( PDF ) Estudo de biodisponibilidade comparativa entre duas formulações contendo levotiroxina sódica em voluntários sadios

Download PDF

ads:

UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ

FACULDADE DE MEDICINA

DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA E FARMACOLOGIA

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM FARMACOLOGIA

PACÍFICA PINHEIRO CAVALCANTI

ESTUDO DE BIODISPONIBILIDADE COMPARATIVA ENTRE DUAS FORMULAÇÕES

CONTENDO LEVOTIROXINA SÓDICA EM VOLUNTÁRIOS SADIOS

FORTALEZA

2005

ads:

Livros Grátis

http://www.livrosgratis.com.br

Milhares de livros grátis para download.

PACÍFICA PINHEIRO CAVALCANTI

ESTUDO DE BIODISPONIBILIDADE COMPARATIVA ENTRE DUAS FORMULAÇÕES

CONTENDO LEVOTIROXINA SÓDICA EM VOLUNTÁRIOS SADIOS

Dissertação submetida à Coordenação do Programade Pós-

Graduação em Farmacologia, do Departamento de Fisiologia e

Farmacologia, da Faculdade de Medicina, da Universidade

Federal do Ceará, como requisito parcial para obtenção do

título de Mestre em Farmacologia.

Orientadora: Profa. Dra. Maria Elisabete Amaral de

Moraes

FORTALEZA

2005

ads:

PACÍFICA PINHEIRO CAVALCANTI

ESTUDO DE BIODISPONIBILIDADE COMPARATIVA ENTRE DUAS FORMULAÇÕES

CONTENDO LEVOTIROXINA SÓDICA EM VOLUNTÁRIOS SADIOS

Dissertação submetida à Coordenação do Programade Pós-

Graduação em Farmacologia, do Departamento de Fisiologia e

Farmacologia, da Faculdade de Medicina, da Universidade

Federal do Ceará, como requisito parcial para obtenção do

título de Mestre em Farmacologia.

Aprovada em ___/___/_____

BANCA EXAMINADORA

Profª. Dra. Maria Elisabete Amaral de Moraes (Orientadora)

Universidade Federal do Ceará - UFC

Profª. Dra. Maria Bernadete de Sousa Maia

Universidade Federal de Pernambuco - UFPE

Profª. Dra. Gisela Costa Camarão

Universidade Federal do Ceará - UFC

Dedico esta dissertação a todos que acreditaram em mim,

em especial à minha mãe, Joseli,

e ao meu marido, Daniel.

AGRADECIMENTOS

A Deus e Nossa Senhora, por me abençoarem com uma vida repleta de bênçãos e graças.

À minha mãe, Joseli, por todo o seu amor, carinho, dedicação e fortaleza, os quais jamais serão

esquecidos.

Ao meu marido, Daniel, pela compreensão nas horas de ausência, pelo seu eterno bom humor e

por me possibilitar vivenciar a maravilhosa sensação de se sentir amada.

Minha Família, em especial, meu irmão, Mário, pelo carinho e por ter possibilitado o início desta

caminhada de realização de sonhos.

Aos meus amigos, pessoas maravilhosas que eu tive o prazer de conhecer, que tornam a minha

vida mais plena e por incluir-me em suas preces.

À Dra. Maria Elisabete Amaral de Moraes, minha orientadora, pelo carinho, apoio e incentivo a

realizar este sonho.

Ao Dr. Manoel Odorico de Moraes, por ter me apresentado ao mundo da Farmacologia Clínica,

pelo incentivo e pelas palavras motivadoras.

Ao Dr. Fernando Antônio Frota Bezerra, por ser sempre tão solícito a nos ajudar a sermos

melhores tanto no aspecto científico como pessoal.

À Dra. Gisela Costa Camarão, por sempre ter me tratado com tanta atenção, esclarecendo as

minhas dúvidas, colaborando no aprimoramento do meu crescimento científico e pela engrandecedora presença

na banca examinadora da defesa desta dissertação.

À Dra. Gilmara Santana, pelas horas desprendidas e pelo amplo conhecimento transmitido de

maneira tão didática e carinhosa.

Ao amigo, Ismael, pela sua invejável paciência e carinhosa solicitude.

À Dra. Maria Bernadete de Sousa Maia, pelos conhecimentos repassados de forma tão cativante

e pela honrosa presença na banca examinadora da defesa desta dissertação.

Ao Dr. Adriano Cunha, por me apresentar a Etapa Analítica e elucidar alguns de seus mistérios.

Aos Professores do Curso de Pós-Graduação, por terem transmitido seus conhecimentos com

tanta sapiência e dedicação.

A todos que fazem a Unidade de Farmacologia Clínica, meu agradecimento a todos vocês por

terem colaborado direta ou indiretamente no desenvolvimento dessa pesquisa científica e por terem propiciado

muitos momentos de alegria.

Colegas de Pós-Graduação, companheiros de tantas batalhas, pelos momentos singulares de

aprendizado mútuo e de alegrias compartilhadas.

As Professoras do Departamento de Enfermagem da Universidade Federal do Ceará, em

especial a Profª Ana Fátima Fernandes, por ter cultivado em mim a paixão pela pesquisa.

À Fábia e à Flávia, secretárias da UNIFAC, pela destreza, profissionalismo e sensibilidade em

ajudar na resolução das minhas dificuldades cotidianas.

À Áurea, secretária do Departamento de Fisiologia e Farmacologia, pelo seu constante sorriso e

pela disposição em ajudar sempre.

Ao Comitê de Ética em Pesquisa Clínica, pelo aprimoramento deste trabalho científico através

das críticas e das sugestões.

A todos os voluntários, que participaram desse estudo, por possibilitarem a concretização deste

trabalho.

CAPES, CNPq e Instituto Claude Bernard, por terem colaborado financeiramente durante todo

o desenvolvimento da pesquisa.

“O valor das coisas não está no tempo que elas duram,

mas na intensidade com que acontecem.

Por isso, existem momentos inesquecíveis,

coisas inexplicáveis e pessoas incomparáveis.”

Fernando Pessoa

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 – Estruturas químicas da Tiroxina (T4) e Liotironina (T3). 10

Figura 2 – 1. Efeito de feedback

negativo dos

hormônios

tireoidianos 14

Figura 3 – Estrutura química da Levotiroxina. 19

Figura 4 – Metabolismo da Levotiroxina. 22

Figura 5 – Análise comparativa do IMC durante os períodos de Pré-estudo e Pós-

estudo em 23 voluntários sadios após administração de duas doses de

600μg de levotiroxina sódica. A linha inteira representa os valores de

referência para os homens e a pontilhada, para mulheres. 48

Figura 6 – Análise comparativa da hemoglobina durante os períodos de Pré-

estudo e Pós-estudo em 23 voluntários sadios após administração de

duas doses de 600μg de levotiroxina sódica. A linha inteira representa

os valores de referência para os homens e a pontilhada, para mulheres.

* p<0,05. 49

Figura 7 – Análise comparativa do hematócrito durante os períodos de Pré-estudo

e Pós-estudo em 23 voluntários sadios após administração de duas

doses de 600μg de levotiroxina sódica. A linha inteira representa os

valores de referência para os homens e a pontilhada, para mulheres. *

p<0,05. 49

Figura 8 – Análise comparativa de TSH durante os períodos de Pré-estudo e Pós-

estudo em 23 voluntários sadios após administração de duas doses de

600μg de levotiroxina sódica. A linha inteira representa os valores de

referência para os homens e para mulheres. * p<0,05.

Figura 9 – Curva média da concentração sérica (ng/mL) versus tempo (h) da

levotiroxina após a administração de duas formulações de 600 µg de

Levotiroxina sódica em 24 voluntários saudáveis. 68

Figura 10 – Curva média da concentração sérica (ng/mL) da Liotironina versus

tempo (h) após a administração de duas formulações de 600 µg de

Levotiroxina sódica em 24 voluntários saudáveis. 69

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 – Definição das seqüências de tratamento. 34

Tabela 2 – Análise dos eventos adversos relatados pelos 24 voluntários

durante o ensaio clínico de biodisponibilidade. 51

Tabela 3 –

Parâmetros metabólicos (

± DP) de 23 voluntários antes e após

a administração de 600μg de Levotiroxina sódica. 53

Tabela 4 –

Parâmetros hepáticos (

± DP) de 23 voluntários antes e após a

administração de duas doses de 600μg de Levotiroxina sódica. 53

Tabela 5 –

Parâmetros renais (

± DP) de 23 voluntários antes e após a

administração de duas doses de 600μg de Levotiroxina. 54

Tabela 6–

Valores de TSH (μUI/mL) pré e pós-estudo dos 24 voluntários

antes e após a administração de duas doses de 600 μg de

levotiroxina sódica. 55

Tabela 7 – Dados do teste de Especificidade da Levotiroxina (T4). 57

Tabela 8 – Dados do teste de Especificidade da Liotironina (T3). 58

Tabela 9 – Parâmetros de validação dos CQ da Levotiroxina (T4). 59

Tabela 10 – Parâmetros de validação dos CQ da Liotironina (T3). 59

Tabela 11 – Dados do processo de reteste da Levotiroxina (T4). 61

Tabela 12– Dados do processo de reteste da Liotironina (T3). 62

Tabela 13 – Resultados do teste de estabilidade de curta duração para amostras

baixas e altas da Levotiroxina (I) e Liotironina (II). 64

Tabela 14 – Resultados do teste de estabilidade após 3 ciclos de congelamento e

descongelamento das amostras de Levotiroxina (I) e Liotironina (II)

nas concentrações baixas e altas. 65

Tabela 15 – Resultados do teste de estabilidade de longa das amostras de

Levotiroxina (I) e Liotironina (II) nas concentrações baixas e

altas. 66

Tabela 16 –

Parâmetros farmacocinéticos (

± DP) da levotiroxina obtidos

após a administração de duas formulações de 600µg de 72

Levotiroxina sódica.

Tabela 17 –

Parâmetros farmacocinéticos (

± DP) da liotironina obtidos

após a administração de duas formulações de 600µg de

Levotiroxina sódica. 72

Tabela 18 – Média, DP e IC (90%) dos parâmetros farmacocinéticos da

levotiroxina obtidos após a administração de duas formulações de

600µg de Levotiroxina sódica. 73

Tabela 19 – Média, DP e IC (90%) dos parâmetros farmacocinéticos da

liotironina obtidos após a administração de duas formulações de

600µg de Levotiroxina sódica. 74

Tabela 20 – Avaliação de biodisponibilidade a partir da razão das médias de

max

e ASC

0-48 h

da Levotiroxina (T4). Dados transformados em

logaritmo natural. 75

Avaliação de biodisponibilidade a partir da razão das médias de

max

e ASC

0-48 h

da Liotironina (T3). Dados transformados em

logaritmo natural.

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

% Porcentagem

mais ou menos

≤

menor ou igual

μg/kg

micrograma por kilograma

μL/mL

microlitros por mililitros

μg/dL micrograma por decilitro

mg Miligrama

μg Micrograma

> Maior

art. Artigo

g Grama

h Hora

kg Kilograma

kg/m

kilograma por metro quadrado

L Litro

ln logaritmo neperiano

mg Miligrama

mg/dL miligrama por decilitro

mL Mililitro

ng/mL nanograma por mililitro

nmol.L

-1

nanomol por litro

M Concentração Molar

nº Número

U/L Unidade por litro

μUI/mL

Micro-unidade internacional por mililitro

Anvisa Agência Nacional de Vigilância Sanitária

ASC Área Sob a Curva

max

Concentração Máxima

CNS-MS Conselho Nacional de Saúde - Ministério da Saúde

CONEP Conselho Nacional de Ética em Pesquisa

CQ Controle de Qualidade

CQA Controle de Qualidade Alto

CQB Controle de Qualidade Baixo

CQM Controle de Qualidade Médio

CPMP

Committee for Proprietary Medicinal Products

CRF Case Report Formulary

CV Coeficiente de Variação

DCB Denominação Comum Brasileira

DP Desvio padrão

ECG Eletrocardiograma

ECLIA Imunoensaio de Eletroquimioluminescência

EUA Estados Unidos da América

FDA Food and Drug Administration

HUWC Hospital Universitário Walter Cantídio

IMC Índice de Massa Corpórea

K Constante de eliminação

LQ Limite de Quantificação

OMS Organização Mundial de Saúde

RDC Resolução da Diretoria Colegiada

ALT Alanina amino transferase

AST Aspartato amino transferase

Gama-GT Gama-glutamiltransferase

1/2

Meia-vida sérica

TBG Globulina Ligante da Tiroxina)

TRH Hormônio liberador de tireotropina

TSH Hormônio estimulante da tireóide

UFC Universidade Federal do Ceará

UNIFAC Unidade de Farmacologia Clínica

USP United States Pharmacopeia

VHS Volume de Hemossedimentação

Vol. Voluntário

Média

ANOVA Análise de Variância

IC Intervalo de Confiança

RESUMO

Estudo de biodisponibilidade comparativa entre duas formulações contendo levotiroxina sódica

em voluntários sadios. Pacífica Pinheiro Cavalcanti. Orientadora: Maria Elisabete Amaral de Moraes.

Dissertação de Mestrado. Programa de Pós-graduação em Farmacologia. Departamento de Fisiologia e

Farmacologia. Faculdade de Medicina. Universidade Federal do Ceará. Fortaleza. Aprovada em 25 de

Agosto, 2005.

O tratamento de escolha para o hipotireoidismo é a levotiroxina sódica. Estudos de biodisponibilidade

com medicamentos com características hormonais têm grande importância na garantia do controle da

qualidade dos fármacos disponíveis à população. Logo, o objetivo deste estudo foi determinar a

biodisponibilidade de duas formulações de 150 μg de levotiroxina sódica em indivíduos sadios; após

única administração de 600 μg, por via oral e compará-las. A pesquisa consistiu de um estudo aberto,

randomizado, cruzado, com dois tratamentos, dois períodos (duas seqüências), nos quais os 24

voluntários, saudáveis e de ambos os sexos, receberam, em cada período distinto, a formulação teste

do Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. ou a formulação referência da Sanofi-Synthelabo Ltda.

(Puran®T4). Foi utilizado o imunoensaio de eletroquimioluminescência para dosar as concentrações

dos hormônios T3 (liotironina) e T4 (levotiroxina) nas amostras de soro dos voluntários e posterior

determinação dos parâmetros farmacocinéticos. Os resultados da análise de variância (ANOVA) da

Levotiroxina demonstraram um significante efeito de período com diminuição dos níveis séricos do

T4, no segundo internamento, independente da aleatorização (p<0,05). As razões das médias

geométricas do C

max

e ASC

0-48h

das formulações teste e referência

foram 92,97% e 97,87%,

respectivamente. Os intervalos de confiança de 90% foram de 88,70– 97,44% e 93,10 - 102,88%,

respectivamente. As formulações de comprimidos de 150μg de levotiroxina sódica estudadas

apresentaram biodisponibilidades semelhantes, quando administradas em dose única de 600μg, por via

oral a voluntários sadios; sendo então consideradas bioequivalentes.

Palavras-chave: Tiroxina; Quimioluminescência; Disponibilidade biológica.

ABSTRACT

Comparative bioavailability study of two formulations of sodic levothyroxine in healthy

volunteers. Pacífica Pinheiro Cavalcanti. Advisor: Maria Elisabete Amaral de Moraes. Master’s

Dissertation. Post-Graduate Program in Pharmacology. Department of Physiology and Pharmacology.

Faculty of Medicine, Federal University of Ceará, Fortaleza. Approved on August 25

, 2005.

The choice treatment for the hipothyroidism is the sodic levothyroxine. Bioavailability studies with

medicines with characteristics hormones have great importance in the warranty of the control of the

quality of the available medicine to the population. Therefore, the study aimed to determine the

bioavailability of two formulations of sodic levothyroxine in healthy volunteers; after only

administration, orally and to compare them. The research consisted of an open study, randomized,

crossover, with two treatments, two periods (two sequences), with 24 volunteers, healthy and of both

sexes, they receive, in each different period, the formulation tests of Aché Laboratories

Pharmaceutical S.A. or the formulation reference of Sanofi-Synthelabo Ltd. (Puran®T4). The

electrochemiluminescence immunoassay was used to dose the concentrations of the hormones T3

(liothyronine) and T4 (levotiroxina) in the samples of the volunteers' serum. The results of the

variance analysis of Levothyroxine demonstrated a significant period effect where a decrease of the

T4 serum´s levels was observed, in the second period, independent of the randomization (p< 0.05).

The reasons of the geometric averages of C

max

and ASC

0-48h

of the formulations test and reference

were 92.97% and 97.87%, respectively. The confidence interval (CI) of 90% was of 88.70 – 97.44%

and 93.10 – 102.88%, respectively. The two formulations of 150 μg of sodic Levothyroxine presented

bioavalabilities, when administered orally in only dose of 600 μg, to healthy volunteers; being then

considered bioequivalent.

Key words: Thyroxine; Chemiluminescence; Biological availability.

SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO

1.1 Ensaios clínicos

1.1.1 Histórico 1

1.1.2 Características 2

1.1.3 Biodisponibilidade 6

1.2 Glândula tireóide

1.2.1 Anatomia e fisiologia 9

1.2.2 Hormônios tireoidianos

1.3 Doenças da tireóide

1.3.1 Hipertireoidismo 16

1.3.2 Hipotireoidismo 18

1.4 Levotiroxina

1.4.1 Química 19

1.4.2 Farmacologia 20

1.4.3 Farmacocinética 20

1.4.3.1 Método de detecção 21

1.4.4 Metabolismo 22

1.4.5 Modo de uso 23

1.4.6 Indicações e contra-indicações 23

1.4.7 Reações adversas 24

1.4.8 Interferência da levotiroxina nos testes clínico-patológicos 25

1.4.9 Interações medicamentosas 25

2 JUSTIFICATIVA

3 OBJETIVOS

3.1 Objetivo geral

3.2 Objetivos específicos

4 MATERIAL E MÉTODOS

4.1 Protocolo clínico

4.1.1 Delineamento do estudo 28

4.1.2 Seleção do voluntário

4.1.2.1 Exames laboratoriais

4.1.2.2 Critérios de Inclusão

4.1.2.3 Critérios de Exclusão

4.1.2.4 Critérios para eliminação do voluntário do estudo

4.1.3 Aspectos éticos 32

4.1.4 Produto 33

4.1.5 Administração 33

4.1.6 Internamento 34

4.2 Protocolo analítico

4.2.1 Princípio do método 37

4.2.2 Material 37

4.2.3 Preparo de soluções 39

4.2.4 Segurança

4.2.5 Validação do método bioanalítico

4.2.6 Determinação das concentrações de levotiroxina e

liotironina no soro

4.2.7 Cálculo dos parâmetros farmacocinéticos

4.3 Protocolo estatístico

5 RESULTADOS E DISCUSSÃO

5.1 Etapa clínica

5.2 Etapa analítica

5.2.1 Especificidade/seletividade 57

5.2.2 Exatidão e precisão 58

5.2.3 Processo de reteste 61

5.2.4 Estabilidade 62

5.3 Análise estatística/farmacocinética

6 CONSIDERAÇÕES FINAIS

7 CONCLUSÃO

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

GLOSSÁRIO

ANEXOS

1 INTRODUÇÃO

1.1 Ensaios clínicos

1.1.1 Histórico

A evolução da terapêutica coincide, provavelmente, com a história da inteligência do

homem, superpondo-se à própria Medicina. A sabedoria atávica, o feliz acaso, a intuição mística, a

observação casual e a reflexão analógica foram, certamente, a base dos primitivos ensaios clínicos,

necessariamente simples e erráticos (FACKLAND; FACKLAND, 1992).

A impropriedade e ineficiência da terapêutica e o desconhecimento da fisiopatologia das

doenças levaram o escritor inglês Richard Gordon a afirmar que “A história da medicina foi, em

grande parte, até os fins do século passado, a substituição da ignorância por mentiras”

(GORDON,1997). Somente depois que Claude Bernard (1813-1878), em sua obra “Introduction à la

Medicine Experimentale”, de 1865, formalizou os critérios científicos para reunir informações

baseadas na experimentação, é que a medicina passou a ser considerada uma ciência (ENTRALGO,

1981). Mesmo assim, a aplicação desses critérios à terapêutica vinha sendo, até recentemente, lenta e

inconsistente. Embora os aspectos diagnósticos da medicina fossem abordados com sofisticação

científica, o valor terapêutico dos medicamentos era determinado pela tradição de uso e o testemunho

dos médicos. Em função disso, a avaliação da descoberta e do aperfeiçoamento de novos

medicamentos teve como história um processo de risco e ineficiência (CHAST, 1995).

Os ensaios clínicos, seguindo princípios éticos e científicos de experimentação, são os

responsáveis pelas bases da avaliação de eficácia e segurança de drogas ou medicamentos. Os

primeiros estudos de pesquisa clínica controlada foram iniciados por Harry Gold, em 1930, médico da

Cornell University – EUA – seguida por Amberson, Mc Mahon e Pinner (1931), que introduziram os

ensaios clínicos “simples cego” randomizados e controlados. Apesar disso, o termo Farmacologia

Clínica, referindo-se à investigação de drogas em seres humanos, somente foi introduzido nos meios

científicos em 1952 (FACKLAND; FACKLAND, 1992).

No Brasil, as pesquisas fármaco-clínicas foram iniciadas com psicotrópicos, na década de

80, pelo professor Elisaldo Carlini, no Departamento de Psicobiologia da Escola Paulista de Medicina,

atual Universidade Federal de São Paulo. Entretanto, somente com os estudos de biodisponibilidade,

bioequivalência e de interações medicamentosas realizados pelos professores Dr. Gilberto de Nucci

(USP), Dra. Maria Elisabete Amaral Moraes, Dr. Manoel Odorico de Moraes e Dr. Fernando Antônio

Frota Bezerra (UFC), no início da década de noventa, é que a pesquisa com medicamentos no nosso

país começou a ser amplamente divulgada no meio científico nacional e internacional (MORAES;

MORAES, 2000).

A necessidade do uso de tal conjunto de conhecimentos sob a supervisão dos órgãos de

vigilância sanitária torna-se clara quando o FDA relata que de 964 auditorias de trabalhos terapêuticos

relacionados a pedidos de licença no período de 1977 a 1983, 111 foram invalidados por serem

portadores de graves defeitos metodológicos, sendo que 42 investigadores foram considerados não

confiáveis (LOCK; WELLS, 1993; TALBOT, 1999).

Concluiu-se, portanto, que a utilização das técnicas dos ensaios clínicos foi a resultante

lógica das necessidades médicas de cobertura de hiatos terapêuticos, em permeio com os imperativos

econômicos do crescimento industrial e com a contrapartida do crescente rigor das repartições

governamentais de vigilância sanitária. Além de ser técnica de conhecimento obrigatório para os

especialistas da área, afigura-se como indispensável componente da cultura médica atual,

especialmente no que concerne à crítica aos trabalhos terapêuticos que perfazem cerca de 20 a 30%

das publicações médicas (ROCHON, 1998).

Na atualidade, a Farmacologia Clínica desenvolve principalmente estudos

farmacocinéticos e farmacodinâmicos, além da elaboração, execução e análise de ensaios clínicos para

verificar a segurança, qualidade e eficácia dos medicamentos em seres humanos (COHEN; POSNE,

2000).

1.1.2 Características

Os ensaios clínicos representam a primeira e mais promissora via para os estudos de novas

formas terapêuticas. Esses estudos são os primeiros testes fora dos laboratórios direcionados para a

população. As observações clínicas tanto de pesquisa comparativa como de investigação qualitativa

sempre propiciam a informações importantes para a geração de novas hipóteses sobre a melhor via a

ser adotada na prática clínica. As pesquisas tanto básicas quanto aplicadas produzem novas

alternativas ou melhoram opções de tratamento já existentes (FULLERTON; SADLER, 2004).

A aplicação do método científico à terapêutica experimental, realizada através de

experimentos clínicos bem planejados e executados, passou a formar a base para as decisões

terapêuticas na medicina atual. Seus objetivos precisam ser bem definidos, a população de pacientes

selecionados deve ser a mais homogênea possível, assim como o grupo usado como controle. A partir

daí escolhem-se índices significativos e sensíveis para a observação, que precisam ser convertidos em

dados e, finalmente, em conclusões válidas (SPILKER, 1991).

Uma investigação clínica com novas substâncias tem o propósito de avaliar o valor de uma

droga na profilaxia ou no tratamento de uma doença ou condição clínica, identificar doses com

eficácia terapêutica, seus riscos e efeitos indesejáveis (FDA, 1997).

Toda pesquisa clínica baseia-se, em termos filosóficos e práticos, no uso de uma amostra

que representa uma população. Ao delinear um estudo, o primeiro passo é definir a população-alvo, ou

seja, as pessoas para as quais os resultados serão generalizados. A partir daí define-se os critérios de

inclusão e exclusão do estudo. Os critérios de inclusão definem as características demográficas e

clínicas dos sujeitos adequados à questão da pesquisa. E os critérios de exclusão eliminam sujeitos

cuja inclusão poderia ferir princípios éticos ou ser inapropriada para o estudo (HULLEYet al., 2003).

As investigações clínicas ou ensaios clínicos costumam ser classificados em quatro tipos

principais, identificados como:

a) Ensaio Clínico Fase I ou Ensaio de Farmacologia Clínica e Toxicidade;

b) Ensaio Clínico Fase II ou Ensaio de Investigação Clínica Inicial para Efeito

Terapêutico;

c) Ensaio Clínico Fase III ou Ensaio de Avaliação Terapêutica em Grande Escala;

d) Ensaio Clínico Fase IV ou Ensaio Pós-Comercialização (FOOD AND DRUG

ADMINISTRATION, 1997; POCOCK, 1987; GRAHAME-SMITH ;

ARONSON, 2002; LLOYD, 1994 ; SGRECCIA, 1996).

O Ensaio Clínico Fase I é feito com o objetivo de introduzir o uso de uma nova droga em

seres humanos. Em função do tipo de substância em estudo, podem ser realizados estudos Fase I

iniciais e Fase I tardios. Os estudos Fase I iniciais têm o intuito de determinar aspectos como:

farmacocinética (absorção, distribuição, metabolismo e excreção) e farmacodinâmica do

medicamento, tolerância ao medicamento, evidência de ações farmacológicas, segurança dos

esquemas posológicos. São utilizados, aproximadamente, 100 voluntários (GRANDY; JOUBERT,

1997). Os estudos Fase I tardios objetivam determinar a atividade farmacológica de doses únicas e

repetidas em portadores de patologias que se encontrem clinicamente estáveis e sejam minimamente

sintomáticos ou assintomáticos (FDA, 1997).

Conforme Lloyd e Raven (1994), o termo voluntário normal ou voluntário sadio deve ser

interpretado como indivíduo adulto, sem anormalidades clínico-laboratoriais capazes de prejudicar a

interpretação do experimento ou aumentar a sensibilidade do indivíduo ao potencial tóxico da droga

em estudo. Alguns estudos de Fase I, por questões éticas ou por considerações científicas, são feitos

em pacientes e não em voluntários sadios. Isso ocorre, por exemplo, com drogas que apresentam

toxicidade importante, como as substâncias: antineoplásicas, citostáticas, antivirais, etc.

A utilização de voluntários saudáveis é baseada no fato que diversas patologias podem

alterar a biodisponibilidade dos fármacos (GIBALDI, 1991) e podem fornecer dados errôneos de suas

biodisponibilidades. Para evitar essas variáveis, os voluntários são submetidos a avaliações clínicas e

laboratoriais para que possa corroborar o seu estado de higidez.

Todos voluntários selecionados para participar dos estudos de biodisponibiliade devem ser

orientados sobre o protocolo, seus riscos e benefícios e assinam um termo de consentimento livre e

esclarecido, autorizando formalmente a sua participação no estudo, antes do seu início.

Ensaio Clínico Fase II ou Ensaio de Investigação Clínica Inicial objetiva, num estágio

inicial, avaliar a eficácia terapêutica do medicamento e definir uma faixa posológica ideal em uma

doença alvo. Bem como, definir sua segurança e tolerabilidade nos pacientes participantes do ensaio

clínico. Pode ser denominado como um estudo piloto para estudar a atividade biológica específica,

controle ou profilaxia da doença. Geralmente, esse tipo de estudo tem a participação de 50 a 100

pacientes, mas podem chegar a 300 ou mais, dependendo do delineamento experimental (HULLEY

al., 2003).

Definida uma faixa posológica ideal, temos os estudos de fase III. Em um Ensaio Clínico

Fase III ou Ensaio de Avaliação Terapêutica faz-se uma avaliação comparativa com outras

terapêuticas já estabelecidas, envolvendo um grande número de pacientes, que pode variar de poucas

centenas a milhares. Por ser a última fase antes da comercialização do medicamento, procura-se

explorar o tipo e o perfil de reações adversas que possa apresentar, assim como: interações

clinicamente relevantes, grupos de pacientes com risco para desenvolver efeitos secundários e fatores

que possam alterar o seu efeito farmacológico (LLOYD; RAVEN, 1994). Os dados resultantes dos

estudos de fase III possibilitam o registro do medicamento para comercialização junto aos órgãos

competentes (POCOCK, 1987).

Ensaio Pós-Comercialização ou Ensaio Clínico Fase IV pode ser subdividido em vários

tipos: 1) estudos para avaliar a incidência de efeitos adversos; 2) estudos para explorar um efeito

farmacológico específico ou para obter informações de natureza circunscrita; 3) grandes ensaios

clínicos de longa duração, realizados para determinar o impacto da droga na morbidade e mortalidade;

4) ensaios semelhantes aos da fase III para suplementar dados sobre aspectos não pesquisados

anteriormente, por ter sido a droga liberada para a comercialização precocemente; 5) estudos de

farmacoeconomia; 6) ensaios para avaliar novas indicações para uma droga já disponível no mercado;

7) ensaios para avaliar a droga em populações não adequadamente estudadas na fase pré-

comercialização (FOOD AND DRUG ADMINISTRATION, 1997; GRAHAME-SMITH;

ARONSON, 2002; SGRECCIA, 1996). A população para esses estudos não é mais selecionada, é

pouco homogênea e inclui doentes raramente recrutados durante as fases I, II ou III, como, pacientes

que recebem associações terapêuticas e idosos (HULLEY et al., 2003).

A obtenção de resultados fidedignos e conclusivos nos estudos de fases I, II e III, está na

dependência de um planejamento adequado dos ensaios clínicos, através de um delineamento

experimental correto (COHEN; POSNER, 2000). Portanto, é fundamental a cautelosa elaboração do

protocolo clínico da pesquisa, especificando os objetivos, definindo a população de pacientes,

selecionando o tratamento controle, enfim, elaborando todos os passos do estudo (CRAMER, 1996).

1.1.3 Biodisponibilidade

De acordo com o FDA (2002) para um fármaco apresentar um efeito terapêutico, necessita

ser absorvido e está disponível na circulação sistêmica, a fim de atingir o seu local de ação. Desse

modo, biodisponibilidade poderia ser definida como extensão e a velocidade com a quais um fármaco

é liberado de uma forma farmacêutica para a circulação geral.

Podemos ainda classificar a biodisponibilidade em absoluta e relativa.

Biodisponibilidade absoluta (F): é a fração da droga (fármaco) sistematicamente absorvida

e a disponibilidade da droga da forma farmacêutica quando comparada com a biodisponibilidade da

droga após administração intravenosa. É usualmente calculada com a razão da área sobre a curva da

concentração plasmática versus tempo, para a forma farmacêutica administrada oralmente (ASC

oral

)

em relação à ASC obtida após administração intravenosa da droga (ASC

intravenosa

). Um valor F de 0,80

ou 80% indica que 80% da droga está biodisponível.

As regulamentações da FDA estabelecem que duas formulações que apresentam taxa e

extensão de absorção variando de ± 20% são geralmente considerados bioequivalentes. O uso do

intervalo de –20% a +25% é baseado numa decisão médica que, para a maioria dos medicamentos,

essa diferença na concentração do ingrediente ativo no sangue não será clinicamente significante

(FDA, 1997). Um medicamento é considerado bioequivalente quando a taxa e a extensão da absorção

verificadas através dos valores de C

max

e ASC, respectivamente, encontram-se dentro de um intervalo

de 80 a 125% considerando um intervalo de confiança de 90% proposto pelo FDA e Anvisa (BRASIL,

2003b).

Biodisponibilidade relativa: disponibilidade sistêmica da droga a partir de sua forma

farmacêutica quando comparada a uma outra formulação de referência. Os dados mais freqüentemente

obtidos nos estudos de biodisponibilidade de um fármaco, seja ela absoluta ou relativa, são: a

concentração plasmática máxima alcançada (C

max

), tempo necessário para atingir o pico da

concentração plasmática (T

max

), área sob a curva de concentração plasmática versus tempo (ASC),

constante de eliminação da fase terminal (Ke), e meia-vida de eliminação (t

1/2

). Além disso, podemos

estudar o comportamento dessas variáveis frente a fatores que possam influenciar a absorção de um

fármaco (ex. alimentos, doença, etc) (SPILKER, 1991).

Uma importante aplicação desses conceitos são os estudos de biodisponibilidade

comparativa (bioequivalência) que têm sido usados como ferramenta no controle de qualidade dos

medicamentos (MORAES; MORAES, 2000). Os estudos de biodisponibilidade comparativa, em geral,

são classificados como ensaios clínicos de fase IV, visto que os medicamentos sob investigação já se

encontram disponíveis no mercado.

De acordo com a agencia Nacional de Vigilância Sanitária, dois medicamentos são ditos

bioequivalentes quando são administrados na mesma dose molar, nas mesmas condições

experimentais e não apresentam diferenças estatisticamente significativas em relação às suas

biodisponibilidades, segundo a Resolução RDC nº 135, de 29 de maio de 2003 (BRASIL, 2003a). De

acordo com o Food and Drug Administration (FDA), produtos farmacêuticos são considerados

equivalentes terapêuticos somente se eles são equivalentes farmacêuticos e se deles pode-se esperar

obter o mesmo efeito clínico e perfil de segurança quando administrado para pacientes sob condições

específicas (FDA, 1997).

Os estudos de biodisponibilidade comparativa podem ser estudos cruzados ou em algumas

situações especiais, em paralelo. Durante a realização do estudo cruzado, os voluntários recebem as

formulações teste e referência aleatoriamente em dois períodos distintos, utilizando-se geralmente uma

população pequena de voluntários adultos e saudáveis, composta de 24 a 36 voluntários (BENETT,

1999).

A utilização de voluntários saudáveis é baseada no fato de que diversas patologias podem

alterar a biodisponibilidade dos fármacos e assim permitir interpretações inadequadas acerca de suas

características farmacocinéticas. Para evitar essas variáveis os voluntários são submetidos a avaliações

clínicas e laboratoriais, a fim de confirmar o seu estado de higidez.

Em estudos de biodisponibilidade são administradas doses únicas dos medicamentos teste

e referência em períodos diferentes, havendo entre eles, um intervalo adequado para garantir que não

haja efeitos residuais, que influenciaria artificialmente os resultados (HOWARD et al., 2000). As

amostras sanguíneas são coletadas para posterior quantificação, antes e após a administração de cada

formulação, e em intervalos pré-estabelecidos para obtenção dos perfis farmacocinéticos necessários

para se determinar a bioequivalência. Estudos farmacocinéticos têm demonstrado que o cronograma

de coletas das amostras sanguíneas deverá contemplar um tempo igual ou superior a 3 a 5 vezes

meias-vidas de eliminação do fármaco ou metabólito ativo (BRASIL, 2003b).

Medidas da área sob a curva de concentração plasmática (ASC) versus tempo e o pico de

concentração plasmática (C

max

) são avaliados empregando-se procedimentos estatísticos (BENETT,

1999). O método mais comumente empregado é o método trapezoidal. Essa curva pode ser descrita

por uma série de trapézios que são determinados a cada ponto concentração versus tempo. A área

representada pelos trapézios se aproxima da área sob a curva quanto maior o número de pontos

coletados maior vai ser esta aproximação. (GIBALDI, 1991).

O projeto de pesquisa, com o protocolo experimental e o termo de consentimento devem

ser submetidos a um Comitê de Ética em Pesquisa. Assim como outros estudos clínicos, os estudos de

biodisponibilidade deverão ser conduzidos de acordo com a Declaração de Helsinque (1964) e as

revisões de Tóquio (1975), Veneza (1983), Hong Kong (1989), África do Sul (1996) e Edimburgo

(2000) e a Resolução 196/96 e complementares do Conselho Nacional de Saúde/Ministério da Saúde-

CNS-MS.

Após 15 anos dos primeiros estudos de biodisponibilidade, pode-se observar um grande

avanço nessa área, uma vez que se trabalhava com estrutura precária e com enorme ceticismo da

comunidade científica. Atualmente o Brasil conta com tecnologia de ponta, estrutura física adequada e

corpo científico qualificado, o que contribui para a credibilidade que agora faz jus a esta nova área de

pesquisa, a Farmacologia Clínica.

1.2 Glândula tireóide

1.2.1 Anatomia e fisiologia

A glândula tireóide é um órgão bilobulado, situado imediatamente abaixo da laringe, à

frente da traquéia, que pesa cerca de 10 a 20 gramas. No sexo feminino, essa glândula, geralmente

aumenta na segunda metade do ciclo menstrual, durante a gravidez e lactação. Com relação ao seu

peso, a tireóide recebe uma grande quantidade de suprimento sangüíneo, em torno de 4 a 6 mL/min As

células tireóideas, secretoras de hormônio, estão dispostas em muitos milhares de unidades funcionais,

chamadas de folículos tireóideos. Em cada folículo, as células epiteliais circundam um lúmen, cheio

por colóide, consistindo de glicoproteína iodada, a tireoglobulina (TG), a precursora dos hormônios T3

e T4. (DAVIES; BLAKELEY; KIDD, 2002).

Durante a gravidez ocorre um aumento na produção hepática da TBG (globulina ligante

da tiroxina) pela ação estrogênica, conseqüentemente acontece uma diminuição da fração livre dos

hormônios tireoidianos, em torno de 10 a 15 %. Isso resulta em uma diminuição da retroalimentação

negativa e a posterior ativação do eixo hipotálamo-hipofisário que se traduz pelo aumento de TSH

circulante, este TSH além de estimular a síntese hormonal, tem uma ação trófica, contribuindo para o

aumento do volume da tireóide (PEREIRAS, 2003).

As células C parafoliculares, também situadas na tireóide, são responsáveis pela secreção

de tirocalcitonina, hormônio regulador do cálcio. Estas células ficam adjacentes às células epiteliais

foliculares, dentro da membrana basal folicular, representando cerca de 10% da massa total da

glândula (DAVIES; BLAKELEY; KIDD, 2002).

1.2.2 Hormônios tireoidianos

Os dois hormônios tireoidianos ativos são a liotironina ou triiodotironina (T3) e a

tetraiodotironina ou tiroxina ou levotiroxina (T4). As estruturas do T3 e do T4 diferem somente por

um único átomo de Iodo.

Figura 1-Estruturas químicas da Tiroxina (A1) e Liotironina (A2).

Para a produção da quantidade normal de tiroxina e de liotironina, deve ser ingeridos

cerca de 50 mg de iodo por ano, ou seja, aproximadamente um mg por semana. Como maneira de se

evitar a deficiência de iodo, o sal de cozinha (cloreto de sódio) é iodetado com uma parte de iodeto de

sódio para cada 100.000 partes de cloreto de sódio (BERNE et al., 2004.).

A primeira etapa na síntese dos hormônios tireoidianos é a transferência de iodeto do

sangue para as células glandulares da tireóide, e, em seguida para o folículo. A membrana basal das

células da tireóide tem a capacidade específica de transportar o iodeto ativamente para o interior da

célula; este processo é denominado bomba de iodeto ou seqüestro de iodo (GUYTON, 1998).

De acordo com Berne et al. (2004) o iodo ingerido na dieta atinge a circulação sistêmica

sob a forma de iodeto (I

), sob circunstâncias normais, sua concentração sangüínea é muito baixa, em

torno de 0,2 a 0,4 μg/dL. Posteriormente no interior da glândula tireóide o iodeto passa por um

processo de oxidação e se transforma em iodo orgânico (I

), estando desta forma apto a se complexar

com a tirosina. Essa oxidação do iodeto é promovida pela peroxidase tireoidiana, que utiliza como

peroxidante o peróxido de hidrogênio (H

) (TAUROG, 1991).

As células da tireóide são típicas células glandulares secretoras de proteínas. O retículo

endoplasmático e o complexo de Golgi sintetizam e secretam para os folículos uma molécula

glicoprotéica com peso molecular de aproximadamente 660 kD, denominada tireoglobulina, que

contém 70 aminoácidos tirosina, que são os principais substratos que se combinam ao iodo para

formar os hormônios da tireóide (LARSEN; DAVIES; HAY, 1998).

Mesmo na forma molecular, o iodo oxidado se liga diretamente, ainda que de modo lento,

ao aminoácido tirosina, mas nas células da tireóide, o iodo oxidado está associado a uma enzima, a

iodase que faz o processo ocorrer em segundos ou minutos. Como conseqüência, quase tão

rapidamente quanto a molécula de tireoglobulina é liberada pelo aparelho de Golgi ou é secretada no

folículo através da membrana apical das células, o iodo se liga a cerca de um sexto dos resíduos de

tirosina presentes na molécula de tireoglobulina A iodetação da tirosina, ou seja, a combinação do I

com as tirosinas da tireoglobulina, é responsável direta pela formação dos dois hormônios importantes

da tireóide, a tiroxina e a liotironina. A tirosina é inicialmente iodetada formando a monoiodotirosina

(MIT), e, em seguida, a diiodotirosina (DIT). Depois, durante os próximos minutos, horas e dias, mais

e mais resíduos de DIT se ligam entre si, formando o T4. Em uma outra reação, uma molécula de DIT

se combina com uma molécula de MIT, formando o T3. A primeira reação é muito mais rápida, e

como resultado forma 10 vezes mais T4 do que T3. Após ocorrerem as reações de acoplamento, a

tireoglobulina contém T3, T4 e excessos de MIT e DIT. Essa tireoglobulina iodada é armazenada na

luz folicular como colóide até que a tireóide seja estimulada a secretar os seus hormônios

(CONSTANZO, 2004).

As três principais iodotirosinas são:

- 3,5,3’,5’ – tetraiodotironina (Tiroxina ou levotiroxina, T4)

- 3, 5,3’ – triiodotironina/liotironina (T3)

- 3,3’, 5’ – triiodotironina/liotironina (T3 reversa, rT3).

Concluída a síntese dos hormônios da tireóide, cada molécula de TG contém cerca de

uma a três moléculas de T4 e, em média, uma molécula de T3 para cada 14 moléculas de T4. A

quantidade total de hormônios tireoidianos armazenada é suficiente para suprir o corpo de sua

necessidade normal por dois a três meses. Por isso, quando a síntese de hormônios cessa

completamente, os efeitos da deficiência só serão observados depois de alguns meses (GUYTON,

1998).

Embora o principal produto de secreção da tireóide seja o T4, este não é a forma mais

ativa. A ativação do T4 ocorre nos tecidos-alvo pela enzima iodotironina 5´-desiodinase, que existe

sob a forma de três isoenzimas distintas expressas e reguladas de diferentes formas no tecido

periférico. A 5’desiodinase do tipo I (5’D-I) é encontrada no fígado, rim e tireóide e gera o T3

circulante que é utilizado pela maioria dos tecidos-alvo periféricos. A 5’desiodinase do tipo II (5’D-II)

tem distribuição restrita ao cérebro e à hipófise. A 5’ desiodinase do tipo III (5’D-III) pode proteger o

cérebro e o feto contra os excessos de T3, pela conversão de T4 em rT3 e T3 em T2, podendo ser a

enzima mais importante para a produção de rT3 (BERNE et al., 2004.).

A desiodação da MIT e da DIT ocorre dentro da célula folicular por meio de uma

desiodase. O iodeto gerado nessa etapa é reciclado para dentro do pool intracelular e adicionado ao I

transportado pela bomba. As moléculas de tirosina são incorporadas na síntese de nova tireoglobulina,

começando um novo ciclo. A TG propriamente dita não é liberada no sangue circulante; em vez disso,

o T3 e o T4 são, primeiramente, clivadas da molécula de tireoglobulina, sendo, então, liberados na

circulação sitêmica (LARSEN; DAVIES; HAY, 1998).

Ao atingir a circulação sistêmica, toda a tiroxina e a liotironina, exceto por uma fração de

1%, associam-se de imediato e fortemente, porém de maneira não-covalente, a várias proteínas

plasmáticas. De acordo com Davies, Blakeley e Kidd (2002) existem três proteínas fixadoras do

hormônio tireóideo, todas sintetizadas pelo fígado:

- A globulina ligante de tiroxina (TBG) que é a responsável pelo transporte de 75% das T3 e T4 totais.

Essa proteína é a principal transportadora dos hormônios tireoidianos, é uma glicoproteína ácida com

massa molecular de aproximadamente 63 kDa e se liga a uma molécula de tiroxina com elevadíssima

afinidade.

- A albumina que se liga à cerca de 25% de T3 e 10% de T4, entretanto estando presente em

concentrações muito maior que esta tem uma afinidade relativamente baixa pelos hormônios

tireoidianos.

- A pré-albumina ligante de tiroxina (TBPA). Embora sua concentração seja mais de 16 vezes maior

que a da TBG, possui fraca afinidade por T4, transportando apenas 15% da mesma, e nenhuma

quantidade significativa de T3.

Segundo Mendel (1989) o hormônio livre é aquele não fixado, o qual exerce atividade

metabólica. Com relação aos hormônios tireoidianos, a fração livre corresponde a um pequeno

percentual (cerca de 0,03% de T4 e de 0,3% de T3) do hormônio total no plasma, sendo essa ligação

dos hormônios tireoidianos às proteínas plasmáticas a grande responsável pela proteção destes

hormônios frente ao metabolismo e à excreção, resultando em longas meias-vidas.

Tendo em vista o alto grau de ligação dos hormônios tireoidianos às proteínas plasmáticas,

quaisquer alterações nas concentrações dessas proteínas ou na afinidade de ligação teriam importantes

efeitos sobre os níveis hormonais séricos. A tiroxina é lentamente eliminada do organismo e tem uma

meia-vida de 6 a 7 dias em indivíduos eutireoidianos, enquanto nos hipertireoidianos é reduzida para 3

a 4 dias e nos hipotireoidianos, pode alcançar 9 a 10 dias. A liotironina, que tem menor afinidade

protéica pela TBG, tem uma meia-vida de aproximadamente um dia (GOODMAN; GILMAN, 2003).

O metabolismo das moléculas livres depende da monodesiodação enzimática progressiva,

realizada, em grande parte, mas, não exclusivamente, no fígado e nos rins. O T3 e o T4 são

conjugados aos ácidos glicurônico e sulfúrico por meio do grupamento hidroxil fenólico e são

excretadas na bile. Uma fração diminuta na bile é clivada pelas bactérias intestinais, para formar T3 e

T4, que são reabsorvidas, para recircularem, no chamado “ciclo êntero-hepático”. Nos seres humanos

cerca de 20% da tiroxina são eliminados nas fezes (DAVIES; BLAKELEY; KIDD, 2002).

Conforme Larsen, Davies e Hay (1998) para que seja mantida no organismo uma atividade

metabólica normal, deve ser secretada com exatidão e constância, uma quantidade adequada de

hormônio da tireóide e para que isso ocorra, mecanismos específicos de feedback operam por meio do

eixo hipotálamo-hipofisário controlando a secreção da tireóide.O hormônio liberador de tireotropina

(TRH) é secretado pelo hipotálamo e atua nas células tireotróficas da hipófise anterior, provocando a

secreção do hormônio estimulante da tireóide (TSH). A seguir, o TSH atua na tireóide, estimulando a

síntese e a secreção dos hormônios tireoidianos, estes, porém, inibem a secreção de TSH. Os

hormônios tireoidianos inibem a secreção de TSH através da dessensibilização dos receptores de TRH

nas células tireotróficas, dessa forma minimizam a sua sensibilidade ao estímulo pelo TRH. Esse

feedback negativo é mediado principalmente, pelo T3 livre, tendo em vista a existência no lobo

anterior da hipófise de uma desiodinase (5’ D-II) que converte T4 em T3 que o contém

(CONSTANZO, 2004).

Figura 2 – Efeito de feedback negativo dos hormônios tireoidianos

Segundo Goodman e Gilman (2003) o TSH é um hormônio glicoprotéico de peso

molecular de aproximadamente 28.000, que é secretado de forma pulsátil conforme um padrão

circadiano, pelo lobo anterior da hipófise em resposta a um estímulo do TRH, atingindo maiores níveis

na circulação durante a noite. O papel do TSH é regular o crescimento da glândula tireóide, efeito

trófico, e a secreção dos hormônios tireoidianos, pela influência nas seguintes etapas da via de

biossíntese: aumenta a proteólise da tireoglobulina nos folículos, com conseqüente liberação do

hormônio da tireóide para o sangue circulante; promove uma maior atividade da bomba de iodeto, o

que facilita um acréscimo na intensidade do seqüestro de iodeto nas células glandulares; facilita uma

maior iodetação da tirosina e maior ligação entre as moléculas de tirosina para a formação dos

hormônios da tireóide; intensifica o aumento do tamanho (hiperplasia), do número de células

(hipertrofia) e da atividade secretora da tireóide; e promove uma intensificação da irrigação vascular

da glândula tireóide.

O efeito geral do hormônio da tireóide é o de causar a transcrição nuclear de grande

número de genes. Conseqüentemente em todas as células do organismo ocorre um incremento na

produção de enzimas protéicas, proteínas estruturais, proteínas transportadoras e outras substâncias. O

resultado final deste processo todo é um aumento generalizado da atividade funcional em todo o corpo

(GUYTON, 1998).

Os hormônios tireoidianos são imprescindíveis para o desenvolvimento cerebral e para o

crescimento, atuam sinergicamente com o hormônio de crescimento e com as somatomedinas,

promovendo a formação dos ossos. Atuam ainda, estimulando quase todos os aspectos do

metabolismo lipídico, dos carboidratos, incluindo a rápida captação da glicose pelas células, aumento

da glicólise, aumento da gliconeogênese, maior absorção pelo tubo gastrintestinal e até mesmo da

secreção de insulina (LARSEN; DAVIES; HAY, 1998).

A levotiroxina e a liotironia aumentam tanto a síntese quanto a degradação das proteínas,

porém seu efeito global é catabólico, o que resulta em massa muscular diminuída Como o hormônio

da tireóide aumenta o metabolismo de quase todas as células corporais, quantidades excessivas desse

hormônio podem ocasionalmente aumentar o metabolismo basal de 60 até 100% acima do normal. Por

outro lado, quando não é produzido nenhum hormônio da tireóide, o metabolismo basal cai

praticamente à metade do normal (CONSTANZO, 2004).

Um dos efeitos mais significativos e pronunciados dos hormônios tireoidianos é o aumento

do consumo de oxigênio e um aumento resultante da taxa de metabolismo basal e da temperatura

corpórea. Um grande aumento da produção do hormônio da tireóide quase sempre diminui o peso

corporal, e grande redução da produção do hormônio quase sempre aumenta o peso corporal; contudo,

esses efeitos nem sempre ocorrem, pois, o hormônio da tireóide aumenta o apetite e isso pode

contrabalançar a alteração do metabolismo (BERNE et al., 2004).

O aumento do metabolismo tecidual implica em uma maior utilização de oxigênio e

conseqüentemente uma maior produção de metabólitos. Esses efeitos provocam uma vasodilatação na

maioria dos tecidos, em especial na pele, devido à necessidade de eliminação de calor. Em virtude

dessa vasodilatação, ocorre o aumento do fluxo sangüíneo, e conseqüentemente do débito cardíaco.

Em casos de hipertireoidismo, o aumento do débito cardíaco pode atingir até 60% do valor normal, em

contrapartida, pode sofrer um decréscimo de 50% em casos de hipotireoidismo grave. O débito

cardíaco aumentado é decorrente também da maior síntese de receptores β

-adrenérgicos cardíacos,

logo que, os hormônios tireoidianos induzem a produção desses receptores, e em ações

complementares, induzem a síntese da miosina cardíaca e da Ca

ATPase no retículo

sarcoplasmático (CONSTANZO, 2004).

Com o aumento do metabolismo, faz-se necessário um maior consumo de oxigênio e

conseqüentemente uma maior liberação de dióxido de carbono, mecanismos tais responsáveis por

taquipnéia e por acréscimo na amplitude dos movimentos respiratórios. Os hormônios tireoidianos são

responsáveis pelo aumento do apetite, da ingestão de alimentos, da secreção dos sucos digestivos,

juntamente com a motilidade do tubo gastrintestinal; muitas vezes quando em excesso ocorre diarréia,

e nos casos de diminuição causam constipação (GUYTON, 1998).

Geralmente, os hormônios da tireóide aumentam a atividade cerebral; a falta destes

lentificam essa função. O indivíduo hipertireoidiano pode apresentar um quadro de nervosismo

extremo, psiconeuroses (ansiedade, preocupação extrema) e até mesmo distúrbios paranóides. Em

decorrência da exaustão muscular e das ações excitantes sobre o SNC, o paciente com

hipertireoidismo refere uma constante sensação de cansaço, todavia, em virtude da excitação sobre as

sinapses, torna-se difícil conciliar o sono. Por outro lado, a sonolência intensa é um dos sinais

clássicos do hipotireoidismo, de forma que um indivíduo hipotireoidiano consegue dormir até 14 horas

por dia (DAVIES; BLAKELEY; KIDD, 2002).

1.3 Doenças da tireóide

O excesso, ou a deficiência, de hormônio tireóideo é designado, respectivamente de hiper

ou hipotreoidismo. Como causas podem apresentar disfunção da própria glândula tireóide (primária),

ou distúrbios do eixo hipotálamo-hipófise-tireóide (secundária) (DAVIES; BLAKELEY; KIDD,

2002).

1.3.1 Hipertireoidismo

A tireotoxicose é uma afecção causada pela elevação das concentrações de hormônios

tireoidianos livres circulantes. Os termos tireotoxicose e hipertireoidismo não são sinônimos. O

hipertireoidismo, definido como uma hiperfunção da glândula tireóide, causa tireotoxicose devido a

um aumento da biossíntese e da liberação dos hormônios (PIMENTEL; HANSEN, 2004).

Aumento do nível dos hormônios tireoidianos podem ocorrer mesmo quando a função da

glândula tireóide está normal, exemplos: liberação excessiva dos hormônios devido a um processo

inflamatório da glândula tireóide, ingestão excessiva do hormônio tireóideo exógeno e produção deste

por um foco ectópico (GILKISON, 1997).

De acordo com Guyton (1998) a glândula tireóide encontra-se aumentada de duas a três

vezes do seu tamanho normal na maioria dos pacientes com hipertireoidismo. Além disso, as células

aumentam em número e em intensidade de secreção. Estudos com iodo radioativo indicam que essas

glândulas hiperplásicas secretam os hormônios tireoidianos com uma velocidade de 5 até 15 vezes

superior ao valor normal. A atividade aumentada da tireóide causa o seu crescimento, conhecido com

bócio. O termo bócio designa uma glândula tireóide aumentada, podendo ocasionar uma compressão

do esôfago e acarretar dificuldades na deglutição.

Segundo

Larsen, Davies e Hay (1998) a forma mais comum do hipertireoidismo é a

doença de Graves, que é um distúrbio auto-imune caracterizado por níveis circulantes aumentados de

imunoglobulinas estimulantes da tireóide. Essas imunoglobulinas são anticorpos contra os receptores

de TSH nas células foliculares. Quando presentes essas imunoglobulinas estimulam de uma forma

intensa a tireóide, resultando em uma secreção aumentada dos hormônios e uma hipertrofia.

Outras causas de hipertireoidismo são neoplasias da tireóide, excessiva produção de TRH

ou TSH, bócio tóxico, tireotoxicose ou administração de excessivas quantidades de hormônios

tireoidianos exógenos (CONSTANZO, 2004).

Os sintomas do hipertireoidismo são: intolerância ao calor, exacerbação da sudorese

secundária à excessiva produção de calor, perda de peso acompanhada de ingesta alimentar acentuada,

graus variáveis de diarréia, alto grau de excitabilidade, fraqueza e tremor musculares, taquicardia,

respiração ofegante ao esforço, nervosismo e outros distúrbios psíquicos, fadiga extrema acompanhada

da incapacidade de conciliar o sono, exoftalmia (protusão dos globos oculares) (LARSEN; DAVIES;

HAY,1998).

A hiperatividade da glândula tireóide e conseqüentemente os efeitos exacerbados de seus

hormônios podem ser reduzidos através de agentes que agem interferirindo na produção dos

hormônios tireoidianos ou modificando a resposta dos tecidos a estes hormônios ou ainda, destruindo

a glândula por irradiação ou ressecção cirúrgica (KATZUNG, 2003).

1.3.2 Hipotireoidismo

O hipotireoidismo é um quadro que se caracteriza por uma diminuição dos hormônios

tireoidianos circulantes. O estado de hipotireoidismo pode ser decorrente de uma disfunção da própria

glândula tireóide, conhecido o como hipotireoidismo primário, ou de disfunções do eixo hipotálamo-

hipófise-tireóide, hipotireoidismo secundário (DAVIES, 2002).

A causa mais comum do hipotireoidismo é a tireoidite de Hashimoto, que consiste em uma

doença auto-imune da tireóide, na qual os anticorpos podem manifestar-se através da destruição da

própria glândula ou bloqueando a síntese hormonal (CONSTANZO, 2004). Essa patologia afeta

aproximadamente 10 vezes mais mulheres do que os homens, também é mais comum em mulheres

mais velhas do que mulheres mais jovens. Como outras causas de hipotireoidismo podemos citar:

hipotireoidismo congênito, hipotireoidismo resultante de um tumor hipofisário ou craniofaringioma ou

outras lesões raras que destroem a função pituitária (DOLLERY, 1999).

Segundo Roberts e Ladenson (2004), os sintomas do hipotireoidismo são opostos aos do

hipertireoidismo e incluem, diminuição da taxa metabólica, intolerância ao frio, bradicardia, letargia,

sonolênia , alopécia, aumento de peso, constipação, disfunção menstrual (amenorréia), depressão,

psicoses, tonturas, dentre outros.

O coma por Mixedema (hipotreoidismo grave) é raro, mas é uma condição freqüentemente

fatal, que ocorre com resultado de um hipotireoidismo não tratado por muito tempo a condição é

facilmente confundida com a hipotermia per se. O tratamento é principalmente de manutenção da

respiração e circulação adequadas e aquecimento gradual. O tratamento com esteróides é usualmente

recomendado por causa do enfraquecimento adrenal da infância. A escolha da terapia de reposição

hormonal é empírica. A levotiroxina sódica em 200-500 µg via intravenosa tem sido recomendada

para o tratamento inicial, entretanto a liotironina tem se mostrado eficaz (NEWMARK;

HIMATHONGKAM; SHANE, 1974).

O tratamento de escolha para o hipotireoidismo é a levotiroxina sódica, que possui

propriedades farmacocinéticas convenientes e quando administrada na dose adequada demonstra um

alto grau de eficácia terapêutica e discretos riscos a desencadear efeitos adversos.

1.4 Levotiroxina

A tiroxina foi inicialmente isolada na forma cristalina por Kendall em 1915, e em 1927 foi

sintetizada quimicamente por Harington e Barger. Harington também foi o responsável pelo

esclarecimento da sua estrutura química (KENDALL, 1915; HARINGTON; BARGER, 1927;

HARINGTON, 1926). A Levotiroxina sódica é um levo-isômero sintético do hormônio tiroxina

endógena (T4) amplamente utilizada na terapia de reposição tireoidiana hormonal. Este composto

sintético é idêntico ao produzido pela glândula tireóide, deste modo não existem entre eles diferenças

bioquímicas nem funcionais (FDA, 2000).

1.4.1 Química

Levotiroxina sódica (C

NNaO

O) é um sal inodoro, possui uma coloração de

branca a amarelo queimado claro, insípido, higroscópico, amorfo ou pó cristalino. Pode desenvolver

resíduo de coloração rósea quando exposto à luz; é produzida por síntese química (Figura 3) e é

solúvel em soluções alcalinas (DOLLERY, 1999).

3. Figura 3-Estrutura química da Levotiroxina

1.4.2 Farmacologia

Doses médias de 100 a 200 µg diárias geralmente são suficientes para manter um estado

eutireóideo ao tratar pacientes com hipotireoidismo. A dose necessária deve ser suficiente para

conferir ao paciente um estado eutireóideo e para restaurar os níveis circulantes do hormônio

estimulante da tireóide (TSH) para o nível normal. Raramente os pacientes podem necessitar de 300

µg diárias, mas a dose mais comum de reposição é de 150 µg diárias de levotiroxina sódica

(DOLLERY,1999).

Mesmo com o aparecimento de preparações sintéticas da levotiroxina na década de 50 e

com o desenvolvimento de métodos de detecção de TSH altamente sensíveis, a manutenção do estado

eutireóideo enfrenta vários obstáculos, tais como: taxas de absorção que variam de acordo com as

preparações, interferências com outras medicações e com dietas ricas em fibras, presença de

anticorpos contra hormônios tireoidianos, divergências entre a quantidade de ingrediente ativo

especificado e o total realmente presente na apresentação farmacêutica (OPPENHEIMER apud

PERAN et al., 2005; TOFT, 1994; LIEL; HARMAN-BOEHM; SHANY, 1996; SAKATA;

NAKAMURA; MIURA; 1985; STOFFER; SZPUNAR, 1984; SAWIN; SURKS, 1984; HENNESSEY

et al. 1986 apud PERAN, 2005; ESCALANTE; AREM; AREM, 1995).

A correção do estado hipotireóideo resulta no bem-estar físico e mental aumentado,

melhora a tolerância ao frio, alivia a constipação e aumenta débito cardíaco e a perfusão vascular

periférica. A taxa metabólica basal é aumentada e há redução do colesterol sérico e triglicérides com

aumento da utilização de carboidrato.

1.4.3 Farmacocinética

Segundo Dollery (1999) a levotiroxina é absorvida incompleta e variavelmente no trato

gastrintestinal, onde esta absorção oral pode variar de 40 a 75%. Tem uma meia-vida de

aproximadamente de 5 a 7 dias em indivíduos normais. É largamente ligada a proteína plasmática,

principalmente à globulina ligante de tiroxina (TBG), mas também à pré-albumina e menos

avidamente à albumina. A fração não-ligante ou livre, embora seja apenas aproximadamente 0,03% da

levotiroxina total, é obviamente a fração disponível para ação periférica e para conversão no

metabólito mais ativo, liotironina (T3). Alterações nos níveis de proteína sérica afetarão a

concentração de T4 total, mas não de T4 livre. Levotiroxina é parcialmente convertida em T3 e outros

metabólitos e conjugados com ácido glicurônico e ácido sulfúrico e são excretados na bile. Parte da

substância conjugada é hidrolisada no cólon e 20-40% da levotiroxina é excretada nas fezes. Parte da

levotiroxina livre assim como os metabólitos formados por substituição de iodo e conjugados são

excretados na urina. Acredita-se que a levotiroxina não atravessa a barreira placentária, exceto nas

primeiras semanas da gestação, antes da produção fetal de T4. A levotiroxina é secretada no leite

materno, mas não em quantidades suficientes para corrigir o hipotireoidismo no lactente (BODE;

VAMJONACK; CRAWFORD, 1978).

1.4.3.1 Método de detecção

Segundo Moffat, Osselton e Widdop (2004) os métodos analíticos convencionais como a

cromatografia líquida de alta eficiência e espectrometria de massa são citados na literatura como

metodologias utilizadas na quantificação de hormônios tireoidianos, embora não sejam perfeitamente

indicadas para a mensuração de moléculas terapêuticas em amostras de plasma ou de soro

provenientes de estudos pré-clínicos ou clínicos. A segura quantificação dessas moléculas para dar

suporte a estudos farmacocinéticos exige o desenvolvimento e a validação de imunoensaio adequado

(HORNINGER et al., 2005).

O desenvolvimento de radioimunoensaios e mais recentemente, de imunoensaios ligados à

enzima e de quimiolumionescência para hormônios tireoidianos melhorou muito o diagnóstico

laboratorial dos distúrbios tireoidianos (SURKS et al., 1990 apud GOODMAN; GILMAN, 2003) .

O método analítico usual para medida de T4 no soro ou no plasma é o radioimunoensaio,

que tem um limite de sensibilidade de 12nmol.L

-1

(nanomol por litro). Entretanto, outros métodos são

descritos na literatura, como imunoensaio de eletroquimioluminescência. O radioimunoensaio é um

dos métodos mais sensíveis para a análise antígeno-anticorpo, permitindo medidas rápidas e precisas;

mesmo em preparações não-purificadas, apresenta limiar de detecção na ordem de nanogramas (10

-9

)

ou picogramas (10

-12

), entretanto como limitações destacam-se o custo do teste, a vida média dos

reagentes e o risco operacional. O princípio do teste consiste em: a quantidade de reagente marcado

(antígeno ou anticorpo) quantifica o antígeno ou anticorpo não-marcado (FERREIRA, 1996).

Nos últimos anos tem se percebido o desenvolvimento e refinamento de muitos novos

princípios de imunoensaio. A maior tendência tem sido substituir ensaios de fase líquida com isótopos

por ensaios rápidos de fase sólida baseados em anticorpos monoclonais. Este desenvolvimento

direciona a um ensaio preciso, seguro, não-isotópico, automatizado com limite de detecção de

picomolar (10

-12

) e attomolar (10

-18

). O imunoensaio de eletroquimioluminescência é uma técnica que

permite alta sensibilidade, boa reprodutibilidade, e poucas interferências dos componentes da matrix

biológica (soro ou plasma) (HORNINGER et al., 2005).

O poder da técnica de imunoensaio consiste no fato de se utilizar anticorpos que conferem

alta especifidade e sensibilidade ao teste, devido a sua alta afinidade com o analito (T3, T4 e/ou TSH),

bem como do poder de quantificar precisamente concentrações muito baixas dos analitos (KUMALA

et al., 2002).

1.4.4 Metabolismo

A levotiroxina é amplamente metabolizada na tireóide, fígado, rins e glândula pituitária

anterior. Sendo excretada na urina e fezes, tanto como droga livre quanto conjugada e também, como,

metabólitos formados por substituição de iodo. Cerca de 30 a 55% da dose é excretada na urina e 20 a

40% nas fezes. A mais importante via metabólica é a eliminação de iodo para a formação do

metabólito ativo, a liotironina (T3), e para o seu enantiômero T3 reverso (rT3), que é metabolicamente

inativo.

Figura 4

- Metabolismo da Levotiroxina

1.4.5 Modo de uso

Todos os usos clínicos requerem que a levotiroxina sódica seja dada em uma dosagem

suficiente para manter o paciente em um estado de eutireoidismo. A dose ideal de levotiroxina para

pacientes hipotireóideos se relaciona com o peso corporal (em torno de 1,8 μg/kg em pacientes

adultos) e com a idade, visto que a dose requerida para crianças e jovens é maior do que para idosos

(0,5 μg/kg por dia) (SAWIN et al., 1989 apud ROBERTS, 2004).

Em pacientes adultos, sem problemas cardíacos, o tratamento oral é iniciado com uma

dose de 50μg diárias, e aumentada em duas semanas para intervalos de 100μg a 150μg diariamente.

De acordo com o bem-estar e a função tireoidiana do paciente os testes são repetidos após 6 a 8

semanas. A dosagem diária pode exigir uma alteração para uma concentração menor, mantendo a

segurança clínica e o eutireoidismo bioquímico (EVERED; YOUNG; ORMSTON, 1973; PEARCH;

HIMSWORTH, 1984).

Em pacientes idosos, com insuficiência cardíaca, com angina e com insuficiência adrenal,

deve ser adotado um regime terapêutico mais cuidadoso, uma vez que esses pacientes podem

apresentar uma maior sensibilidade ao potencial tóxico da droga. Em caso de ocorrer uma exacerbação

de um quadro anginoso, a dose da levotiroxina sódica deve ser reduzida para a dosagem inicial e o

propranolol ou um agente similar (β-bloqueador) deve ser administrado (LARSEN; DAVIES; HAY,

1998).

Em pacientes que sofreram retirada da tireóide, devido a um câncer, e que usam

levotiroxina sódica é essencial que a dose seja suficiente para suprimir a produção de TSH ectópica,

que por sua vez poderia estimular o crescimento de tecidos tumorais residuais sensíveis a TSH

(LAMBERG; RANTANEN; SAARINEN, 1977).

1.4.6 Indicações e contra-indicações

A levotiroxina sódica é o tratamento de escolha na rotina clínica de pacientes

hipotireóideos. A terapia com hormônios tireoidianos tem sido indicada também para problemas não-

tireoidianos, incluindo obesidade, infertilidade, irregularidade menstrual, baixa estatutura e fadiga

crônica. Alguns psiquiatras reportam o benefício de adicionar estas medicações a terapia

antidepressiva (SINGER et al., 1995).

A liotironina (T3) pode ser usada no tratamento de câncer da tireóide associada a iodo

radioativo, entretanto deve ser utilizada por um período menor do que tratamentos com levotiroxina

(T4). Terapia crônica com liotironina em casos de hipotireoidismo não é recomendada, desde que seu

uso está associada com grandes índices de hipertireoidismo iatrogênico; alguns indivíduos ,

especialmente, os idosos, são bastante sensíveis aos efeitos deletérios do T3. Preparações de

hormônios tireoidianos sintéticas e biológicas contendo T3 e T4 não são atualmente recomendadas

para terapêutica, uma vez que, produzem flutuações e elevações nas concentrações de T3, entretanto

seu uso não é necessariamente contra-indicado (SINGER et al., 1995).

1.4.7 Reações adversas

Segundo Dollery (1999), nenhuma reação potencialmente fatal ocorre durante o tratamento

com doses normais no paciente com hipotireoidismo, por outro lado em indivíduos saudáveis poderá

ocorrer. Entretanto, em pacientes portadores de doença cardíaca tem sempre um risco de exacerbação

da angina ou disritmias ou infarto potencialmente fatal. A terapia de reposição inicial cuidadosa deve

ser recomendada particularmente nos idosos e/ou nos portadores de doença isquêmica cardíaca. As

manifestações de toxicidade como resultado dos excessos de levotiroxina são aqueles de tireotoxicose

e os graus variam dependendo da dose e da rapidez da ingestão.

O Hipertireoidismo iatrogênico devido a terapia de reposição com levotiroxina sódica não

é uma ocorrência rara, se o restabelecimento dos níveis normais hormonais é conseguido muito

rapidamente ou níveis excessivos são atingidos por uma dose muito alta, o paciente pode apresentar

osteoporose, taquicardia ou arritmia, diarréia, perda de peso, intolerância ao calor, insônia e agitação.

Todos esses sintomas desaparecem em 1 mês após a retirada da droga (HARVERY, 1973). Efeitos

adversos devido a reações idossincráticas aos comprimidos de levotiroxina são extremamente raros.

1.4.8 Interferência da levotiroxina nos testes clínico-patológicos

Muitos fatores podem alterar os níveis séricos de T

promovendo resultados mascarados.

O aumento da ligação a TBG durante a gravidez e com a terapia estrogênica irá aumentar os níveis de

totais, mas não o T

livre. A perda de proteína como resultado da síndrome nefrótica ou doença

hepática irá reduzir os níveis de T

mas não o T

livre. A ligação competitiva ao TBG por drogas como

a fenilbutazona e a fenitoína baixam os níveis de T4 normal, mas os níveis de TSH permanecem

normais (DOLLERY, 1999).

1.4.9 Interações medicamentosas

Levotiroxina, quando administrada a pacientes hipotireóideos que já estão em terapia com

anticoagulantes, potencializará o efeito do warfarin e de outro anticoagulante dicumarínico,

necessitando de uma marcante redução (50%) na dose de warfarin para prevenir um excessivo

prolongamento do tempo de protrombina e no tempo parcial de tromboplastina (COSTIGAN;

FREEDMAN; EHLICH, 1984). O mecanismo de ação é incerto, mas pode ser devido ao aumento do

catabolismo, redução dos fatores plaquetários ou redução dos lipídios séricos, dessa forma diminuindo

a quantidade de vitamina K disponível para o fígado.

A colestiramina pode diminuir absorção de levotiroxina (NORTHCUTT; STIEL; STANG,

1969).A fenilbutazona pode causar uma falsa diminuição no nível sérico de T4 total através da

competição com os sítios de ligação do TBG (mas T4 livre e TSH permanecem normais). A

carbamazepina e a fenitoína também podem interferir com proteína de ligação do T4 e causar uma

falsa diminuição nos níveis séricos de T4 total. Fenitoína também pode diminuir o nível de T4 livre

através do aumento do clearance (YEO et al.; BATES; HOWE et al., 1978). A amiodarona é

amplamente utilizada em arritmias cardíacas e comumente produz aumento no nível de T4, mas o

nível de liotironina geralmente está normal, já que a droga interfere na conversão do T4 em T3. T3

sérico e níveis de TSH ao invés de T4 devem ser usados para monitorar o estado do paciente tireóideo

(BURGER et al. apud DOLLERY, 1999; MELMED et al. apud DOLLERY, 1999).

O consumo de certos alimentos pode afetar a absorção da levotiroxina, deste modo implica

na necessidade do ajuste da dose. Farinha de semente de soja e de algodão, noz, dieta rica em fibras,

diminuem a absorção da levotiroxina sódica pelo trato gastrointestinal (FDA, 2000b).

2 JUSTIFICATIVA

A levotiroxina sódica é uma droga com estreita janela terapêutica, ou seja, é

imprescindível uma determinação de posologia adequada para se evitar o surgimento de manifestações

tóxicas ou de uma resposta terapêutica sub-ótima (FDA, 2000 ). Por causa dos riscos associados a um

over ou sub tratamento com levotiroxina sódica, é de fundamental importância que as drogas que

contenham esse princípio ativo tenham os parâmetros farmacocinéticos avaliados, possibilitando a

determinação da biodisponibilidade e indiretamente da eficácia terapêutica.

3 OBJETIVOS

3.1 Objetivo geral

Determinar e comparar a biodisponibilidade de duas formulações de 150

μg de levotiroxina

sódica em indivíduos sadios.

3.2 Objetivos específicos

Identificar possíveis efeitos adversos das duas formulações de 150 μg de levotiroxina

sódica em voluntários sadios.

Avaliar indiretamente a eficácia terapêutica da levotiroxina sódica através da mensuração

das concentrações séricas de TSH antes e após a administração de duas doses de 600 μg das duas

formulações de 150 μg de levotiroxina sódica em indivíduos sadios.

Validar a metodologia analítica usada para determinação das concentrações séricas da

levotiroxina e da liotironina avaliando precisão, exatidão, especificidade, sensibilidade e

reprodutibilidade.

Determinar os parâmetros farmacocinéticos da levotiroxina e da liotironina no soro de

voluntários sadios a partir das curvas de concentração sérica versus tempo.

4 MATERIAL E MÉTODOS

4.1 Protocolo clínico

4.1.1 Delineamento do estudo

A pesquisa consistiu de um estudo aberto, randomizado, cruzado, com dois tratamentos,

dois períodos (duas seqüências), nos quais os voluntários recebem, em cada período distinto, a

formulação teste de levotiroxina sódica do Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. ou a formulação

referência de levotiroxina sódica do Laboratório Sanofi-Synthelabo Ltda. (Puran®T4), havendo, por

conseguinte, dois braços de tratamento.

4.1.2 Seleção do voluntário

Um profissional de sáude da equipe da Unidade de Farmacologia Clínica (UNIFAC)

orientou previamente os voluntários no que diz respeito a todas as informações pertinentes ao estudo

de biodisponibilidade do fármaco estudado, neste caso específico à levotiroxina sódica. Esses

receberam explanação sobre a natureza e os objetivos do estudo, sendo enfatizado que o trabalho teria

a finalidade de pesquisa e que o voluntário não poderia esperar qualquer efeito terapêutico, foi

informado dos possíveis riscos e efeitos adversos . O voluntário também tinha conhecimento da sua

liberdade para se retirar a qualquer momento do estudo sem que isto lhe cause qualquer prejuízo no

seu atendimento junto a Unidade de Farmacologia Clínica ou ao Hospital Universitário Walter

Cantídio da Universidade Federal do Ceará. Foi solicitado a cada voluntário que, caso concordasse

com o protocolo de estudo, assine o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido para a participação

do estudo.

Foram selecionados 24 voluntários (12 homens e doze mulheres) após terem sido

submetidos a uma avaliação clínica completa, conduzida por um profissional médico, que incluiu a

realização de exames laboratoriais para avaliar as funções renal, hepática e hematológica, bem como

avaliação da função cardíaca através de um eletrocardiograma (ECG) e uma entrevista, que avaliou as

condições emocionais dos mesmos.

4.1.2.1 Exames Laboratoriais

Os exames laboratoriais foram analisados no Laboratório de Análises Clínicas Louis

Pasteur, sendo realizados nos períodos pré-estudo (seleção dos voluntários) e no pós-estudo (avaliação

após o último internamento):

a) Análise Hematológica: Hemoglobina, Hematócrito, Contagem Total e Diferencial de Leucócitos,

Contagem de Plaquetas e VHS (Volume de Hemossedimentação).

b) Análise Bioquímica: Creatinina, Bilirrubina Total, Proteína Total, Albumina, Glicose em jejum,

Fosfatase Alcalina, ALT (Alanina amino transferase), AST (Aspartato amino transferase), Colesterol

Total, Triglicérides, Ácido Úrico, Gama-GT, T3, T4 e TSH.

c) Sumário de Urina

d) Exames realizados somente no período pré-estudo: Parasitológico de Fezes; Análise Sorológica

para Hepatite B, Hepatite C, HIV (Síndrome da Imunodeficiência Adquirida-AIDS).

4.1.2.2 Critérios de Inclusão

Indivíduos de ambos os sexos, com idade variando de 18 a 50 anos, com uma distribuição

a mais homogênea possível, possuir um índice de massa corporal maior ou igual a 19 e menor ou

igual a 30. Apresentar uma boa condição física, apreciada pela ausência de antecedentes patológicos,

que por ventura tenham uma repercussão sobre o atual estado de saúde; ausência de anomalias clínicas

após exame físico completo e anomalias paraclínicas detectáveis, através dos exames laboratoriais e

eletrocardiograma (ECG). E, finalmente, ser capaz de compreender a natureza e objetivo do estudo,

inclusive os riscos e efeitos adversos e com intenção de cooperar com o pesquisador e agir de acordo

com os requerimentos de todo o ensaio, o que vem a ser confirmado mediante a assinatura do Termo

de Consentimento Livre e Esclarecido.

4.1.2.3 Critérios de Exclusão

Foram excluídos do estudo, os voluntários que se enquadram nos seguintes critérios:

a) Problemas relacionados com a droga

a) Apresentar uma história de hipersensibilidade a Levotiroxina sódica ou a compostos

quimicamente relacionados (tiroxina), bem como, história de reações adversas sérias ou

hipersensibilidade a qualquer droga;

b) Apresentar qualquer condição patológica, exemplo: disfunção reanal e/ou hepática, que

possa interferir na farmacocinética (absorção, distribuição, excreção ou metabolismo) ou

farmacodinâmica da levotiroxina;

c) Usar de terapia de manutenção com qualquer fármaco.

b) Doenças ou problemas de saúde

a) História de doença hepática, renal, pulmonar, gastrintestinal, epiléptica, hematológica ou

psiquiátrica; hipo ou hipertensão de qualquer etiologia que necessite de tratamento

farmacológico; infarto do miocárdio, angina e/ou insuficiência cardíaca;

b) Achados eletrocardiográficos não recomendados, a critério do investigador, para participação no

estudo;

c) Exames laboratoriais complementares fora dos valores considerados de referência, de acordo com

as normas deste protocolo, a menos que sejam considerados clinicamente irrelevantes pelo

investigador;

d) Apresentar qualquer um dos testes de função da tireóide (T3, T4 e THS) com valores fora da

faixa de referência;

e) Voluntária do sexo feminino com β-HCG positivo.

c) Hábitos e dependências

a) Fumar mais de 10 cigarros por dia;

b) Ingerir mais de 5 xícaras de café ou chá por dia;

c) História de abuso de álcool ou drogas;

d) Condições encontradas nos dias/meses que antecedem o estudo

a) Fez uso de medicação regular dentro das duas semanas que antecedem o início deste estudo

e/ou fez uso de qualquer medicação dentro de uma semana antes do início do tratamento deste

estudo.

b) Foi internado por qualquer motivo durante as oito semanas que antecedem o início do

primeiro período de tratamento deste estudo;

c) Fez tratamento dentro dos três meses prévios ao estudo com qualquer droga conhecida de ter

um potencial tóxico bem definido nos grandes órgãos;

d) Participou de qualquer estudo experimental ou ingeriu qualquer droga experimental dentro

dos três meses que antecedem o início deste estudo;

e) Doou ou perdeu 450 mL ou mais de sangue dentro dos três meses que antecedem o início deste

estudo ou que doou mais de 1500mL dentro dos 12 meses anteriores ao início do tratamento deste

estudo;

f) Ter qualquer condição que o impede de participar do estudo pelo julgamento do investigador.

4.1.2.4 Critérios para eliminação do voluntário do estudo

As seguintes condições foram consideradas como critérios de retirada do estudo: o

voluntário não desejava continuar no estudo, por razões outras que a ocorrência de eventos adversos

do fármaco teste, por exemplo, indisponibilidade ou intolerância aos procedimentos do estudo; reações

adversas do fármaco; testes laboratoriais anormais, julgados de relevância clínica; doença intercorrente

requerendo medicação.

4.1.3 Aspectos éticos

O projeto de pesquisa, o protocolo experimental e o termo de consentimento foram

submetidos ao Comitê de Ética em Pesquisa com Seres Humanos da Universidade Federal do Ceará,

credenciado pelo CONEP, Conselho Nacional de Ética em Pesquisa do Conselho Nacional de

Saúde/Ministério da Saúde – CNS/MS (ANEXO C).

O estudo foi conduzido de acordo com a Declaração de Helsinque (1964) e as revisões de

Tóquio (1975), Veneza (1983), África do Sul (1996) e Edimburgo (2000), assim como as

regulamentações locais (Resoluções 196/96 e 251/97 do CNS-MS, bem como Resolução 135/03 da

Anvisa).

O “Termo de Consentimento Livre e Esclarecido” é uma tradução brasileira originária do

termo francês “consentement livre et éclairé”. Esta forma é utilizada nas resoluções da Comissão

Nacional de Saúde (CNS – MS), órgão que regula a ética na pesquisa em seres humanos no Brasil.

Segundo a Declaração do Congresso Nacional de Bioética (SIBI), realizado em junho de

2000, o art. 11º, dedicado aos temas da pesquisa e experimentação, relata que “os sujeitos das

experimentações deverão dar seu consentimento livre e esclarecido e plenamente informado”.

O termo de consentimento livre e esclarecido é uma condição indispensável na pesquisa de

seres humanos. Trata-se de uma decisão voluntária, verbal ou escrita, realizada por uma pessoa

autônoma e capaz, selecionada após um processo informativo, para a experimentação consciente dos

seus riscos, benefícios e possíveis conseqüências (ANEXO D). A prática do termo do consentimento

livre e esclarecido contribui no exercício da ética dignificando e engrandecendo tanto o voluntário

quanto o investigador da pesquisa.

Os resultados da avaliação médica, o eletrocardiograma e os exames laboratoriais foram

registrados em folha individual de cada voluntário. Todas as informações obtidas durante o estudo,

referentes ao estado de saúde dos voluntários, ficam disponíveis aos médicos do Hospital Universitário

Walter Cantídio da Universidade Federal do Ceará. Uma cópia dos exames laboratoriais realizados no

período pré e pós-estudo foram fornecidas aos voluntários, quando solicitada. Todos os documentos

gerados, de natureza clínica e laboratorial, tiveram caráter confidencial.

4.1.4 Produto

A formulação referência de levotiroxina sódica de 150g, com lote 4074671, foi fornecida

pelo Laboratório Sanofi-Synthelabo, enquanto que a formulação teste de levotiroxina sódica de 150g, com

lote 0400001648, foi cedida pelo Aché Laboratórios Farmacêuticos.

4.1.5 Administração

Os voluntários receberam, conforme a randomização (ANEXO A), quatro comprimidos de

Levotiroxina 150g em dose única, por via oral, entre 7:00 e 8:00 da manhã do dia após o confinamento

(o tempo foi registrado no CRF – Case Report Formulary – ANEXO B), acompanhado de 240 mL de água

mineral sem gás, após pelo menos 10 horas de jejum, conforme preconizado pelo FDA, Food and Drug

Administration (FDA, 2000a).

As amostras sangüíneas para a determinação dos níveis plasmáticos de levotiroxina sódica

foram obtidas imediatamente antes da administração de uma das preparações de 150g de

LEVOTIROXINA (tempo zero) e nos seguintes intervalos, a partir da administração: 0:30; 1; 1;30h; 2;

2:30; 3; 4; 6, 8; 10; 12; 18; 24 e 48 horas. O intervalo entre os internamentos obedeceram a um intervalo

mínimo de 5 a 7 meias-vidas, período conhecido como wash out. Diante da meia-vida prolongada da

levotiroxina (T1/2 = 7 dias) e tomando por base o protocolo adotado pelo FDA (ANEXO E), planejou-se

um intervalo mínimo de 35 dias entre os períodos. Em cada internamento, os voluntários receberam a

formulação Levotiroxina Sódica (teste) ou Puran® T4.

Os voluntários foram randomicamente designados a uma das seguintes seqüências de

tratamento:

Tabela 1 – Definição das seqüências de tratamento.

Tratamento no Período I Tratamento no Período II

1 Levotiroxina Sódica Puran

2 Puran

T4 Levotiroxina Sódica

4.1.6 Internamento

Os 24 voluntários apresentaram-se para internamento na Unidade de Farmacologia Clínica

(UNIFAC) – Departamento de Fisiologia e Farmacologia – Faculdade de Medicina – Universidade

Federal do Ceará (UFC), às 20:00 horas na noite anterior de cada período do estudo, tendo realizado

uma refeição normal noturna (jantar). O início do ensaio clínico teve início às 07:00 horas da manhã

do dia seguinte, com a administração da levotiroxina sódica. Os voluntários permaneceram na

UNIFAC 24 horas após a administração da medicação, sendo privados de alimento durante toda à

noite que antecedeu a administração e nas primeiras duas horas após a administração. Nas demais

horas não foram permitidos outros alimentos, exceto os padronizados pela dieta.

Não foi permitido fumar durante o período de internamento. Medicações concomitantes

foram evitadas quando possível mas, em caso de necessidade, quando utilizada, foi registrada em

formulário próprio. O consumo de álcool foi limitado durante o período de estudo e evitado

completamente durante as 48 horas que antecedem cada coleta de sangue.

A fim de manter a padronização dos grupos de tratamento, a dieta (alimentos e líquidos)

oferecida, obedeceu ao mesmo padrão para todos os voluntários. Todos os alimentos e bebidas

servidos foram ingeridos por completo.

O horário do início e fim de cada refeição (desejejum, almoço, lanche, jantar, ceia ) foi

anotado, bem como o de início das ingestões programadas de líquidos.

A ingestão de líquidos ad libitum foi permitida até 2 horas antes da administração da

droga, sendo fornecido suco de laranja 2 horas após a administração. Os voluntários tiveram livre

acesso a água após as refeições, entretanto bebidas xânticas (chá, café, cola, guaraná) foram proibidas.

Os voluntários tiveram assistência e cuidados especializados durante todo o período do

estudo. Para cada voluntário, foi preenchida uma ficha clínica contendo os critérios de admissão,

história médica pré-estudo, exame físico geral pré e pós estudo, resultado ECG pré e pós estudo, fichas

de administração, coleta de sangue e aferição de sinais vitais do 1º e 2º internamentos, registro de

eventos adversos, medicação para tratamento de eventos adversos, término prematuro do estudo,

determinações laboratoriais e comentários adicionais. Para exemplificar, encontra-se em anexo a ficha

clínica do vol. 01 CA 120583 (ANEXO B).

a) Coletas de sangue para a determinação da levotiroxina sódica

As amostras de sangue para determinação da concentração sérica de T3 eT4 foram

obtidas, através de um catéter venoso heparinizado introduzido em veia superficial do antebraço do

voluntário. As coletas foram obtidas imediatamente antes da administração (T

) de uma das

preparações de LEVOTIROXINA Teste ou Referência 150 μg (600 μg) e nos seguintes intervalos, a

partir da administração: 0:30; 1; 1;30h; 2; 2:30; 3; 4; 6, 8; 10; 12; 18; 24 e 48 horas após a

administração. O tempo real da coleta de sangue foi registrado usando um relógio digital. A cada

intervalo de tempo, foram coletados 4,5 mL de sangue e colocados em tubos vacutainer de vidro sem a

presença de nenhum anticoagulante, visto que as análises foram realizadas em soro. Após

centrifugadas a 1000g, na temperatura ambiente, durante 15 minutos, o soro foi armazenado e mantido

à temperatura de -20°C, até sua análise.

Finalizando os estudo, seis dias após a última coleta de sangue referente ao segundo

internamento, os voluntários foram reavaliados clínica e laboratorialmente (período de pós-estudo).

b) Avaliação de efeitos adversos

Os voluntários foram orientados a relatar a ocorrência de todo e qualquer efeito adverso,

imediatamente, para que se realizasse o devido acompanhamento. A partir dessas informações, foi

avaliado a necessidade de se fazer uso ou não de medicação adicional A pergunta efetuada para saber

se os voluntários tiveram algum evento adverso limitou-se a: Como vai você?

Definições de efeitos adversos quanto a intensidade: Leve (efeito facilmente tolerado);

Moderado (efeito desagradável o bastante para interferir nas atividades cotidianas); Severo (efeito que

impossibilita a realização das atividades cotidianas normais).

Para avaliação da suposta relação entre o efeito adverso e o medicamento em estudo, os

eventos adversos podem ser caracterizados como:

Não atribuído: Quando não há presença de relatos na literatura sobre o evento adverso

ocorrido, não há provas objetivas ou subjetivas evidentes, a seqüência temporal do evento com a

administração do medicamento não é plausível.

Possível: Neste caso, além de não haver presença do evento observado no caso de re-

administração do medicamento, não há melhora clínica na administração de um antagonista ou após

wash-out do fármaco em estudo. Esse fato sugere a presença de causas alternativas para o evento

adverso avaliado, pois apesar da existência de dados científicos e evidências, o evento pode estar

sendo originado por um outro fator não relacionado ao medicamento.

Provável: Não se pode comprovar sua atribuição devido ao voluntário não ter apresentado

o mesmo evento no caso de re-administração, tanto durante os internamentos quanto durante outras

exposições anteriores.

Atribuído: O evento já é conhecido na literatura e há provas para respaldar objetivamente e

subjetivamente o ocorrido. A seqüência temporal após a administração do medicamento também deve

ser considerada de maneira clinicamente sensata.

4.2 PROTOCOLO ANALÍTICO

4.2.1 Princípio do método

As concentrações de levotiroxina (T4) e liotironina (T3) foram determinadas utilizando o

método de imunoensaio de eletroquimioluminescência (ECLIA), que permite a detecção e

quantificação de antígenos e anticorpos utilizando conjugados fluorescentes cuja emissão de luz, de

um determinado comprimento de onda, é medida com precisão em um fluorômetro (FERREIRA;

ÁVILA, 1996).

O imunoensaio de eletroquimioluminescência emprega como um anticorpo de captura um

monoclonal amino-terminal específico biotinilado, e o anticorpo de revelação é outro monoclonal

marcado com rutênio. O processo de separação emprega partículas magnéticas recobertas com

estreptavidina. O tempo de incubação é de 18 minutos e a sensibilidade analítica é de 1,2 ng/L

(VIEIRA et al., 2004).

4.2.2 Material

a) Equipamento

O imunoensaio de eletroquimioluminescência foi concebido para ser utilizado nos

analizadores de imunoensaios Elecsys 1010/2010 e Modular Analytics E170 (Módulo Elecsys) da

Roche.O MODULAR ANALYTICS SWA é produzido pela empresa japonesa Hitachi High-

Technologies Corporation , e tem como representante autorizado a Roche Diagnostics GMBH da

Alemanha.

O MODULAR ANALYTICS SWA E170 (Módulo Elecsys) da Roche/Hitachi é um

sistema completamente automatizado, controlado por software e destinado a análises de bioquímica,

eletrólitos e imunoensaios. Foi concebido para determinações quantitativas e qualitativas in vitro

usando uma ampla variedade de testes para a análise.

O sistema modular utilizado neste estudo é constituído por seis unidades de hardware: uma

unidade de controle, uma unidade central (core), um módulo ISE, um módulo P e um módulo E.

O módulo ISE (Eletrodo Seletivo de Íon) confere ao sistema um método eletrônico para

analisar as amostras de sódio, potássio e cloro.

O módulo P proporciona ao sistema um método fotométrico flexível, capaz de analisar até

800 testes in vitro por hora numa ampla variedade de substâncias analisadas, exemplos: ácido úrico,

colesterol, triglicerídeos, glicose, transaminases hepáticas (ALT, AST, gama-GT), imunoglobulinas

(IgA, IgG, IgM), proteínas, etc.

O módulo E, especificamente utilizado neste estudo, é um sistema de imunoensaio multi-

teste com acesso aleatório e com uma capacidade de até 170 testes por hora, com um tempo de reação

variando em um intervalo de 18-27 minutos. Com capacidade de diluição automática das amostras,

utiliza reagentes com códigos de barras e notificação de calibração automática.

b) Biológico

Para a determinação dos parâmetros analíticos de validação (especificidade, seletividade,

exatidão e precisão) foram utilizados soro humano normal, hemolisado e lipêmico provenientes da

Unidade de Farmacologia Clínica.

Para determinação das concentrações séricas de levotiroxina e liotironina foram utilizadas

amostras de soro dos voluntários obtidas a partir do protocolo clínico de coletas.

c) Soluções empregadas pelo equipamento

As soluções empregadas pelo Módulo E 170 do sistema MODULAR ANALYTICS SWA

são: ProCell M é uma solução de Tripropilamina na concentração de 180mmol/L que exerce função

importante na mensuração do analito; As soluções de limpeza, Clenn Cell M , cuja composição é de

KOH 176 mmol/L e detergente <1%; e a solução PreClean M formada por tampão fosfato 10mmol/L,

NaCl 20mmol/L, detergente 0,1% e conservante.

d) Padrões e Reagentes

Foram utilizados padrões de referência autênticos da Levotiroxina (T4) e da Liotironina

(T3), cujos os lotes são, respectivamente, K e L1C262, ambos distribuídos e fornecidos pela United

States Pharmacopéia (USP). As cópias dos Certificados de Análise dos analitos estão no Anexo F.

Para diluição dos padrões de referência foram utilizadas soluções de hidróxido de sódio (produzido

pelo laboratório Reagen).

4.2.3 Preparo das soluções

a) Soluções Padrões

Foram preparadas soluções padrões de levotiroxina (T4) nas concentações de 10 e 1000

μg/mL em hidróxido de sódio 0,5M; e as de liotironia (T3) nas concentrações de 1, 100 e 1000 μg/mL

em hidróxido de sódio 0,5M, para que a parir destas fossem preparadas as soluções de trabalho.

As soluções padrões de levotiroxina (T4) e de liotironia (T3) foram preparadas

diariamente, e utilizadas logo após o preparo, tendo em vista que o Módulo E 170 do sistema

MODULAR ANALYTICS SWA quantifica analitos apenas no soro e deste modo não foi realizado

estudo de estabilidade das soluções padrões. Cada grupo de padrões (T3 e T4), utilizados nos lotes de

validação, foram pesados preparados independentemente.

b) Soluções de trabalho

As soluções de trabalho foram preparadas a partir das soluções padrões de levotiroxina e

liotironina, sendo obtidas soluções nas concentrações finais de 1 e 10 μg/mL para a levotiroxina e 0,1;

1 e 100 μg/mL para a liotironina.

c) Amostras de Controle de Qualidade(CQ)

As amostras de Controle de Qualidade (CQ) têm o propósito de monitorar a precisão e

exatidão dos valores quantificados dos analitos (T3 e T4) durante o ensaio clínico. Essas foram

preparadas contaminando soro humano com soluções de trabalho específicas para levotiroxina ou

liotironina. Foi realizado a dosagem de amostras brancas para avaliação do nível de endógeno dos

analitos (T4 e T3).

Os valores adotados para as amostras de Controle de Qualidade (CQ) são definidos com

base na faixa de concentração dos analitos específicos. O controle de qualidade baixo (CQB) consistiu

num valor menor ou igual a três vezes o Limite de Quantificação, sendo utilizada a concentração de

10ng/mL para a levotiroxina e 0,5ng/mL para a liotironina.

Na determinação da concentração do controle de qualidade alto (CQA), adotamos um

valor de 80,45% do maior ponto da curva de calibração da levotiroxina, que equivale a 200ng/mL.

Com relação a liotironina, a concentração do controle de qualidade alto correspondeu a 76,80% do

maior ponto da curva de calibração, equivalendo a 5ng/mL

O controle de qualidade médio (CQM) corresponde a uma média entre o CQB e o CQA,

desta forma os valores de CQM foram 100ng/mL para a levotiroxina e 2,8 ng/mL para a liotironina.

4.2.4 Segurança

O manuseio dos reagentes e material biológico e durante a realização dos experimentos

laboratoriais, os analistas utilizaram equipamentos de proteção individual. As normas de segurança

laboratorial foram seguidas, bem como os procedimentos adequados para a eliminação de resíduos.

4.2.5 Validação do método bioanalítico

a) Especificidade/Seletividade

Cada tipo de amostra de soro (normal,hemolisado e lipêmico) foi testado para avaliar a

presença de interferentes nas condições de detecção do método. A impossibilidade técnica do

equipamento utilizado para efetuar a dosagem de soluções preparadas em fluidos não biológicos, não

permitiu a comparação dos resultados obtidos com soluções aquosas dos analitos. Desta forma foi

realizada uma comparação entre 5 replicatas do Controle de Qualidade Médio (CQM), preparadas no

soro normal, soro hemolisado e soro lipêmico, avaliando as concentrações dos dois analitos em estudo

(T3 e T4).

A escolha do CQM para verificação da especificidade/seletividade do método analítico é

justificada pela presença dos analitos na matriz biológica não contaminada (endógenos), desta forma a

utilização de uma concentração próxima do limite de quantificação não pode ser utilizada; uma vez

que a própria matriz biológica já apresenta valores acima do Limite de Quantificação (LQ) do método.

b) Curva de calibração

Para definição da relação entre a concentração e a resposta gerada pelo equipamento, os

resultados foram determinados com base numa curva de calibração gerada pelo analisador (Módulo E

170 do sistema MODULAR ANALYTICS SWA) a cada kit reagente através de dois pontos de

calibração, não sendo necessária à construção de uma curva com soluções contendo padrões de

Levotiroxina (T4) e Liotironina (T3). A cada lote de amostra foi realizada a calibração prévia dos dois

pontos. Teve-se também o cuidado de sempre utilizar o mesmo lote de kit-reagente durante toda a

validação

O intervalo de medição gerado pela calibração prévia dos dois pontos foi de 4,20 – 248,6

ng/mL para a Levotiroxina (T4) e de 0,19 – 6,51 ng/mL para Liotironina (T3). Estes valores foram

definidos pelo limite de quantificação do método e pelo ponto máximo da curva principal de cada

analito.

c) Determinação do limite de quantificação

O limite de detecção é definido com base na sensibilidade, precisão e exatidão do método.

Neste caso específico, onde a curva de calibração é gerada pelo kit-reagente utilizado no método, o

limite de detecção pré-estabelecido no método utilizado é de 4,20 ng/mL para Levotiroxina (T4) e

0,195 ng/mL para Liotironina (T3).

d) Precisão e Exatidão

Para determinar a precisão e exatidão do método analítico foram avaliadas oito amostras

dos controles de qualidade baixo, médio e alto da levotiroxina e liotironina.

A Precisão e Exatidão foram avaliadas em variações intradia (intralote), na qual são

avaliados esses parâmetros durante uma corrida analítica simples; e em variações interdias (interlotes),

na qual são mesuradas as variações entre dias (lotes), possivelmente envolvendo diferentes analistas,

lotes de reagentes, condições ambientais, etc.

Os testes para avaliação da precisão e exatidão intra e interlote foram conduzidos usando

lotes contendo as seguintes amostras:

- Oito amostras Brancas (soro normal não contaminado com analitos), para avaliação do nível de

endógeno;

- Oito amostras de Controle de Qualidade (CQ) de cada tipo definido anteriormente;

- Foram preparadas amostras de Controle de Qualidade de levotiroxina e liotironina a partir de

soluções padrões de T4 e T3, respectivamente.

e) Validação do processo de reteste

A precisão da reprodutibilidade dos resultados foi avaliada submetendo as amostras de

controles de qualidade a uma nova quantificação imediatamente após o fim do lote de validação,

obedecendo as mesmas condições de detecção.

A precisão do processo de reteste foi determinada considerando a percentagem de variação

(V%) entre as amostras inicialmente quantificadas e as retestadas; sendo aceito os valores de variação

(V%) que não excedessem 15%.

f) Estudo de estabilidade da levotiroxina no soro

Para avaliar a estabilidade, uma série de amostras foi preparada a partir da mesma solução

padrão utilizada para preparação das amostras de controles de qualidade.

As amostras em soro humano de cada concentração foram preparadas em volume

suficiente para fornecer várias alíquotas. Cinco alíquotas de cada concentração são preparadas antes de

cada teste e quantificadas em cada lote de amostra referente a cada teste, fornecendo valores de

referência (recém preparados). Outras cinco amostras de cada concentração são processadas para cada

teste desejado (pós-processamento, congelamento e descongelamento, estabilidade de curta duração e

estabilidade de longa duração).

a) Estabilidade de curta duração

Para avaliar a estabilidade de curta duração, foram preparadas cinco alíquotas

de controle de qualidade na concentração baixa (CQB) e cinco alíquotas de controle de

qualidade na concentração alta (CQA). Estas alíquotas foram congeladas, descongeladas e

mantidas à temperatura ambiente por 24 horas. A estabilidade dos analitos é comparada

com amostras de referência, que equivalem às amostras que foram preparadas

recentemente.

b) Estabilidade do fármaco em ciclos de congelamento e descongelamento

Para avaliar a estabilidade do fármaco em ciclos de congelamento e

descongelamento foram definidos para estocagem amostras de controle de qualidade baixo

e alto nas concentrações de 10 e 200ng/mL para a Levotiroxina e 0,5 e 5 ng/mL para a

Liotironia.

As alíquotas foram submetidas a três ciclos de congelamento e

descongelamento perfazendo ao final um total de 72 horas. Cada ciclo consistiu em

congelar as alíquotas à temperatura de -20 ºC por 24 horas, e em seguida, descongelá-las à

temperatura ambiente. As amostras foram quantificadas após o terceiro ciclo de

congelamento, junto com amostras de referência, que correspondiam às amostras recém-

preparadas.

c) Estabilidade de longa duração

Alíquotas de cada tipo de amostra foram inicialmente congeladas a -20 ºC e

posteriormente descongeladas e quantificadas após dezoito dias, uma vez que o intervalo

entre a administração da medicação e a determinação analítica foi de dezessete dias, tanto

para o primeiro internamento quanto para o segundo. A estabilidade dos analitos foi

comparada com as amostras de referência que correspondiam às soluções recém

preparadas.

d) Estabilidade das soluções padrões e de trabalho

Como o equipamento utilizado para quantificação da Levotiroxina (T4) e

Liotironina (T3), não consegue detectar esses analitos em matrizes não biológicas, esse

teste não pode ser realizado. Desta forma toda vez que foi necessário fazer uma nova

solução dos analitos em soro humano, novas soluções padrões e novas soluções de

trabalham eram preparadas.

e) Estabilidade de pós-processamento

Este teste específico não pôde ser aplicado, pois o equipamento utilizado para

quantificação da Levotiroxina (T4) e Liotironina (T3), não permite que a amostra fique no

auto-injetor o tempo mais que suficiente para sua quantificação.

4.2.6 Determinação das concentrações de levotiroxina e liotironina no soro

Os resultados são determinados com base numa curva de calibração gerada a partir das

soluções controle do kit-reagente. Os valores para a Levotiroxina (T4) são expressos nos dados brutos

em µg/dL, sendo transformados para ng/mL multiplicando por 10. Os dados brutos para Liotironina

(T3) já são expressos em ng/mL.

4.2.7 Cálculo dos parâmetros farmacocinéticos

A partir da quantificação da levotiroxina no soro dos voluntários; os parâmetros

farmacocinéticos analisados para a determinação da biodisponibilidade das formulações de

levotiroxina sódica teste e referência, foram:

ASC(

0-∞

) – Área sob a curva de concentração do fármaco versus tempo do tempo 0 (zero) extrapolada

ao infinito, calculada pelo método linear-log trapezoidal. ASC

[0-∞]

= ASC

[0-48]

+ Ct/K, onde Ct é a

última concentração quantificável;

ASC(

0-48h

) – Área sob a curva de concentração do fármaco versus tempo do tempo 0 (zero) ao tempo

de 48 h, calculada pelo método linear-log trapezoidal.

max

– Pico de concentração plasmática máxima do fármaco, obtida diretamente dos dados de

concentração.

max

– Tempo para atingir o C

max

1/2

– Representa o tempo em que a concentração do fármaco no plasma é reduzida à metade.

As concentrações séricas de levotiroxina e liotironina determinadas pelo método de

imunofluorescência, foram analisadas usando o programa WinNonlinTM, versão 3.1; para

determinação dos parâmetros farmacocinéticos descritos acima.

4.3 Protocolo estatístico

No protocolo clínico a análise estatística dos exames laboratoriais e medidas

antropométricas (relação peso/altura) foi realizada comparando os valores encontrados no pré-estudo

com os valores do pós-estudo, através do teste t de Student pareado com p<0,05; utilizando os

programas: Microsoft Excel Version 7.0 e Graph Pad Prism Version 3.02.

A média da razão teste/referência dos parâmetros acima mencionados foi calculada, e

avaliada a bioequivalência considerando um intervalo de confiança de 90%. A análise de variância

(ANOVA) foi utilizada para avaliar fatores de seqüência, período e tratamento, considerando a

determinação da menor diferença significante (p<0,05).

A bioequivalência entre as duas formulações foi avaliada a partir dos resultados obtidos a

partir de análise estatística realizada através dos seguintes programas: WinNonlin

, versão 3.1;

EquivTest versão 2.0; GraphPad Prism, versão 2.0; Microsoft Excel, versão 97; Microsoft Word

versão 97.

5 RESULTADOS E DISCUSSÃO

5.1 Etapa clínica

Foram selecionados 24 voluntários para participação neste ensaio clínico, cuja idade

variou entre 19 e 49 anos (25,92± 8,41) e o índice de massa corporea médio de 24,41 ± 2,39 kg/m

. O

número de voluntários sadios deve assegurar poder estatístico suficiente para garantir a confiabilidade

dos resultados do estudo (BRASIL, 2003c). O termo voluntário normal ou sadio deve ser interpretado

como indivíduo adulto, sem anormalidades clínico-laboratoriais capazes de prejudicar a interpretação

do experimento ou aumentar a sensibilidade do indivíduo ao potencial tóxico do fármaco em estudo

(LLOYD; RAVEN, 1994).

Vinte e três voluntários (doze homens e onze mulheres) concluíram todas as etapas do

estudo, havendo uma desistência por razões pessoais, após a primeira fase do estudo.

Os estudos de biodisponibilidade têm uma relevante importânica social, pois é através

deles que poderá ser disponibilizado, principalmente a população de baixa renda, medicamentos de

qualidade, eficácia e segurança , a um preço justo e acessível (MORAES; MORAES, 2000).

A utilização de um delineamento de estudo cruzado permite que nos ensaios de

biodisponibilidade cada indivíduo seja seu próprio controle, o que proporciona uma comparação do

indivíduo com ele mesmo, para as diferentes formulações; a variabilidade inter-individual é então

desconsiderada na comparação entre as formulações, o que torna o teste de diferença de tratamentos

em geral mais poderoso e com uma aleatorização apropriada de indivíduos para a seqüência de

administração das formulações, o planejamento produz as melhores estimativas não viciadas para a

diferença (ou razão) entre as formulações (BRASIL, 2003c).

A partir do acompanhamento dos voluntários no decorrer do estudo através de aferições de

sinais vitais (pulso, pressão sanguínea sistólica e diastólica) que foram realizadas concomitante as

coletas de sangue, não foi evidenciada qualquer anormalidade clínica relacionada a esses parâmetros,

quando comparadas aos resultados obtidos durante o período de pré-estudo. No presente estudo, não se

observou variação estatisticamente significante no que diz respeito ao índice de massa corporea médio,

antes e após a etapa clínica (Figura 5).

Figura 5-Análise comparativa do IMC durante os períodos de Pré-estudo e Pós-estudo em 23 voluntários sadios

após administração de duas doses de 600μg de levotiroxina sódica. A linha inteira representa os valores de

referência para os homens e a pontilhada, para mulheres.

Através das Figuras 6 e 7 pode-se observar uma redução significativa da concentração de

hemoglobina (Figura 6), bem como da concentração de hemtócrito (Figura 7) dos 23 voluntários

analisados, no período de pós-estudo.

Essa redução em ambos os sexos poderia não poderia estar associada as perdas sangüíneas

inerentes ao ensaio clínico, pois o volume sangüineo total coletado durante todo o estudo foi de

aproximadamente 150 mL. Entretanto, de acordo com Dollery (1999), a levotiroxina pode apresentar

como efeitos adversos uma irregularidade no ciclo menstrual, podendo variar de amenorréia total a

polimenorréia, neste útimo caso podendo ser uma justificativa a diminuição desses parâmetros

hematológicos nas mulheres. Com relação ao sexo masculino não há relatos na literatura que

justifiquem a influencia da levotiroxina nos parâmetros hematológicos em questão (hematócrito e

hemoglobina.

Mulher

Homem

IMC (Kg/m

)

Figura 6-Análise comparativa da hemoglobina durante os períodos de Pré-estudo e Pós-estudo em 23

voluntários sadios após administração de duas doses de 600μg de levotiroxina sódica. A linha inteira representa

os valores de referência para os homens e a pontilhada, para mulheres. * p<0,05.

Figura 7-Análise comparativa do hematócrito durante os períodos de Pré-estudo e Pós-estudo em 23 voluntários

sadios após administração de duas doses de 600μg

de levotiroxina sódica. A linha inteira representa os

valores de referência para os homens e a pontilhada, para mulheres. * p<0,05.

Os voluntários qualificados para participar do estudo foram internados por dois

períodos de aproximadamente 36 horas, com trinta e cinco dias de intervalo entre os internamentos,

para garantir que não haja um efeito residual do primeiro fármaco administrado, que inflaria

artificialmente os resultados do segundo período (HOWARD; NICHOLAS; LLOYD., 2000). Para

PRÉ PRÉ PÓS PÓS

Hematócrito (%)

Mulher

Homem

Mulher

Homem

PRÉ PRÉ PÓS PÓS

Hemoglobina (g/dL)

estudos farmacocinéticos de acordo com o FDA (2000a), deve-se utilizar uma dose de no mínimo

600μg de levotiroxina, para que as concentrações basais do hormônio T4 alcancem níveis seguramente

mensuráveis, sem entretanto representar condições de riscos iatrogênicos para os voluntários.

Os eventos adversos, juntamente com sua intensidade e a ação adotada, estão descritos na

Tabela 2. Quanto à severidade os eventos adversos podem ser classificados como: Leve, Moderado,

Severo. A classificação com relação à causalidade (atribuição ou não à droga) pode ser: Sim, Possível,

Não e Desconhecido.

Tabela 2 – Análise dos eventos adversos relatados pelos 24 voluntários durante o ensaio clínico de

biodisponibilidade.

Vol. Descrição

Severidade

Atribuída a droga?

Fezes Amolecidas Leve Possível

Cefaléia Leve Possível

Cefaléia holocraniana Moderada Não

Tontura Moderada Não

Náusea Moderada Não

Vômito Moderada Não

Dor pélvica Moderada Não

Febre Leve Possível

Cefaléia Leve Não

Obstrução nasal Leve Não

Náusea Leve Não

Náusea Moderada Desconhecida

Cefaléia Moderada Desconhecida

Vômito (1 episódio) Moderada Desconhecida

Cefaléia Moderada Possível

Dor em dorso Leve Não

Epigastralgia Leve Desconhecida

Náuseas Leve Desconhecida

Odontalgia Moderada Não

Aumento do fluxo menstrual Leve Possível

Adinamia Moderada Não

Cefaléia Moderada Não

Dor na garganta Moderada Não

Sangramento transvaginal Leve Possível

As duas formulações de levotiroxina sódica foram bem toleradas pelos voluntários, no

entanto ocorreram alguns relatos de eventos adversos: onze voluntários (45,83%) relataram eventos

adversos de intensidade leve a moderada. Os eventos adversos, observados durante os dois períodos de

internação, não foram atribuídos precisamente ao medicamento, devido aos seguintes critérios: não há

informações científicas prévias sobre o evento; não há provas com evidências objetivas (exames

laboratoriais, pressão arterial, e outros parâmetros) ou subjetivas (clínicas); presença de causas

alternativas que podem ter causado o evento observado; ausência de reação semelhante com o uso do

mesmo medicamento no primeiro internamento ou com o uso de medicamentos do mesmo grupo

farmacológico e ausência de reincidência quando da nova administração do medicamento (GUZZO,

2004). Nenhum desses sintomas foram recorrentes no mesmo voluntário.

Os efeitos adversos ( náuseas, vômitos, cefaléia) presentes neste estudo de administração

única, foram observados em estudos prévios de administração crônica de levotiroxina a pacientes com

hipotireoidismo. De acordo com Brenta et al., (2003), 82% dos pacientes hipotireóideos que faziam

uso crônico de levotiroxina sódica apresentaram os seguintes eventos adversos, distúbios

gastrointestinais (6,25%), taquicardia (31,25%), insônia (12,5%), alopécia (6,25%), irritabilidade

(6,25%), cefaléia (12,5%), hipertensão (12,5%), astenia (6,25%), fogachos (6,25%). Segundo Faber e

Galloe (1998) a administração crônica de doses de levotiroxina está associada a taquicardia, insônia,

nervosismo, hipertensão e osteoporose. Com relação aos distúrbios menstruais (aumento do fluxo

menstrual e sangramento transvaginal) referidos pelas voluntárias de números 22 e 23, podem estar

associados ao uso de levotiroxina sódica, que segundo, FDA (2000b), a levotiroxina pode apresentar

como efeitos adversos uma irregularidade no ciclo menstrual, podendo variar de amenorréia total a

polimenorréia.

Os exames clínicos e laboratoriais pós-estudo não foram estatística e clinicamente

significantes, quando comparados aos exames realizados no período pré-estudo. As Tabelas 3, 4, e 5

apresentam as médias das determinações laboratoriais pré e pós-estudo juntamente com os valores de

referência estipulados pelo laboratório de análise. Os parâmetros analisados permitiram avaliar as

funções metabólica (glicose e colesterol), hepática (ALT, AST, bilirrubina total e gama-GT) e renal

(creatitina e uréia) de vinte e três voluntários de ambos os sexos.

Tabela 3 – Parâmetros metabólicos (

± DP) de 23 voluntários antes e após a administração de duas

doses de 600 μg de Levotiroxina sódica.

Metabólico

Resultados (

± DP)

Valor de Referência 70 – 105

Pré-estudo 83,08 ± 8,58

GLICOSE

(U/L)

Pós-estudo 88,29 ± 5,80

Valor de Referência Até 200

Pré-estudo 156,71 ± 24,67

Colesterol

Total

(mg/dL)

Pós-estudo 165,14 ± 27,54

Os parâmetros metabólicos, glicose e colesterol, analisados estão perfeitamente

enquadrados na taxa de normalidade, tanto referente ao período de pré-estudo como de pós-estudo,

demonstrando que a utlização da medicação não acarretou nenhuma alteração metabólica. O mesmo se

aplica aos parâmetros hepáticos (bilirrubina total, AST, ALT e gama-GT) que não refletem nenhum

dano hepático ocasionado pela levotiroxina.

Tabela 4 – Parâmetros hepáticos (

± DP) de 23 voluntários antes e após a administração de duas

doses de 600 μg de Levotiroxina sódica.

Hepático Homens Mulheres

Valor de Referência Até 38 Até 32

Pré-estudo 20,77 ± 4,85 21,86 ± 7,05

AST (U/L)

Pós-estudo 24,4±9,27 20,96±0,28

Valor de Referência Até 41 Até 31

Pré-estudo 25,63±12,28 15,39±7,89

ALT (U/L)

Pós-estudo 29,77±20,88 17,67±11,11

Valor de Referência 8 a 61 5 a 36

Pré-estudo 31,33±17,60 20,72±21,21

Gama GT

(U/L)

Pós-estudo 36,59±21,26 22,00±9,90

Valor de Referência Até 1,1 Até 1,1

Pré-estudo 1,09± 0,56 0,54±0,22

Bilirrubina

Total

(mg/dL)

Pós-estudo 0,88 ± 0,42 1,24±0,12

Não foi constatado nenhuma alteração renal pelo uso da levotiroxina, fato que pode ser

facilmente observado na Tabela 5, onde os parâmetros renais, uréia e creatinina, admitem valores

dentro da faixa de normalidade tanto após o uso da levotiroxina quanto antes.

Tabela 5 – Parâmetros renais (

± DP) de 23 voluntários antes e após a administração de duas doses

de 600 μg de Levotiroxina sódica.

Renal Homens Mulheres

Valor de Referência 10 a 50 10 a 50

Pré-estudo 30,3 ± 7,50 24,97 ± 8,03

URÉIA

(mg/dL)

Pós-estudo 33,46± 4,82 21,7± 2,54

Valor de Referência 0,7 a 1,2 0,5 a 0,9

Pré-estudo 0,97 ± 0,09 0,64 ± 0,06

CREATININA

(mg/dL)

Pós-estudo 0,73 ± 0,14 0,81 ± 0,07

Os resultados demonstraram que as variações ocorridas, após o término do estudo, estão

dentro dos valores de referência e não apresentam diferenças estatísticas entre as determinações pré e

pós estudo. Dessa forma, garantiu-se com segurança o estado de higidez dos voluntários e a

tolerabilidade às medicações administradas.

A partir da década de 80 com a introdução de métodos sensíveis de detecção de TSH, é

recomendado que a terapia de reposição de T4 seja monitorada através da medição de valores

laboratoriais de TSH (DEGROOT; HENNEMAN, 2002). Mensurações periódicas do TSH devem ser

incorporadas ao acompanhamento médico de pacientes que recebem terapia de reposição de

hormônios da tireóide, no intuito de evitar sub-doses ou overdoses, tanto na manutenção da medicação

usual quanto na substituição por outras formulações.

A secreção do TSH varia ritmicamente durante o dia, sendo que mais da metade é

secretada de forma pulsátil no intervalo de 22:00 horas às 04:00 horas. Entretanto, as moléculas de

TSH secretadas no período noturno demonstram menor atividade hormonal do que aquelas secretadas

durante o dia (PIMENTEL; HANSEN, 2004). Portanto, de acordo com Ross (2001), não ocorre

aumento de secreção de hormônios tireoidianos (T3 e T4) em resposta ao acréscimo da concentração

de TSH nesse período.

O TSH pode ser monitorizado como um indicativo da eficácia terapêutica da levotiroxina,

uma vez que em pacientes com hipotireoidismo os níveis desse hormônio encontram-se elevados

(KATZ; ROSEN; WARTOFSKY, 2005). Baseado nesta afirmativa foram mensurados as

concentrações séricas de TSH dos voluntários antes e depois da administração das formulações de

levotiroxina sódica.

Analisando os resultados representados na Tabela 6 e na Figura 8 observa-se uma redução

nas concentrações de TSH em todos os 23 voluntários no período de pós-estudo. A diminuição dos

níveis de TSH é uma conseqüência da retro-alimentação negativa induzida pelo T4 exógeno após a

administração das duas formulações de levotiroxina sódica

Tabela 6 – Valores de TSH (μUI/mL) pré e pós-estudo dos 24 voluntários antes e após a administração

de duas doses de 600 μg de levotiroxina sódica.

VOLUNTÁRIO PRE-ESTUDO* POS-ESTUDO*

0,70 0,37

1,13 0,27

2,78 2,62

1,23 0,18

1,62 0,70

0,81 0,32

1,38 0,97

2,16 0,53

2,30 0,81

1,24 Não realizado

1,35 0,55

0,92 0,37

2,91 0,64

1,84 0,67

2,05 1,67

2,88 1,86

2,20 0,59

2,78 2,55

2,46 0,24

0,6 0,22

3,86 0,5

1,51 0,93

0,46 0,17

1,78 0,46

* Valores normais para maiores de 21 anos: 0,270 a 4,200 μUI/mL.

Figura 8-Análise comparativa de TSH durante os períodos de Pré-estudo e Pós-estudo em 23 voluntários sadios

após administração de duas doses de 600 μg de Levotiroxina sódica. A linha inteira representa os valores de

referência para os homens e para mulheres. * p<0,05.

A terapia de reposição hormonal com a levotiroxina é amplamente recomendada, sendo

uma substância sintética segura e eficaz, que promove o alívio dos sintomas hipotireóideos e

normaliza os valores laboratoriais dos pacientes com hipotireoidismo (LANDIS; COLLINS, 2004).

Embora a glândula tireóide produza T4 e T3, as terapias de reposição de hormônios tireoidianos

contém somente o T4, pois este apresenta uma meia-vida maior produzindo assim, níveis séricos mais

estáveis (SARAVANAN et al., 2005).

Embora a levotiroxina sódica tenha apresentado boa tolerabilidade e segurança terapêutica,

é aconselhável que se adote uma monitorização da dose terapêutica, ou seja, um ajuste gradual da

dose até que o efeito desejado seja alcançado, de forma a evitar conseqüências nocivas decorrentes de

um tratamento inadequado que podem envolver alterações danosas no crescimento, desenvolvimento,

função cardiovascular, metabolismo ósseo, funções reprodutiva, gastrointestinal, cognitiva, emocional,

metabolismo lipídico e dos carboidratos. Ratificando a importância da monitoração, Canaris et al.

(2000) afirmam que muitos pacientes que fazem uso de terapia de reposição de hormônios tireoidianos

recebem doses insuficientes ou excessivas.

PRÉ PÓS

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

3.5

4.0

4.5

TSH (U/mL)

5.2 Etapa analítica

5.2.1 Especificidade/seletividade

Segundo Leite (2002), a especificidade/seletividade significa que o valor encontrado

provém somente do analito em estudo, de modo a assegurar que o método é indiferente a presença de

interferentes na amostra.

A especificidade/seletividade foi avaliada através da determinação da interferência da

matriz biológica na quantificação do analito nos soros hemolisado, lipêmico e normal. Os valores

encontrados para a variação da levotiroxina nos soros normal/hemolisado e normal/lipêmico foram

respectivamente: -3,71 e 3,55. Para a liotironina as variações nos soros normal, hemolisado e lipêmico

foram respectivamente: -0,92 e 5,53. Os resultados demonstraram que a variação entre as médias das

concentrações encontradas dos soros normal/hemolisado e normal/lipêmico foi inferior a 15% para a

levotiroxina e para a liotironina; como pode ser observado nas Tabelas 7 e 8.

Tabela 7 – Dados do teste de Especificidade da Levotiroxina (T4)

ANALITO LEVOTIROXINA (T4)

Matriz Soro Normal Soro Hemolisado Soro Lipêmico

171,3 167,6 181,5

168,6 164,3 179,6

172,9 165,6 179,9

175,6 166,7 179,1

Concentração

Medida

(ng/mL)

172,4 165,8 172,4

Média 172,16 166,00 178,50

CV (%) 1,48 0,75 1,98

Variação (%) -3,71 3,55

A homogeneidade entre as amostras de soro de cada categoria foi determinada através do

coeficiente de variação, sendo considerada satisfatória uma vez que satisfez os critérios estabelecidos

pelo Guia para validação de métodos analíticos e bioanalíticos da Anvisa (BRASIL, 2003d). Os

valores do Coeficiente de Variação (CV) encontram-se nas Tabelas 7 e 8.

Segundo Doria Filho (1999), o coeficiente de variação é um importante parâmetro de

avaliação da dispersão entre os resultados analíticos, e quanto menor forem os valores, mais

homogênea será a amostra.

Com relação à homogeneidade os valores encontrados para o coeficiente de variação da

levotiroxina nos soros normal, hemolisado e lipêmico foram respectivamente: 1,48; 0,75 e 1,98. Para a

liotironina os CV nos soros normal, hemolisado e lipêmico foram respectivamente: 1,90; 1,93 e 2,13.

Tabela 8 – Dados do teste de Especificidade da Liotironina (T3)

ANALITO LIOTIRONINA (T3)

Matriz Soro Normal Soro Hemolisado Soro Lipêmico

3,86 3,96 4,07

3,85 3,86 4,17

3,95 3,94 4,1

3,98 3,78 4,3

Concentração

Medida

(ng/mL)

4,02 3,94 4,17

Média 3,93 3,90 4,16

CV (%) 1,90 1,93 2,13

Variação (%) -0,92 5,53

A capacidade de medir exatamente um composto, em presença de outros componentes tais

como impurezas, produtos de degradação e componentes da matriz, determina a especificidade e a

seletividade do método bioanalítico (MASSART, 1988). Desta forma podemos afirmar que o método

deste estudo demonstrou ser específico e seletivo.

5.2.2 Exatidão e precisão

Segundo Leite (2002), precisão é concordância entre vários valores experimentais obtidos,

ou seja, quanto mais parecidos forem esses valores mais precisos estes serão. Com relação à exatidão,

esta traduz a concordância dos valores experimentais com o valor verdadeiro.

A precisão é a avaliação da proximidade dos resultados obtidos em uma série de medidas

de uma amostragem múltipla de uma mesma amostra. Esta é considerada como a concordância entre

os resultados dentro de um curto período de tempo com o mesmo analista e mesma instrumentação,

chamada de precisão intralote, e a concordância entre os resultados do mesmo laboratório, mas obtidos

em dias diferentes, com analistas diferentes e/ou equipamentos diferentes, chamada de precisão

interlote (CAUSON, 1997).

Para obter a precisão e a exatidão, foram utilizadas os controles de qualidade, que

abrangiam concentrações distintas dentro da faixa das concentrações esperadas. As Tabelas 9 e 10

mostra os valores para precisão e exatidão inter e intralote para a levotiroxina e liotironina

respectivamente.

Tabela 9 – Parâmetros de validação dos CQ da Levotiroxina (T4)

Intralote Interlote

Controles 1º Lote 1º Lote, 2º Lote e 3º Lote

Precisão (%) Exatidão (%) Precisão (%) Exatidão (%)

CQB

12,97 96,18 1,31 95,44

CQM

3,51 94,67 2,54 92,04

CQA

1,86 85,79 1,05 86,62

Concentração nominal: CQB= 10 ng/mL, CQM= 100 ng/mL e CQA= 200 ng/mL

Para a Levotiroxina os valores de precisão e exatidão intralote foram 12,97% e 96,18;

3,51% e 94,67; 1,86% e 85,79 para CQB (10 ng/mL), CQM (100 ng/mL) e CQA (200 ng/mL),

respectivamente. Os valores interlote foram 1,31% e 95,44; 2,54% e 92,04; 1,05% e 86,62 para CQB

(10 ng/mL), CQM (100 ng/mL) e CQA (200 ng/mL), respectivamente. Os resultados foram

determinados para um único lote em quintuplicata e estão apresentados na Tabela 9.

Tabela 10 – Parâmetros de validação dos CQ da Liotironina (T3)

Intralote Interlote

Controles 1º Lote 1º Lote, 2º Lote e 3º Lote

Precisão (%) Exatidão (%) Precisão (%) Exatidão (%)

CQB

5,29 101,08 1,03 101,43

CQM

2,85 97,52 6,47 93,98

CQA

3,20 98,88 6,82 98,53

Concentração nominal: CQB= 0,5 ng/mL, CQM= 2,8 ng/mL e CQA= 5 ng/mL

Para a Liotironina os valores de precisão e exatidão intralote foram 5,29% e 101,08%;

2,85% e 97,52; 3,20% e 98,88 para CQB (0,5 ng/mL), CQM (2,8 ng/mL) e CQA (5 ng/mL),

respectivamente. Os valores interlote foram 1,31 e 95,44; 2,54 e 92,04; 1,05 e 86,62 para CQB (0,5

ng/mL), CQM (2,8 ng/mL) e CQA (5 ng/mL), respectivamente. Os resultados foram determinados

para um único lote em quintuplicata e estão apresentados na Tabela 10.

De acordo com a Resolução da Diretoria Colegiada (RDC nº 899) da Anvisa, os critérios

de precisão e exatidão a seguir foram utilizados para aprovar os lotes de intra e interdia:

- Precisão: Para cada nível de concentração, o coeficiente de variação (CV%) em percentual, não

excedeu a 15% para os controles CQB, CQM e CQA, o coeficiente de variação em percentual (CV%)

não deveria exceder 15%.

- Exatidão: Os valores médios das amostras para cada nível de concentração estavam situados entre o

intervalo de 85 – 115% do valor nominal (BRASIL, 2003d).

A proximidade dos resultados obtidos pelo método em estudo em relação ao valor

verdadeiro define a exatidão de método analítico. Deve ser determinada em uma mesma corrida

analítica, a exatidão intralote, e em corridas diferentes, a exatidão interlote (BRASIL, 2003d).

Por definição, o coeficiente de variação (CV), para a precisão, não pode exceder 15% para

cada concentração analisada – tolerância até 20% da concentração do limite de quantificação. Em se

tratando da exatidão, deve estar dentro de 15% do valor atual em relação à média das amostras de cada

concentração – tolerância até 20% da concentração do limite de quantificação. A variação estabelecida

para a exatidão é 85 – 115% (BRASIL, 2003d).

Como todos os parâmetros descritos estão de acordo com o Guia para Validação de

Métodos Analíticos da Anvisa pôde-se concluir que as amostras de controle de qualidade baixo, médio

e alto foram totalmente validadas para precisão e exatidão (BRASIL, 2003d).

Foi verificado um alto grau de precisão e exatidão intra-lote para as referidas

concentrações, sugerindo não haver variabilidade e discrepância entre os resultados das amostras

dosadas. O método validado procurou garantir a reprodutibilidade e concordância das análises,

reduzindo, assim, as possíveis interferências nas amostras quantificadas.

5.2.3 Processo de reteste

O processo de reteste foi validado através da injeção repetida das amostras dos Controles

de Qualidade. A razão entre o valor original e o valor retestado das amostras foi determinada para

avaliar a reprodutibilidade dos resultados. Os resultados presentes nas Tabelas 11 e 12 mostram uma

variação menor que 15% para os Controles de Qualidade. Desta forma, as amostras podem ser

retestadas desde que não ultrapasse o tempo de bancada validado no teste de estabilidade de curta

duração. Os dados do processo de reteste das amostras da levotiroxina e liotironina estão

demonstrados nas Tabelas 11 e 12.

Tabela 11 – Dados do processo de reteste da Levotiroxina (T4)

BRANCO CQB CQM CQA

Valor

Original

Valor

Reinjeção

Valor

Original

Valor

Reinjeção

Valor

Original

Valor

Reinjeção

Valor

Original

Valor

Reinjeção

73,60 73,90 83,00 83,40 162,50 170,60 242,10 246,60

73,40 75,10 82,00 83,40 167,40 170,20 236,30 237,50

73,10 73,40 84,20 83,10 165,60 170,10 242,40 246,80

72,40 74,90 84,40 84,00 163,60 170,10 233,10 237,60

74,00 73,20 81,60 83,80 160,60 167,10 238,50 247,70

73,40 73,20 84,00 84,30 164,40 170,10 237,30 238,90

72,50 73,50 82,10 83,50 167,60 166,80 240,10 248,60

72,90 73,10 81,60 80,00 160,00 173,00 236,10 241,00

Média

(ng/mL)

73,16 73,79 82,86 83,19 163,96 169,75 238,24 243,09

Variação

(%)

0,85 0,39 3,53 2,04

Tabela 12 – Dados do processo de reteste da Liotironina (T3)

BRANCO CQB CQM CQA

Valor

Original

Valor

Reinjeção

Valor

Original

Valor

Reinjeção

Valor

Original

Valor

Reinjeção

Valor

Original

Valor

Reinjeção

1,11 1,07 1,58 1,62 3,86 3,90 5,87 5,95

1,10 1,10 1,60 1,56 3,82 3,83 6,14 6,23

1,08 1,09 1,63 1,60 3,84 3,91 6,16 6,19

1,09 1,11 1,55 1,61 3,88 3,91 6,25 6,04

1,09 1,10 1,61 1,65 3,88 3,99 6,04 6,33

1,04 1,07 1,57 1,63 3,64 3,94 6,11 6,06

1,08 1,03 1,57 1,60 3,85 3,74 6,02 6,30

1,09 1,11 1,61 1,64 3,82 3,90 5,77 6,29

Média

(ng/mL)

1,09 1,09 1,59 1,61 3,82 3,89 6,05 6,17

Variação

(%)

0,00 1,49 1,73 2,13

Como se pode observar na Tabela 11 os valores de variação do processo de reteste para a

levotiroxina para os controles de qualidade baixo, médio e alto foram, respectivamente, 0,39%, 3,53%,

2,04%. Com relação valores de variação do processo de reteste para a liotironina, expostos na Tabela

12, para os controles de qualidade baixo, médio e alto foram, respectivamente, 1,49%, 1,73%, 2,13%.

Estando todos estes valores dentro do limite aceitável pela (BRASIL, 2003d).

5.2.4 Estabilidade

Para realização do estudo de estabilidade foram observados os parâmetros de exatidão,

precisão e especificidade, previamente validados.

A estabilidade do fármaco em líquidos biológicos depende de suas propriedades químicas,

da matriz biológica e do material de acondicionamento utilizado. A estabilidade determinada para um

tipo de matriz e de material de acondicionamento específico não pode ser extrapolada para outros.

As condições de realização dos ensaios de estabilidade devem reproduzir as reais

condições de manuseio e análise das amostras. Deve ser avaliada a estabilidade do analito durante a

coleta e manuseio da amostra, após armazenagem de longa duração (congelamento) e curta duração (à

temperatura ambiente), após ciclos de congelamento e descongelamento e nas condições de análise.

Deve-se incluir também avaliação da estabilidade do analito nas soluções-padrão, preparadas com

solvente apropriado e concentrações conhecidas.

As determinações de estabilidade devem utilizar um conjunto de amostras, preparadas a

partir de uma solução estoque recente do fármaco em análise, adicionado à matriz biológica isenta de

interferência. Os testes de estabilidade avaliam a estabilidade dos analitos no soro humano sobre

condições distintas de tempo e temperatura.

A estabilidade de fármacos em fluidos biológicos é função das condições de estocagem,

das propriedades químicas do fármaco, da matriz biológica (soro humano) e do sistema de

acondicionamento; os resultados dos presentes testes são relevantes somente quando as mesmas

condições destes testes são aplicadas, não podendo ser extrapoladas para outras matrizes e sistemas de

acondicionamento.

a)Estabilidade de curta duração

Os teste realizados indicam que amostras de Levotiroxina (T4) e Liotironina (T3) em soro

humano, quando descongeladas à temperatura ambiente e processadas após 24 horas, horas estas que

excedem as expectativas do tempo em que as amostras devem ser mantidas à temperatura ambiente

após o descongelamento antes de serem analisadas, não apresentam degradação significante.

A variação para a levotiroxina foi de –5,80 para as amostras baixas e –0,32 para as

amostras altas, e para a liotironina foi de 3,39 para as amostras baixas e 0,06 para as amostras altas.

Estando todos estes valores dentro do limite aceitável pela RDC 899 de 29 de maio de 2003 da Anvisa

que estabelece um limite de variabilidade menor ou igual a 15% (BRASIL, 2003d).

Tabela 13 – Resultados do Teste de Estabilidade de curta duração para amostras baixas e altas da

levotiroxina (I) e liotironina (II).

Levotiroxina (T4) ng/mL

Amostras Baixas Amostras Altas

Valor de

Referência

Após 24 horas

Valor de

Referência

Após 24 horas

81,50 84,90 248,60 248,60

82,40 87,10 248,60 248,60

81,50 85,60 248,60 248,60

81,30 85,50 244,60 248,60

81,60 88,90 248,60 248,60

Média 81,66 86,40 247,80 248,60

CV (%) 0,52 1,87 0,72 0,00

Variação (%) -5,80 -0,32

Liotironina (T3) ng/mL

Amostras Baixas Amostras Altas

Valor de

Referência

Valor de

Referência

Após 24 horas

1,72 1,65 6,19 6,11

1,71 1,65 6,27 6,36

1,73 1,69 6,16 6,22

1,69 1,64 6,33 6,24

1,70 1,63 6,21 6,21

Média 1,71 1,65 6,23 6,23

CV (%) 0,92 1,38 1,09 1,43

Variação (%) 3,39 0,06

b) Estabilidade do fármaco em ciclos de congelamento e descongelamento

Os resultados correspondentes à quantificação das amostras de levotiroxina e liotironina,

nas concentrações baixas e altas, após três ciclos de congelamento e descongelamento estão

demonstrados na Tabela 14.

A variação para a levotiroxina foi de –7,81 para as amostras baixas e –0,32 para as

amostras altas, e para a liotironina foi de 6,78 para as amostras baixas e 3,72 para as amostras altas.

Os teste realizados indicam que amostras de Levotiroxina (T4) e Liotironina (T3) em soro

humano são estáveis após três ciclos de congelamento e descongelamento, quando estocadas a -20 ºC

e descongeladas a temperatura ambiente. Estando todos estes valores dentro do limite aceitável pela

RDC 899 de 29 de maio de 2003 da Anvisa que estabelece um limite de variabilidade menor ou igual

a 15% (BRASIL, 2003d).

Durante a validação do método, tomaram parte dos estudos de estabilidade, testes

realizados em ciclos de congelamento e degelo. A oscilação de temperatura, à qual as amostras seriam

submetidas na quantificação, foi simulada através dos ciclos executados durante o desenvolvimento do

método. A finalidade destes testes foi verificar a ocorrência de degradação de uma fração significativa

da amostra.

Tabela 14 – Resultados do Teste de Estabilidade após 3 ciclos de congelamento e descongelamento

das amostras de levotiroxina (I) e liotironina (II) nas concentrações baixas e altas.

Levotiroxina (T4) ng/mL

Amostras Baixas Amostras Altas

Valor de

Referência

Após 3 ciclos

Valor de

Referência

Após 3 ciclos

81,50 88,40 248,60 248,60

82,40 87,60 248,60 248,60

81,50 87,50 248,60 248,60

81,30 88,60 244,60 248,60

81,60 88,10 248,60 248,60

Média 81,66 88,04 247,80 248,60

CV (%) 0,52 0,55 0,72 0,00

Variação (%) -7,81 -0,32

Liotironina (T3) ng/mL

Amostras Baixas Amostras Altas

Valor de

Referência

Após 3 ciclos

Valor de

Referência

Após 3 ciclos

1,72 1,54 6,19 6,00

1,71 1,62 6,27 5,89

1,73 1,60 6,16 6,04

1,69 1,59 6,33 6,05

1,70 1,62 6,21 6,02

Média 1,71 1,59 6,23 6,00

CV (%) 0,92 2,06 1,09 1,07

Variação (%) 6,78 3,72

c) Estabilidade de longa duração

A Tabela 15 apresenta os resultados das análises realizadas com amostras recém-

preparadas (a fresco) e com as amostras de longa duração, que permaneceram congeladas a –20°C, por

um período equivalente ao compreendido entre a primeira coleta e análise da última amostra (18 dias),

segundo o preconizado pela Anvisa através do Guia para Validação de Métodos Analíticos e

Bioanalíticos (BRASIL, 2003d). A variação para a levotiroxina foi de –9,09 para as amostras baixas e

0,02 para as amostras altas, e para a liotironina foi de –1,01 para as amostras baixas e 0,00 para as

amostras altas.

Tabela 15 – Resultados do Teste de Estabilidade de Longa duração das amostras de levotiroxina (I) e

liotironina (II) nas concentrações baixas e altas.

Levotiroxina (T4) ng/mL

Amostras Baixas Amostras Altas

Valor de

Referência

Após 18 dias Valor de Referência Após 18 dias

79,70 83,90 243,50 240,80

80,30 88,90 248,60 248,60

79,40 88,80 240,60 248,60

79,50 87,70 247,40 248,60

10. I

78,30 84,00 248,30 241,60

Média 79,44 86,66 245,68 245,64

CV (%) 0,91 2,91 1,42 1,65

Variação (%) -9,09 0,02

Liotironina (T3) ng/mL

Amostras Baixas Amostras Altas

Valor de

Referência

Após 18 dias Valor de Referência Após 18 dias

1,77 1,67 6,51 6,51

1,82 1,79 6,51 6,51

1,75 1,84 6,51 6,51

1,78 1,83 6,51 6,51

11. II

1,76 1,84 6,51 6,51

Média 1,78 1,79 6,51 6,51

CV (%) 1,52 4,03 0,00 0,00

Variação (%) -1,01 0,00

As variações obtidas, quando são comparados os valores médios de CQB e CQA, para as

amostras recém-preparadas, com os valores médios de CQB e CQA, para as amostras armazenadas,

durante 18 dias (período de armazenamento para o estudo de estabilidade de longa duração), estão

abaixo dos desvios permitidos de 15% para os controles analisados e, portanto, pode-se concluir que a

levotiroxina sódica, analisado no soro humano, permaneceu estável neste período em que as amostras

ficaram armazenadas a –20

C e, portanto, apresentam estabilidade de longa duração.

Estudos de estabilidade mostram se a concentração de analito presente na amostra no

momento da análise corresponde à concentração presente no momento da coleta (DADGAR et al.,

1995). As amostras utilizadas nos estudos de estabilidade devem ser comparadas com as recém-

preparadas (controles 100%) e analisadas na mesma corrida analítica. As amostras serão consideradas

estáveis quando não se observar desvio superior a 15% do valor obtido das amostras recém-

preparadas, com exceção do LQ, para o qual se aceita desvio de até 20% (BRASIL, 2003d).

A validação do método bioanalítico é um processo utilizado para garantir que um método

analítico quantitativo é sustentável para aplicações biomédicas. A validação garante que os parâmetros

de eficiências analítica, como sensibilidade, seletividade, precisão, exatidão, recuperação e

estabilidade, estão adequados ao seu uso (CAUSON, 1997).

A validação do método analítico foi realizada com sucesso, uma vez que cumpriu os

seguintes critérios:

a) Especificidade: não ocorreram interferências da matriz biológica sobre as concentrações

determinadas;

b) Precisão: os coeficientes de variação (CV) calculados para os controles de qualidade

CQB, CQM e CQA foram menores ou iguais a 15% e menores ou iguais a 20% para o

controle de qualidade LQ;

c) Exatidão: a exatidão calculada para o controle de qualidade LQ e para os controles de

qualidade CQB, CQM e CQA apresentaram valores compreendidos dentro do desvio

de + 20% e + 15%, respectivamente, em relação ao valor nominal.

5.3 Análise estatística/farmacocinética

A análise estatística foi realizada considerando os resultados obtidos a partir das

concentrações séricas de Levotiroxina Sódica (T4) e Liotironina (T3) no soro dos voluntários.

Segundo o FDA (2002) uma das propostas dos estudos de bioequivalência é demonstrar a

equivalência terapêutica, especificamente através da avaliação da biodisponibilidade entre

medicamentos, assegurando que caso esses sejam bioequivalentes, um pode substituir o outro sem

nenhuma medida de correção de posologia ou necessidade de monitorização terapêutica. Embora não

seja evidente clinicamente, a avaliação farmacocinética é a única base para determinação da eficácia

terapêutica.

As Figuras 9 e 10 representam a curvas médias das concentrações séricas de Levotiroxina

sódica dos 24 voluntários versus tempo. Com ela obtemos uma representação gráfica dos processos

farmacocinéticos de absorção e excreção dos fármacos. No ANEXO VII estão apresentados os

gráficos das curvas de concentrações versus o tempo e os parâmetros farmacocinéticos para cada

indivíduo.

0 10 20 30 40 50

100

110

120

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Figura 9-Curva média da concentração sérica (ng/mL) versus tempo (h) da levotiroxina após a

administração de duas formulações de 600 µg de Levotiroxina sódica em 24 voluntários saudáveis.

0 10 20 30 40 50

0.90

0.92

0.94

0.96

0.98

1.00

1.02

1.04

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Figura 10-Curva média da concentração sérica (ng/mL) da Liotironina versus tempo (h) após a

administração de duas formulações de 600 µg de Levotiroxina sódica em 24 voluntários saudáveis.

O órgão responsável pelo controle de medicamentos no Brasil, Agência Nacional de

Vigilância Sanitária – Anvisa, determina que o cronograma de coletas das amostras sanguíneas deverá

incluir o maior número possível de amostras na região próxima à concentração máxima atingida (C

max

)

possibilitando a determinação deste parâmetro com maior exatidão; a determinação de amostras

anteriores e posteriores ao C

max

possibilitará a determinação da área sob a curva de concentração

sangüínea versus tempo – ASC (BRASIL, 2003a).

Os voluntários permaneceram em jejum durante as 10 horas que antecederam a

administração da medicação, pois, segundo Fish et al. (1987), quando a levotiroxina é administrada em

jejum sua taxa de absorção oscila em torno de 80%. Com relação ao pico de concentração plasmática

da levotiroxina, este é atingido em torno de 2 a 4 horas após sua ingestão, fato que fundamenta a

Liotironina (ng/mL)

ingestão de alimentos sólidos somente depois de quatro horas da administração da droga (SANTINI;

PINCHERA; MARSILI, 2005).

A dose administrada aos voluntários foi de 600µg de levotiroxina sódica suficiente para

fornecer concentrações séricas superiores ao valor basal e conseqüentemente possibilitar a segura

mensuração das mesmas, sem implicar em riscos e desconfortos para os voluntários. Mesmo assim, os

níveis endógenos de T4 continuam contribuindo para a ASC (BERG; MAYOR, 1993).

Segundo Marzo (1995) existem algumas dificuldades em se mensurar parâmetros

farmacocinéticos de substâncias endógenas, visto que essas possuem ritmos específicos, podem ter

flutuações diárias em suas concentrações e podem apresentar importantes diferenças entre os sexos.

No caso específico da levotiroxina sódica, soma-se a essas dificuldades o fato do composto sintético

ser bioquimica e fisiologicamente indistinguível do composto endógeno.

Embora alguns autores, Blakesley, Awni, Locke e colaboradores (2004) sugiram a

subtração da linha basal endógena desses compostos, essa medida implicaria, conseqüentemente em:

aumento da dispersão dos dados; surgimento de um efeito de período, visto que os valores basais não

são unicamente atribuídos a períodos e sim a sujeitos; e a impossibilidade de uma correta extrapolação

da ASC para o infinito, visto que o ponto final não poderá ser zero (MARZO, 1995).

Corroborando com as observações de Marzo (1995), as diretrizes da Food and Drug

Administration determinam que as mensurações dos perfis das concentrações séricas dos hormônios

T3 e T4 totais ( fração livre mais ligada) devem ser apresentadas sem o ajuste dos níveis basais, uma

vez que as concentrações da levotiroxina endógena são imprevisíveis durante o decorrer do dia (FDA,

2000a).

Neste estudo para a realização do cálculo dos parâmetros farmacocinéticos da levotiroxina

e da liotironina nós optamos por não efetuar a subtração de seus valores endógenos de T3 e T4

respectivamente, por estarmos de acordo com as declarações defendidas por Marzo (1995), pelo FDA

(2000a).

Conforme Walter-Sack, Clanget, Ding e colaboradores (2004) uma simples subtração dos

valores basais acarretaria no aumento dos erros estatísticos dos resultados, resultando em uma menor

precisão. Porém se for estabelecido um método de ajuste dos valores basais mediante um modelo de

covariante, a análise será mais precisa e viável. Sendo que o ajustamento dos valores endógenos de T3

e T4 seria mais eficaz na análise da ASC, pois valores de área são mais sensíveis as variações de

concentrações do que valores máximos como C

max.

Uma covariante basal é freqüentemente definida como um fator qualitativo ou uma

variável quantitativa mensurada ou observada antes da administração do fármaco (normalmente antes

da randomização) que influencia a variável primária a ser analisada (COMMITTE FOR

PROPRIETARY MEDICINAL PRODUCTS, 2003). Essa covariante seria uma ferramenta estatística

que minimizaria ou até mesmo eliminaria as variações pertinentes a substâncias endógenas.

Para avaliar as variações inter (seqüência) e intra-individual (período) para a concentração

máxima e a área sob a curva, utilizou-se de uma análise de variância para obter a variabilidade dos

dados, em um delineamento cruzado padrão 2x2. Os resultados da levotiroxina demonstraram que para

os parâmetros farmacocinéticos Cmax, ASC

0-48h

o efeito de seqüência não foi significante (valor de p

= 0,9854 para Cmax e valor de p = 0,5167 para ASC

0-48h

); entretanto o efeito de período foi

significante (valor de p = 3,364 e

-7

) para Cmax e (valor de p = 3,116 e

-14

) para ASC

0-48h,

pois houve

uma diminuição dos valores de T4 nestes parâmetros farmacocinéticos no segundo internamento

(ANEXO H).

O efeito de seqüência reflete diferenças envolvendo a variabilidade individual entre os

voluntários randomizados; conforme Dong et al. (1997), essas diferenças não têm importância clínica

em estudos de bioequivalência. Uma vez que os voluntários selecionados obedecem a uma rigorosa

seleção e encontram-se dentro dos critérios clínicos de normalidade.

De forma semelhante à levotiroxina, os resultados de C

max

, e ASC

0-48 h

da liotironina

evidenciam que o efeito de seqüência também não foi significante (valor de p = 0,4762 para C

max

, e

valor de p = 0,4748 para ASC

0-48h

), logo a variação inter-individual não interferiu de modo

significativo nos valores encontrados para C

max

e para ASC

(0-48h)

. Entretanto o efeito de período foi

significante (valor de p = 1,358 e

-9

) para C

max

, e (valor de p = 9,705 e

-13

) para ASC

0-48 h

, sendo também

observado, no segundo internamento, uma redução de C

max

e ASC

0-48 h

de T3 (ANEXO A).

Os resultados da análise de variância (ANOVA) da Levotiroxina demonstraram um

significante efeito de período, onde se observou uma diminuição dos níveis séricos do T4, no segundo

internamento, independente da aleatorização. Deve ser ressaltado que todos os voluntários respeitaram

o período correto de "washout", de 35 dias, conforme o protocolo recomendado pelo Food and Drug

Administration (FDA, 2000a).

Esse efeito pode ser explicado pela supressão de TSH em decorrência da administração de

levotiroxina exógena, deste modo a redução na síntese de TSH acarretaria numa menor estimulação da

tireóide e conseqüentemente diminuição dos níveis séricos do hormônio T4 endógeno. Desta forma a

secreção endógena de T4 sofre um declínio relevante como uma conseqüência dos efeitos sistêmicos

da levotiroxina exógena (WALTER-SACK et al.; CLANGET; DING. et al., 2004).

Nas Tabelas 16 e 17 podemos observar que não houve alterações significativas entre o

max

e a ASC

(0-48h)

de ambos os analitos, T4 e T3, das formulações teste e referência quando

consideramos isoladamente cada fase de internamento. Todavia quando esta análise envolve a

comparação desses parâmetros farmacocinéticos entre a 1ª e a 2ª fase, pode-se destacar uma redução

significativa dos resultados no segundo internamento. Contudo, as diferenças entre as ASC

(0-48h)

são

mais relevantes, pois essa medida representa valores referentes a vários pontos, enquanto que o C

max

representa um valor pontual. E segundo Walter-Sack, Clanget, Ding e colaboradores (2004) um valor

máximo é menos sensível a variações de concentrações do que áreas.

Tabela 16 – Parâmetros farmacocinéticos (

± DP) da levotiroxina obtidos após a administração de

duas formulações de 600µg de Levotiroxina sódica.

1ª FASE 2ª FASE

TESTE REFERÊNCIA TESTE REFERÊNCIA

max

(ng.mL

-1

)

127,53 ± 17,44 135,41 ± 9,25 103,96 ± 11,90 110,75 ± 12,59

ASC

0-48h

(ng.h.mL

-1

)

4806,64 ± 581,91 4922,33 ± 517,66 2923,85 ± 574,86 2800,22 ± 390,71

Tabela 17 – Parâmetros farmacocinéticos (

± DP) da liotironina obtidos após a administração de

duas formulações de 600µg de Levotiroxina sódica.

1ª FASE 2ª FASE

TESTE REFERÊNCIA TESTE REFERÊNCIA

max

(ng.mL

-1

)

1,23 ± 0,10 1,00 ± 0,14 1,17 ± 0,15 1,01± 0,10

ASC

0-48h

(ng.h.mL

-1

)

54,00 ± 4,99 50,67 ± 5,90 40,89 ± 4,49 40,91± 3,80

Conforme Walter-Sack et al. (2004) o efeito de período em um estudo de

biodisponiblidade de substâncias endógenas poderia ser atribuído à variação sazonal, pois é observado

que indivíduos saudáveis habitantes das mais diversas regiões geográficas do planeta, apresentam

níveis mais altos de T4 no inverno, enquanto níveis mais baixos de T4 são detectáveis durante a

estação mais quente, o verão. Essa redução de T4 nos períodos mais quentes do ano é responsável pela

diminuição da taxa de metabolismo basal e conseqüentemente por uma maior tolerância ao calor,

enquanto que a elevação de seus níveis em períodos mais frios se justifica pela necessidade do

organismo em se manter aquecido através do aumento da taxa de metabolismo basal. Todavia neste

estudo, como a realização da etapa clínica aconteceu em um pequeno intervalo de tempo,

aproximadamente 40 dias, não podemos atribuir o efeito de período constatado a uma variação

sazonal.

Nas Tabelas 18 e 19 estão apresentados os parâmetros farmacocinéticos médios, usando

um intervalo de confiança de 90%, obtidos das concentrações séricas de levotiroxina e liotironina;

após a administração das formulações referência (Puran®T4) e teste (Levotiroxina sódica). Pode-se

notar que os resultados obtidos para os medicamentos referência e teste são semelhantes, tanto para a

média como para o IC (90%). Para o produto referência foram utilizados 23 voluntários no cálculo da

média e IC (90%), o valor ausente corresponde ao voluntário 10 que não compareceu na segunda fase

da pesquisa.

Tabela 18 – Média, DP e IC (90%) dos parâmetros farmacocinéticos da levotiroxina obtidos após a

administração de duas formulações de 600µg de Levotiroxina sódica.

Formulação

Parâmetros Farmacocinéticos

Puran

(Referência)

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Média (valor n)

3907,41 (23) ± 6,41,42 3865,25 (24) ± 1115,68

ASC

0-48h

(ng.h.mL

-1

)

(IC 90%)

(3487,07 – 4327,74) (3474,93 – 4255,56)

Média (valor n)

123,62 (23) ± 16,54 115,74 (24) ± 18,92

max

(ng.mL

-1

)

(IC 90%)

(117,70 – 129,54) (109,12 – 122,36)

Média

3,11 (23) ± 1,34 4,11(23) ± 2,63

max

(h)

(IC 90%)

(2,59 – 3,54) (2,67 – 9,21)

Tabela 19 – Média, DP e IC (90%) dos parâmetros farmacocinéticos da liotironina obtidos após a

administração de duas formulações de 600µg de Levotiroxina sódica.

Formulação

Parâmetros Farmacocinéticos

Puran

(Referência)

Liotironina

(Teste)

Média (valor n)

46,00 (23) ± 7,02 47,44 (24) ± 8,15

ASC

0-48h

(ng.h.mL

-1

)

(IC 90%)

(43,50 – 48,50) (44,59 – 50,29)

Média (valor n)

1,09 (23) ± 0,15 1,12 (24) ± 0,17

max

(ng.mL

-1

)

(IC 90%)

(1,04 – 1,15) (1,06 – 1,18)

Média

7,66 (23) ± 9,67 12,17 (24) ± 16,37

max

(h)

(IC 90%)

(4,20 – 11,11) (6,44 – 17,90)

De maneira semelhante ao estudo desenvolvido por Cerutti et al. (1999), os valores de T

max

tanto para a levotiroxina como para a liotironina demonstraram em alguns casos grandes diferenças

(ANEXO G), entretanto segundo Marzo (1993), o pico de tempo em que se atinge a concentração

máxima não é tão relevante, tendo em vista que as concentrações desses hormônios não apresentam

padrões de picos séricos bem definidos.

Para a levotiroxina as razões das médias geométricas do C

max

e ASC

0-48h

das formulações

teste e referência

foram 92,97% e 97,87%, respectivamente. O intervalo de confiança de 90% foi de

88,70– 97,44% e 93,10 - 102,88%, respectivamente. Com relação a liotironina as razões das médias

geométricas do C

max

e ASC

0-48h

das formulações teste e referência

foram 101,37% e 101, 85%,

respectivamente. O intervalo de confiança de 90% foi de 98,46 – 104,37% e 99,13 – 104,64%,

respectivamente.

Formulações farmacêuticas são consideradas bioequivalentes quando a razão das médias

de C

max

e ASC

(0-48h)

apresentarem-se entre 80–125% (considerando um intervalo de confiança de 90%)

(FDA, 2002). Os resultados estatísticos demonstraram que a formulação de levotiroxina sódica teste

foi bioequivalente à formulação Puran® T4 quanto à taxa (C

max

) e extensão de absorção (ASC) após

uma dose única de 600μg por via oral, conforme pode ser observado nas Tabelas 20 e 21.

Tabela 20 – Avaliação de biodisponibilidade a partir da razão das médias de C

max

e ASC

0-48 h

Levotiroxina (T4). Dados transformados em logaritmo natural.

Razão: Levotiroxina

Sódica/ Puran

Média

Geométrica

IC (90%) CV (%) Poder

do Teste

(%)

Bioequi-

valência

max

*(ng.mL

-1

)

92,97 (88,70 – 97,44) 9,24 > 95,00 SIM

ASC

0-48h

(ng.h.mL

-1

)

97,87 (93,10 – 102,88) 9,82 > 95,00 SIM

*O voluntário 10 não foi utilizado no cálculo do IC (90%)

Tabela 21 – Avaliação de biodisponibilidade a partir da razão das médias de C

max

e ASC

0-48 h

Liotironina (T3). Dados transformados em logaritmo natural.

Razão: Liotironina/ Puran

Média

Geométrica

IC (90%) CV (%) Poder

do Teste

(%)

Bioequi-

valência

max

*(ng.mL

-1

)

101,37 (98,46 – 104,37) 5,66 > 95,00 SIM

ASC

0-48 h

*(ng.h.mL

-1

)

101,85 (99,13 – 104,64) 5,30 > 95,00 SIM

* O voluntário 10 não foi utilizado no cálculo do IC (90%).

6 CONSIDERAÇÕES FINAIS

As formulações de levotiroxina nas doses utilizadas (600μg) demonstraram boa

tolerabilidade por parte dos voluntários, bem como segurança terapêutica, visto que não acarretaram

reações adversas graves.

A metodologia analítica foi considerada adequada para a determinação das concentrações

séricas de levotiroxina e liotironina, uma vez que se mostrou precisa, exata, específica e reprodutível.

A redução dos níveis de TSH após a administração das formulações de 150 μg de

levotiroxina sódica, na dose de 600 μg, em indivíduos saudáveis demonstra indiretamente a eficácia

terapêutica desses fármacos.

A análise dos parâmetros farmacocinéticos da levotiroxina e da liotironina após a

administração de duas formulações de 150μg em voluntários sadios mostrou que as formulações

estudadas apresentaram resultados semelhantes que estão de acordo com as especificações das

agências reguladoras (FDA e ANVISA), que estipulam que a razão entre as médias de C

max

e de ASC

48th

situam-se entre 80 e 125% com um intervalo de confiança de 90%.

7 CONCLUSÃO

As formulações estudadas, sob a forma de comprimidos de 150μg de levotiroxina sódica,

apresentaram biodisponibilidades semelhantes, quando administradas em dose única de 600μg, por via

oral a voluntários sadios; sendo então consideradas bioequivalentes.

Com base nos resultados observados sugere-se que os protocolos de biodisponibilidade

sejam desenvolvidos através de delineamentos paralelos, visando eliminar efeito de período e incluam

a determinação de TSH como parâmetro indireto de eficácia terapêutica.

Nossos resultados demonstraram que a administração da formulação Teste (Levotiroxina)

e Referência (Puran®T4) apresentam equivalência de velocidade e intensidade de absorção de T3 e T4

e, dessa forma as duas formulações podem ser consideradas bioequivalentes.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

BRASIL. Ministério da Saúde. Agencia Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução da diretoria

colegiada da Anvisa (RDC) nº 135, de 29 de maio de 2003. Estabelece regulamento técnico para

medicamentos genéricos. Diário Oficial [da] República Federativa do Brasil, Poder Executivo,

Brasília, DF, 2 jun. 2003a.

BRASIL. Ministério da Saúde. Agencia Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução da diretoria

colegiada da Anvisa (RDC) nº 896, de 29 de maio de 2003. Estabelece guia para provas de

biodisponibilidade relativa/bioequivalência de medicamentos. Diário Oficial [da] República

Federativa do Brasil, Poder Executivo, Brasília, DF, 2 jun. 2003b.

BRASIL. Ministério da Saúde. Agencia Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução da diretoria

colegiada da Anvisa (RDC) nº 898, de 29 de maio de 2003. Estabelece guia para planejamento e

realização da etapa estatística de estudos de biodisponibilidade relativa/bioequivalência de

medicamentos. Diário Oficial [da] República Federativa do Brasil, Poder Executivo, Brasília, DF, 2

jun. 2003c.

BRASIL. Ministério da Saúde. Agencia Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução da diretoria

colegiada da Anvisa (RDC) nº 899, de 29 de maio de 2003. Estabelece guia para validação de métodos

analíticos e bioanalíticos. Diário Oficial [da] República Federativa do Brasil, Poder Executivo,

Brasília, DF, 2 jun. 2003d.

BENETT, L. Z. Understanding bioequivalence testing. Transplant. Proc., v. 31, Suppl 3A, p. 7S-9S,

1999.

BERG, J. A. Q.; MAYOR, G. A. apud CERUTTI, R.; RIVOLTA, G.; CAVALIERI, L.; DI GIULIO,

C.; VAGO, T.; BALDI, G.; VELELLA, R.; MARZO. A. Bioequivalence of levothyroxine tablets

administered to a target population in steady state. Pharmacol. Res., v. 39, n. 3, p. 193-201, 1999.

BERNE, R. M.; LEVI, M. N.; KOEPPEN, B. M.; STANTON, B. A. Fisiologia. 5. ed. Rio de Janeiro:

Elsevier, 2004.

BLAKESLEY, V.; AWNI, W.; LOCKE, C.; LUDDEN, T.; GRANNEMAN, G. R.; BRAVERMAN,

L. E. Are bioequivalence studies of levothyroxine sodium formulations in euthyroid volunteers

reliable? 2004. Disponível em :<

www. medscape.com/viewarticle/472917.>. Acesso em: 25 abr.

2005.

BODE, H. M.; VAMJONACK, W. J.; CRAWFORD, J. D. apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs.

2nd

ed. London: Churchill Livingstone, 1999. p. L49-L52.

BRENTA, G.; SCHNITMAN, M.; FRETES, O.; FACCO, E.; GURFINKEL, M.; DAMILANO, S.;

PACENZA, N.; BLANCO, A.; GONZALEZ.; PISAREV, M. A. Comparative efficacy and side effects

of treatment of euthyroid goiter with levo-thyroxine or triiodothyroacetic acid. J. Clin. Endocrinol.

Metab., v. 88, n. 11, p. 5287-5292, 2005.

BURGER, A.; DINICHERT, D.; NICOD, P. apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs. 2nd

ed.

London: Churchill Livingstone, 1999.p. L49-L52.

CANARIS, G.; MANOWITZ, N.; MAYOR, G.; RIDGWAY, C. The Colorado thyroid disease

prevalence study. Arch. Intern Med., v. 160, p. 526-534, 2000.

CAUSON, R. Validation of chromatographic methods in biomedical analysis. Viewpoint and

discussion. J. Chromatogr. B, v. 689, p. 175-180, 1997.

CERUTTI, R.; RIVOLTA, G.; CAVALIERI, L.; DI GIULIO, C.; VAGO, T.; BALDI, G.; VELELLA,

R.; MARZO. A. Bioequivalence of levothyroxine tablets administered to a target population in steady

state. Pharmacol. Res., v. 39, n. 3, p. 193-201, 1999.

CHAST, F. História contemporânea dos medicamentos. Editions la Decouverte, 1995.

COHEN, A.; POSNE, J. A guide to Clinical Drug Research. 1st ed. London: Kluwer Academic

Publishers, 2000.

COMMITTEE FOR PROPRIETARY MEDICINAL PRODUCTS (CPMP). Points to consider on

adjustment for baseline covariates. Disponível em

:<www.emea.eu.int/pdfs/human/ewp/286399en.pdf.>. Acesso em: 10 July 2005.

CONNER, D. apud HENNESSEY, J. V. Precise thyroxine dosing: clinical requirements. The

Endocrinologist, v. 13, p. 479-487, 2003.

CONSTANZO, L. Fisiologia. Rio de Janeiro: Elsevier, 2004.

COSTIGAN, D. C.; FREEDMAN, M. H.; EHLICH, R. M. apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs.

2nd

ed. London: Churchill Livingstone, 1999. p. L49-L52.

CRAMER, A. Patient compliance in medical practice and clinical trials. Philadelphia: Lippincott

Williams & Wilkins, 1996.

DADGAR, D.; BURNETT, P. E.; CHOC, M. G.; GALLICANO, K.; HOOPER, J. W. Application

issues in bioanalytical method validation, sample analysis and data reporting. J. Pharm. Biomed.

Anal., v. 13, p. 89, 1995.

DAVIES, A.; BLAKELEY, A. G. H.; KIDD, C. Fisiologia humana. Porto Alegre: Art Med, 2002.

DEGROOT, L. J.; HENNEMANN, G. Thyroid disease manager. 2002. Disponível em:<

http://www.thyroiddiseasemanager.org>. Acesso em: 24 jun. 2005.

DOLLERY, C. Therapeutic drugs. 2nd

ed. London: Churchill Livingstone, 1999.

DONG, B. J.; HAWCK, W. W.; GAMBERTOGLIO, J. G.; GEE, L.; WHITE, J. R.; BUBP, J. L.;

GREENSPAN, F. S. apud CERUTTI, R.; RIVOLTA, G.; CAVALIERI, L.; DI GIULIO, C.; VAGO,

T.; BALDI, G.; VELELLA, R.; MARZO. A. Bioequivalence of levothyroxine tablets administered to

a target population in steady state. Pharmacol. Res., v. 39, n. 3, p. 193-201, 1999.

DORIA FILHO, U. Introdução à bioestatística: para simples mortais. 3. ed. São Paulo: Negócio

Editora, 1999. 158 p..

ESCALANTE, D. A.; AREM, N.; AREM, R. apud PERAN, S., GARRICA, M. J., ESCOBAR, M.;

ASUNCIÓN, M.; PERAN, M. Increase in plasma thyrotropin levels in hypothyroid patients during

treatment due to a defect in the commercial preparation. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 82, n. 10, p.

3192-3195, 2005

EVERED, D. A.; YOUNG, E. T.; ORMSTON, B. J. T apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs. 2nd

ed. London: Churchill Livingstone, 1999. p. L49-L52.

FABER, J.; GALLOE, A. M. Changes in bone mass during prolonged subclinical hyperthyroidism due

to L-thyroxine treatment: a metaanalysis. Eur. J. Endocrinol., n.130, p. 350-356, 1998.

FACLAND, M.; FACKLAND, H. Healing drugs: The history of pharmacology. New York: Facts on

File Inc., 1992.

FERREIRA, A. W.; ÁVILA, S. L. M. Diagnóstico laboratorial. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan,

1996.

FISH, L. H.; SCHWARTZ, H. L.; CAVANAUGH, J.; STEFFES, M. W.; BANTLE, J. P.;

OPPENHEIMER, J. H. apud SANTINI, F.; PINCHERA. A.; MARSILI, A.; CECCARINI, G.;

CASTAGNA, M. G.; VALERIANO, R.; GIANNETTI, M.; TADDEI, D.; CENTONI, R.;

SCARTABELLI, G.; RAGO, T.; MAMMOLI, C.; ELISEI. R., VITTI, P. Lean body mass is a major

determinant of levothyroxine dosage in the treatment of thyroid diseases. J. Clin. Endocrinol.

Metab., v. 90, n. 1, p. 124-127, 2005.

FOOD AND DRUG ADMINISTRATION (FDA). General considerations for The clinical

evaluation of drugs. [S.l]: U.S. Department of Health, Education and Welfare, 1997.

_____. Guidance for industry: Levothyroxine Sodium Tablets: in vivo pharmacokinetic and

bioavailability studies and in vitro dissolution testing. [S.l]: U. S. Department of Health and Human

Services, 2000a.

_____. Guidance for industry: bioavailability and bioequivalence studies for orally administered

drug products. [S.l]: U. S. Department of Health and Human Services. 2002. p. 1-24. Disponível em:

www.fda.gov/cder/guidance/index.htm.>. Acesso em: 20 June 2005.

_____. Unithryoid information. [S.l.]: U. S. Department of Health and Human Services, 2000b.

Disponível em:< www.fda.gov/cder/drug/infopage/unithroid/unithroid.htm>. Acesso em: 20 June

2005.

FULLERTON, J. T.; SADLER, G. R. Ethical considerations related to the inclusion of women in

clinical trials. J. Midwifery Womens Health, v. 49, n. 3, p. 194-202, May/June 2004.

GIBALDI, M. Biopharmaceuticals and clinical pharmacokinetics. 4

ed. Philadelphia: Lea &

Febiger, 1991.

GILKISON, C. R. Thyrotoxicosis recognition and management. Lippincott's Prim. Care Pract., v. 1,

n. 5 , p. 485-498, Nov./Dec. 1997.

GOODMAN, L. S.; GILMAN, A. As bases farmacológicas da terapêutica. 10. ed.. Rio de Janeiro:

MacGraw-Hill, 2003.

GORDON, R. Assustadora história da medicina. São Paulo: Ediouro, 1997.

GRAHAME-SMITH, D.; ARONSON, J. K. Oxford textbook of clinical pharmacology and drug

therapy. 3rd ed. Oxford: Oxford University Press, 2002.

GRANDY, J.; JOUBERT, P. Handbook of phase I/II clinical drug trials. New York: CRB Press,

1997.

GUYTON, A. C.; HALL, J. E. Fisiologia humana e mecanismos de doenças. 6. ed. Rio de Janeiro:

Guanabara Koogan, 1998.

GUZZO, G. C.

Perfil dos eventos adversos registrados nos estudos de bioequivalência realizados

na unidade de farmacologia clínica no período de 2000 a 2003. 2004. 116 f. Dissertação

(Mestrado)-Faculdade de Medicina,Universidade Federal do Ceara, Fortaleza, 2004.

HARINGTON, C. R. apud CERUTTI, R.; RIVOLTA, G.; CAVALIERI, L.; DI GIULIO, C.; VAGO,

T.; BALDI, G.; VELELLA, R.; MARZO. A. Bioequivalence of levothyroxine tablets administered to

a target population in steady state. Pharmacol. Res., v. 39, n. 3, p. 193-201, 1999.

HARINGTON, C. R.; BARGER, G. apud CERUTTI, R., RIVOLTA, G., CAVALIERI, L., DI

GIULIO, C., VAGO, T., BALDI, G., VELELLA, R., MARZO. A. Bioequivalence of levothyroxine

tablets administered to a target population in steady state. Pharmacol. Res., v. 39, n. 3, p. 193-201,

1999.

HARVERY, R. F. apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs. 2nd

ed. London: Churchill Livingstone,

1999. p. L49-L52.

HENNESSEY, J. V.; EVAUL, J. E.; TSENG, Y. C.; BURMAN, K. D.; WARTOFSKY, L. apud

PERAN, S.; GARRICA, M. J.; ESCOBAR, M.; ASUNCIÓN, M.; PERAN, M. Increase in plasma

thyrotropin levels in hypothyroid patients during treatment due to a defect in the commercial

preparation. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 82, n. 10, p. 3192-3195, 2005.

HILL, H. Proceedings of analytical validation: a practical approach to meet current regulatory

requirements. London: Management Forum, 1994.

HORNINGER, D.; EIRIKIS, E.; PENDLEY, C.; GILES-KOMAR, J.; DAVIS, H. M.; MILLER, B. E.

A one-step, competitive electrochemiluminescence-based immunoassay method for the quantification

of a fully human anti-TNFα antibody in human serum. J. Pharm. Biomed. Anal., v. 38, n. 4, p. 703-

708, July 2005.

HOWARD, C. A.; NICHOLAS, G. P.; LLOYD, V. A. J. R. Pharmaceutical dosage forms and drug

delivery systems. 6th ed. Philadelphia: Premier, 2000.

HULLEY, S. B.; CUMMINGS, S. R.; BROWNER, W. S.; GRADY, D.; HEARST, N.; NEWMAN, T.

B. Delineando a pesquisa clínica: uma abordagem epidemiológica. 2. ed. Porto Alegre: Artmed,

2003.

KATZ, M.; ROSEN, D. L.; WARTOFSKY, L. Issues in bioequivalence and therapeutic equivalence

of levothyroxine products. U. S. Pharmacist, p. 1-12, 2003. Disponível em:

<www.uspharmacist.com/print.asp?page=ce/2915/default.htm>. Acesso em: 20 maio 2005.

KENDALL, E. C. apud CERUTTI, R.; RIVOLTA, G.; CAVALIERI, L.; DI GIULIO, C.; VAGO, T.;

BALDI, G.; VELELLA, R.; MARZO. A. Bioequivalence of levothyroxine tablets administered to a

target population in steady state. Pharmacol. Res., v. 39, n. 3, p. 193-201, 1999.

KUMALA, S.; HAKANSSON, M.; SPEHAR, A.– M.; NYMAN, A.; KANKARE, J.; LOIKAS, K.;

ALA-KLEME, T.; ESKOLA, J. Heterogeneous and homogeneous electrochemiluminoimmunoassays

of hTSH at disposable oxide-covered aluminum electrodes. Anal. Chim. Acta, v. 458, p. 271-280,

2002.

LAMBERG, B. A.; RANTANEN, M.; SAARINEN, P. apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs. 2nd

ed. London: Churchill Livingstone, 1999. p. L49-L52.

LANDIS, S. E.; COLLINS, L. J. How should thyroid replacement be initiated? J. Fam. Pract., v. 53,

n. 11, p. 925-926, Nov. 2004.

LARSEN, P. R.; DAVIES, T. F.; HAY, I. D. The thyroid gland. In: WILSON J. D.; FOSTER, D. W.;

KRONENBER, H. M.; LARSEN, P. R. Williams textbook of endocrinology. 9th ed. Philadelphia:

Saunders, 1998. p. 389-515.

LIEL, Y.; HARMAN-BOEHM, I.; SHANY, S. apud PERAN, S., GARRICA, M. J.; ESCOBAR, M.;

ASUNCIÓN, M.; PERAN, M. Increase in plasma thyrotropin levels in hypothyroid patients during

treatment due to a defect in the commercial preparation. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 82, n. 10, p.

3192-3195, 2005.

LLOYD, J. Clinical trial design In: LLOYD, J.; RAVEN, A. Handbook of clinical research. 2nd ed.

London: Churchill Livingstone, 1994.

LLOYD, J.; RAVEN, A. Handbook of clinical research. 2nd ed. New York: Churchill Livingstone,

2004.

LOCK, S. T.; WELLS, F. (Ed.). Fraud and misconduct in medical research. London: BMJ, 1993.

MASSART, D. L.; ANDEGINSTE, B. G. M.; DEMING, S. N.; MICHOTTE, Y.; KAUFMAN, L.

Chemometrics a textbook. New York: Elsevier, 1988.

MARZO, A. Open questions in bioequivalence. Pharmacol. Res., v. 32, n. 4, p. 237-240, 1995.

MARZO, A.; RESCIGNO, A. apud CERUTTI, R.; RIVOLTA, G.; CAVALIERI, L.; DI GIULIO, C.;

VAGO, T.; BALDI, G.; VELELLA, R.; MARZO. Bioequivalence of levothyroxine tablets

administered to a target population in steady state. Pharmacol. Res., v. 39, n. 3, p. 193-201, 1999.

MELMED, S.; NADEMANEE, K.; ALLEN, K. W. apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs. 2nd

ed.

London: Churchill Livingstone, 1999. p. L49-L52.

MENDEL, C. M. apud GOODMAN, L. S.; GILMAN, A. As bases farmacológicas da terapêutica.

10. ed. Rio de Janeiro: MacGraw-Hill, 2003.

MOFFAT, A. C.; OSSELTON, M. D.; WIDDOP, B. Clark’s analysis of drugs and poisons. 3rd ed.

Londres: Pharmaceutical Press, 2004.

MORAES, M. E. A.; MORAES, M. O. Ensaios clínicos de medicamentos no Brasil. Fármacos e

Medicamentos, v. 6, n. 1, p. 35-40, 2000.

NEWMARK, S. R.; HIMATHONGKAM, T.; SHANE, J. M. apud DOLLERY, C. Therapeutic

drugs. 2nd

ed. London: Churchill Livingstone, 1999. p. L49-L52.

NORTHCUTT, R. C.; STIEL, J. N.; STANG, E. G. apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs. 2nd

ed.

London: Churchill Livingstone, 1999. p. L49-L52.

OPPENHEIMER, J. H.; BRAVERMAN, L. E.; TOFT, A.; JACKSON, I. M.; LADENSON, P. W.

apud PERAN, S.; GARRICA, M. J.; ESCOBAR, M.; ASUNCIÓN, M.; PERAN, M. Increase in

plasma thyrotropin levels in hypothyroid patients during treatment due to a defect in the commercial

preparation. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 82, n. 10, p. 3192-3195, 2005.

PEARCH, C. J.; HIMSWORTH, R. L. apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs. 2nd

ed. London:

Churchill Livingstone, 1999. p. L49-L52.

PEREIRAS, C.; HORTA, C. Gravidez e tireóide. Acta Méd. Port., v. 16, p. 329-331, 2003.

PIMENTEL, L. ; HANSEN, K. N. Thyroid disease in the emergency department : a clinical and

laboratory review. J. Emerg. Med., v. 28, n. 2, p. 201-209, Feb. 2005.

POCOCK, S. J. Clinical trials: a practical approach. Londres, 1987.

ROBERTS, C. G.; LADENSON, P. W. Hypothyroidism. The Lancet, v. 363, n. 9411, p. 793-803,

Mar. 2004.

ROCHON, P. A.; BERGER, P. B.; GORDON, M. The evolution of clinical trials: inclusion and

representation CMAJ, v. 159, n. 11, p. 1373-1374, Dec. 1998.

ROSS, D. S. apud: PIMENTEL, L.; HANSEN, K. N. Thyroid disease in the emergency department : a

clinical and laboratory review. J. Emerg. Med., v. 28, n. 2, p. 201-209, Feb. 2005.

SAKATA, S.; NAKAMURA, S.; MIURA, K. apud PERAN, S.; GARRICA, M. J.; ESCOBAR, M.;

ASUNCIÓN, M.; PERAN, M. Increase in plasma thyrotropin levels in hypothyroid patients during

treatment due to a defect in the commercial preparation. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 82, n. 10, p.

3192-3195, 2005.

SANTINI, F.; PINCHERA, A.; MARSILI, A.; CECCARINI, G.; CASTAGNA, M. G.;

VALERIANO, R.; GIANNETTI, M.; TADDEI, D.; CENTONI, R.; SCARTABELLI, G.; RAGO, T.;

MAMMOLI, C.; ELISEI. R.; VITTI, P. Lean body mass is a major determinant of levothyroxine

dosage in the treatment of thyroid diseases. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 90, n. 1, p. 124-127,

2005.

SARAVANAN, P.; DAWN, J. S.; GREENWOOD, R.; PETERS, T. J.; DAYAN, C. M. Partial

substitution of Thyroxine (T4) with Tri-iodothyronine in patients on T4 replacement therapy: results

of a large community-based randomized controlled trial. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 90, n. 2, p.

805-812, 2005.

SAWIN, C. T.; SURKS, M. I.; LONDON, M.; RANGANATHAN, C.; LARSEN, P. R. apud PERAN,

S.; GARRICA, M. J.; ESCOBAR, M.; ASUNCIÓN, M.; PERAN, M. Increase in plasma thyrotropin

levels in hypothyroid patients during treatment due to a defect in the commercial preparation. J. Clin.

Endocrinol. Metab., v. 82, n. 10, p. 3192-3195, 2005.

SAWIN, C. T.; GELLER, A.; HERSHMAN, J. M.; CASTELLI, W.; BACHARACH, P. apud

ROBERTS, C. G. P.; LADENSON, P. W. Hypothyroidism. The Lancet, v. 363, n. 9411, p. 793-803,

2004.

SGRECCIA, E. Manual de bioética. São Paulo: Loyola, 1996.

SINGER P.; COOPER D.; LEVY E.; LADENSON, P. W.; BRAVERMAN, L. E.; DANIELS, G.;

GREENSPAN, F. S.; McDOUGALL, I. R.; NICOLAI, T. F. Treatment guidelines for patients with

hyperthyroidism and hypothyroidism. JAMA, v. 273, n. 10, p. 808-812, Mar. 1995.

SPILKER, B. Guide to clinical trials. 1st ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 1991.

1156 p.

STEVENS, J. Clinical pharmacology and biopharmaceuticals review. [S.l.]: FDA, 2000.

Disponível em :<

www.fda.gov/cder/foi/nda/2000/21210_unithroid_clinphrmr.pdf.>. Acesso em: 20

June 2005.

STOFFER, S. S.; SZPUNAR, W. E. apud PERAN, S.; GARRICA, M. J.; ESCOBAR, M.;

ASUNCIÓN, M.; PERAN, M. Increase in plasma thyrotropin levels in hypothyroid patients during

treatment due to a defect in the commercial preparation. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 82, n. 10, p.

3192-3195, 2005.

SURKS, M. I.; CHOPRA, I. J.; MARIASH, C. N.; NICOLOFF, J. T.; SOLOMON, D. H. apud

GOODMAN, L. S.; GILMAN, A. As bases farmacológicas da terapêutica. 10. ed.. Rio de Janeiro:

MacGraw-Hill, 2003.

TAROUG, A. apud GOODMAN, L. S.; GILMAN, A. As bases farmacológicas da terapêutica. 10.

ed.. Rio de Janeiro: MacGraw-Hill, 2003.

TOFT, A. D. apud PERAN, S.; GARRICA, M. J.; ESCOBAR, M.; ASUNCIÓN, M.; PERAN, M.

Increase in plasma thyrotropin levels in hypothyroid patients during treatment due to a defect in the

commercial preparation. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 82, n. 10, p. 3192-3195, 2005.

VIEIRA, J. G. H.; NISHIDA, S. K.; CAMARGO, M. T.; OBARA, L. H.; KUNII, I. S.; OHE, M. N.;

HAUACHE, O. M. Valores de paratormônio obtidos com ensaios imunométricos dependem da

especificidade do anticorpo amino terminal empregado. Arq. Bras. Endocrinol. Metab., v. 48, n. 4,

p. ,518-524, ago. 2004.

WALTER-SACK, I.; CLANGET, C.; DING, R.; GOEGGELMANN, V. H.; LANG, M.;

PFEILSCHIFTER, J.; TAYROUZ, Y.; WEGSCHEIDER, K. Assessment of levothyroxine sodium

bioavailability – recommendations for an improved methodology based on the pooled analysis of eight

identically designed trials with 396 drug exposures. Clin. Pharmacokinet., v. 43, n. 14, p. 1037-1053,

2004.

YEO, P. P. B.; BATES, D.; HOWE, J. G. apud DOLLERY, C. Therapeutic drugs. 2nd

ed. London:

Churchill Livingstone, 1999. p. L49-L52.

ANEXO A – LISTA DE RANDOMIZAÇÃO

Estudo de biodisponibilidade comparativa entre uma formulação contendo levotiroxina sódica

produzida pelo Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. (TETROID® comprimido de 150μg)

versus Puran® T4 produzido pelo Sanofi-synthelabo Ltda (comprimido de 150μg - formulação

referência) em voluntários sadios

LISTA DE RANDOMIZAÇÃO PROPOSTA

Nº INICIAIS PERÍODO I PERÍODO II

1. CA120583 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

2. SS250283 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

3. MS260387 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

4. TA071177 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

5. FC101073 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

6. JA310776 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

7. RC100483 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

8. SB180784 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

9. GG280574 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

10. AC060367 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

11. DC051184 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

12. TS180383 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

13. FR060184 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

14. FA221268 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

15. RD300683 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

16. DS040182 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

17. JF301084 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

18. ZC140279 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

19. FQ200455 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

20. RP080187 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

21. WA150785 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

22. JF230284 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

23. GS031057 PURAN® T4 TETROID® - ACHÉ

24. LM040878 TETROID® - ACHÉ PURAN® T4

ANEXO B – CASE REPORT FORMULARY (CRF)

‘

FOLHA DE CADASTRO

Dados do Voluntário

Nome

Nascimento

Data Local

Sexo

Masculino Feminino

Grau de Instrução

Estado Civil

Solteiro(a) Casado(a) Viúvo(a)

Divorciado(a)

Filiação

Mãe

Endereço Residencial

Telefone(s)

Residencial Celular Recados

Nº

Órgão

Emissor

Data

Emissão

CPF

Nº

PRONTUÁRIO- UNIFAC

Nº

O nome e o Nº Protocolo, Nº e código do Voluntário são preenchidos quando da inclusão do voluntário no estudo

Responsável pelas Informações Assinatura Data da Assinatura

HISTÓRIA CLÍNICA – PRÉ-ESTUDO

Dados do Voluntário

Nascimento Idade Sexo Raça Ocupação

C M N A

Caucasóide Mulata Negra Amarela Outra

Medidas

Pressão Arterial

Sistólica / Diastólica

(Após 5 min sentado)

Pulso Arterial

Altura Peso Corporal

(Roupas leves)

Índice de Massa

Corporal

Temperatura

(axilar)

mm/Hg batimentos/min m kg Kg/m

ºC

Revisão de Sistemas

Sistema / História Normal Anormal Forneça os detalhes que julgar pertinentes

Alergias

Alergia a drogas

Olhos-ouvidos-nariz-garganta

Respiratório

Cardiovascular

Gastrintestinal

Geniturinário

Sistema Nervoso Central

Hematopoiético-Linfático

Endócrino-Metabólico

Dermatológico

Músculo-esquelético

Estabilidade Emocional

Abuso de Álcool ou Drogas

História Familiar

História Cirúrgica

Outras Informações

O profissional deve também averiguar se há suspeita de não enquadramento do voluntário em função dos

Critérios de Inclusão / Exclusão, assinalando o campo apropriado nas folhas onde constam estes critérios.

Hist. Obstétrica

Gest..: Partos: Abortos:

Cesáreas:

DUM:

Voluntárias

Mulheres

Método Anticoncepcional

ACO ACIM DIU Outro:

Tabagismo

Fumante

Qtde:

Nunca Doou

Nunca Fumou Ex-Fumante

Época:

Doação de Sangue

Última doação:

Café

Nega

Consumo

Qtde. / dia :

Chá

Nega

Consumo

Qtde. / dia :

Álcool

Nega

Consumo

Qtde. / sem.:

Outras inf:

Informar p.ex., o nome do anticoncepcional

Profissional Responsável pela Avaliação Assinatura Data da Assinatura

EXAME FÍSICO – PRÉ-ESTUDO

Exame Físico

Item Normal Anorma

Forneça os detalhes que julgar pertinentes

Aparência

Pele/ Mucosas

Cabeça e Pescoço

Tireóide

Olhos

Ouvidos

Nariz

Boca/ Garganta

Tórax

Coração

Fígado

Baço

Gânglios Linfáticos

Condição Neurológica

Extremidades

Músculo-esquelético

Comentários Adicionais

Recomendações

Reiteradas as restrições quanto ao uso de medicamentos ? Sim Não

Reiteradas as restrições de dieta (alimentos e bebidas) ? Sim Não

Reiterada a possibilidade de falha do ACO / DIU, bem como a

recomendação do uso de preservativos ?

Sim

Não

Não se Aplica

Reiteradas as demais diretrizes e restrições previstas em

protocolo ?

Sim Não

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da Assinatura

EXAMES LABORATORIAIS – PRÉ-ESTUDO

1/2

Hematologia

Coletado em:

 Marque quando solicitar repetição do Hemograma

Data * Parâmetro Valor Correção Valores de Referência

Hemoglobina g/dL Homem: 13,5 - 18 Mulher: 11,5 – 16,4

Hematócrito % Homem: 40 – 54 Mulher: 36 - 47

Eritrócitos 10

/mm

Homem: 4,5 – 6,5 Mulher: 3,9 - 5,8

VCM Micra 76,0 – 96,0

HbCM Pg 27 - 32

Leucócitos 10

/mm

5 – 10

Contagem Diferencial %

Bastões 1 – 3

Segmentados 40 – 75

Linfócitos 20 – 45

Monócitos 2 – 10

Basófilos 0 – 1

Eosinófilos 1 – 6

Outros -

Plaquetas 10

/mm

150 - 450

Tempo de Protrombina S n.d n.d

Percentual de Ativação % n.d n.d

Tempo de Tr. Parc.Ativ. s n.d n.d

Comentários Globais

Bioquímica

Coletado em:

 Marque quando solicitar repetição do Teste

Data * Parâmetro Valor Correção Valores de Referência

Colesterol Total mg/dL < 200

Triglicerídeos mg/dL < 150

Proteínas Totais g/dL 6,6 – 8,7

Albumina mg/dL 3,4 – 4,8

Globulinas g/dL -

Ácido Úrico mg/dL Homem: 3,4 - 7,0 Mulher: 2,4 - 5,7

Bilirrubina Total mg/dL Até 1,1

Direta mg/dL Até 0,3

Indireta mg/dL Até 0,7

Fosfatase Alcalina U/L Homem: < 270 Mulher: < 240

γGT

U/L Homem: 8 - 61 Mulher: 5 - 36

TGO (AST) U/L Homem: até 38 Mulher: até 32

TGP (ALT) U/L Homem: até 41 Mulher: até 31

TSH

Uréia mg/dL 10 - 50

Creatinina mg/dL 0,7 - 1,2

Glicose em jejum mg/dL 70 - 105

Comentários Globais

* A ser preenchida somente quando a data da coleta do material para a 1ª realização de algum teste diferir da data indicada no cabeçalho. Não usar para repetições

EXAMES LABORATORIAIS – PRÉ-ESTUDO

2/2

Análise de

Urina

Coletado em:

 Marque quando solicitar a repetição do Ex. de

Urina

Data * Parâmetro Valor Correção Valores de Referência

Densidade 1005 – 1030

pH 4,5 – 8,0 (média 6,0)

Proteínas -

Glicose -

Corpos Cetônicos -

Urobilinogênio Traços Normais

Bilirrubina -

Nitritos -

Análise Microscópica

Glób. Brancos < 03

Glób. Vermelhos -

Cilindros 0 – 1

Céls Epiteliais Algumas

Cristais -

Bactérias -

Outros -

Comentários Globais

Fezes

Coletado em:

 Marque quando solicitar a repetição do Ex. de Fezes

Parasitológico Positivo Negativo

Comentários:

Sorologia

Coletado em:

 Marque quando solicitar a repetição do Teste

Parâmetro Resultado Comentários

Hepatite B Positivo Negativo

Hepatite C Positivo Negativo

HIV 1 + HIV 2 Positivo Negativo

Teste Gravidez

Coletado em:

 Repetição Solicitada NÃO APLICÁVEL



HCG

Positivo Negativo

Comentários:

Responsável pela transcrição dos dados Assinatura Data da Assinatura

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da Assinatura

ECG – PRÉ-ESTUDO

Parâmetros

ECG 12 derivações  Marque quando solicitar a repetição do Exame

FC bpm

Ritmo

Cardíaco

Intervalo PR s

Duração do

QRS

QT s

Normal

Não clinicamente significativo

Diagnóstico

Anormal

Clinicamente significativo

Especificação da Anomalia

(preencher caso tenha sido assina-lado

“Diagnóstico Anormal”,

independentemente de ser significativo)

Conclusão

Apto para participação no Estudo Não Apto

Apto com restrições 

12.

ndique as restrições

específicas



13. Observações

Comentários

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da Assinatura

AVALIAÇÃO PRÉ-ESTUDO

Repetição de Exames

ASSINALE SE NÃO REALIZADO



Parâmetro

Data Coleta

(dd/mm)

Resultado

Responsável pela

transcrição dos dados

Rubrica e Data

Hemograma

Bioquímica

Exame de Urina

Exame de Fezes

Sorologia

ECG

Comentários

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da Assinatura

CRITÉRIOS DE ADMISSÃO

1/2Data de Referência da Avaliação



100

Critérios de Inclusão

O voluntário tem entre 18 e 50 anos de idade. Sim Não

O índice de massa corpórea do voluntário é maior ou igual a 19 e menor

ou igual a 30.

Sim Não

O voluntário foi examinado e considerado com boas condições de saúde

sem doenças significativas, a juízo médico, de acordo com as regras

definidas no Protocolo e avaliações a que foi submetido: história clínica,

medidas de pressão e pulso, exame físico, ECG, e exames laboratoriais

complementares.

Sim Não

O voluntário é capaz de compreender a natureza e objetivo do estudo,

inclusive os riscos e efeitos adversos e com intenção de cooperar com o

pesquisador e agir de acordo com os requerimentos de todo o ensaio, o

que vem a ser confirmado mediante a assinatura do Termo de

Consentimento Livre e Esclarecido.

Sim Não

Critérios de Exclusão

O voluntário tem hipersensibilidade conhecida á levotiroxina ou a

compostos quimicamente relacionados (tiroxina); história de reações

adversas graves ou hipersensibilidade a qualquer droga

Sim Não

O voluntário que apresentou ou apresenta qualquer condição patológica

que possa interferir na farmacocinética (absorção, distribuição, excreção

ou metabolismo) ou farmacodinâmica da levotiroxina.

Sim Não

Uso de terapia de manutenção com qualquer droga. Sim Não

Tem história de doença, hepática, renal, pulmonar, epiléptica,

hematológica ou psiquiátrica; tem hipo ou hipertensão de qualquer

etiologia que necessite de tratamento farmacológico; tem história ou teve

infarto do miocárdio, angina pectoris e/ou insuficiência cardíaca.

Sim Não

Achados eletrocardiográficos não recomendados. a critério do

investigador. para a participação no estudo.

Sim Não

Os resultados dos exames laboratoriais complementares estão fora dos

valores considerados normais de acordo com as normas deste protocolo,

a menos que sejam considerados não clinicamente significativos pelo

investigador .

Sim Não

O voluntário apresenta qualquer um dos testes de função da tireóide (T3,

T4 e THS) com valores anormais

Voluntária do sexo feminino com βHCG positivo



A Data de Referência corresponde à última data na qual as informações foram obtidas para fins de utilização na avaliação dos Critérios de Admissão.

Corresponde, normalmente à data do Exame Físico, salvo a realização de entrevista, avaliação de resultados de exames laboratoriais complementares ou

outro contato por parte equipe considerado para avaliação dos Critérios de Admissão.

101

CRITÉRIOS DE ADMISSÃO

2/2

Critérios de Exclusão

O Voluntário fuma mais que dez cigarros por dia. Sim Não

O voluntário ingere mais do que 5 xícaras de café ou chá por dia. Sim Não

Tem história de abuso de álcool ou drogas. Sim Não

10.

Fez uso de medicação regular dentro das duas semanas que antecedem o

início do tratamento deste estudo e/ou fez uso de qualquer medicação

dentro de uma semana antes do início do tratamento deste estudo. Ou os

casos em que, com base na meia-vida do fármaco e/ou s ativos, possa ser

assumida a completa eliminação.

Sim Não

11.

Foi internado por qualquer motivo durante as 8 semanas antes do

primeiro período de tratamento deste estudo.

Sim Não

12.

Terapia dentro dos 3 meses prévios ao início do tratamento deste estudo

com qualquer droga que se conheça ter um potencial tóxico bem definido

nos grandes órgãos

Sim Não

13.

O voluntário participou de qualquer estudo experimental ou ingeriu

qualquer droga experimental dentro dos 3 meses que antecedem o início

do tratamento deste estudo

Sim Não

14.

O voluntário doou ou perdeu 450 mL ou mais de sangue dentro dos três

meses que antecederam o estudo ou doou mais de 1500mL dentro dos 12

meses anteriores ao início do tratamento deste estudo.

Sim Não

15.

O voluntário tem qualquer condição que o impede de participar do

estudo, à juízo do investigador

Sim Não

Conclusão

Após a avaliação da história, exame físico, exames

laboratoriais, ECG, critérios de inclusão e exclusão o médico

responsável considerou o Voluntário:

Apto para participação no Estudo

Não Apto

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da Assinatura

102

PRIMEIRO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

1/6

Internação

ASSINALE SE O VOLUNTÁRIO NÃO

COMPARECEU



Admitido na UNIFAC Data Horário

Rubrica:

Exames Laboratoriais*

Material Coletado em: Data

Hemoglobina Hematócrito Creatinina TGO (AST) TGP (ALT) Rubrica

Valor

Valores Normais

H: 13,5 – 18,0

M: 11,5 – 16,4

H: 40,0 – 54,0

M: 36,0 – 47,0

H: 0,70 – 1,2

M: 0,50 – 0,9

H: até 38

M: até 32

H: até 41

M: até 31

g/dL % mg/dL U/L U/L -

* Solicitado somente quando exigido pelo protocolo

Avaliação Inicial Segurança / Aderência

Alguma mudança significativa desde o exame

de seleção ?

Não Sim 

Comentários:

Algum sinal, sintoma ou doença desde o

exame de seleção ?

Não Sim 

Preencher a folha de Sinais e Sintomas Pré-Dose

Ingeriu medicamentos nos 14 dias que

precedem a data do início do tratamento ?

Não Sim 

Preencher a folha de medicação Pré-dose

Suspeita de abuso de drogas ou ingeriu

bebidas alcoólicas nas últimas 12 horas ?

Não Sim 

Realizar teste previsto no Protocolo

Resultado:

Ingeriu alimentos ou bebidas constantes nas

restrições de dieta

Não Sim 

Comentários:

Foi hospitalizado por qualquer motivo

Não

Sim 

Comentários:

Doou ou perdeu Sangue (> 450mL)

Não

Sim 

Comentários:

Encontra-se enquadrado em qualquer outro

Critério de Exclusão ?

Não Sim 

Comentários:

Avaliação Pré-dose de Aderência

Deixou de cumprir as restrições de dieta,

sobretudo período de Jejum.

Não Sim 

Comentários:

Realizou exercício físico intenso durante a

Internação (12 horas antes da medicação).

Não Sim 

Comentários:

Deixou de cumprir qualquer outra restrição

(

ou resposta positiva na reavaliação do

critérios acima )

Não Sim 

Comentários:

O voluntário ratificou seu desejo de participar

do Estudo? (Consentimento Informado)

Sim

Não



Caso assinalada a coluna à direita em qualquer dos 11

itens acima Preencher abaixo



O médico responsável (em conjunto com o Pesquisador Principal

no caso de uso de medicamentos) decidiu que o Voluntário:

permanece apto para participar no Estudo

deve ser desligado do Estudo

Obs.: Complete as Folhas de “Sinais e Sintomas Pré-dose” e "Medicação Pré-dose" quanto ao status pré-dose.

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da Assinatura

UTILIZAÇÃO DE MEDICAMENTOS

2/6

Princípio(s) Ativo(s) Nome Comercial

Forma

Farmacêutica

Data do Início

Tratamento

(dd-mm-aa)

Hora

(hh:mm ou turno)

Dose

(em unidades)

Via

Administ.

Duração

Tratamento

Intervalo de

Doses

(1x/dia, … 8/8h)

Prescrição



Data do

Término

Tratamento

(dd-mm-aa)

  

 Prescrição:

 Equipe UNIFAC  Prescrição Externa  Auto-medicação

SINAIS E SINTOMAS PRÉ-DOSE



Utilize o campo acima para qualquer outra informação julgada relevante

Revisão Pré-Dose

A ser realizada imediatamente antes da administração da 1ª dose da medicação do Estudo.

Revisado em:

(data )

Foi utilizada alguma medicação desde o prazo de controle

previsto no Protocolo até o início do Tratamento ?

Não

Sim  Complementar o quadro acima



Médico Responsável pela Revisão Pré-dose Assinatura Data da Assinatura

PRIMEIRO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

3/6

Formulação deste Período de Internação:

REFERENCIA ⌦

PURAN® T4 – Sanofi-synthelabo

Serão Administrados: 04 comprimidos de 150μg

Administração(ões)

Data

Administração

(dd/mm/aa)

Jejum

Observou

o jejum previsto?

Administração

[ 1 ] Administrado de acordo c/

Protocolo

[ 2 ] Erro/Inversão na randomização 



[ 3 ] Erro na dose  

[ 9 ] Outro  

Rubrica



Sim Não 1[ ] 2[ ] 3[ ] 9[ ]

 Indique os detalhes no campo de Observações disponível na penúltima folha desta seção 

Coleta de Amostras

Materia

Sangue

Volume por

amostra:

4,5mL

Nº de

Ordem

Tempo

Coleta

(hh:mm)

Horário Previsto

(hh:mm)

Horário Real

(hh:mm)

Desvios



Atrasos /

Indisponibilidade /

Outros

Rubrica



(coluna para correções)

30 min Pré

15 min Pré

00:00h

00:30h

01:00h

01:30h

02:00h

02:30h

03:00h

04:00h

06:00h

08:00h

10:00h

12:00h

18:00h

24:00h

48:00h

 Atraso na coleta → [A1] Problema no acesso venoso [A2] Atraso do Voluntário [A3] Erro Operacional

Não coletada → [N1] Problema no acesso venoso [N2] Não comparecimento do Voluntário [N3] Erro Operacional

Outros Casos → [6] Amostra Hemolisada [7] Amostra Hiperlipêmica [8] Perda no Processamento [9] Outros desvios

105

PRIMEIRO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

4/6

Refeições

Última alimentação ocorreu pelo menos 8h antes da administração: Sim Não

O término do jejum ocorreu pelo menos 2h após a administração: Sim Não

Refeição

Data

(dd/mm/aa)

Horário

(Relógio 24h)

(hh:mm )

Refeição Ingerida?

(S/N)

Rubrica



Ceia

S N

Almoço

S N

Lanche da tarde

S N

Jantar

S N

Ceia

S N

Desjejum

S N

Ingestão de Líquidos

Ingestão de líquidos interrompida 2h antes da administração: Sim Não

Liberação de líquidos ocorrida 2h depois da administração: Sim Não

Outras Informações

Rubrica e Data:



106

PRIMEIRO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

5/6

Sinais Vitais

Nº

Ordem

Tempo

após

1ª dose

(hh:mm)

Horário

Previsto

(Relógio 24h )

(hh:mm)

Horário

Real

(Relógio 24h )

(hh:mm)

Pressão Arterial

(Sentado)

(mmHg)

(p/ correções)

Pulso

(Sentado)

(bpm)

(p/ correções)

Temperatura

(axilar)

(ºC)

(p/ correções)

Rubrica



0:00h

1:00h

2:00h

4:00h

6:00h

8:00h

10:00h

12:00h

24:00h

48:00h

Observações

Rubrica e Data:



107

PRIMEIRO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

6/6

Avaliação Para-Alta

Alguma mudança significativa desde o exame

anterior ?

Não Sim 

Comentários:

Algum Evento Adverso durante o internamento ?

Não

Sim 

Preencher a folha de “Eventos Adversos.

Ingeriu medicamentos concomitantes ao tratamento

Não

Sim 

Preencher a folha de

“Medicação Pós-dose”

Deixou de cumprir alguma restrição do Protocolo?

Não

Sim 

Preencher folha de comentários adicionais

A alta ocorreu por desligamento do Voluntário ?

Não

Sim 

Preencher o quadro de “Término Prematuro” e

comentários adicionais, caso haja relação.



14.



PREENCHER ABAIXO SOMENTE NO CASO DE DESLIGAMENTO



Algum das formulações sob investigação foi ingerida ?

Não

Sim 

Preencher abaixo:



Reiteradas as restrições de doação e participação em estudos ?

Sim Não

Conclusão:

Alta Autorizada Alta inicialmente não autorizada 

Rubrica:



Caso a Alta não tenha sido inicialmente autorizada, informar a Data e

Horário em que a Alta foi concedida (fazer registro no campo

Observações)

___________________________________________________

Responsável pela Avaliação

____/____/____ _____:_____

Data Horário

Observações

Rubrica e Data:



Saída da UNIFAC

O voluntário deixou a UNIFAC logo após a autorização de alta Rubrica 

Efetivada em

Data

Horário:

108

SEGUNDO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

1/6

Internação

ASSINALE SE O VOLUNTÁRIO NÃO

COMPARECEU



Admitido na Unidade Data Horário

Rubrica:

Exames Laboratoriais*

Material Coletado em: Data

Hemoglobina Hematócrito Creatinina TGO (AST) TGP (ALT) Rubrica

Valor

Valores Normais

H: 13,5 – 18,0

M: 11,5 – 16,4

H: 40,0 – 54,0

M: 36,0 – 47,0

H: 0,70 – 1,2

M: 0,50 – 0,9

H: até 38

M: até 32

H: até 41

M: até 31

g/dL % mg/dL U/L U/L -

* Solicitado somente quando exigido pelo protocolo

Avaliação Inicial Segurança / Aderência

Alguma mudança significativa desde o exame

anterior ?

Não Sim 

Comentários:

Algum sinal, sintoma ou doença desde o

exame anterior ?

Não Sim 

Preencher a folha de Eventos Adversos

Ingeriu medicamentos desde a alta da

internação anterior ?

Não Sim 

Preencher a folha de medicação Pós-dose

Suspeita de abuso de drogas ou ingeriu

bebidas alcoólicas nas últimas 12 horas ?

Não Sim 

Realizar teste previsto no Protocolo

Resultado:

Ingeriu alimentos ou bebidas constantes nas

restrições de dieta

Não Sim 

Comentários:

Foi hospitalizado por qualquer motivo

Não

Sim 

Comentários:

Doou ou perdeu Sangue (> 450mL)

Não

Sim 

Comentários:

Encontra-se enquadrado em qualquer outro

Critério de Exclusão ?

Não Sim 

Comentários:

Avaliação Pré-dose de Aderência

Deixou de cumprir as restrições de dieta,

sobretudo período de Jejum

Não Sim 

Comentários:

Realizou exercício físico intenso durante a

Internação (12 horas antes da medicação)

Não Sim 

Comentários:

Deixou de cumprir qualquer outra restrição

(

ou resposta positiva na reavaliação do

critérios acima )

Não Sim 

Comentários:

O voluntário ratificou seu desejo de participar

do Estudo? (Consentimento Informado)

Sim

Não



Caso assinalada a coluna à direita em qualquer dos 11

itens acima Preencher abaixo



O médico responsável (em conjunto com o Pesquisador Principal

no caso de uso de medicamentos) decidiu que o Voluntário:

permanece apto para participar no Estudo

deve ser desligado do Estudo

Obs.: Complete as Folhas de “Sinais e Sintomas Pré-dose” e "Medicação Pré-dose" quanto ao status pré-dose.

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da Assinatura

109

SEGUNDO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

2/6

Formulação deste Período de Internação:

TESTE ⌦

TETROID® - Ache Laboratório Farmacêutico

Serão Administrados: 04 comprimidos de 150μg

Administração(ões)

Data

Administração

(dd/mm/aa)

Jejum

Observou

o jejum previsto?

Administração

[ 1 ] Administrado de acordo c/

Protocolo

[ 2 ] Erro/Inversão na randomização 



[ 3 ] Erro na dose  

[ 9 ] Outro  

Rubrica



Sim Não 1[ ] 2[ ] 3[ ] 9[ ]

 Indique os detalhes no campo de Observações disponível na penúltima folha desta seção 

Coleta de Amostras

Materia

Sangue

Volume por

amostra:

4,5mL

Nº de

Ordem

Tempo

Coleta

(hh:mm)

Horário Previsto

(hh:mm)

Horário Real

(hh:mm)

Desvios



Atrasos /

Indisponibilidade /

Outros

Rubrica



(coluna para correções)

30 min Pré

15 min Pré

00:00h

00:30h

01:00h

01:30h

02:00h

02:30h

03:00h

04:00h

06:00h

08:00h

10:00h

12:00h

18:00h

24:00h

48:00h

 Atraso na coleta → [A1] Problema no acesso venoso [A2] Atraso do Voluntário [A3] Erro Operacional

Não coletada → [N1] Problema no acesso venoso [N2] Não comparecimento do Voluntário [N3] Erro Operacional

Outros Casos → [6] Amostra Hemolisada [7] Amostra Hiperlipêmica [8] Perda no Processamento [9] Outros desvios

110

SEGUNDO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

3/6

Refeições

Última alimentação ocorreu pelo menos 8h antes da administração: Sim Não

O término do jejum ocorreu pelo menos 2h após a administração: Sim Não

Refeição

Data

(dd/mm)

Horário Real

(Relógio 24h)

(hh:mm)

Refeição Ingerida?

(S/N)

Rubrica



Ceia

S N

Almoço

S N

Lanche da tarde

S N

Jantar

S N

Ceia

S N

Desjejum

S N

Ingestão de Líquidos

Ingestão de líquidos interrompida 2h antes da administração: Sim Não

Liberação de Líquidos ocorrida 2h depois da administração: Sim Não

Outras Informações

Rubrica e Data:



111

SEGUNDO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

4/6

Sinais Vitais

Nº

Ordem

Tempo

após

1ª dose

(hh:mm)

Horário

Previsto

(Relógio 24h )

(hh:mm)

Horário

Real

(Relógio 24h )

(hh:mm)

Pressão Arterial

(Sentado)

(mmHg)

(p/ correções)

Pulso

(Sentado)

(bpm)

(p/ correções)

Temperatura

(axilar)

(ºC)

(p/ correções)

Rubrica



0:00h

1:00h

2:00h

4:00h

6:00h

8:00h

10:00h

12:00h

24:00h

48:00h

Observações

Rubrica e Data:



112

SEGUNDO PERÍODO DE INTERNAÇÃO

5/6

Avaliação Pré-Alta

Alguma mudança significativa desde o exame

anterior ?

Não Sim 

Comentários:

Algum Evento Adverso durante a hospitalização ?

Não

Sim 

Preencher a folha de “Eventos Adversos.

Ingeriu medicamentos concomitantes ao tratamento

Não

Sim 

Preencher a folha de

“Medicação Concomitante”

Deixou de cumprir alguma restrição do Protocolo?

Não

Sim 

Preencher folha de comentários adicionais

A alta ocorreu por desligamento do Voluntário ?

Não

Sim 

Preencher o quadro de “Término Prematuro” e

comentários adicionais, caso haja relação.



15.



PREENCHER ABAIXO SOMENTE NO CASO DE DESLIGAMENTO



Alguma das formulações sob investigação foi ingerida ?

Não

Sim 

Preencher abaixo:



Reiterada a necessidade de comparecer ao Exame Pós Alta ?

Sim Não

Reiteradas as restrições de doação e participação em estudos ?

Sim Não

Conclusão:

Alta Autorizada Alta inicialmente não autorizada 

Rubrica:



Caso a Alta não tenha sido inicialmente autorizada, informar a Data e

Horário em que a Alta foi concedida (fazer registro no campo

Observações)

___________________________________________________

Responsável pela Avaliação

____/____/____ _____:_____

Data Horário

Observações

Rubrica e Data:



Saída da UNIFAC

O voluntário deixou a UNIFAC logo após a autorização de alta Rubrica 

Efetivada em Data:

Horário:

UTILIZAÇÃO DE MEDICAMENTOS

6/6

Princípio(s) Ativo(s) Nome Comercial

Forma

Farmacêutica

Data do Início

Tratamento

(dd-mm-aa)

Hora

(hh:mm ou turno)

Dose

(em unidades)

Via

Administ.

Duração

Tratamento

Intervalo de

Doses

(1x/dia, … 8/8h)

Prescrição



Data do

Término

Tratamento

(dd-mm-aa)

  

 Prescrição:

 Equipe UNIFAC  Prescrição Externa  Auto-medicação

SINAIS E SINTOMAS PÓS-DOSE



Utilize o campo acima para qualquer outra informação julgada relevante

Revisão Alta

A ser realizada imediatamente após a administração da 2ª dose da medicação do Estudo.

Revisado em:

(data )

Foi utilizada alguma medicação desde o início do tratamento até o término do estudo clínico?

Não

Sim  Complementar o quadro acima



Médico Responsável pela Revisão Pós-dose Assinatura Data da Assinatura

114

EXAME FÍSICO – PÓS ESTUDO

ASSINALE SE NÃO REALIZADO



(Ver Encerramento do Estudo)



(Se necessário, preencher Folha de EAs)

Pressão Arterial

Sistólica / Diastólica

(Após 5 min sentado)

Pulso Arterial

(Sentado)

Peso Corporal

(Roupas leves)

Temperatura

(axilar)

mm/Hg batimentos/min kg ºC

Exame Físico

Item Normal Anormal Forneça os detalhes que julgue pertinentes

Pele/ Mucosa

Cabeça e Pescoço

Tireóide

Olhos

Ouvidos

Nariz

Boca/ Garganta

Tórax

Coração

Fígado

Baço

Gânglios Linfáticos

Condição Neurológica

Extremidades

Músculo-esquelético

Comentários Adicionais

 Assinalar somente no encerramento do estudo, já que o voluntário pode vir a comparecer em uma nova convocação

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da

Assinatura

115

EXAMES LABORATORIAIS – PÓS ESTUDO

1/2

Hematologia

Coletado em:

 Marque quando solicitar repetição do Hemograma

Data * Parâmetro Valor Correção Valores de Refrência

Hemoglobina g% Homem: 13,5 -18 Mulher: 11,5 – 16,4

Hematócrito % Homem: 40 - 54 Mulher: 36 - 47

Eritrócitos 10

/mm

Homem: 4,5 – 6,5 Mulher: 3,9 - 5,8

VCM Micra 76,0 – 96,0

HbCM Pg 27 - 32

Leucócitos 10

/mm

5 – 10

Contagem Diferencial %

Bastões 1 – 3

Segmentados 40 – 75

Linfócitos 20 – 45

Monócitos 2 – 10

Basófilos 0 – 1

Eosinófilos 1 – 6

Outros -

Plaquetas 10

/mm

150 - 450

Tempo de Protrombina S n.d n.d

Percentual de Ativação % n.d n.d

Tempo de Tr. Parc.Ativ. s n.d n.d

Comentários Globais

116

ASSINALE SE NÃO REALIZADO



(Ver Encerramento do Estudo)



* A ser preenchida somente quando a data da coleta do material para a 1ª realização de algum teste diferir da data indicada no cabeçalho. Não usar para repetições

Bioquímica

Coletado em:

 Marque quando solicitar repetição do Teste

Data * Parâmetro Valor Correção Valores de Referência

Colesterol Total mg/dL < 200

Triglicerídeos mg/dL < 150

Proteína Total g/dL 6,6 – 8,7

Albumina mg/dL 3,4 – 4,8

Globulinas g/dL -

Ácido Úrico mg/dL Homem:3,4 a 7,0 Mulher:2,4 a 5,7

Bilirrubina Total mg/dL Até 1,1

Direta mg/dL Até 0,3

Indireta mg/dL Até 0,7

Fosfatase Alcalina U/L Homem: < 270 Mulher: < 240

γGT

U/L Homem: 8 - 61 Mulher: 5 - 36

TGO (AST) U/L Homem: até 38 Mulher: até 32

TGP (ALT) U/L Homem: até 41 Mulher: até 31

TSH

Uréia mg/dL 10 – 50

Creatinina mg/dL 0,7 – 1,2

Glicose em jejum mg/dL 70 – 105

Comentários Globais

117

Análise de Urina

Coletado em:

 Marque quando solicitar a

repetição do Ex. de Urina

Data * Parâmetro Valor Correção Valores de Referência

Densidade 1005 – 1030

pH 4,5 – 8,0 (média 6,0)

Proteínas -

Glicose -

Corpos Cetônicos -

Urobilinogênio Traços Normais

Bilirrubina -

Nitritos -

Análise Microscópica

Leucócitos < 03

Hemácias -

Cilindros 0 – 1

Céls Epiteliais Algumas

Cristais -

Bactérias -

Outros -

Comentários Globais

Responsável pela Transcrição dos Dados Assinatura Data da

Assinatura

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da

Assinatura

EXAMES LABORATORIAIS – PÓS ESTUDO

2/2

118

AVALIAÇÃO PÓS-ESTUDO

Repetição de Exames

ASSINALE SE NÃO REALIZADO



Parâmetro Data

Coleta

(dd/mm)

(Novo)

Resultado

Responsável

Avaliação

Rubrica e Data

Hemograma

Bioquímica

Exame de Urina

ECG

Outros

Comentários

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da Assinatura

119

E C G – PÓS ESTUDO

ASSINALE SE NÃO REALIZADO



(Ver Encerramento do Estudo)



Parâmetros

ECG 12 derivações

HR bpm

Ritmo

Cardíaco

Intervalo PR s

Duração do

QRS

QT s

Normal

Não clinicamente significativo

Diagnóstico

Anormal

Clinicamente significativo

Especificação da Anomalia

(preencher caso tenha sido assina-lado

“Diagnóstico Anormal”,

independentemente de ser significativo)

Conclusão Comparativa

Inalterado ou sem alterações clinicamente relevantes

(em relação ao ECG pré-tratamento)

Nova alteração ou piora

em relação à situação inicial



Preencher a folha de Eventos Adversos,

indicando o as condições pré e pós estudo

Preencher demais folhas complementares s/n

Melhora em relação à situação

inicial

Outro



Especificar abaixo e preencher a folha de

Eventos Adversos, se aplicável

Não comparado

Observações:

Médico Responsável pela Avaliação Assinatura Data da

Assinatura

120

ENCERRAMENTO DA ETAPA CLÍNICA

1/2

Avaliação

Foram evidenciadas diferenças significativas entre

os resultados de exame laboratoriais pré e pós-

estudo ? *

Não Sim 

Preencher a folha de Eventos Adversos, indicando o

exame e os valores pré e pós estudo

Preencher demais folhas complementares se necessário

Foram evidenciadas diferenças significativas entre

os achados de exame clínico / físico pré e pós-

estudo ? *

Não Sim 

Preencher a folha de Eventos Adversos, indicando o as

condições pré e pós estudo

* As alterações laboratoriais ou de história clínica/exame físico consideradas não significativas (N.S.) não devem ser assinalas como "Sim"

Segurança

Alguma mudança significativa desde a últim

avaliação ?

Não Sim 

Comentários:

Algum Evento Adverso desde a última avaliação ?

Não

Sim 

Preencher a folha de “Eventos Adversos” .

Deixou de cumprir restrições previstas no

Protocolo desde a última avaliação ?

Não

Sim 

Preencher a folha de “Eventos Adversos” .

Ingeriu medicamentos concomitantes ao

tratamento ?

Não

Sim 

Preencher a folha de

“Medicação Pós-dose”

Reiteradas as restrições de doação e participação em estudos ? Sim Não

121

Responsável pelas informações Assinatura Data

Término Prematuro

ASSINALE SE NÃO HOUVE TÉRMINO PREMATURO



Antes dos Períodos de Tratamento (antes da 1ª internação)

Durante o

º Período

de Tratamento

Antes da administração das terapias previstas

Após a administração, durante a internação

Após ter recebido alta da internação

Ocasião em que foi

observada a saída:

Data:

Hora:

Não compareceu à Avaliação Pós-Estudo ou parte dela

O fato ocorreu:

Em Função de Devido a

Decisão

da Equipe

Resposta positiva à reavaliação de Critério de Exclusão

Não Aderência às exigências do Protocolo

EAs Outras razões, a juízo do investigador

Decisão

Voluntário

Razões Pessoais Retirada Consentimento

EAs Intolerância aos Procedimentos

Indisponibilidade Outras razões

Informação Não Disponível

Constatação de Simples Abandono (Não houve retorno por parte do voluntário)

Óbito Data do Óbito

_____/_____/_____

(ver Eventos Adversos)

Principal Causa Mordis___________________________________________________

122

ENCERRAMENTO DA ETAPA CLÍNICA

2/2

Informações Finais

Data em que foi administrada a última dose dos produtos sob Investigação:

(indicar a data relativa ao último período de internação)

Encerramento:

Conclusão do Estudo - Alta regular da Etapa Clínica após todas as avaliações

Desistência / Retirada do Consentimento antes da 1º internação / administração terapia

Alta regular após Término Prematuro, com as avaliações aplicáveis *

Encerramento Administrativo do CRF por abandono, sem completar as Avaliações Pós-Estudo **

Encerramento Administrativo do CRF; o Voluntário permanece sob acompanhamento ***

(a documentação do acompanhamento ou abandono após o encerramento do CRF será anexada ao Arquivo do Estudo)

Encerramento devido à óbito (ver Eventos Adversos e Término Prematuro)

* O voluntário desistiu ou foi desligado do estudo por qualquer motivo (inclusive EAs), mas compareceu em todos os exames de alta e/ou outras avaliações aplicáveis

** O voluntário abandonou durante as internações ou durante as avaliações pós estudo, ou não retornou para acompanhamento de EAs .

*** Inclui os casos em que está prevista a conclusão das avaliações e os casos em que EAs permanecem em aberto, sob acompanhamento após o encerramento do CRF. Envolve

os casos em que, por questão de prazos, há necessidade de encerramento administrativo do CRF, independentemente do potencial de retorno/comparecimento do voluntário

(Mesmo com Alta regular, o surgimento de Eventos Adversos pode ensejar acompanhamento a posteriori do encerramento deste CRF, que serão documentadas à parte e anexadas ao Arquivo do Estudo)

Comentários Adicionais:

Eu certifico que:

Revisei todos os dados em todas as páginas deste CRF e, até onde é de meu melhor conhecimento,

eles estão corretos, completos e, quando transcritos, correspondem exatamente aos registros originais.

Responsável pela Garantia da Qualidade Assinatura Data

Investigador Principal Assinatura Data

123

FOLHA DE EVENTO ADVERSO

Nº de Ordem do Evento 1

Assinale caso se trate de uma nova versão relativa ao mesmo evento



Detalhes Evento

Data Início do Evento

Adverso

Hora

Antes da administração do Produto sob Investigação *

Após a administração, durante a internação

Após ter recebido alta da internação

Queixa / Diagnóstico

* Ocorrências antes da administração do Produto sob Investigação no 1º Período não são Eventos Adversos

Classificações

Seriedade Não Sério Sério

Intensidade Leve Moderado Severo

Relação c/ Terapia Provável  Possível  Não Relacionado Desconhecido

Expectativa

Somente no

caso de

Reações

Adversas

Esperado Não Esperado 

Quando a natureza, intensidade ou

freqüência não é consistente com a

informação disponível na literatura

Conduta

Tratamento Farmacológico * Outra Terapia Hospitalização

Conduta Imediata

Observação (ou nenhuma ação

imediata)

Outros Não Aplicável

Exames Complem. Desnecessário Solicitados Exames:

Detalhes

* Os Tratamentos Farmacológicos são descritos na Folha de Medicação concomitante constante no

CRF.

Próximo Acomp. Retornos já programados Solicitado retorno adicional em:

Desligamento O médico retirou o Voluntário do Estudo em função do Evento

O Voluntário resolveu interromper sua participação no estudo em função do Evento

Outras Informações

Desfecho

Avaliado em

Data:

Término

Data Hora Duração

Não Encerrado (Ver

abaixo)

Recuperação: Total Com Seqüelas

Evento Adverso ainda presente: Sob Observação Sob Tratamento

Status

(escolha apenas 1

opção)

Falecimento Dados Não Disponíveis (Não compareceu aos retornos solicitados)

Outras Informações

Responsável pelas Informações Assinatura Data da

Assinatura

124

FOLHA DE EVENTO ADVERSO

Nº de Ordem do Evento 2

Assinale caso se trate de uma nova versão relativa ao mesmo evento



Detalhes Evento

Data

Início do Evento

Adverso

Hora

Antes da administração do Produto sob

Investigação *

Após a administração, durante a internação

Após ter recebido alta da internação

Queixa / Diagnóstico

*Ocorrências antes da administração do Produto sob Investigação no 1º Período não são Eventos Adversos

Classificações

Seriedade Não Sério Sério

Intensidade Leve Moderado Severo

Relação c/ Terapia Provável  Possível  Não Relacionado Desconhecido

Expectativa

Somente no

caso de

Reações

Adversas

Esperado Não Esperado 

Quando a natureza, intensidade ou

freqüência não é consistente com a

informação disponível na literatura

Conduta

Tratamento Farmacológico * Outra Terapia Hospitalização

Conduta Imediata

Observação (ou nenhuma ação

imediata)

Outros Não Aplicável

Exames Complem. Desnecessário Solicitados Exames:

Detalhes

* Os Tratamentos Farmacológicos são descritos na Folha de Terapias Adicionais constante no CRF.

Próximo Acomp. Retornos já programados Solicitado retorno adicional em:

Desligamento O médico retirou o Voluntário do Estudo em função do Evento

O Voluntário resolveu interromper sua participação no estudo em função do Evento

Outras Informações

Desfecho

Avaliado em

Data:

Término

Data Hora Duração

Não Encerrado (Ver

abaixo)

Recuperação: Total Com Seqüelas

Evento Adverso ainda presente: Sob Observação Sob Tratamento

Status

(escolha apenas 1

opção)

Falecimento Dados Não Disponíveis (Não compareceu aos retornos solicitados)

Outras Informações

Responsável pelas Informações Assinatura Data da

Assinatura

125

COMENTÁRIOS ADICIONAIS

Evolução

Data

Hora

126

ANEXO C – DECLARAÇÃO DO COMITÊ DE ÉTICA EM PESQUISA COM

SERES HUMANOS DA UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ

127

ANEXO D -

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO

Estudo de biodisponibilidade comparativa entre uma formulação contendo

levotiroxina sódica produzida pelo Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

(TETROID® - comprimido de 150μg) versus Puran® T4 produzido pelo Sanofi-

sythelabo Ltda (comprimido de 150μg - formulação referência) em voluntários sadios.

(UNIFAC 10/2005)

Você está sendo convidado a participar de um projeto de pesquisa. Sua participação

é importante, porém, você não deve participar contra a sua vontade. Leia atentamente as

informações abaixo e faça qualquer pergunta que desejar, para que todos os procedimentos

desta pesquisa sejam esclarecidos.

O abaixo-assinado, ________________________________________________,

______ anos, RG nº________________ declara que é de livre e espontânea vontade que

está participando como voluntário do projeto de pesquisa supracitado, de responsabilidade

de dos Médicos/Pesquisadores Profa Dra. Maria Elisabete Amaral de Moraes, Prof. Dr.

Manoel Odorico de Moraes, Prof. Fernando Antonio Frota Bezerra e da Dra. Gilmara Silva

de Melo Santana da Unidade de Farmacologia Clínica (UNIFAC) da Universidade Federal

do Ceará. O abaixo-assinado está ciente que:

NATUREZA E PROPÓSITO DO ESTUDO

O objetivo da pesquisa é verificar se o comprimido de 150μg de levotiroxina,

produzidas pelo Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.,(TETROID® - formulação teste)

atinge níveis no sangue equivalentes comprimido de 150μg de levotiroxina (Puran® T4 -

formulação referência) produzido pela Sanofi-sythelabo Ltda. Você receberá as duas

medicações, cada uma em uma ocasião diferente. A ordem que você tomará cada

medicação obedecerá um sorteio.

128

PROCEDIMENTOS A SEREM REALIZADOS E RESPONSABILIDADES

Antes de sua participação no estudo e após a sua participação você será convidado a

ir na Unidade de Farmacologia Clínica para avaliar a sua condição de saúde. Você será

examinado por um médico que lhe fará um exame completo, medindo o seu pulso, sua

temperatura, sua pressão arterial. Também será feito um exame do coração

(eletrocardiogrrama). O médico lhe perguntará se você teve ou tem alguma doença e se

você faz uso de algum medicamento. Durante a visita serão coletadas amostras de sangue,

urina e fezes para exames laboratoriais. Os exames laboratoriais incluem exame de sangue

completo como hemograma completo (hemoglobina, hematócrito, contagem diferencial de

glóbulos brancos, contagem de glóbulos vermelhos e plaquetas); bioquímica sangüínea

(glicose no sangue, proteínas totais, albumina, transaminases oxalacética e pirúvica,

gamaglutamil trasnferase, creatinina, uréia, ácido úrico, colesterol e triglicerídeos); exame

sumário de urina (Urina I) .Exames para a hepatite B e C e para AIDS (HIV 1 e HIV2), T3,

T4 e TSH, no sangue, e exame de fezes (protoparasitológico), serão feitos somente no pré

estudo.

Durante o estudo, você será internado duas vezes por aproximadamente 36 horas

cada período, com intervalo mínimo de 35 dias. Em cada internamento:

a) será colhida uma amostra de sangue para dosagem de creatinina, hemoglobina,

hematócrito, transaminases e colesterol total;

b) serão administrados 04 comprimidos de 150μg de levotiroxina, acompanhado de

240 mL de água sem gás;

c)serão coletadas 17 amostras de sangue de 8 mL, cada, através de agulha

introduzida em veia superficial para a dosagem do medicamento e mais uma amostra de 10

mL antes da administração da medicação para o controle do método de dosagem do

medicamento no sangue.

d) em intervalos regulares, será verificada sua pressão, pulso e temperatura;

129

e) serão também servidas refeições padronizadas [ceia, na noite da internação (se

não interferir com o jejum); almoço, lanche da tarde, jantar e ceia no dia de administração

do medicamento; café da manhã no dia de alta] ou bebidas em horários preestabelecidos.

Após a coleta de 24 horas você receberá alta da Unidade de Farmacologia Clínica, devendo

retornar para coleta de 48 horas após a administração da medicação, em cada internação.

Um total de 300mL de sangue será colhido durante todo o estudo.

A duração total de sua participação na pesquisa está estimada em dias, a contar da

primeira internação, após o processo de seleção.

RESPONSABILIDADES

É condição indispensável, para participação no ensaio clínico, que esteja em boa

saúde e, portanto, não esteja no momento sob tratamento médico ou fazendo uso de

quaisquer drogas ou medicações e que tampouco tenha participado de outro estudo clínico

com medicamentos nos últimos 3 meses. Algumas regras deverão ser seguidas para sua

participação no estudo: a) não pode ser dependente de drogas ou álcool e caso o

investigador tenha alguma suspeita, poderá solicitar exame de urina para detecção do uso

de drogas; b) não pode ter doado (ou retirado/perdido por qualquer motivo) sangue ou

plasma dentro dos três meses que antecedem o estudo ou ter doado 1500 mL (um litro e

meio) no período de um ano antecedendo o estudo; c) não pode tomar bebidas contendo

cafeína e xantinas (café, chá, coca-cola, etc) nas 12 horas que antecedem as internações até

a última coleta.

É ainda de sua responsabilidade em relação a sua participação no ensaio clínico: a)

comparecer às internações na data e horários informados; b) permanecer em jejum pelo

tempo previsto (pelo menos 14 horas) em cada internação; c) tomar toda a medicação

prevista; d) Ingerir toda a alimentação e líquidos que tenham sido previstos; e) retornar à

Unidade de Farmacologia Clínica 1 vez em cada internação para a coleta da amostra de

sangue após a alta de cada uma das internações, no horário indicado pela equipe, relativo à

coleta de 48 horas; f) retornar à Unidade de Farmacologia Clínica na data, horário e local

130

combinados, para realização da consulta e exames de alta, independentemente de haver sido

interrompida sua participação no estudo ou de sua desistência.

POSSÍVEIS RISCOS E DESCONFORTOS

A administração oral de levotiroxina de maneira continuada pode causar reações

leves como: palpitação, insônia, dor de cabeça, febre, aumento do suor e diarréia.

Entretanto o aparecimento de efeitos indesejáveis após administração de dose única de

levotiroxina tem menor probabilidade de aparecer. Além dos efeitos citados, a

administração de qualquer medicamento pode causar reações imprevisíveis.

A retirada de sangue é um procedimento seguro e pode causar um leve desconforto,

além de uma mancha roxa pequena no local da picada que freqüentemente resolve sem

maiores problemas.

BENEFÍCIOS OU COMPENSAÇÕES

A participação neste estudo, não tem objetivo de submetê-lo a um tratamento

terapêutico. Conseqüentemente, não se espera que a participação no estudo traga qualquer

benefício em função do tratamento.

INTERCORRÊNCIAS (efeitos indesejáveis)

Se você sofrer algum malefício em decorrência direta de sua participação no estudo,

você receberá tratamento nesta Instituição, sem qualquer custo. Não haverá no entanto

qualquer compensação de ordem financeira em função do ocorrido, a não ser que a

condição faça jus da indenização prevista no Seguro de Vida em Grupo mencionado

abaixo. Contudo, ao assinar este termo, você não está renunciando qualquer direito legal

que você possui.

Durante o período de 90 dias a partir da data da assinatura deste termo, o voluntário

estará assegurado (Seguro de Vida em Grupo).

131

RESSARCIMENTO

De acordo com valores previamente estabelecidos, os voluntários serão ressarcidos

das despesas e tempo despendidos na realização do supracitado estudo clínico após a

consulta de alta. Caso desista ou seja dispensado antes do estudo ser finalizado o voluntário

receberá proporcionalmente ao tempo despendido, no final do estudo. Entende também que

a desistência ou dispensa antes do comparecimento para a primeira internação não dá

direito a ressarcimento.

Estima-se que durante o período de sua participação no Estudo vocês terão como

despesa apenas os gastos de deslocamento da residência ou trabalho até à Unidade de

Farmacologia Clínica para internação e consultas, bem como coletas de amostras após a

alta; ou ao Laboratório de Análises Clínicas para a realização dos exames. Ainda deve ser

previsto eventuais visitas posteriores para acompanhamento dos eventos adversos. O

ressarcimento destas despesas já está incluído no valor estabelecido no item acima.

PARTICIPAÇÃO VOLUNTÁRIA

Sua participação é voluntária e você tem a liberdade de desistir ou interromper a

participação neste estudo no momento que desejar. Neste caso, você deve informar

imediatamente sua decisão ao pesquisador ou a um membro de sua equipe, sem necessidade

de qualquer explicação e sem que isto venha interferir no seu atendimento médico desta

Instituição.

Obteve todas as informações e esclarecimentos necessários para poder decidir

conscientemente sobre a participação no referido ensaio clínico.

Independente de seu desejo e consentimento, sua participação no ensaio clínico

poderá ser interrompida, em função a) da ocorrência de eventos adversos; b) da ocorrência

de qualquer doença que, a critério médico, prejudique a continuação de sua participação no

estudo; c) do não cumprimento das normas estabelecidas; d) de qualquer outro motivo que,

132

a critério médico, seja do interesse de seu próprio bem estar ou dos demais participantes; e)

da suspensão do Estudo como um todo.

A Unidade de Farmacologia Clínica o manterá informado, em tempo oportuno,

sempre que houver alguma informação adicional que possa influenciar seu desejo de

continuar participando no estudo e prestará qualquer tipo de esclarecimento em relação ao

progresso da pesquisa, conforme sua solicitação.

A interrupção não causará prejuízo ao seu atendimento, cuidado e tratamento pela

equipe da Unidade de Farmacologia Clínica .

DIVULGAÇÃO DE INFORMAÇÕES QUANTO A PARTICIPAÇÃO NO ESTUDO

Os registros que possam identificar sua identidade serão mantidos em sigilo, a não

ser que haja obrigação legal de divulgação. A Unidade de Farmacologia Clínica não

identificará o voluntário por ocasião da publicação dos resultados obtidos.

Contudo, o(s) monitor(es) do Estudo, auditor(es), membros do Comitê de Ética em

Pesquisa do Complexo Hospitalar da Universidade Federal do Ceará, ou autoridades do(s)

órgão(s) governamentais envolvido(s) na fiscalização e acompanhamento do estudo terão

direito de ter acesso aos registros originais de dados clínicos de sua pessoa, coletados

durante a pesquisa, na extensão em que for permitido pela Lei e regulamentações

aplicáveis, com o propósito de verificar os procedimentos e dados do ensaio, sem no

entanto violar a condição de que tais informações são confidenciais. Ao assinar este Termo

de Consentimento Livre e Esclarecido, você está também autorizando tal acesso, mesmo se

você se retirar do Estudo.

133

CONTATOS E PERGUNTAS

Caso surja alguma intercorrência, deverá procurar a Unidade de Farmacologia

Clínica (Fone 288-8250) e solicitar que a mesma contacte os médicos responsáveis pelo

ensaio clínico ou então entrar em contato diretamente com os mesmos nos telefones

indicados no final deste Termo de Consentimento Livre e Esclarecido.

Poderá contactar a Dra. Maria Elisabete Amaral de Moraes para receber

informações adicionais, relacionadas à pesquisa ou quanto aos seus direitos como

voluntário.

Poderá contactar a Secretaria do Comitê em Pesquisa do complexo hospitalar da

UFC, fone 288 8338, para apresentar recursos ou reclamações em relação ao ensaio

clínico.

Se você concorda com o exposto acima leia e assine o documento abaixo.

ASSINATURAS

Eu declaro que li cuidadosamente todo este documento denominado Termo de

Consentimento Livre e Esclarecido e que, após, tive nova oportunidade de fazer perguntas

sobre o conteúdo do mesmo o também sobre o Estudo e recebi explicações que

responderam por completo minhas dúvidas e reafirmo estar livre e espontaneamente

decidindo participar do Estudo.

Ao assinar este Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu também estou

certificando que toda a informação que eu prestei, incluindo minha história médica, é

verdadeira e correta até onde é de meu conhecimento, e declaro estar recebendo uma cópia

assinada deste documento.

Ao assinar este Termo de Consentimento Livre e Esclarecido estou autorizando o

acesso às minhas informações, conforme explicitado anteriormente.

134

Ao assinar este Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu não renunciei

qualquer direito legal que eu venha a ter ao participar deste Estudo.

Fortaleza,_____/_____/______

Nome do voluntário Data Assinatura

Nome da pessoa que está obtendo o termo

de consentimento

Data Assinatura

Nome da Testemunha (somente necessário

se o voluntário não souber ler)

Data Assinatura

CONTROLE INTERNO Nº do Estudo: _____/____ Nº do Voluntário: ___

TELEFONES PARA CONTATO

UNIDADE DE FARMACOLOGIA CLÍNICA (85) 3288-8250

Dra. Maria Elisabete Amaral de Moraes (85) 3288 8346

Dr. Manoel Odorico de Moraes (85) 3288 8201

Dr. Fernando Antonio Frota Bezerra (85) 3288 8346

Gilmara Silva de Melo Santana (85) 3288 8060

135

ANEXO E – PROTOCOLO DO FDA

136

ANEXO F – CERTIFICADO DE ANÁLISE DOS

ANALITOS

CERTIFICADO DE ANÁLISE DA LEVOTIROXINA (T4)

137

138

CERTIFICADO DE ANÁLISE DA LIOTIRONINA (T3)

139

140

ANEXO G – Gráficos das Curvas de Concentrações versus tempo e os

Parâmetros Farmacocinéticos para cada voluntário

Gráficos e parâmetros farmacocinéticos da LEVOTIROXINA

VOL 01

Voluntário 1

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 1

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran®

(Referência)

max

(h)

4,00 4,00

max

(ng*mL

-1

)

102,80 133,30

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

2782,19 3911,03

1/2

(h)

53,41 86,06

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

2782,19 3911,03

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

6827,46 12056,03

141

VOL 02

Voluntário 2

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 2

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,00 4,00

max

(ng*mL

-1

)

120,40 99,70

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

3546,15 2289,01

1/2

(h)

54,61 38,57

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

3546,15 2289,01

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

8462,06 4358,81

142

VOL 03

Voluntário 3

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 3

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

4,00 2,50

max

(ng*mL

-1

)

102,80 144,50

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

2331,61 4725,70

1/2

(h)

38,50

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

2331,61 4725,70

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

7819,23

143

VOL 04

Voluntário 4

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 4

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,50 4,00

max

(ng*mL

-1

)

149,00 119,60

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

5244,59 2869,86

1/2

(h)

90,11 29,11

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

5244,59 2869,86

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

18296,35 4608,70

VOL 05

144

Voluntário 5

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 5

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

6,00 2,50

max

(ng*mL

-1

)

92,70 142,40

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

2559,00 5005,41

1/2

(h)

39,85 75,91

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

2559,00 5005,41

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

4979,16 15716,49

VOL 06

145

Voluntário 6

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 6

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

1,50 4,00

max

(ng*mL

-1

)

141,20 101,80

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

5178,10 2995,03

1/2

(h)

103,78 56,87

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

5178,10 2995,03

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

20989,24 7704,12

VOL 07

146

Voluntário 7

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 7

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

3,00 2,00

max

(ng*mL

-1

)

83,20 121,40

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

2403,23 4478,25

1/2

(h)

68,11 75,26

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

2403,23 4478,25

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

6186,50 13707,09

VOL 08

147

Voluntário 8

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 8

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,00 3,00

max

(ng*mL

-1

)

161,00 113,40

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

5120,96 3090,45

1/2

(h)

89,79 92,54

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

5120,96 3090,45

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

17763,87 10713,58

VOL 09

148

Voluntário 9

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 9

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

10,05 2,50

max

(ng*ml

-1

)

118,80 145,40

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

4297,93 5547,80

1/2

(h)

82,06 127,68

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

4297,93 5547,80

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

13733,25 24243,74

VOL 10

149

Voluntário 10

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 10

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

4,00

max

(ng*mL

-1

)

123,80

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

5235,35

1/2

(h)

200,43

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

5235,35

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

34092,77

VOL 11

150

Voluntário 11

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 11

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

8,00 4,00

max

(ng*mL

-1

)

101,20 140,30

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

2525,57 4593,10

1/2

(h)

38,74 72,20

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

2525,57 4593,10

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

4258,15 14706,94

VOL 12

151

Voluntário 12

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 12

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

4,00 3,00

max

(ng*mL

-1

)

126,30 116,70

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

4610,31 3209,13

1/2

(h)

87,79 31,01

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

4610,31 3209,13

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

15870,47 5065,47

VOL 13

152

Voluntário 13

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 13

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

6,00 1,50

max

(ng*mL

-1

)

108,60 138,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

2899,75 5173,03

1/2

(h)

38,91 108,65

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

2899,75 5173,03

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

5537,77 21083,67

VOL 14

153

Voluntário 14

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 14

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,00 1,50

max

(ng*mL

-1

)

125,00 123,30

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

4940,72 3009,58

1/2

(h)

174,98 33,95

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

4940,72 3009,58

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

29604,89 5532,34

VOL 15

154

Voluntário 15

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 15

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

4,00 3,00

max

(ng*mL

-1

)

101,80 140,70

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

2706,38 5971,07

1/2

(h)

40,35 198,84

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

2706,38 5971,07

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

6118,03 38415,88

VOL 16

155

Voluntário 16

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 16

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,00 3,00

max

(ng*mL

-1

)

122,00 89,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

4552,90 2676,86

1/2

(h)

43,47

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

4552,90 2676,86

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

5047,43

VOL 17

156

Voluntário 17

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 17

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,50 2,00

max

(ng*mL

-1

)

92,00 131,90

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

2919,68 4938,23

1/2

(h)

58,08 137,66

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

2919,68 4938,23

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

7444,33 22951,22

VOL 18

157

Voluntário 18

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 18

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

48,00 3,00

max

(ng*mL

-1

)

89,80 96,60

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

3885,00 1903,63

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

3885,00 1903,63

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

VOL 19

158

Voluntário 19

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 19

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

3,00 3,00

max

(ng*mL

-1

)

124,80 133,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

3754,78 4976,88

1/2

(h)

85,51 182,53

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

3754,78 4976,88

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

13019,93 31495,11

VOL 20

159

Voluntário 20

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 20

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

3,00 2,50

max

(ng*mL

-1

)

125,00 124,20

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

4893,25 3042,73

1/2

(h)

107,05 70,88

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

4893,25 3042,73

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

18947,45 10118,69

VOL 21

160

Voluntário 21

0 10 20 30 40 50

100

200

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 21

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

4,00 2,00

max

(ng*mL

-1

)

116,70 138,90

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

3144,53 4951,02

1/2

(h)

47,13 118,41

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

3144,53 4951,02

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

7999,17 20001,64

161

VOL 22

Voluntário 22

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 22

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,00 2,50

max

(ng*mL

-1

)

121,30 107,50

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

4938,89 2712,20

1/2

(h)

213,96 40,35

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

4938,89 2712,20

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

35374,17 6222,38

162

VOL 23

Voluntário 23

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 23

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

3,00 3,00

max

(ng*mL

-1

)

102,10 114,90

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

2761,58 4796,45

1/2

(h)

37,21 199,08

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

2761,58 4796,45

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

5628,52 31908,61

163

VOL 24

Voluntário 24

0 10 20 30 40 50

100

150

Referência

Teste

Tempo (h)

Levotiroxina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 24

Levotiroxina Sódica

(Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

12,00 8,00

max

(ng*mL

-1

)

125,50 126,40

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

5533,45 3003,93

1/2

(h)

294,60

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

5533,45 3003,93

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

52667,68

164

Gráficos e parâmetros farmacocinéticos da LIOTIRONINA

Voluntário 1

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 1

Liotironina (Teste)

Puran®

(Referência)

max

(h)

4,00 24,00

max

(ng*mL

-1

)

1,10 1,20

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

47,30 49,60

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

47,30 49,60

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

165

Voluntário 2

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 2

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

0,00 8,00

max

(ng*mL

-1

)

1,10 1,00

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

44,20 40,25

1/2

(h)

130,46

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

44,20 40,25

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

190,82

166

Voluntário 3

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 3

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

4,00 24,02

max

(ng*mL

-1

)

1,00 1,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

37,25 45,90

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

37,25 45,90

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

167

Voluntário 4

0 10 20 30 40 50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 4

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,50 4,00

max

(ng*mL

-1

)

1,30 1,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

55,88 43,23

1/2

(h)

180,12

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

55,88 43,23

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

277,10

168

Voluntário 5

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 5

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

3,00 2,50

max

(ng*mL

-1

)

1,00 1,20

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

39,97 52,56

1/2

(h)

118,50 2194,00

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

39,97 52,56

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

176,74 3534,37

169

Voluntário 6

0 10 20 30 40 50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 6

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

24,00 0,00

max

(ng*mL

-1

)

1,20 0,90

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

52,85 41,23

1/2

(h)

5694,67

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

52,85 41,23

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

7435,33

170

Voluntário 7

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 7

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

1,50 24,00

max

(ng*mL

-1

)

1,00 1,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

39,68 45,83

1/2

(h)

242,42

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

39,68 45,83

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

319,46

171

Voluntário 8

0 10 20 30 40 50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A,

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 8

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

48,00 4,00

max

(ng*mL

-1

)

1,30 1,00

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

57,48 43,10

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

57,48 43,10

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

172

Voluntário 9

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 9

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

10,05 3,00

max

(ng*ml

-1

)

0,90 1,20

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

39,47 49,45

1/2

(h)

512,52

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

39,47 49,45

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

631,00

173

Voluntário 10

0 10 20 30 40 50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 10

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

24,00

max

(ng*mL

-1

)

1,30

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

57,65

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

57,65

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

174

Voluntário 11

0 10 20 30 40 50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 11

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

0,00 1,50

max

(ng*mL

-1

)

1,00 1,30

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

39,98 52,15

1/2

(h)

157,89 197,38

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

39,98 52,15

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

222,20 393,86

175

Voluntário 12

0 10 20 30 40 50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A,

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 12

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,00 18,02

max

(ng*mL

-1

)

1,30 1,20

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

57,88 46,65

1/2

(h)

101,21

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

57,88 46,65

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

2,00 178,06

176

Voluntário 13

0 10 20 30 40 50

0.7

0.8

0.9

1.0

1.1

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 13

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

0,00 0,00

max

(ng*mL

-1

)

0,90 1,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

39,45 50,60

1/2

(h)

211,01 358,63

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

39,45 50,60

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

282,99 568,00

177

Voluntário 14

0 10 20 30 40 50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 14

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

0,00 0,00

max

(ng*mL

-1

)

1,20 1,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

56,71 42,48

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

56,71 42,48

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

178

Voluntário 15

0 10 20 30 40 50

0.5

0.6

0.7

0.8

0.9

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 15

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

0,00 0,00

max

(ng*mL

-1

)

0,70 0,80

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

32,55 37,85

1/2

(h)

3003,08 6487,40

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

32,55 37,85

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

3065,32 7525,33

179

Voluntário 16

0 10 20 30 40 50

0.0

0.5

1.0

1.5

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 16

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

2,00 2,50

max

(ng*mL

-1

)

1,20 0,90

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

51,18 35,88

1/2

(h)

155,89

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

51,18 35,88

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

215,79

180

Voluntário 17

0 10 20 30 40 50

0.7

0.8

0.9

1.0

1.1

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 17

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

0,50 0,00

max

(ng*mL

-1

)

0,90 1,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

39,10 51,75

1/2

(h)

327,20

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

39,10 51,75

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

416,74

181

Voluntário 18

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 18

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

48,00 2,00

max

(ng*mL

-1

)

1,10 0,90

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

47,03 35,43

1/2

(h)

115,32

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

47,03 35,43

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

151,88

182

Voluntário 19

0 10 20 30 40 50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 19

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

0,50 24,00

max

(ng*mL

-1

)

1,10 1,30

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

49,48 57,03

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

49,48 57,03

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

183

Voluntário 20

0 10 20 30 40 50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 20

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

24,00 0,00

max

(ng*mL

-1

)

1,40 1,10

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

61,97 45,83

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

61,97 45,83

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

184

Voluntário 21

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 21

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

4,00 0,00

max

(ng*mL

-1

)

1,20 1,20

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

42,05 54,13

1/2

(h)

113,74 669,87

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

42,05 54,13

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

189,73 1117,19

185

Voluntário 22

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 22

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

24,00 2,50

max

(ng*mL

-1

)

1,20 0,90

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

53,36 37,20

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

53,36 37,20

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

186

Voluntário 23

0 10 20 30 40 50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 23

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

18,00 24,00

max

(ng*mL

-1

)

1,20 1,40

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

44,40 61,20

1/2

(h)

7307,12

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

44,40 61,20

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

10586,34

187

Voluntário 24

0 10 20 30 40 50

0.00

0.25

0.50

0.75

1.00

1.25

1.50

Referência

Teste

Tempo (h)

Liotironina (ng/mL)

Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A.

Parâmetros

Farmacocinéticos

Voluntário 24

Liotironina (Teste)

Puran

(Referência)

max

(h)

48,00 8,00

max

(ng*mL

-1

)

1,20 1,00

ASC

0-ult h

(ng*h*mL

-1

)

51,78 38,73

1/2

(h)

ASC

0-48h

(ng*h*mL

-1

)

51,78 38,73

ASC

0-∞

(ng*h*mL

-1

)

188

ANEXO VIII – TABELAS DE SEQUENCIA E PERÍODO PARA A LEVOTIROXINA

Tabela 1: ANOVA para In(C

max

) Levotiroxina

Fonte g.l. SQ QM F Valor de p

Inter-individual

Seqüência

Resíduos (Inter)

6,161e

-06

0,3775

6,161e

-06

0,0179

0,0003

2,0998

0,9854

0,0483

Intra-individual

Fármaco

Período

Resíduos (Intra)

0,0451

0,4579

0,1798

0,0451

0,4579

0,0085

5,2674

53,4875

0,0321

3,364e

-07

Total

45 1,0964

Tabela 2: ANOVA para In(ASC(

0-48h)

) Levotiroxina

Fonte g.l. SQ QM F Valor de p

Inter-individual

Seqüência

Resíduos (Inter)

0,0143

0,6946

0,0143

0,0330

0,4349

3,4227

0,5167

0,0034

Intra-individual

Fármaco

Período

Resíduos (Intra)

2,835e

-05

3,1253

0,2029

2,835e

-05

3,1253

0,0096

0,0029

323,3919

0,9573

3,116e

-14

Total

4,1792

189

ANEXO IX – TABELAS DE SEQUENCIA E PERÍODO PARA A LIOTIRONINA

Tabela 3: ANOVA para In(C

max

) Liotironina

Fonte g.l. SQ QM F Valor de p

Inter-individual

Seqüência

Resíduos (Inter)

0,0137

0,5483

0,0137

0,0261

0,5260

7,9154

0,4762

6,852e

-06

Intra-individual

Fármaco

Período

Resíduos (Intra)

0,0049

0,3438

0,0692

0,0049

0,3438

0,0032

1,5116

104,2298

0,2324

1,358e

-09

Total

45 0,9928

Tabela 4: ANOVA para In(ASC(

0-48h)

) Liotironina

Fonte g.l. SQ QM F Valor de p

Inter-individual

Seqüência

Resíduos (Inter)

0,0104

0,4163

0,0104

0,0198

0,5294

6,9865

0,4748

1,918e

-05

Intra-individual

Fármaco

Período

Resíduos (Intra)

0,0091

0,6456

0,0595

0,0091

0,6456

0,0028

3,2280

227,5118

0,0867

9,705e

-13

Total

1,1644

Livros Grátis
( http://www.livrosgratis.com.br )
 
Milhares de Livros para Download:
 
Baixar livros de Administração
Baixar livros de Agronomia
Baixar livros de Arquitetura
Baixar livros de Artes
Baixar livros de Astronomia
Baixar livros de Biologia Geral
Baixar livros de Ciência da Computação
Baixar livros de Ciência da Informação
Baixar livros de Ciência Política
Baixar livros de Ciências da Saúde
Baixar livros de Comunicação
Baixar livros do Conselho Nacional de Educação - CNE
Baixar livros de Defesa civil
Baixar livros de Direito
Baixar livros de Direitos humanos
Baixar livros de Economia
Baixar livros de Economia Doméstica
Baixar livros de Educação
Baixar livros de Educação - Trânsito
Baixar livros de Educação Física
Baixar livros de Engenharia Aeroespacial
Baixar livros de Farmácia
Baixar livros de Filosofia
Baixar livros de Física
Baixar livros de Geociências
Baixar livros de Geografia
Baixar livros de História
Baixar livros de Línguas

Baixar livros de Literatura
Baixar livros de Literatura de Cordel
Baixar livros de Literatura Infantil
Baixar livros de Matemática
Baixar livros de Medicina
Baixar livros de Medicina Veterinária
Baixar livros de Meio Ambiente
Baixar livros de Meteorologia
Baixar Monografias e TCC
Baixar livros Multidisciplinar
Baixar livros de Música
Baixar livros de Psicologia
Baixar livros de Química
Baixar livros de Saúde Coletiva
Baixar livros de Serviço Social
Baixar livros de Sociologia
Baixar livros de Teologia
Baixar livros de Trabalho
Baixar livros de Turismo
 
 