Garcia Jr, IR. Avaliação do

copolímero de ácido poliláctico e poliglicólico ao redor de

implantes osseointegráveis sem estabilidade primária. Análise

biomecânica, histométrica e imunoistoquímica em co

elhos.

[Dissertação]. Araçatuba: Unesp/SP, 2008; 119 p.

26.

Simonet WS, Lacey DL, Dunstan CR, Kelley M, Chang MS, Lüthy R,

Nguyen HQ, Wooden S, Bennett L, Boone T, Shimamoto G, DeRose

M, Elliott R, Colombero A, Tan HL, Trail G, Sullivan J, Davy E, Bucay

N, Renshaw-Gegg L, Hughes TM, Hill D, Pattison W, Campbell P,

Sander S, Van G, Tarpley J, Derby P, Lee R, Boyle WJ.

Osteoprotegerin: a novel secreted protein involved in the

regulation of bone density.

Cell

. 1997,

89:309

19.

27.

Khosla S. Minireview: the OPG/RANKL/RANK system.

Endocrinology

200,

142:5050

28.

Schneider GB, Perinpanayagam H, Clegg M, Zaharias R, Seabold

D, Keller J, Stanford C. Implant surface roughness affects

osteoblast gene expression.

J Dent Res. 2003 May;82(5):372

29.

Cochran DL, Senk RK, Lussi A, Higginbottom FL, Buser D. Bone

response to unloaded and loaded titanium implants with a

sandblasted and acid-etched surface: a histometric study in the

canine mandible. J Biomed Mater Res. 40(1):1

11, 1998.

30.

Cordioli G Majzoud Z, Piatelli A, Scarano A Removal torque and

histomorphometric investigation of 4 different titanium surfaces: an

experimental study in the rabbit tibia. Int J Oral Maxillofac implants.

15(5):668

674, 2000.

ANEXO

1: NORMAS DE PUBLICAÇÃO

The International Journal of Oral & Maxillofacial

Implants

Author Guidelines

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and matters of education related to the implant field are invited.

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should be limited to four. Secondary contributors

can be acknowledged at the end of the article. (Special circumstances will

be considered by the editorial chairman.)

Review/editing of manuscripts

Manuscripts will be reviewed by the editorial chairman an

d will be

subjected to blind review by the appropriate section editor and editorial

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Group) in regard to preparation of manuscripts and authorship

(Uniform requirements for manuscripts submitted to biomedical

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Ann Intern Med 1997;126:36

–

47).

See

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rs on each page.

Title page.

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authors. Phone, fax, and e-

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author unless otherwise noted. If the paper was presented before an

organized group, the name of the organization, location, and date

should be included.

Abstract/key words.

Page 2 of the manuscript should include the

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word abstract, and a list of key words

not to exceed 6. Abstracts for basic and clinical research articles

must be structured with the following sections:

(1)

Purpose,

(2)

Materials and Methods,

(3)

Results, and

(4)

Conclusio

ns. Abstracts for

all other types of articles (ie, literature rev

iews, clinical reports,

technologies, and case reports) should not exceed 250 words and

need not be structured.

Introduction.

Summarize the rationale and purpose of the study,

giving only pe

rtinent references.

Clearly state the working hypothesis.

Materials and Methods.

Present materials and methods in sufficient

detail to allow confirmation of the observations. Published methods

should be referenced and discussed only briefly, unless modifi

cations

have been made.

Indicate the statistical methods used, if

applicable.

Results.

Present results in a logical sequence in the text, tables, and

illustra tio ns. Do no t re p e a t in th e te xt a ll th e d a ta in th e ta b le s o r

illustrations; emphasize only impo

rtant observations.

Discussion.

Emphasize the new and important aspects of the study

a nd the c onc lusions tha t fo llo w fro m them . Do not rep ea t in d e ta il

d a ta or o ther m a teria l g iven in the Introd uc tio n or Re sults sec tion.

Rela te ob serva tions to o ther relev

a nt stud ie s a nd p oint out the

implications of the findings and their limitations.

Conclusions.

Link the conclusions with the goals of the study but

avoid unqualified statements and conclusions not adequately

supported by the data. In particular, authors s

hould avoid making

statements on economic benefits and costs unless their manuscript

includes the appropriate economic data and analyses. Avoid

claiming priority and alluding to work that has not been completed.

State new hypotheses when warranted, but cle

arly label them as

such.

Acknowledgments.

Acknowledge persons who have made

substantive contributions to the study. Specify grant or other financial

support, citing the name of the supporting organization and grant

number.

Abbreviations.

The full term fo

r which an abbreviation stands should

precede its first use in the text unless it is a standard unit of

measurement.

Trade names.

Generic terms are to be used whenever possible, but

trade names and manufacturer name, city, state, and country should

be inc

luded parenthetically at first mention.

REFERENCES

All references must be cited in the text, numbered in order of

appearance.

The reference list should appear at the end of the article in numeric

sequence.

Do not include unpublished data or personal co

mmunications in the

reference list. Cite such references parenthetically in the text and

include a date.

Avoid using abstracts as references.

Provide complete information for each reference, including names of

all authors (up to six). If the reference is

to part of a book, also include

title of the chapter and names of the book's editor(s).

Journal reference style:

Johansson C, Albrektsson T. Integration of screw implants in the rabbit:

A 1-year follow-up of removal torque of titanium implants. Int J Or

Maxillofac Implants 1987;2:69

75.

Book reference style:

Skalak R. Aspects of biomechanical considerations. In: Brånemark P-

Zarb GA, Albrektsson T (eds).

Tissue

Integrated Prostheses:

Osseointegration in Clinical Dentistry. Chicago: Quintessence,

85:117

128.

ILLUSTRATIONS AND TABLES

All illustrations must be numbered and cited in the text in order of

appearance.

Illustrations and tables should be embedded in a PC Word

document.

All illustrations and tables should be grouped at the end of the tex

Original slides or high-

resolution images must be sent to the Publisher's

office upon acceptance of the article.

Note that article acceptance is pending the receipt of acceptable

original art.

Black & white–Submit three sets of high-quality glossy pr

ints. Should the

quality prove inadequate, negatives will be requested as well. Photographs

should be unmounted and untrimmed.

Radiographs

–

Submit the original radiograph as well as two sets of prints.

Color

–Color is used at the discretion of the publishe

r. No charge is made for

such illustrations. Original slides (35-

mm transparencies) must be submitted,

plus two sets of prints made from them. When a series of clinical images is

submitted, tonal values must be uniform. When instruments and appliances

are

photographed, a neutral background is best.

Drawings

–

Figures, charts, and graphs should be professionally drawn and

lettered large enough to be read after reduction. High-

resolution (at least

300 dpi) laser-printed art is acceptable (no photocopies, pleas

e); also

provide electronic file if possible.

Electronic Files

–

May be accepted if original figures (as specified above) are

unavailable. Resolution must be at least 300 dpi; files saved in .tiff or .eps

format are preferred.

Legends

–

Figure legends should

be grouped on a separate sheet and typed

double

spaced.

MANDATORY SUBMISSION FORM

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www.quintpub.com

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xed to the

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er copyright that does not

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Submission Form to the JOMI Manuscript Editor (630 736 3634).

ANEXO 2:

TABELAS, GRÁFICOS E ILUSTRAÇÕES

Tabela 1: Dados dos valores obtidos na análise de

torque

-reverso nos grupos controle (C)

e tratado (G)

no período de 60 dias.

AMOSTRAS

Período 6

0 dias

C(controle)

PLA

PGA + OSSO

)

Amostra 1

Amostra 2

Amostra 3

Amostra 4

Amostra 5

Média

13,2

21,6

Desvio padrão

5,8

5,4

Tabela 2: Teste estatístico paramétrico utilizando amostras independentes para análise de

torque

reverso

nos grupos

controle (C) e tratado (G).

GMC

C e G

Valor Calculado de

2,38

Graus de Liberdade

8,00

Media de amostra

(1)

13,20

Media de amostra

(2)

21,60

Probabilidade de

Igualdade

4,32*

Significante ao nível de 5% <

a =

0,05

Tabela 3

lise semi

quanitativa.

Mé

dias percentuais das imunomarca

çõ

es obtidas nas

diferentes regi

nos per

odos de 15 e 40 dias nos grupos C e G.

Médias das Amostras de Torque Reverso (N.cm)

5,8

5,4

13,2

21,6

Média

Desvio padrão

Controle

Tratado

áfico 1: Média das amostras de torque reverso dos grupos C e G no período de 60 dias

a =

0,05 >

C (Controle)

G (

Tratado

)

Período

Proteína

Cortical

Superior

Medular

Cortical

Inferior

Cortica

Superior

Medular

Cortical

Inferior

OPG

20%

6,6%

20%

33,3%

46,6%

RANKL

26,6%

6,6%

46,6%

56,6%

20%

15 dias

Osteocalci

6,6%

13,3%

46,6%

20%

60%

OPG

43,3%

46,6%

33,3%

20%

RANKL

6,6%

20%

60%

56,6%

33,3%

46,6%

40 dias

Osteocalc

26,6%

40%

46,6%

56,6%

66,6%

Somas Percentuais dos Valores das Regiões Analisadas - GRUPO CONTROLE

20,0%

26,6%

6,6%6,6% 6,6% 6,6%

20,0%

46,6%

60,0%

46,6%

26,6%

43,3%

6,6%

40,0%

46,6%

13,3%

33,3%

20,0%

0,0%

10,0%

20,0%

30,0%

40,0%

50,0%

60,0%

70,0%

OPG

RANKL

Osteocalcina

OPG

RANKL

Osteocalcina

15 dias 40 dias

Cortical Superior

Medular

Cortical Inferior

áfico 2: Somas percentuais dos valores das imunomarca

çõ

es das regiões analisadas no

grupo co

ntrole (C).

Per

odo de 15 e 40 dias.

Somas Percentuais dos Valores das Regiões Analisadas - GRUPO G

20,0%

56,6% 56,6%

33,3%

20,0% 20,0%

33,3%

46,6%

66,60%

56,60%

20,0%

46,6%

56,60%

20,0%

60,0%

20,0%

46,6%

0,0%

10,0%

20,0%

30,0%

40,0%

50,0%

60,0%

70,0%

OPG

RANKL

Osteocalcina

OPG

RANKL

Osteocalcina

15 dias 40 dias

Cortical Superior

Medular

Cortical Inferior

áfico 3: Somas percentuais dos valores das imunomarca

çõ

es das regiões analisadas no

grupo tratado (G). Per

odo de 15 e 40 dias.

Soma: Cortical Superior + Medular + Cortical Inferior

47%

80%

27%

123%

87%

113%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

140%

OPG

RANKL

Osteocalcina

OPG

RANKL

Osteocalcina

15 dias 40 dias

áfico 4: Somas percentuais dos valores obtidos das imunomar

çõ

es nas diferentes

regi

es analisadas nos per

odos de 15 e 40 dias no grupo tratado (G).

Fig

–

Anti

sepsia

Fig

–

Incisão

Fig

Retalho

cirúrgico

descolado.

Fig

–

Leito receptor

Fig

–

Fresagem

do leito receptor.

Fig

. 6

leta de osso raspado (G)

Fig

–

Polímero PLA/PGA adicio

nado

à superfície do implante (G).

Fig. 8

–

Implante instalado após

adição do polímero misturado ao

osso autógeno raspado (G)

Fig

. 11 - Remoção do implante por

torque

reverso (G)

Fig

. 12 - Negativo da área onde foi

instalado o implante após sua

remoção

(G).

Fig

. 9 – Implante após 60 dias d

instalação

(G).

Fig

. 13 – Soro de burro

para

processamento imunohistoquímico.

Fig

–

Soro Donkey.

Fig

. 10 - Preparo do tecido ósseo

para encaixe de chave para

torquímetro manual

(G).

Fig. 15 – Coloração das lâminas por

DAB.

Fig. 16 – Álcoois e corantes para

coloração HE

Fig

. 18 – Desgaste da peça incl

uída

em resina em aparelho abrasivo

Exakt

®.

Fig. 20

–

Corte da peça

em aparelho

do Sistema

Exakt

®.

Fig. 19 – Adesão do corpo de prova

na lâmina no aparelho do Sistema

Exakt

®.

Fig

– Corantes

VA/AS

utilizados na

coloração das lâminas cortadas pelo

Sistema Exakt®

Fig. 22 – Microscópio acoplado a

computador onde foram capturadas

as ima

gens

de todas as lâminas

obtidas das amostras.

Fig. 17 – Bloco ósseo (tíbia) contendo

o implante incluído em resina Metil

Metacrilato.

Fig. 23: Tecido ósseo neoformado celularizado acompanhando toda a interface.HE, 40X,

40 dias (G).

Fig. 24: Nota-se a presença de tecido ósseo em neoformação, além de restos do

biomaterial (PLA/PGA) visualizado no canto superior direito da lâmina. HE, 400X, 15 dias

(G).

Fig. 25: Aspecto da interface no grupo controle apresentando-se com tecido ósseo

apenas na cortical superior e tecido conjuntivo adjacente à interface. HE, 40X, 15 dias (C).

Fig. 26: Aspecto da interface no grupo controle. Tecido ósseo apenas na cortical inferior e

tecido imaturo preenchendo

a interface. HE, 40X, 15 dias (C).

Fig. 27

: Tecido ósseo

neoformado na interface óssea.

HE, original 10

, 40 dias (G

Fig. 28: Tecido ósseo neoformado e tecido imaturo (conjuntivo) entre a interface e o osso.

HE, 40X, 40 dias (C).

Fig. 29: Ca

mada estreita de tecido ósseo na interface

próxima a cortical superior no grupo

controle. HE, 40X, 40 dias (C).

Fig. 30: Tecido ósseo na região ocupada pelo pico e vale do implante no grupo tratado.

Nota

se as áreas de osso compacto acompanhando a inter

face e a ausência do

biomaterial. HE, original 400X, 60 dias (G).

Fig. 31: Tecido ósseo neoformado, celularizado, corado pelo VA, em contato com a

superfície do implante na área da cortical superior. VA/AS, 400X, 60 dias (G).

Fig. 32: Tecido ósseo neoformado, celularizado, corado pelo VA, em contato com a

superfície do implante na área das espiras do implante. VA/AS, 100X, 60 dias (G).

Fig. 33: Tecido ósseo em neoformação celularizado, corado pelo VA e áreas de tecido

conjuntivo coradas pelo AS em contato com a superfície do implante. VA/AS, 400X, 60

dias Grupo Controle (C).

Fig. 34: Tecido ósseo corado pelo VA contendo inúmeros osteócitos. VA/AS, 400X, 60 dias

Grupo Controle (C).

Fig. 35: Quadro contendo as imagens das lâminas do grupo tratado (G) para aná

lise

qualitativa das imunomarca

çõ

es.

RANK

OPG

Fig. 36: Quadro contendo as imagens das lâminas do grupo controle (C) para aná

lise

qualitativa das imunomar

çõ

es.

RANK L

OPG

Fig.

37: MEV. Grupo controle (C). Período 60 dias. Observa-

algumas

áreas contendo

osso

aderido

superf

cie do implante. (originais de 56X).

Fig.

38: MEV. Grupo

controle

(C). Período 60 dias. Observa-

a presença de algum tecido

sseo ad

erido

superf

cie do implante.

(originais de 200

X).

Fig.

39: MEV. Grupo tratado (G2). Período 60 dias. Observa-

a presença de

osso

contato em toda

a superf

cie do implante. (originais de 56X).

Fig. 40

: MEV. Grupo tratado (G2

). Per

odo 60 dias.

Numa vista mais aproximada o

bserva

a presença de tecido ó

sseo

em intimo

contato

com as espiras do implante. (originais de

500

X).

ANEXO 4: CERTIFICADO DO CEP

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