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MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO
UNIVERSIDADE FEDERAL DE PELOTAS
FACULDADE DE AGRONOMIA ELISEU MACIEL
DEPARTAMENTO DE CIÊNCIA E TECNOLOGIA AGROINDUSTRIAL
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA E TECNOLOGIA
AGROINDUSTRIAL
EFEITOS DO TEOR DE AMILOSE E DA PARBOILIZAÇÃO DO ARROZ
NA FORMAÇÃO DE AMIDO RESISTENTE E NOS NÍVEIS GLICÊMICO E
LIPÊMICO DE RATOS WISTAR
ELIZABETE HELBIG
Nutricionista
Mestre em Ciência da Nutrição
Tese apresentada ao Programa de Pós-
Graduação em Ciência e Tecnologia
Agroindustrial da Universidade Federal de
Pelotas, como requisito parcial à obtenção
do título de Doutor em Ciência e Tecnologia
Agroindustrial.
Pelotas
Rio Grande do Sul - Brasil
Março de 2007
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ii
ELIZABETE HELBIG
Nutricionista
Mestre em Ciência da Nutrição
EFEITOS DO TEOR DE AMILOSE E DA PARBOILIZAÇÃO DO ARROZ
NA FORMAÇÃO DE AMIDO RESISTENTE E NOS NÍVEIS GLICÊMICO E
LIPÊMICO DE RATOS WISTAR
Tese apresentada ao Programa de Pós-
Graduação em Ciência e Tecnologia
Agroindustrial da Universidade Federal de
Pelotas, como requisito parcial à obtenção
do título de Doutor em Ciência e Tecnologia
Agroindustrial.
Orientador: Prof. Dr. Moacir Cardoso Elias
Co-orientadores: Prof. Dr. Manoel Artigas Schirmer
Prof. Dr. Pedro Luiz Antunes
Pelotas
Rio Grande do Sul - Brasil
Março de 2007
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iii
BANCA EXAMINADORA
Dr. Moacir Cardoso Elias
Drª. Leonor Almeida de Souza Soares
Drª. Luciana Bicca Dode
Drª. Márcia Rúbia Duarte Buchweitz
Dr. Walter Augusto Ruiz
iv
FOLHA DE APROVAÇÃO
____________________________________________________________
Prof. Dr. Moacir Cardoso Elias
Orientador
____________________________________________________________
Profa. Dra. Leonor Almeida de Souza Soares
____________________________________________________________
Profa. Dra. Luciana Bicca Dode
____________________________________________________________
Profa. Dra. Márcia Rúbia Duarte Buchweitz
____________________________________________________________
Prof. Dr. Walter Augusto Ruiz
v
Este trabalho é dedicado...
... ao meu esposo e à minha filha,
torcedores,
pelo eterno incentivo, carinho, respeito e paciência
durante esta etapa de nossas vidas,
amo vocês.
vi
AGRADECIMENTOS
Ao amigo e orientador, prof. Dr. Moacir Cardoso Elias, pela amizade e extrema
competência, e pelo crédito na realização deste trabalho.
Aos co-orientadores Dr. Manoel Artigas Schirmer e Dr. Pedro Luiz Antunes,
pelos ensinamentos e valiosa experiência.
A CAPES pela bolsa de doutorado, a qual permitiu o desenvolvimento deste
trabalho, e também pelos recursos que proporcionaram suporte financeiro para a sua
execução.
Ao CNPq (Processo nº. 474853/2004-7 APQ) pela concessão do Auxílio à
Pesquisa.
Ao IRGA, na pessoa de Carlos Alberto Fagundes, Granja Quatro Irmãos e ao
Sr. Roni Radünz, pelo fornecimento do arroz, matéria-prima utilizada neste trabalho.
Ao Dr. Olavo Rusig de M. Cassab Indústria e Comércio Ltda., pela doação da
mistura vitamínica.
À Faculdade de Nutrição, UFPel, em especial aos professores Márcia Rúbia
Duarte Buchweitz e José Beiro Carvalhal, por possibilitarem a realização do ensaio
biológico.
Aos amigos do Laboratório de Grãos, pela amizade com que me acolheram em
especial à Cátia Maria Romano, Alexandra Morás, Márcia Arocha Gularte, Ana Clara
Klug Tavares, Olívia Schwonke, Flávio Manetti Pereira e Daniel Simioni, e aos demais
pela boa vontade em compartilhar seus conhecimentos profissionais permitindo a
realização de parte deste trabalho.
Aos colegas pós-graduandos: Ana Paula, Cátia, Elvio, Fernanda (F1),
Fernanda (F2), Jéferson, Leandro, Magna, Marcelo, Maurício, Pablo, Romeu e Volnei
vii
pela convivência, a qual permitiu que os dias de trabalho se passassem entre
conversas, guloseimas, chimarrão, músicas, conselhos e piadas, e que desta forma ou
pelas sugestões e ajudas contribuíram para o desenvolvimento deste trabalho.
Aos estagiários e bolsistas pela valiosa cooperação e amizade, em especial a
Juliane Mascarenhas Pereira e Daniel Rutz.
Aos amigos, colegas, professores e funcionários do Departamento de Ciência e
Tecnologia Agroindustrial, pela prazerosa convivência e presteza com que sempre me
receberam nestes anos.
Aos funcionários do Biotério da UFPel, em especial aos professores Milton
Amado e Leonor Almeida de Souza Soares, pela amizade e apoio técnico
imprescindível durante toda realização deste trabalho e, aos graduandos do curso de
medicina veterinária, Rafael, Lucas, Matheus, Vagner e Tanaia.
Aos membros da banca examinadora, que contribuíram para o aprimoramento
do trabalho através das correções e sugestões.
Enfim, a todos que direta ou indiretamente, colaboraram para a realização
deste trabalho, aqui não mencionados, mas não esquecidos.
Acima de tudo, a Deus pela vida, por Sua presença, por Seu zelo e por todas
as graças já concedidas.
viii
¨ A alma é indestrutível e sua atividade continua através da
eternidade. É um quadro semelhante ao sol que, aos nossos olhos,
parece se pôr à noite, quando, na realidade, vai difundir a sua
luz em outros lugares.¨
Goethe
ix
RESUMO
AUTOR: Elizabete Helbig – Nutricionista – Mestre em Ciência da Nutrição
TÍTULO: Efeito do Teor de Amilose e da Parboilização do Arroz na Formação de Amido
Resistente e nos Níveis Glicêmico e Lipêmico de Ratos Wistar
ORIENTADOR: Prof. Dr. Moacir Cardoso Elias
CO-ORIENTADORES: Prof. Dr. Manoel Artigas Schirmer; Prof. Dr. Pedro Luiz Antunes
Departamento de Ciência e Tecnologia Agroindustrial – DCTA, UFPel, Março-2007
O consumo de arroz parboilizado tem aumentado no Brasil e as alterações provocadas
pelo processo nos grãos têm despertado interesses quanto ao conhecimento de suas
conseqüências tanto nos aspectos tecnológicos quanto nutricionais vinculados à saúde.
Foram estudados os efeitos da parboilização, do teor de amilose, da pressão de
autoclavagem e do tempo de armazenamento na formação de amido resistente em
arroz. Três amostras de arroz com alto, médio e baixo teores de amilose foram
utilizadas. As amostras foram parboilizadas nas pressões 0,4; 0,7 e 1,0kgf.cm
-2
e
armazenadas por 30; 60 e 120 dias. A determinação de amido resistente foi realizada
em arroz branco (controle) e parboilizado polido, nas seguintes condições, cru, cozido e
cozido seco em estufa com circulação de ar, e no arroz parboilizado cru armazenado. O
arroz parboilizado apresentou diferenças quanto à composição centesimal e quanto ao
rendimento de amido resistente, quando comparado com o arroz branco convencional.
A formação de amido resistente está relacionada ao teor de amilose e à pressão de
autoclavagem. O tempo de armazenamento de arroz parboilizado interfere no teor de
amido resistente. Através de ensaio biológico com ratos, foram avaliados efeitos de
dietas contendo arroz convencional ou parboilizado, com alto, médio e baixo teor de
amilose, sobre glicemia, ação hipolipidêmica e volume fecal. As variáveis ganho de
peso, consumo de dieta, massa hepática, glicemia de jejum e pós-prandial não
apresentaram diferenças com relação ao controle. O volume fecal foi afetado pelo teor
de amilose. O arroz parboilizado proporciona redução de colesterol total, sem interferir
nos níveis de HDL. Para LDL a redução maior foi observada no arroz parboilizado com
médio e alto teores de amilose. Maior teor de amido resistente em material intestinal e
fecal foi encontrado para arroz parboilizado de médio e alto teores de amilose.
Palavras-chave: Arroz. Amido Resistente. Amilose. Parboilização. Armazenamento.
Colesterol. Glicemia. Rato.
x
ABSTRACT
AUTHOR: Elizabete Helbig – Nutritionist – M.Sc. in Nutrition Science
TITLE: Effect of Amilose Content and Rice Parboiling Process in the Resistant Starch
Formation and in the Glycaemic and Lipaemic Levels in Rats Wistar
ADVISOR: Prof. Dr. Moacir Cardoso Elias
CO-ADVISOR: Prof. Dr. Manoel Artigas Schirmer; Prof .Dr. Pedro Luiz Antunes
Department of Agro-industrial Science and Technology–DCTA, UFPel, March-2007
The consumption of parboiling rice has increased in Brazil and the alterations provoked
by the process in the grains is of great interest in order to understand its consequences
on nutritional and technological aspects related to human health. The effects of
parboiling, amylose content, autoclave pressure and storage time on the formation of
resistant starch in rice were studied. Three rice samples were used, with high, medium
and low amylose contents. The samples were parboiled at pressures of 0.4, 0.7 and
1.0kgf.cm
-2
and stored for 30, 60 and 120 days. Resistant starch was determined in the
white (control) and polished parboiled rice samples for the following conditions: raw,
cooked and dry cooked in an incubator with air circulation, and in the stored raw
parboiled rice. The parboiled rice showed differences with respect to the proximate
composition and the resistant starch yield, when compared to conventional white rice.
The formation of resistant starch is related to the amylose content and to the autoclaving
pressure, and the storage time interfered with the resistant starch content. Using
biological trials with rats, the effects of diets containing conventional or parboiled rice
with high, medium and low amylose contents were evaluated with respect to their effects
on glycaemia, hypolipidaemic action and faecal volume. The variables of weight gain,
diet consumption, hepatic mass, fasting and post-prandial glycaemia showed no
differences from the control. The faecal volume was affected by the amylose content.
The parboiled rice caused a reduction in total cholesterol without affecting the HDL
levels, the highest reductions in LDL being shown for the parboiled rice with medium
and high amylose contents. The highest resistant starch contents in the intestinal and
faecal materials were found for the parboiled rice with medium and high amylose
contents.
Keywords: Rice. Resistant Starch. Amylose. Parboiling. Storage. Cholesterol.
Glycaemia. Rat.
xi
LISTA DE FIGURAS
Figura 1.
Amido resistente (% b.s.) em função da amilose e da pressão de
autoclavagem na parboilização de arroz...........................................
36
Figura 2.
Teores (mg.dL
-1
) de colesterol total sérico (CT) dos ratos
Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas
experimentais (n= 6 ratos/grupo).......................................................
47
Figura 3.
Teores (mg.dL
-1
) de triacilgliceróis séricos (TAG) dos ratos
Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas
experimentais (n= 6 ratos/grupo).......................................................
48
Figura 4.
Redução (%) do colesterol total e de triacilgliceróis séricos quanto
ao controle após 28 dias do ensaio com ratos Wistar/UFPel (n= 6
ratos/grupo).......................................................................................
48
Figura 5.
Teores (mg.dL
-1
) de colesterol HDL (c-HDL), colesterol LDL (c-
LDL) e colesterol VLDL (c-VLDL) sérico dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6
ratos/grupo).......................................................................................
50
Figura 6.
Redução (%) das frações de colesterol HDL (c-HDL), colesterol
LDL (c-LDL) e colesterol VLDL (c-VLDL) séricos quanto ao
controle após 28 dias do ensaio com ratos Wistar/UFPel (n= 6
ratos/grupo).......................................................................................
51
Figura 7.
Glicemia de jejum (mg.dL
-1
) dos ratos Wistar/UFPel alimentados
durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6 ratos/grupo)......
54
Figura 8.
Curva glicêmica (mg.dL
-1
) das dietas experimentais em ratos
machos Wistar/UFPel, no tempo inicial (jejum), e aos 30, 60 e 90
minutos após ingestão.......................................................................
54
Figura 9.
Curvas glicêmicas (mg.dL
-1
) das dietas experimentais em ratos
adultos Wistar/UFPel em jejum e ao longo de 90 minutos................
56
Figura 10.
Lipídeos totais fecais (mg), em base seca, dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6
ratos/grupo).......................................................................................
63
Figura 11.
Colesterol total fecal (mg), em base seca, dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6
ratos/grupo).......................................................................................
63
Figura 12.
Triacilgliceróis fecais (mg), em base seca, dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6
ratos/grupo).......................................................................................
64
xii
LISTA DE TABELAS
Tabela 1.
Tratamentos para definição da melhor combinação operacional de
tempo e temperatura de encharcamento no processo de
parboilização – Isotermas de hidratação de amostras de arroz com
três teores de amilose........................................................................
20
Tabela 2.
Tratamentos para caracterização da matéria-prima e determinação
de amido resistente em arroz convencional (branco) e parboilizado,
cru, cozido e cozido seco..................................................................
21
Tabela 3.
Tratamentos para determinação de amido resistente decorrente do
teor de amilose, da pressão de autoclavagem e do
armazenamento..................................................................................
22
Tabela 4.
Ensaio biológico com ratos adultos machos Wistar/UFPel................
23
Tabela 5.
Dietas experimentais utilizadas durante 28 dias no ensaio biológico
com ratos adultos machos Wistar/UFPel............................................
26
Tabela 6.
Valores calórico (Kcal.100g
-1
) e protéico (%) das dietas
experimentais oferecidas durante 28 dias aos ratos adultos machos
Wistar/UFPel.......................................................................................
27
Tabela 7.
Efeito do processo de beneficiamento sobre a composição
centesimal de amostras de arroz (g.100g
-1
- b.s.*) com três níveis
de amilose..........................................................................................
32
Tabela 8.
Amido resistente (% - b.s.) em arroz, cru, cozido e cozido seco........
34
Tabela 9.
Amido Resistente (% b.s.) em função do teor de amilose e da
pressão de autoclavagem na parboilização de arroz.........................
37
Tabela 10.
Amido resistente (% b.s.) em função do teor de amilose e do tempo
de armazenamento em arroz parboilizado cru...................................
39
Tabela 11.
Amido Resistente, em base seca, das dietas experimentais.............
40
Tabela 12.
Ganho de peso (g), consumo de dieta (g) e Quociente de Eficiência
Alimentar (QEA) dos ratos alimentados durante 28 dias com as
dietas experimentais...........................................................................
41
Tabela 13.
Massa dos fígados (g), do material intestinal (g) e fezes (g) dos
ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as
dietas experimentais...........................................................................
43
xiii
Tabela 14.
Dosagens sorológicas (mg.dL
-1
) de colesterol total e triacilgliceróis
dos ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com
as dietas experimentais......................................................................
45
Tabela 15.
Dosagens sorológicas (mg.dL
-1
) c-HDL, c-LDL e c-VLDL dos ratos
machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas
experimentais.....................................................................................
49
Tabela 16.
Glicemia de jejum (mg.dL
-1
) no tempo inicial, meio e fim do ensaio
biológico com ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28
dias com as dietas experimentais.......................................................
52
Tabela 17.
Curva glicêmica (mg.dL
-1
) das dietas experimentais em ratos
machos Wistar/UFPel, no tempo inicial (jejum), e aos 30, 60 e 90
minutos após ingestão........................................................................
55
Tabela 18.
Lipídeos totais, colesterol total e triacilgliceróis hepáticos de ratos
machos Wistar/UFPel, em base seca.................................................
58
Tabela 19.
Teores de lipídeos, colesterol e triacilgliceróis hepáticos (mg.g
-1
)
específicos, em base seca, dos ratos machos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais................
59
Tabela 20.
Teores de lipídeos totais, colesterol total e triacilgliceróis
excretados (b.s.), dos ratos machos Wistar/UFPel alimentados
durante 28 dias com as dietas experimentais....................................
60
Tabela 21.
Teores de lipídeos, colesterol e triacilgliceróis excretados (b.s.), dos
ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as
dietas experimentais...........................................................................
61
Tabela 22.
Amido resistente (mg.g
-1
) nas fezes e no material intestinal, e
volume fecal (mL) dos ratos machos Wistar/UFPel alimentados
durante 28 dias com as dietas experimentais....................................
65
xiv
LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS
Amido Resistente – AR.
Colesterol Total – CT.
Departamento de Ciência e Tecnologia Agroindustrial – DCTA
Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel – FAEM.
Lipoproteína de Alta Densidade – HDL.
Lipoproteína de Baixa Densidade – LDL.
Lipoproteína de Muito Baixa Densidade – VLDL.
Triacilgliceróis – TG.
Universidade Federal de Pelotas – UFPel.
xv
LISTA DE ANEXOS
Anexo 1.
Aprovação do ensaio biológico pela Comissão de
É
tica na
Experimentação Animal (CEEA-UFPel)......................................
88
xvi
SUMÁRIO
1 INTRODUÇÃO............................................................................................
01
2 REVISÃO DA LITERATURA......................................................................
03
2.1 O Arroz.....................................................................................................
03
2.2 Amido Resistente.....................................................................................
08
3 OBJETIVOS................................................................................................
18
3.1 Geral.........................................................................................................
18
3.2 Específicos...............................................................................................
18
4 MATERIAIS E MÉTODOS..........................................................................
19
4.1 Material.....................................................................................................
19
4.1.1 Arroz......................................................................................................
19
4.1.2 Animais para Experimentação...............................................................
19
4.2 Métodos....................................................................................................
19
4.2.1 Delineamentos Experimentais...............................................................
19
4.2.1.1 Experimento I: Determinação do tempo e temperatura de
encharcamento...............................................................................................
19
4.2.1.2 Experimento II: Efeito da parboilização e do tempo de
armazenamento sobre o conteúdo de amido resistente................................
21
4.2.1.3 Experimento III: Ensaio Biológico - Efeito do amido resistente nos
níveis glicêmicos de ratos Wistar/UFPel........................................................
23
4.2.2 Procedimentos Experimentais...............................................................
24
4.2.2.1 Processo de Parboilização.................................................................
24
4.2.2.2 Cocção do Arroz.................................................................................
24
4.2.2.3 Secagem do Arroz Cozido..................................................................
25
xvii
4.2.2.4 Dietas Experimentais..........................................................................
25
4.2.2.5 Protocolo para a Condução do Ensaio Biológico...............................
27
4.2.3 Determinação de Composição Centesimal...........................................
28
4.2.4 Determinação de Amilose.....................................................................
28
4.2.5 Determinação de Amido Resistente......................................................
29
4.2.6 Determinação de Lipídeos Totais Hepáticos e Fecais..........................
29
4.2.7 Determinação de Colesterol Total Sérico, Hepático e Fecal.................
29
4.2.8 Determinação de Colesterol HDL..........................................................
30
4.2.9 Determinação de Triacilgliceróis Sérico, Hepático e Fecal...................
30
4.2.10 Determinação de Glicemia de Jejum e Curva Glicêmica....................
30
4.2.11 Determinação de Volume Fecal..........................................................
31
4.2.12 Determinação de Ganho de Peso.......................................................
31
4.2.13 Determinação de Consumo de Dieta..................................................
31
4.2.14 Tratamento Estatístico dos Resultados Experimentais.......................
31
5 RESULTADOS E DISCUSSÃO..................................................................
32
5.1 Composição Centesimal...........................................................................
32
5.2 Amido Resistente.....................................................................................
33
5.3 Ensaio Biológico.......................................................................................
40
5.3.1 Ganho de Peso, Consumo de Dieta e Quociente de Eficiência
Alimentar (QEA).............................................................................................
41
5.3.2 Massa Hepática, Material Intestinal e Massa Fecal..............................
43
5.3.3 Dosagens Sorológicas...........................................................................
45
5.3.3.1 Colesterol Total, c-HDL, c-LDL, c-VLDL e Triacilgliceróis..................
45
5.3.3.2 Glicemia de Jejum e Curva Glicêmica................................................
52
5.3.3.3 Lipídeos Totais, Colesterol Total e Triacilgliceróis Hepáticos............
57
xviii
5.3.3.4 Lipídeos Totais, Colesterol Total, Triacilgliceróis e Amido
Resistente Fecais...........................................................................................
60
6 CONCLUSÕES...........................................................................................
67
7 REFERÊNCIAS...........................................................................................
68
8 ANEXOS.....................................................................................................
88
1 INTRODUÇÃO
Os carboidratos, especialmente o amido, são importantes fontes energéticas na
alimentação humana. Classificados em simples e complexos representam uma fonte
primária de energia, contribuindo com mais de 60% do consumo total calórico. Os
carboidratos simples possuem a capacidade de liberar energia de forma rápida,
ocorrendo o contrário com os carboidratos complexos, que provêem energia durante
tempo prolongado.
Os carboidratos complexos estão relacionados aos seus efeitos fisiológicos e
nutricionais. Nesse grupo de nutrientes incluem-se o amido e os outros polissacarídeos,
os quais possuem diferenças em suas estruturas químicas e em seus efeitos
fisiológicos (LOBO e SILVA, 2003). Por suas diferenças estruturais, uma parte dos
componentes que formam o grupo não-amido contribui pouco para o conteúdo
energético das dietas, mas pode auxiliar na prevenção de várias doenças relacionadas
à alimentação.
O amido resistente, sendo um carboidrato complexo, incluído no conceito de
fibra alimentar, conduziu a uma nova linha de pesquisa nas áreas de nutrição,
tecnologia e análise de alimentos. Efeitos fisiológicos causados por este componente,
como a alteração no trânsito gastrintestinal, o aumento da sensação de saciedade, a
ação em colesterolemia, glicemia e níveis de insulina sérica pós-prandiais, são
decorrentes de um conjunto de propriedades físicas desempenhadas em função dos
componentes químicos encontrados no alimento (LAJOLO et al., 2001a).
Com o decorrer do tempo, ocorreram grandes modificações no conhecimento
da função dos carboidratos na nutrição e saúde humana, principalmente em relação
aos seus efeitos fisiológicos diferenciados, atribuídos em especial ao amido resistente.
Neste sentido, o emprego de ratos de laboratório em pesquisas na área de Nutrição
2
tem proporcionado importantes descobertas e, contribuído para a formação de bases
científicas e de suas aplicações, neste campo de conhecimento (ANGELIS, 1995).
O amido resistente é a fração de amido não digerida no intestino delgado de
indivíduos saudáveis, sendo fermentada no intestino grosso. As atuações do amido
resistente são similares as da fibra alimentar, incluindo efeito pré-biótico, atuando no
metabolismo lipídico, reduzindo o colesterol e os riscos de colite ulcerativa e de câncer
de cólon. O amido resistente, por não ser digerido no intestino delgado, também atua
na redução da glicemia pós-prandial (SHAMAI et al., 2003).
Dentre os alimentos ricos em carboidratos, o arroz é um dos cereais de maior
destaque, pois se trata de alimento básico para a maioria da população mundial. O
arroz é consumido preferencialmente na forma de grãos brancos polidos, obtidos por
processo convencional de industrialização, e se caracteriza como um alimento que
apresenta limitado conteúdo de fibra alimentar.
Vários estudos caracterizam o arroz parboilizado como sendo excelente fonte
de carboidratos complexos, possuindo teores significativos de vitaminas do complexo B
e minerais (ELIAS et al. 2001; AMATO, 2003; SILVA, 2003). Apesar de ser um alimento
secular, alguns aspectos nutricionais ainda não são conclusivos. Os carboidratos
presentes no arroz não teriam apenas caráter energético, mas também complexas
funções fisiológicas.
O consumo de arroz parboilizado tem crescido substancialmente nos últimos
anos. O arroz parboilizado em relação ao branco polido apresenta vantagens
nutricionais de suma importância: o aumento de minerais e vitaminas e de substâncias
com ação semelhante a das fibras, como o amido resistente, que atua na manutenção
da glicemia. O arroz parboilizado apresenta menor índice glicêmico quando comparado
ao arroz branco polido (WALTER et al., 2005).
O Brasil tem grande potencial para explorar o mercado de produtos
modificados. Paralelamente ao esforço no aumento da produção, tanto qualitativa como
quantitativamente, há necessidade básica de incremento das condições de
3
beneficiamento. Há, entretanto, a possibilidade de maior consumo de arroz
parboilizado, por parte de pessoas saudáveis preocupadas em reduzir o consumo
calórico diário e também por aquelas acometidas por patologias como o diabetes
mellitus, onde este produto resultaria em menor índice glicêmico, fator benéfico para o
bom controle desta patologia.
Diante do exposto, é sabido que a fibra alimentar e as substâncias
semelhantes contribuem na prevenção e no controle de alguns problemas de saúde,
devido a suas propriedades funcionais. O arroz parboilizado é um produto natural e de
fácil acesso em todo o Brasil. Portanto, há necessidade de novas pesquisas a partir
deste alimento, especificamente em relação ao amido resistente, para que seus efeitos
nutricionais possam ser mais conhecidos e divulgados entre a comunidade científica e
os próprios consumidores.
Considerando-se o aumento do consumo de arroz parboilizado e a
importância da fração amido resistente na saúde, a pesquisa foi conduzida objetivando
avaliar a influência do teor de amilose, da pressão de autoclavagem e do tempo de
armazenamento na formação do amido resistente em arroz, assim como verificar efeitos
da parboilização de arroz com diferentes teores de amilose sobre os níveis glicêmico e
lipêmico de ratos Wistar.
2 REVISÃO DA LITERATURA
2.1 O Arroz
O arroz é uma planta originária do sudeste asiático, havendo relatos de
semeadura na China, há cerca de 5.000 anos (GALLI, 1978). Segundo Pedroso (1982),
o arroz é uma das mais importantes culturas, sendo alimento básico de 2/3 da
população mundial. Jardim (2000) relata que o arroz fornece 20% de energia para a
alimentação mundial, enquanto que o trigo fornece 19% e o milho 5%.
4
No mundo, existe mais de 240.000 variedades de arroz registradas. Isto ocorre
devido ao clima, às características do solo e às culturas diferentes. Desta variação
surgem grãos com diversas características como temperatura de gelatinização, textura,
estabilidade e viscosidade (HOSENEY, 1991; BOBBIO e BOBBIO, 1992).
O arroz foi introduzido no Brasil por portugueses, no século XVI, constituindo-
se como componente essencial da dieta básica da população como fonte de
carboidratos (ROVARIS et al., 2003). Apesar do excelente valor nutritivo, o arroz se
caracteriza como um alimento que apresenta limitado conteúdo de fibra alimentar,
principalmente na forma em que ele é mais consumido, o arroz branco polido.
Além de ser uma fonte rica em energia alimentar, o arroz possui vitaminas do
complexo B, como a tiamina, riboflavina e niacina. Na fração lipídica destacam-se o
orizanol e o tocotrienol (HEINEMANN et al., 2006). De acordo com vários
pesquisadores, o óleo do farelo de arroz é recomendado para o tratamento de
hiperlipoproteinemias em humanos, pois auxilia na redução das concentrações
plasmáticas de colesterol total (CT), lipoproteína de baixa densidade (c-LDL) e
triacilgliceróis (TG), quando adicionado à dieta (WILSON et al. 2000; CICERO e GADDI
2001; BERGER et al. 2004). Estudos com ratos demonstraram a associação entre o
consumo de óleo de farelo de arroz e a resposta hipolipidêmica, caracterizada por
reduções nas concentrações séricas de triacilgliceróis, colesterol total, lipoproteína de
muito baixa densidade (c-VLDL) e lipoproteínas de baixa densidade (RUKMINI e
RAGHURAM, 1991; SUNITHA et al. 1997).
O sistema de cultivo e colheita do arroz, a sazonalidade de produção e a
perecibilidade do produto, em associação às características anatômicas e funcionais do
grão, fazem com que este cereal seja submetido a operações que visam a sua
conservação. Para que este alimento possa ser consumido é necessária pelo menos
uma operação de processamento. O grão é uma cariopse, envolta por duas glumelas, a
lema e a pálea, que formam a casca do arroz, havendo a necessidade do
descascamento antes do seu consumo, mesmo que este seja na forma de arroz integral
(ELIAS, 2004).
5
O arroz é consumido na forma integral ou esbramado, ou na forma de grãos
brancos polidos, parboilizados ou não parboilizados. Estima-se que entre 70 e 80% do
arroz consumido no Brasil seja branco polido. O parboilizado corresponde a 20% - 25%.
Todas as demais formas de arroz, incluindo o integral, não chegam juntas a 10%
(ELIAS e FRANCO, 2006).
Dentre as formas de processamento do arroz, o uso do pilão é uma das mais
antigas, entretanto, processos primitivos de parboilização são também relatados, sem,
contudo, identificar cronológica e geograficamente o emprego pela primeira vez do
método, sendo o mais provável que tenha sido na Ásia sul-oriental ou na África tropical.
Com o passar do tempo o processo de parboilização foi sendo aperfeiçoado, os
processos anteriores variavam desde encharcamento do grão com água abundante e
secagem ao sol, processo repetido várias vezes, ou então, os grãos eram colocados em
vasilhas de argila ou de ferro, com água suficiente e eram aquecidas e, após o arroz
era seco ao sol. Atualmente este processo foi tecnificado e mecanizado, utilizando-se o
vapor sob pressão após o encharcamento dos grãos (AMATO e ELIAS, 2005)
O processo de parboilização pode ser resumido como uma ação de água e
calor promovendo a migração do microconstituintes hidrossolúveis para o interior do
grão, deixando-o mais rico sob o ponto de vista nutricional. Uma vez transferidos para o
interior do grão, os nutrientes são fixados através da gelatinização do amido pelo calor.
As operações unitárias iniciais a que são submetidos os grãos, ainda em casca, através
de um processo hidrotérmico, resultam em uma nova vantagem que ora começa tomar
importância: o incremento no valor das fibras, devido à formação de amido resistente.
Este fato permite cogitar que o parboilizado possa fazer parte de um grupo muito
especial de alimentos com propriedades, simultâneas, de nutrir e servir como remédio:
os nutracêuticos (AMATO et al., 2002; AMATO, 2003).
Estudos relatam que o processo de parboilização do arroz, através de
tratamentos hidrotérmicos modifica a estrutura físico-química de seus constituintes,
proporcionando um aumento da fração não digerível (ELIAS et al. 2001; AMATO et al.,
2002).
6
O amido é a mais importante substância de reserva nutricional das plantas
superiores, sendo o principal constituinte do arroz, e compreende de 50 a 65% do peso
dos grãos dos cereais. É constituído de dois polissacarídeos, a amilose e a
amilopectina, cujas proporções são variáveis (BOBBIO e BOBBIO, 1992). A variação
nos teores de amilose e amilopectina não afeta o valor nutritivo do arroz, mas influi nas
qualidades culinárias, de tal forma que, quanto maior for o teor de amilose, mais
separados ficarão os grãos após a cocção (CHANDIER, 1994).
O processo de parboilização provoca modificações que alteram propriedades
físicas, químicas e sensoriais nos grãos de arroz, com vantagens econômicas e
nutricionais, uma vez que se obtêm maiores renda e rendimentos durante o
beneficiamento, quando se compara com o branco convencional, e também pela maior
retenção de micronutrientes, como as vitaminas do complexo B (ELIAS et al. 2001;
AMATO et al., 2002; PEREIRA, 2006).
Martinez y Cuevas (1989) relatam que a relação amilose/amilopectina depende
da origem do amido e é em função dela que existem diferenças nas características dos
amidos provenientes de fontes vegetais distintas e que pequenas variações nesta
relação podem afetar as propriedades físicas do amido. De acordo com os autores, o
teor de amilose para os grãos de arroz é considerado baixo quando inferior a 22%,
médio quando entre 23 e 27%; alto quando superior a 28%.
Monks (2001) verificou que a parboilização não altera o conteúdo de amilose
dos grãos de arroz. Silva (2003), trabalhando com arroz irrigado, observou que a
parboilização aumentou, em média, em relação ao processo convencional de
beneficiamento, o teor de matéria mineral de 0,53% para 0,86%, o teor de proteína
bruta de 8,55% para 8,77%, o amido disponível de 76,27% para 62,58% e a fibra em
detergente neutro de 2,7% para 15,4%.
Segundo Elias (1998), no processo de parboilização do arroz, as operações
correspondentes às do beneficiamento convencional são precedidas pelo tratamento
hidrotérmico, que em geral consta de três etapas: hidratação, autoclavagem e
secagem. A hidratação tem por finalidade promover a entrada de água no grão,
7
aproveitando a propriedade que tem o amido de absorver até 30% do seu peso em
água, tomando o espaço ocupado pelo ar dentro do grão. A temperatura utilizada é um
pouco inferior à temperatura de gelatinização e esse valor é próprio para cada cultivar,
mas nunca inferior a 58ºC, segundo a legislação nacional (BRASIL, 1988).
Nas indústrias mais tecnificadas, após a hidratação o arroz é submetido à
autoclavagem, a qual tem por objetivo promover a gelatinização do amido, que é
facilitada pelo fato do grão entrar com umidade alta e energia, gerada pelo calor da
água de hidratação, mas nas de menor tecnificação, esse processo ocorre em estufas,
que ao invés de vapor utilizam ar seco em altas temperaturas (ELIAS e FRANCO,
2006). A autoclavagem é uma etapa da parboilização em que ocorre a completa
gelatinização do amido e pode ser realizada a pressões entre 0,3 e 1,2 kgf.cm
-2
, por 10
a 20 minutos em temperaturas de 108 a116ºC (SILVA 2003).
A operação de secagem na parboilização pode ser dividida em três etapas, de
acordo com Amato e Elias (2005). A secagem primária ocorre quando há uma alta
concentração de umidade na superfície do grão, a retirada dessa água superficial é
facilitada pela transferência na massa de grãos. A umidade é rebaixada em cerca de 10
pontos percentuais. Esta é uma etapa com rápida perda de água, o que permite o uso
de equipamentos de alta taxa de transferência, como os secadores rotativos horizontais
e secadores em leito fluidizado.
A secagem secundária ou complementar é caracterizada por ser mais lenta,
pois a umidade do interior do grão deve migrar para a periferia, e então ser transferida
para o ar de secagem. Nesta etapa, comumente são utilizados os secadores
intermitentes, que podem ser precedidos por secadores contínuos adaptados.
Durante a secagem de arroz deve ser considerada a diferença entre a
secagem de um grão de arroz comum de um grão gelatinizado, isto torna necessário
um comportamento diferenciado, havendo a necessidade de uma operação
intermediária entre as duas etapas de secagem. Esta etapa é o revenido, ou
temperagem intermediária, caracterizada por reequilibrar a água no grão, deixando-o
8
estacionado, aproveitando a propriedade de tendência a homogeneizar a distribuição
de água segundo a capacidade de retenção de cada uma das camadas.
2.2 Amido Resistente
Os carboidratos contribuem com cerca de 40 a 60% da energia ingerida
diariamente pela população. A fonte de carboidratos é variável, entretanto o amido é o
maior componente. O amido é composto por macromoléculas, amilose e amilopectina.
Os alimentos amiláceos comumente não são consumidos crus, havendo a necessidade
de um tratamento térmico, de forma a torná-lo palatável e aumentar sua
biodisponibilidade. Quando o amido é aquecido em excesso de água, a estrutura de
seus grânulos é alterada pela perda da cristalinização da amilopectina, seguida de
lixiviação, hidratação e solubilização. Este processo é conhecido como gelatinização.
A hidratação do amido, seguida de processamento térmico, resulta na
formação de amido retrogradado, onde as moléculas de amido formam cadeias lineares
através de ligações fortes entre seus polímeros e também com outros componentes do
alimento, como exemplo as proteínas (SAGUM e ARCOT 2000).
A definição do amido como um carboidrato nutricionalmente disponível está
baseada na facilidade de hidrólise de suas macromoléculas formadoras, no sistema
digestório, produzindo carboidratos de baixo peso molecular. Segundo Asp (1995), as
propriedades mais importantes com influência no valor nutricional do amido incluem a
taxa e a extensão da digestão ao longo do trato gastrintestinal e o metabolismo de seus
monômeros absorvidos. Entretanto, alguns aspectos físico-químicos do amido podem
afetar a sua digestibilidade. De um modo geral, os principais fatores incluem a origem
botânica, as características do próprio amido, a relação amilose/amilopectina, o grau de
cristalinidade, a forma física, as condições de processamento a que são submetidos os
produtos amiláceos, assim como interações ocorridas entre esta substância e outros
constituintes do alimento (COLONNA et al., 1992; GRANFELDT et al., 1993;
SKRABANJA e KREFT, 1998; HOOVER, 2003).
9
A partir da década de 80, do século XX, os trabalhos de Englyst e Cummings
(1987) intensificaram as pesquisas a respeito das frações do amido, assim como suas
classificações e propriedades.
O amido pode ser classificado de acordo com sua susceptibilidade à hidrólise
enzimática. Segundo Englyst et al. (1992), de acordo com a velocidade em que o
alimento é digerido, o amido divide-se em (a) rapidamente digerível, quando ocorre
conversão em glicose em até 20 minutos; (b) lentamente digerível, quando convertido
em glicose em 120 minutos; e (c) amido resistente, quando resiste à ação das enzimas
digestivas.
O termo amido resistente foi sugerido inicialmente por Englyst et al. (1982)
quando constataram que muitos alimentos processados continham maior teor aparente
de polissacarídeos não amiláceos do que os seus produtos crus correspondentes.
Estes pesquisadores definiram amido resistente como sendo aquele que resiste à
dispersão em água fervente e hidrólise pela ação da amilase pancreática e da
pululanase. A partir de 1992, a definição para amido resistente assumiu um caráter
mais relacionado a seus efeitos fisiológicos, representando “a soma do amido e
produtos de sua degradação que não são absorvidos no intestino delgado de indivíduos
saudáveis” (FAISANT et al., 1993; CHAMP e FAISANT, 1996; GOÑI et al., 1996).
Para Annison e Topping (1994), quimicamente o amido resistente resulta da
fração amilose altamente retrogradada. A quantidade formada é diretamente
proporcional ao conteúdo de amilose linear presente no amido. Assim, o grau de
formação de amido resistente em alimentos depende do tipo de amido, condições de
processamento empregadas, e está também influenciado pela duração e pelas
condições de armazenamento (GOLDBLITH, 1971; GOÑI et al., 1996).
O amido resistente é classificado em quatro tipos de acordo com Eerlingen e
Delcour (1995). O tipo 1 (RS 1) representa o grânulo de amido fisicamente inacessível
na matriz do alimento, fundamentalmente por causa das paredes celulares e proteínas;
o tipo 2 (RS 2)refere-se aos grânulos de amido nativo, encontrados no interior da célula
vegetal, apresentando lenta digestibilidade devido às características intrínsecas da
10
estrutura cristalina dos seus grânulos; o tipo 3 (RS 3)consiste em polímeros de amido
retrogradado, principalmente de amilose, produzidos quando o amido é resfriado após a
gelatinização (ENGLYST et al., 1992; COLONNA et al., 1992). O tipo 4 (RS 4) é o
amido modificado quimicamente, decorrente de modificações na estrutura química do
amido. Estes incluem os amidos substituídos quimicamente com grupamentos ésteres,
fosfatos e éteres, bem como amidos com ligações cruzadas (BJÖRK et al., 1989;
CHAMP et al., 2001).
Alguns fatores, como, métodos de conservação do alimento, processos
culinários e fatores intrínsecos do alimento podem afetar a formação de amido
resistente. Durante o processamento e o armazenamento, as mudanças ocorridas na
estrutura do amido influenciam profundamente as suas propriedades funcionais e
fisiológicas (COLONNA et al., 1992). A quantidade de água, o grau de gelatinização, o
tempo e a temperatura de armazenamento são variáveis que influenciam no processo
de cristalização e afetam diretamente os rendimentos de amido resistente (ESCARPA
et al., 1996).
Durante o aquecimento em meio aquoso, ocorre rompimento das pontes de
hidrogênio estabilizadoras da estrutura cristalina interna dos grânulos de amido. Com o
prosseguimento do aquecimento, rompe-se a região cristalina e a água entra, fazendo
com que o grânulo se rompa e perca a birrefringência (HOSENEI, 1991; GERMANI,
1999). Mangala et al. (1999), em estudo sobre a formação de amido resistente,
constataram que a retirada da fração lipídica do arroz aumentou em 110% o amido
resistente, e após a autoclavagem das amostras, o amido resistente, passou de 0,03%
para 0,89%, resultando em quase 300% de aumento. A retirada da fração lipídica, que
internamente é responsável pela interação com as moléculas de amilose, torna este
constituinte disponível para maior agregação entre si, e após ciclos de autoclavagem e
resfriamento, ocasionam o aumento de amido resistente (EERLINGEN e DELCOUR,
1995).
Para Themeier et al. (2005), entretanto, o teor de amilose não é o único
determinante do teor de amido resistente no alimento. Amidos de cereais contendo 34%
11
de amilose apresentaram baixo teor de amido resistente (1%), já amido de ervilha com
teor semelhante de amilose (30-34%) resultou em elevados teores de amido resistente,
na faixa de 9 a 11,5%. Os autores atribuem a diferença no teor de amido resistente ao
alto grau de cristalinidade destes amidos, que apresentam polimorfismo tipo C,
enquanto que o amido de cereais apresenta polimorfismo tipo A.
Em temperatura de refrigeração e de congelamento, as cadeias de amido
tendem a interagir mais fortemente entre si, obrigando a água a sair e determinando,
assim, a chamada sinerese. A recristalização ou retrogradação ocorre quando, após
uma solubilização durante o processo de gelatinização, as cadeias de amilose, mais
rapidamente do que as de amilopectina, agregam-se formando duplas hélices
cristalinas estabilizadas por pontes de hidrogênio (GERMANI, 1999). Os polímeros de
amilopectina retrogradada, limitados pela sua estrutura ramificada, são menos
firmemente ligados do que os da amilose retrogradada, o que lhes confere uma menor
resistência à hidrólise enzimática e por conseqüência torna o amido mais digerível
(COLONNA et al., 1992).
Propriedades físico-químicas desses componentes resistentes à digestão no
intestino delgado, e mesmo o seu grau de desintegração durante o processamento e a
mastigação, influenciam nos efeitos fisiológicos no organismo. Dentre tais efeitos, é
importante salientar a propriedade de sofrer fermentação no cólon. A extensão de sua
fermentação é influenciada por fatores como disponibilidade de nutrientes, pH, tempo
de trânsito intestinal, suas características físico-químicas, presença de alguns
constituintes como fitatos e compostos fenólicos, além da microbiota existente no
intestino grosso. Por outro lado, a fermentação gera alguns produtos que aumentam a
acidez do cólon, exercendo efeitos protetores. Esses produtos também provêm energia
que poderá ser utilizada como reserva energética para a proliferação de bactérias
colônicas benéficas (LAJOLO et al., 2001b; LOBO e SILVA, 2003).
Segundo Sievert e Pomeranz (1989) uma parte do amido ingerido escapa da
digestão enzimática no intestino delgado. A microflora do cólon utiliza esta fração do
amido não digerido fermentando-o. A atuação do amido resistente é similar a das fibras
12
alimentares, incluindo efeito pré-biótico na microflora do cólon, alteração no
metabolismo de lipídeos e colesterol, com redução do risco de colite ulcerativa e câncer
de cólon. Por não ser digerido no intestino delgado, também reduz o índice glicêmico do
alimento (HOEBLER et al., 1999).
Pesquisas demonstram uma relação positiva entre a fibra alimentar e a saúde
humana. A fibra alimentar, definida como o somatório de polissacarídeos e substâncias
relacionadas indigeríveis mais a lignina, é o constituinte de alimentos e de produtos
alimentícios que resiste à hidrólise dos sucos digestivos do homem. A fibra ingerida na
alimentação humana não é hidrolisada até no intestino delgado, mas, sim a partir da
porção terminal deste e, principalmente, ao alcançar o intestino grosso, a fração solúvel
é extensamente fermentada pela flora natural microbiana, enquanto que, a fração
insolúvel permanece quase que totalmente intacta (RAUPP e SGARBIERI, 1997).
A evolução do conhecimento científico permite concluir que a normalidade
digestiva, bem como, a prevenção e o tratamento de doenças como a constipação, a
diverticulite, a hipercolesterolemia, a hiperglicemia, a obesidade, o câncer do intestino
grosso e de mama, estão relacionados, em parte, à ingestão de fibra alimentar.
Contudo, os diversos constituintes da fibra alimentar não têm o mesmo efeito ou ação
fisiológica. A fibra solúvel contribui para o aumento do volume intra-luminal, no entanto,
tem pouco efeito, em contraste com a fibra insolúvel, no peso e no volume fecal
(MIKKELSEN et al., 1979; BOLTON et al., 1981; SMITH et al., 1981; ANDERSON e
BRYANT, 1986; SCHNEEMAN, 1987; ROEHRIG, 1988; SEVA-PEREIRA et al., 1991;
SCHWEIZER e EDWARDS, 1992; HERNANDEZ et al., 1995; RAUPP e SGARBIERI,
1997).
O interesse em estudar os efeitos fisiológicos dos carboidratatos baseia-se na
hipótese de que do amido ingerido aproximadamente 10% são resistentes à hidrólise
que ocorre no trato digestivo, e como tal são fermentados no cólon onde exercem um
efeito similar ao da fração solúvel da fibra, motivo pelo qual este amido resistente é
considerado um dos componentes da fibra alimentar (GOÑI et al., 1995; VALASCO et
al., 1997; OSORIO-DÍAZ et al., 2002; FREITAS, 2002).
13
O cólon humano é descrito como um complexo ecossistema, contendo mais de
400 espécies de bactérias. Os principais nutrientes para o crescimento das bactérias do
cólon são os carboidratos e as proteínas da dieta. A composição da microbiota colônica
de adultos é relativamente estável, mas vários fatores, incluindo a dieta, podem alterar
a composição ou o metabolismo das bactérias intestinais. A alta ingestão de
carboidratatos é conhecida por elevar o número de bifidobactérias. Por outro lado, uma
alta ingestão de lipídeos ocasiona aumento na população de Bacteróides spp, assim
como os oligossacarídeos, em particular oligofrutose, podem estimular o crescimento de
Bifidobacterium spp. Estas descobertas sugerem que o balanço da microbiota intestinal
pode ser manipulado por meios dietéticos (WANG et al., 1999).
Tomlin e Read (1990) e Slavin et al. (1997) verificaram que a suplementação
da dieta com fibras contribui para a prevenção da constipação intestinal e do câncer do
cólon, através do aumento do volume, do peso e da freqüência das fezes, aliado ao
menor tempo de trânsito intestinal.
O amido não digerido no intestino delgado serve de substrato para a
fermentação bacteriana, resultando na produção de gases e ácidos orgânicos voláteis,
dos quais o ácido butírico é considerado por atuação específica, com efeito anti-
proliferativo de células epiteliais colônicas. Estudos epidemiológicos têm demonstrado a
correlação entre a alta ingestão de carboidratos dietéticos (cerca de 400 gramas por
dia), e a baixa incidência de câncer colorretal. Estes estudos propõem que este efeito é
decorrente dos elevados níveis de ácido butírico encontrados no cólon (CASSIDY et al.,
1994; STEPHEN et al., 1995; BINGHAM, 1996).
Pesquisas de Vonk et al. (2000) e Bednar et al. (2001) têm demonstrado a
participação do amido resistente no processo fermentativo no cólon, por bactérias
probióticas, como as bifidobactérias, promovendo o desenvolvimento de uma microbiota
saudável, em detrimento de espécies bacterianas nocivas, com benefícios à saúde,
atuando como prebiótico.
Os prebióticos são definidos como “substâncias alimentares não digeríveis que
afetam beneficamente e, estimulam seletivamente o crescimento e/ou atividade de uma
14
ou um número ilimitado de espécies bacterianas residentes no cólon e que auxiliam na
manutenção da saúde” (GIBSON e ROBERFROID, 1995).
Um dos fatores reconhecido como de maior importância para a manutenção da
saúde do aparelho digestório é a flora colônica, especialmente a composição bacteriana
e os ¨nutrientes¨ que por ela são metabolizados. Assim sendo, o consumo de
carboidratos fermentáveis pela flora pode originar condições metabólicas que
supostamente façam à eliminação de substâncias tóxicas e substâncias carcinogênicas
(BROUNS et al., 2002). Entretanto, Conway (2001) afirma ser difícil ter conclusões
clínicas definitivas, pois os efeitos benéficos em longo prazo são difíceis de mensurar e,
geralmente têm sido atribuídos ao efeito conjunto de pré e probióticos na manutenção
da saúde.
O pH, originado a partir da fermentação, favorece a vasodilatação e aumenta a
absorção de água e sais, melhorando a sintomatologia de indivíduos com diarréia. Além
disso, a amônia torna-se ionizada e não é absorvida por difusão passiva, influenciando
os níveis sangüíneos e beneficiando pacientes em tratamento de cirrose hepática com
ou sem encefalopatia portal sistêmica (FERREIRA, 2003).
O ácido propiônico, resultante da fermentação do amido resistente leva ao
aumento da contração muscular do cólon, acelerando o peristaltismo intestinal,
reduzindo a constipação. Outro efeito atribuído ao ácido propiônico é o fato de estar
envolvido na inibição da síntese de colesterol nos hepatócitos, mediada pela atividade
da enzima hidroximetilglutaril-coenzima A redutase (HMG-CoA), diminuindo assim o
risco de enfermidades cardiovasculares (FREITAS, 2002; FERREIRA, 2003).
Behall et al. (1989) em estudo com humanos, observaram redução de 30 a
36% na concentração de colesterol para a dieta com amido de milho de alta amilose
comparada ao amido de baixa amilose. Em estudos subseqüentes com ratos, Deckere
et al., (1993) e Vanhoof e Schrijver (1997) encontraram cerca de 8 a 23% de redução
de colesterol.
15
Em estudo com arroz japônico, com 18,6% de amilose, oferecido a ratos
hipercolesterolêmicos, Cheng e Lai (2000) constataram que a dieta contendo 63% de
amido de arroz apresentou efeito mais pronunciado na redução de colesterol quando
comparado ao amido de milho na mesma concentração.
Em 1992, Miller et al. observaram que o farelo de arroz, servido como purê
para indivíduos também saudáveis de 19 a 36 anos, provocou índice glicêmico muito
baixo (19 ± 3), concluindo que poderia ser útil suplemento em dietas para diabéticos.
Entre as fibras do alimento, as solúveis apresentam efeito hipoglicêmico,
hipocolesterolêmico, atuam no esvaziamento gástrico e podem ser metabolizadas no
cólon, fornecendo ácidos graxos de cadeia curta, liberando energia (BRENELLI, 1990;
SCHENEEMAN e GALLAHER, 1991; READ e ESTWOOD, 1992; ROBERFROID,
1993).
Cummings et al. (1996) observaram que alguns amidos resistem à hidrólise por
enzimas pancreáticas, podendo alcançar o intestino grosso, tendo importante
implicação na saúde humana. As atividades fisiológicas no intestino, especialmente o
hábito intestinal, a produção de ácidos graxos de cadeia curta, o metabolismo do
nitrogênio, as atividades bacteriológicas e a proliferação celular são amplamente
controladas pelos carboidratos que entram no cólon.
Oguido et al. (1995) trabalharam com ratos diabéticos e observaram que
aqueles suplementados com farelo de arroz apresentaram maior ingestão alimentar,
diminuição dos níveis glicêmicos sangüíneos e da taxa de glicogênio hepático.
Silva (1996) pesquisou pacientes diabéticas com idade entre 45 e 60 anos e
verificou que uma dieta rica em fibras causou diminuição significativa da glicemia de
jejum a partir do primeiro dia e da glicemia pós-prandial a partir do terceiro dia.
Para Qureshi et al. (2002), o farelo de arroz atenua a hiperglicemia em
indivíduos diabéticos. Os pesquisadores atribuem este efeito aos componentes solúveis
presentes no farelo de arroz, onde constataram redução nas concentrações de glicose
de 29 e 33%, para indivíduos com diabetes tipo 1 e tipo 2, respectivamente.
16
Estudos mostram a relação entre o surgimento das complicações agudas e
crônicas do Diabetes mellitus com o tratamento inadequado, promovendo a
manutenção da hiperglicemia, principal agente desencadeante das mesmas. Logo, é
extremamente necessário encontrar procedimentos que promovam a compensação
glicêmica, a fim de se evitar e/ou minimizar essas complicações. Por isso, inúmeros
trabalhos têm buscado a melhor forma de tratamento, chegando-se ao vital papel da
dieta no controle glicêmico. As duas principais formas de diabetes, Diabetes mellitus
insulino-dependente e não-insulino-dependente, se beneficiam com o tratamento
dietoterápico (SIMPSON et al. 1979; MADAR, 1987; HALPERN e MANCINI, 1995).
O índice glicêmico e o conteúdo de amido resistente dos alimentos têm sido
estabelecidos como sendo dois importantes indicadores da digestibilidade do amido. Do
ponto de vista nutricional, a baixa resposta glicêmica é considerada benéfica,
especialmente para aqueles indivíduos com diminuída tolerância à glicose. O arroz é
conhecido por apresentar uma resposta glicêmica relativamente alta comparado a
outros alimentos amiláceos. Jenkins et al. (1984) relatou que o arroz integral apresenta
índice glicêmico 96 e o arroz branco 83. Miller et al. (1992) classificam arroz cozido
fresco como um alimento de alto índice glicêmico com valores variando entre 64 a 93.
Para Kim et al. (2003), no Diabetes mellitus não-insulino-dependente, a dieta
com elevado conteúdo de carboidratos simples ou carboidratos digeríveis pode agravar
o controle glicêmico ou acelerar o desenvolvimento de doenças cardiovasculares. O
amido resistente, por ser resistente à digestão e também por retardar o processo
absortivo, correlaciona-se negativamente com o índice glicêmico, podendo ser usado
como um meio eficiente para a redução da glicemia (HU et al., 2004).
Carreira et al. (2004) estudaram o efeito do armazenamento de pão branco,
feijão seco, espaguete branco, grão-de-bico e farinha de milho, em baixas temperaturas
através do índice glicêmico em humanos. Observaram que o índice glicêmico é
significativamente reduzido nos alimentos armazenados a -20°C durante 30 dias.
Atribuem este efeito ao aumento de amido resistente, pela formação de amido
resistente tipo III (retrogradação amilose/amilopectina). Todos os alimentos estudados
17
apresentaram aumento no teor de amido resistente após 30 dias de armazenamento a -
20°C; 61% para espaguete, 47% para feijões, 16% para farinha de milho e 8% para
grão-de-bico.
A relação entre amido resistente e controle glicêmico, entretanto, ainda não
está totalmente elucidada, tanto em diabetes humano quanto em modelos animais, mas
acredita-se que o amido resistente seja um candidato ideal para o controle glicêmico
em condições de diabetes.
O Brasil vive uma “transição nutricional”, que diz respeito a “mudanças
seculares em padrões nutricionais que resultam de modificações na estrutura da dieta
dos indivíduos e que se relacionam com mudanças econômicas, sociais, demográficas
e relacionadas à saúde”. Constata-se, assim, a tendência de se reduzir a ingestão de
carboidratos complexos pela diminuição do consumo de cereais, leguminosas e
tubérculos, além de substituir os carboidratos por lipídeos e aumentar o consumo de
proteínas animais e de açúcar, como ocorreu nos países desenvolvidos, aspectos estes
que podem ser alguns dos fatores associados à maior incidência da obesidade e de
diferentes doenças crônico-degenerativas, dentre elas o Diabetes mellitus (CARVALHO,
1999).
18
3 OBJETIVOS
3.1 Geral
Avaliar influências do teor de amilose, da pressão de autoclavagem e do
tempo de armazenamento sobre a formação do amido resistente em arroz, assim como
verificar efeitos da parboilização de arroz com diferentes teores de amilose nos níveis
glicêmico e lipêmico de ratos Wistar.
3.2 Específicos
3.2.1 Determinar os teores de amido resistente em grãos de arroz convencional polido
(branco) e parboilizado polido, em amostras de alto, médio e baixo teor de amilose.
3.2.2 Avaliar efeitos de diferentes pressões de autoclavagem durante a parboilização do
arroz nos teores de amido resistente.
3.2.3 Avaliar efeitos do tempo de armazenamento do arroz parboilizado nos teores de
amido resistente.
3.2.4 Determinar o Quociente de Eficiência Alimentar (QEA), ganho de peso, consumo
de dieta, volume fecal e massa dos fígados de ratos.
3.2.5 Avaliar efeitos do arroz parboilizado nos níveis glicêmicos de ratos Wistar.
3.2.6 Determinar o perfil lipídico em termos de colesterol total e suas frações (c-VLDL,
c-LDL e c-HDL) e triacilgliceróis séricos no início (valor referencial) e após 28 dias do
ensaio biológico, quantificando lipídeos totais, triacilgliceróis e colesterol total hepáticos
e fecais.
19
4 MATERIAIS E MÉTODOS
4.1 Materiais
4.1.1 Arroz
Amostras de arroz (Oryza sativa L.) com alto (31,57%), médio (21,84%) e baixo
(6,31%) teores de amilose, cedidas pelo IRGA (Instituto Rio-Grandense do Arroz), pela
Indústria Comércio e Representações Líder Ltda. e pela Granja Quatro Irmãos, do
grupo JOSAPAR (Joaquim Oliveira Participações Ltda.).
4.1.2 Animais para Experimentação
Foram utilizados ratos adultos machos, da linhagem Wistar/UFPel, idade 90
dias, com peso médio de 317g, provenientes do Biotério Central da Universidade
Federal de Pelotas, RS.
4.2 Métodos
4.2.1 Delineamentos Experimentais
4.2.1.1 Experimento I: Determinação do tempo e da temperatura de
encharcamento na parboilização do arroz
Para avaliação das isotermas de hidratação, através da avaliação das
temperaturas e dos tempos de encharcamento mais adequados para cada matéria-
prima foi utilizado o delineamento experimental apresentado na Tabela 1.
Para a verificação das isotermas de hidratação foi utilizado o método descrito
por Elias (1998), adaptado para as condições do experimento.
20
Tabela 1. Tratamentos para definição da melhor combinação operacional de tempo e
temperatura de encharcamento no processo de parboilização – Isotermas de hidratação
de amostras de arroz com três teores de amilose.
Variáveis Independentes
Temperatura de
Encharcamento
Tratamentos
Teor de
amilose
60°C 65°C 70°C
Variáveis
Dependentes
1 – 3 Alto
4 – 6 Alto
7 - 9 Alto - Tempo de
encharcamento
10 – 12 Médio
13 - 15 Médio - % umidade
16 – 18 Médio final
19 - 21 Baixo
22 – 24 Baixo
25 - 27 Baixo
As amostras (50 gramas em cada uma das três repetições por tratamento)
foram acondicionadas em saquinhos de filó e cada uma delas foi colocada num
recipiente de alumínio previamente identificado. Cada recipiente de alumínio tinha
capacidade para 300mL.
Foram utilizadas 48 unidades experimentais para cada tratamento, totalizando
7320 gramas de arroz de cada grupo de amostras. Os tratamentos foram feitos em três
temperaturas (60, 65 e 70°C) para cada teor de amilose (alto, médio, baixo). A cada 30
minutos de encharcamento eram retiradas triplicatas de cada amostra, sendo escorrido
o excesso de água, e submetidas à centrifugação por 2 minutos e 30 segundos, a
21rpm. Depois de retiradas da centrífuga, as amostras eram pesadas para posterior
21
cálculo da absorção efetiva de água. Este procedimento se repetiu a cada 30 minutos
até completar 480 minutos de encharcamento, definidos por testes prévios.
Definiu-se 30% de umidade como percentual referencial de hidratação. Assim
as condições binárias utilizadas foram hidratação a 65°C durante 6 horas para as
amostras de médio e alto teores de amilose, enquanto a amostra de baixo teor de
amilose teve essa condição com temperatura de encharcamento a 70°C durante 7
horas.
4.2.1.2 Experimento II: Efeito da parboilização e do tempo de armazenamento
sobre o conteúdo de amido resistente.
Tabela 2. Tratamentos para caracterização da matéria-prima e determinação de amido
resistente em arroz convencional (branco) e parboilizado, cru, cozido e cozido seco.
Variáveis Independentes
Arroz
Trata-
mentos
Teor de
amilose
Processo
Cru Cozido Cozido
Seco
Variáveis
Dependentes
01 - 03 Alto Convencional
04 - 06 Alto Parboilização
07 - 09 Médio Convencional Amido
10 - 12 Médio Parboilização Resistente
13 - 15 Baixo Convencional
16 - 18 Baixo Parboilização
Três repetições por tratamento
Parboilização - Temperatura de encharcamento: 65°C, 6 horas = amostras de médio e alto teor de
amilose, a 70°C, 7 horas= amostra de baixo teor de amilose. Pressão 0,7kgf.cm
-2
22
Tabela 3. Tratamentos para determinação de amido resistente decorrente do teor de
amilose, da pressão de autoclavagem e do armazenamento.
Variáveis Independentes Variáveis Dependentes Trata-
mentos
Teor de
amilose
Pressão
(kgf.cm
-2
)
Armazenamento
(dias)
01 - 04 alto 0,4 1; 30; 60; 120 Amido
05 – 08 alto 0,7 1; 30; 60; 120 resistente
09 - 12 alto 1,0 1; 30; 60; 120
13 - 16 médio 0,4 1; 30; 60; 120
17 - 20 médio 0,7 1; 30; 60; 120
21 - 24 médio 1,0 1; 30; 60; 120
25 - 28 baixo 0,4 1; 30; 60; 120
29 - 32 baixo 0,7 1; 30; 60; 120
33 - 36 baixo 1,0 1; 30; 60; 120
Três repetições por tratamento
Parboilização - Temperatura de encharcamento: 65°C, 6 horas = amostras de médio e alto teor de
amilose, 70°C, 7 horas = amostra de baixo teor de amilose.
Armazenamento: Pressão 0,7kgf.cm
-2
Para a caracterização da matéria-prima, determinação de amido resistente em
arroz processado (Tabela 2) e no armazenamento (Tabela 3), a parboilização foi
realizada com pressão de 0,7kgf.cm
-2
, executada no Laboratório de Pós-Colheita,
Industrialização e Controle de Qualidade de Grãos, do Departamento de Ciência e
Tecnologia Agroindustrial da Faculdade de Agronomia “Eliseu Maciel” FAEM da UFPel,
sendo utilizado método desenvolvido no próprio laboratório (ELIAS, 1998), nas
condições definidas pelos testes prévios (Tabela 1).
23
4.2.1.3 Experimento III: Ensaio Biológico - Efeito do amido resistente nos níveis
glicêmicos de ratos Wistar
O Ensaio Biológico foi realizado no Laboratório de Nutrição Experimental da
Faculdade de Nutrição da UFPel, seguindo o método proposto por Pellet e Young
(1980), enquanto a parte analítica foi realizada no Laboratório de Pós-colheita,
Industrialização e Qualidade de Grãos da FAEM.
Os animais foram tratados diariamente e distribuídos aleatoriamente em 6
grupos experimentais com 6 animais em cada grupo.
Tabela 4. Ensaio biológico com ratos adultos machos Wistar/UFPel.
Variáveis Independentes
Variáveis Dependentes
Dietas Experimentais
Avaliações
Tratamentos Amilose Processo
1 Alta Convencional - nível glicêmico
2 Alta Parboilização - consumo de dieta
3 Média Convencional - volume fecal
4 Média Parboilização - perfil lipídico
5 Baixa Convencional - lipídeos hepáticos
6 Baixa Parboilização - amido resistente em
material intestinal
7 – Controle* - amido resistente em fezes
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
Parboilização - Temperatura de encharcamento: 65°C, 6 horas = amostras de médio e alto teor de
amilose, 70°C, 7 horas = amostra de baixo teor de amilose. Pressão 0,7kgf.cm
-2
24
4.2.2 Procedimentos e Avaliações
4.2.2.1 Processo de Parboilização.
O experimento foi executado no Laboratório de Pós-Colheita, Industrialização e
Qualidade de Grãos, do Departamento de Ciência e Tecnologia Agroindustrial da
Faculdade de Agronomia “Eliseu Maciel” da UFPel.
A parboilização foi realizada de acordo com método desenvolvido no próprio
laboratório (ELIAS, 1998). Amostras de 50 gramas foram acondicionadas em saquinhos
de filó e colocadas em recipientes de alumínio, empregando-se temperatura e tempos
de encharcamento previamente definidos para cada grupo de amostra (Tabela 1). Nos
de alto e médio teores de amilose a operação foi realizada em 6 horas, a 65°C,
enquanto no de baixo teor de amilose foram 7 horas a 70ºC. Utilizaram-se três pressões
de autoclavagem, 0,4; 0,7 e 1,0 kgf.cm
-2
, constando de três repetições para cada
tratamento.
Antes do descascamento e após a autoclavagem as amostras eram secas em
estufa com circulação forçada de ar. O armazenamento foi feito em sala climatizada a
20ºC, até o momento da determinação do teor de amido resistente. Para avaliação no
tempo inicial, as amostras aguardaram três dias para a completa estabilização da
umidade. O polimento foi previamente definido por calibração em branquímetro de
amostras comerciais. O polimento e o descascamento foram realizados em engenho de
provas Suzuki, previamente regulado para cada grupo de amostras.
4.2.2.2 Cocção do Arroz
Na cocção das amostras, foram utilizados recipientes de alumínio com tampa,
aquecidos em chapa com termostato (Gularte 2005), com água equivalente à relação
água/arroz de 2,3:1 a 2,5:1 e 2,0:1 a 2,2:1 (v/v), respectivamente para arroz
parboilizado (0,7 kgf.cm
-2
) e convencional. A proporção de água e o tempo de
cozimento foram previamente estabelecidos em ensaios preliminares.
25
4.2.2.3 Secagem do Arroz Cozido
Após a cocção do arroz, as amostras eram transferidas para peneiras de
polietileno e secadas em estufa com circulação forçada de ar durante 24 horas em
temperatura de 60ºC.
4.2.2.4 Dietas Experimentais
As amostras de arroz com alto, médio e baixo teor de amilose, parboilizado
polido (0,7 kgf.cm
-2
) e branco polido (convencional), cozidos e secos a 60ºC, em estufa
com circulação forçada de ar, foram utilizadas como fonte de carboidratos complexos.
Para a fibra foram considerados somente a fração existente no arroz e o seu teor de
amido resistente.
O ensaio biológico constou de sete (7) tratamentos:
A) alto teor de amilose, convencional polido (branco);
B) alto teor de amilose, parboilizado polido;
C) médio teor de amilose, convencional polido (branco);
D) médio teor de amilose, parboilizado polido;
E) baixo teor de amilose, convencional polido (branco);
F) baixo teor de amilose, parboilizado polido;
G) dieta controle.
As dietas experimentais seguiram a formulação da AIN-93M (Reeves et al.,
1993) para ratos em manutenção de peso, isocalóricas e isoprotéicas. O valor
energético das dietas experimentais foi calculado pelos equivalentes calóricos por
26
grama, sendo 4,0 Kcal para proteínas e carboidratos e 9,0 Kcal para lipídeos. Os 42
animais foram sorteados aleatoriamente para comporem os sete (7) grupos
experimentais.
Tabela 5. Dietas experimentais utilizadas durante 28 dias no ensaio biológico com ratos
adultos machos Wistar/UFPel.
Dietas
Ingredientes (g)
A B C D E F G
Arroz convencional 670,7 670,7 670,7 -
Arroz parboilizado 670,7 670,7 670,7 -
Caseína* 143,0 144,5 143,9 146,5 148,2 151,9 154,0
Proteína do arroz 52,6 53,9 27,6 34,5 40,3 44,2 -
Fibra* - - - - - - 50,0
Fibra do arroz 8,2 8,1 8,1 8,6 8,2 17,8 -
Amido de milho* 465,7
Amido dextrinizado* 141,0
Sacarose* 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0
Óleo de soja* 37,1 35,8 36,1 33,6 31,8 28,1 40,0
Lipídeos do arroz 2,9 4,2 3,9 6,4 8,2 11,9 -
Mistura mineral* 35,0 35,0 35,0 35,0 35,0 35,0 35,0
Mistura vitamínica* 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0
L-cistina* 1,8 1,8 1,8 1,8 1,8 1,8 1,8
Bitartarato de colina* 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5
Tetrabutilhidroquinona* 0,008 0,008 0,008 0,008 0,008 0,008 0,008
A) alto teor de amilose, convencional; B) alto teor de amilose, parboilizado; C) médio teor de amilose,
convencional; D) médio teor de amilose, parboilizado; E) baixo teor de amilose, convencional; F) baixo
teor de amilose, parboilizado: G) dieta controle (AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido
dextrinizado).
Valores em g.Kg
-1
de dieta.
Caseína: 78,23% de proteína
* Segundo formulação da AIN-93M. Fibra: celulose microcristalina
27
Tabela 6. Valores calórico (Kcal.100g
-1
) e protéico (%) das dietas experimentais
oferecidas durante 28 dias aos ratos adultos machos Wistar/UFPel.
Dietas Calórico
(Kcal.100g
-1
)
Protéico
(%)
Alta amilose, convencional 373,14 12,12
Alta amilose, parboilizado 370,61 12,17
Média amilose, convencional 381,23 11,82
Média amilose, parboilizado 376,96 11,93
Baixa amilose, convencional 374,72 12,00
Baixa amilose, parboilizado 369,00 12,10
Controle* 380,28 12,19
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
4.2.2.5 Protocolo para a Condução de Ensaio Biológico
O ensaio biológico foi aprovado pela Comissão de Ética na Experimentação
Animal (CEEA-UFPel), em reunião realizada no dia 08/07/2005, Ata 03/2005 (Anexo 1).
A seqüência experimental foi dividida em dois períodos: adaptação e
tratamento.
Durante o período de adaptação, ratos Wistar/UFPel (peso médio 317g)
permaneceram no Laboratório de Nutrição Experimental da Faculdade de Nutrição da
UFPel, durante 7 dias, em gaiolas metabólicas individuais, sob condições controladas
de temperatura e umidade relativa, respectivamente (23 ± 1ºC e 50 a 60%), fotoperíodo
de 12 horas. Água e ração foram oferecidas “ad libitum”. Os ratos foram distribuídos
aleatoriamente para compor os grupos experimentais.
Os ratos eram pesados no 1º (início), no 14º (meio) e 28º dias (fim) do
experimento, para controles de ganho de peso e consumo de ração. Nesses mesmos
momentos eram monitorados os níveis de glicemia. No final do experimento, os animais
28
eram anestesiados com éter etílico, para coleta de sangue através de punção cardíaca.
A seguir procedia-se a eutanásia dos animais em câmara isolada contendo éter etílico.
4.2.3 Determinação de Composição Centesimal
A composição centesimal foi determinada nas amostras de arroz branco polido
e parboilizado polido, segundo os respectivos procedimentos:
Umidade: Pearson (1976); Proteínas: AOAC (1995), utilizando 5,95 como fator de
conversão de nitrogênio para proteína; Lipídeos: Bligh & Dyer (1959); Cinzas: Lees
(1979); Fibra Bruta: Angelucci et al. (1987); Carboidratos: por diferença, usando a
fórmula: 100 – (proteína bruta + lipídeos totais + fibra bruta + cinzas).
4.2.4 Determinação de Amilose
Para a determinação do teor de amilose nas amostras foi utilizado o método
proposto por Martinez y Cuevas (1989).
As amostras de arroz foram descascadas e polidas em engenho de provas
Zacaria, e posteriormente foram moídas em moinho Perten e peneiradas em malha de
60 mesh. Amostras de 100mg foram transferidas para balões de 100 mL, acrescentado
1 mL de álcool etílico 96%GL e 9 mL de solução 1N de NaOH. Os balões foram
colocados em banho-maria por 10 minutos a 100ºC, seguidos de resfriamento durante
30 minutos, até a temperatura ambiente de 20ºC, ajustando-se o volume com água. Foi
retirada uma alíquota de 5 mL e transferida para balão de 100 mL, sendo acrescido 1
mL de ácido acético 1N e 2 mL de solução de iodo 2% (p/v) recém preparada sendo
ajustado o volume do balão com água.
Para a curva padrão foram utilizados 40mg de amilose pura submetida ao
mesmo procedimento das amostras de arroz. Do balão, alíquotas de 1, 2, 3, 4, e 5 mL
29
foram retiradas e acrescidas de 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 e 1 mL de ácido acético e de 0,4; 0,8;
1,2; 1,6 e 2 mL de iodo, respectivamente, completando o volume de cada balão com
água destilada.
A leitura foi realizada a 610 nm e os resultados de absorbância (A)
multiplicados por fator de correção (FC) obtido pela média dos valores lidos com as
amostras de amilose pura. O teor de amilose das amostras foi obtido pela fórmula: %
Amilose = A x FC
4.2.5 Determinação de Amido Resistente
O amido resistente foi determinado através do método proposto por Goñi et al.
(1996), com adaptações. As amostras de arroz foram incubadas com pepsina (40ºC;
1h; pH 1,5) e α-amilase (37ºC; 16h; pH 6,9), sendo centrifugadas a 3000 rpm durante
15 minutos e descartado o sobrenadante. Os resíduos foram tratados com KOH
(concentração final 2M) e incubados com amiloglicosidase (60ºC; 30 min; pH 4,75). Foi
retirada uma alíquota de 1mL do sobrenadante e determinado o teor de glicose livre
pelo método enzimático (glicose oxidase/peroxidase/ABTS).
4.2.6 Determinação de Lipídeos Totais Hepáticos e Fecais
Os lipídeos totais hepáticos e fecais (mg.g
-1
) foram determinados segundo
método de Bligh & Dyer (1959).
4.2.7 Determinação de Colesterol Total Sérico, Hepático e Fecal
O colesterol total sérico (mg.dL
-1
), o hepático (mg.g
-1
) e o fecal (mg.g
-1
) foram
extraídos segundo método proposto por Haug & Hostimark (1987) e então quantificados
30
por sistema enzimático (colesterol esterase, colesterol oxidase e peroxidase Labtest
Diagnóstica
®
colesterol liquiform cat. 76-2/100).
4.2.8 Determinação de Colesterol HDL
O colesterol HDL (mg.dL
-1
) foi determinado através da precipitação das
lipoproteínas de baixa e de muito baixa densidades (c-LDL e c-VLDL), utilizando-se
sistema enzimático (colesterol esterase, colesterol oxidase e peroxidase Labtest
Diagnóstica
®
cat. 13). O c—VLDL foi determinado pela fórmula c-VLDL =
triacilgliceróis/5. O c-LDL foi obtido pela fórmula c-LDL= {colesterol total – (c-HDL + c-
VLDL)}, de acordo com procedimento proposto por Haug & Hostimark (1987).
4.2.9 Determinação de Triacilgliceról Sérico, Hepático e Fecal
Os triacilgliceróis séricos (mg.dL
-1
) e fecais (mg.g
-1
) foram extraídos segundo
método descrito por Haug & Hostimark (1987) e quantificados por sistema enzimático
(lípase, glicerolquinase, glicerol-3-fosfato oxidase e peroxidase Labtest Diagnóstica
®
GPO-ANA cat. 59-4/50).
4.2.10 Determinação de Glicemia de Jejum e Curva Glicêmica
Os níveis de glicemia foram monitorados por leitura de glicofita (ACCU-CHEK
®
Advantage II), contendo sangue obtido por punção da parte distal da cauda do rato.
Esta fita foi introduzida em glicosímetro específico (ACCU-CHEK
®
Advantage II -
Roche), expressando os valores da glicemia em miligramas por decilitro (mg.dL
-1
).
Foram realizadas três medidas de glicemia de jejum, no início, no meio e no fim do
experimento. Para a curva glicêmica as medidas de glicemia foram feitas em jejum, e
posteriormente os animais consumiram 20g da dieta específica para cada grupo.
31
Passados 30, 60 e 90 minutos foi coletado sangue para monitoramento da glicemia
pós-prandial.
4.2.11 Determinação de Volume Fecal
As fezes foram recolhidas diariamente, secas em estufa e ao final do
experimento pesadas e medido o volume em proveta graduada com capacidade de
75mL.
4.2.12 Determinação de Ganho de Peso
Os animais experimentais foram pesados no início do tratamento (1º dia), no
meio (14º dia) e, no final do experimento (28º dia).
4.2.13 Determinação de Consumo de Dieta
O consumo de dieta foi monitorado diariamente. Foi aferido o peso inicial de
dieta oferecida, e esta dieta foi reposta diariamente ou conforme a necessidade, e ao
final do experimento foi feito o somatório do consumo.
4.2.14 Tratamento Estatístico dos Resultados Experimentais
Os dados experimentais foram dispostos em tabelas e gráficos, com
respectivos e convenientes tratamentos estatísticos. Foi utilizada a análise de variância
ANOVA, seguida do teste de Tukey, de comparação de médias, considerando como
nível de significância estatística o limite de 5% (p<0,05).
32
5 RESULTADOS E DISCUSSÃO
5.1 Composição Centesimal
Na Tabela 7 encontra-se a composição centesimal das amostras de arroz
estudadas, que apresentaram os seguintes teores de amilose: alto= 31,57±0,22;
médio= 21,84±0,20; baixo= 6,31±0,10.
Tabela 7. Efeito do processo de beneficiamento sobre a composição centesimal de
amostras de arroz (g.100g
-1
- b.s.*) com três níveis de amilose.
Amilose Processo Proteína Lipídeos Cinzas FB** CHOs***
Alta Convencional
A
8,58
a B
0,47
d A
0,62
a,b A
1,34
b
88,99
Alta Parboilizado
A
9,18
a A
0,72
d A
0,57
a,b A
1,37
b
88,16
Média Convencional
B
4,75
d B
0,70
d B
0,20
d B
1,39
b
92,98
Média Parboilizado
A
5,91
c A
1,10
c A
0,48
c B
1,47
b
91,03
Baixa Convencional
A
6,79
b B
1,38
b B
0,51
b,c B
1,39
b
89,93
Baixa Parboilizado
A
7,52
b A
2,03
a A
0,73
a A
3,02
a
87,09
Letras maiúsculas diferentes para o mesmo grupo de amilose, indicam diferença estatística pelo Teste de
Tukey (p<0,05).
Letras minúsculas diferentes na mesma coluna, para o mesmo constituinte, indicam diferença estatística
pelo Teste de Tukey (p<0,05).
Fator de conversão do nitrogênio em proteína = 5,95.
* b.s. = base seca **FB= fibra bruta ***CHOs = carboidratos determinados por diferença.
Analisando-se os dados da Tabela 7 é possível verificar que os resultados da
composição centesimal das amostras de arroz estão em concordância com os
resultados reportados por outros autores (BORGES et al., 2003; WANG et al., 2000; AL-
BAYATI e ALRAYESS, 1981), demonstrando que o arroz é uma importante fonte
energética, com destaque para os carboidratos.
33
A maioria das frações (proteínas, lipídeos, cinzas, fibra bruta) apresentou
valores mais altos para o arroz parboilizado do que para o arroz branco polido, com
aumento mais intenso para lipídeos e fibras nas amostras com baixa amilose, sendo o
oposto verificado com relação ao teor de carboidratos.
Quanto ao aumento do valor nutritivo, a parboilização permite maior retenção
de proteínas, lipídeos, minerais e de vitaminas, principalmente as do complexo B, que
devido às etapas do processo de parboilização proporcionam a migração destes
compostos periféricos para o interior do grão, além da redução na retirada do farelo,
que é uma fração rica nestes compostos, assegurando com isso, um alimento mais
saudável (AMATO e ELIAS, 2005).
Segundo afirmam Sgarbieri (1996) e Sagum e Arcot (2000), o tratamento
térmico favorece o aumento do valor nutricional de produtos alimentícios, devido à
desnaturação de proteínas, melhoria nas características sensoriais, inativação de
enzimas, fatores antinutricionais e microrganismos, conferindo ao alimento além do
aumento de digestibilidade, aumento da biodisponibilidade de nutrientes e do valor
biológico do mesmo.
5.2 Amido Resistente
Na Tabela 8 estão apresentados os percentuais de amido resistente
encontrado nas cultivares de arroz, cru, cozido e cozido seco em arroz convencional
(branco) e parboilizado.
Os dados da Tabela 8 refletem comportamentos típicos do material analisado.
O arroz é fonte rica de carboidratos e, segundo Colonna et al. (1992), a origem, as
características de seus constituintes e as condições de processamento a que são
submetidos os produtos amiláceos são de grande importância na alteração das taxas
de hidrólise in vivo e in vitro.
34
Tabela 8. Amido resistente (% - b.s.) em arroz, cru, cozido e cozido seco.
Arroz
Amilose Processo
Cru Cozido Cozido Seco
Alto Convencional
B
0,75±0,11
b
A
1,31±0,34
b
A
1,16±0,01
b
Alto Parboilizado
A
2,33±0,26ª
A
2,09±0,15ª
A
1,82±0,25ª
Médio Convencional
B
0,67±0,24
b
A
1,37±0,14
b
A
1,35±0,02
b
Médio Parboilizado
A
1,97±0,24ª
A
2,01±0,11ª
A
1,64±0,01ª
Baixo Convencional
B
0,40±0,03
b
A
1,56±0,08
b
A
1,71±0,15ª
Baixo Parboilizado
B
1,71±0,16
a
A
2,38±0,15ª
B
1,62±0,08
a
Letras maiúsculas diferentes na mesma linha indicam diferença estatística, pelo Teste de Tukey (p<0,05).
Letras minúsculas diferentes para o mesmo grupo de amilose indicam diferença estatística, pelo Teste de
Tukey (p<0,05).
Amilose Alta = 31,57±0,22; Média = 21,84±0,20; Baixa = 6,31±0,10.
b.s. = base beca
Verifica-se, pela observação dos dados da Tabela 8, que o método de
processamento interferiu no teor de amido resistente. A parboilização aumentou o teor
de amido resistente para todas as amostras, tanto no arroz cru como no arroz cozido
úmido e arroz cozido seco. Para o arroz cru, os maiores valores de amido resistente
foram observados na amostra com maior teor de amilose, tanto para o arroz
convencional (branco) como para o arroz parboilizado. Estes resultados estão de
acordo com Sagum e Arcot (2000) e Salgado et al. (2005a) que estudaram o efeito do
processamento na formação de amido resistente.
A extensão do efeito do processamento nos alimentos pode ser explicada em
termos de modificações na estrutura do amido, na matriz protéica e na interação com
lipídeos. Estas modificações devem ser levadas em consideração para um melhor
entendimento da taxa de hidrólise do amido (COLONNA et al., 1992).
Para o arroz branco polido, obtido pelo beneficiamento convencional, o
cozimento aumentou o teor de amido resistente, embora sem diferença significativa
entre o arroz cozido úmido e o arroz cozido e seco. O aumento mais intenso no teor de
35
amido resistente foi verificado na amostra de baixa amilose, que passou de 0,40% no
arroz branco cru para 1,71% no arroz branco cozido seco. Isto, segundo Cereda (2001)
pode ser devido às interações mais intensas ocorridas na amilopectina, como a
formação de clusters e bloquetes, desempenhando um papel importante na maior ou
menor resistência dos amidos à ação enzimática.
Para o arroz parboilizado, o fato de o grão estar cru, cozido úmido ou cozido
seco, não há interferência no teor de amido resistente, com exceção do arroz de baixa
amilose, que apresentou o maior teor quando cozido úmido, antes da secagem. As
alterações, provocadas no grão, pelas operações hidrotérmicas da parboilização
(JULIANO, 1971; AMATO e ELIAS, 2005) explicam os resultados.
O cozimento do arroz branco, assim como a parboilização, tem como
características comuns promover gelatinização e retrogradação do amido. Estes
fenômenos seqüenciais permitem um rearranjo das moléculas, com a desestruturação
dos grânulos de amido, gerando uma massa homogênea que ao resfriar-se perde água
e apresenta interação entre as moléculas bastante forte, o que impede em certos locais
o acesso de enzimas amilolíticas, formando assim o amido resistente (SAGUM e
ARCOT, 2000). Pelos dados da Tabela 8 é possível se verificar que, após a
parboilização, quando ocorrem gelatinização e retrogradação do amido, ao serem
submetidos os grãos a novo aquecimento com água (cozimento) não há modificação
em seu teor de amido resistente, nem para o arroz branco e nem para o parboilizado,
indicando que quando há desestruturação dos grânulos de amido e posterior
retrogradação, são formadas estruturas estáveis que não são afetadas por outro
processo de aquecimento e resfriamento, nem pela ação enzimática in vitro,
especialmente nas amostras de média e alta amilose.
Segundo Lajolo et al. (2001b) a formação de amido resistente é afetada pelo
conteúdo de água presente durante o tratamento térmico, onde a máxima produção
deste composto é obtida quando uma proporção de 1:3,5 (p/p) de amido:água é
aplicada. A cristalinidade das frações resistentes pode ser aumentada com aumentos
do tempo e da temperatura de armazenamento dos géis de amido. A presença de
36
lipídeos pode reduzir a quantidade de amido resistente produzida, através da formação
de complexos com a amilose, resultando em menor quantidade disponível desta porção
para formar as duplas hélices resistentes à hidrólise enzimática.
Efeitos da pressão de autoclavagem e do teor de amilose na produção do
amido resistente podem ser observados na Figura 1.
0
0,5
1
1,5
2
2,5
Alta Média Baixa
AMILOSE
% AMIDO RESISTENTE
0,4 kgf.cm-2 0,7 kgf.cm-2 1,0 kgf.cm-2
a
a
a,b a,b
a,b
b
b
b
b
Figura 1. Amido resistente (% b.s.) em função da amilose e da pressão de
autoclavagem na parboilização de arroz.
Letras diferentes indicam diferença estatística, pelo Teste de Tukey a 5% de significância.
Alta amilose = 31,57±0,22; Média amilose= 21,84±0,20; Baixa amilose = 6,31±0,10.
Pode-se observar na Figura 1 que o maior rendimento de amido resistente
ocorreu nas amostras com maior teor de amilose e em pressão intermediária (0,7
kgf.cm
-2
). Nas amostras com teor intermediário de amilose, a variação da pressão de
autoclavagem não alterou o conteúdo de amido resistente. Para as amostras que
apresentam o menor teor de amilose, o melhor resultado foi observado na menor
pressão de autoclavagem aplicada (0,4 kgf.cm
-2
). A quantidade máxima de amido
resistente (2,32%) foi obtida com pressão 0,7 kgf.cm
-2
e alto teor de amilose.
37
Na Tabela 9 estão os percentuais de amido resistente encontrados nas
amostras de arroz cru parboilizado em diferentes pressões.
Tabela 9. Amido Resistente (% b.s.) em função do teor de amilose e da pressão de
autoclavagem na parboilização de arroz.
Autoclavagem (kgf.cm
-2
) Amilose
0,4 0,7 1,0
Alta
B
1,66±0,22
b
A
2,32±0,26ª
B
1,57±0,10
b
Média
A
1,88±0,24ª
, b
A
1,97±0,24ª
, b
A
1,97±0,02ª
Baixa
A
2,25±0,05ª
B
1,71±0,16
b
B
1,69±0,26ª
, b
Letras maiúsculas diferentes na mesma linha indicam diferença estatística, pelo Teste de Tukey (p<0,05).
Letras minúsculas diferentes para o mesmo grupo de amilose indicam diferença estatística, pelo Teste de
Tukey (p<0,05).
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
b.s. = base seca
Na comparação isolada de cada pressão de autoclavagem aplicada, em
amostras, com diferentes teores de amilose (Tabela 9), observa-se que na pressão de
0,4 kgf.cm
-2
o maior teor de amido resistente (2,25%) foi obtido nas amostras com
menor teor de amilose, sendo estatisticamente diferente das amostras que apresentam
o maior teor de amilose. Na pressão 0,7 kgf.cm
-2
o maior valor (2,32%) foi para as
amostras com maior teor de amilose, estatisticamente diferente das que apresentam
menor teor de amilose. Quando foi empregada a pressão de 1,0 kgf.cm
-2
, o maior valor
para o amido resistente (1,97%) foi para as amostras com teor médio de amilose, não
diferindo estatisticamente das de baixo teor de amilose. Para as amostras com teor
médio de amilose, a variação da pressão da autoclavagem não interferiu na formação
de amido resistente. Esse comportamento pode ter ocorrido em função de
características intrínsecas das próprias amostras ou indica que seu potencial de
hidratação na operação de encharcamento da parboilização ainda poderia ser
aumentado.
Os comportamentos apresentados pelas amostras podem ser explicados pela
retrogradação mais lenta da amilopectina, também envolvida na formação do amido
resistente segundo Van Soest (1994).
38
A análise conjunta dos dados da Tabela 9 permite verificar que os resultados
mostram teores de amido resistente variando entre 1,57 e 2,32%. Segundo vários
estudos (POMERANZ, 1992; BOBBIO e BOBBIO, 1992; HOEBLER et al., 1999;
SAGUM e ARCOT, 2000; KUTOS et al., 2003) o teor de amido resistente está
relacionado à gelatinização e à retrogradação, fenômenos que ocorrem durante as
etapas da parboilização de arroz.
O teor de amido resistente é também influenciado pela quantidade de água
utilizada durante o processamento e pela razão amilose/amilopectina (SHAMAI et al.,
2003). A ação de alta pressão (1,0 kgf.cm
-2
) ao provocar uma ruptura gradual de
algumas ligações glicosídicas do amido, origina produtos capazes de formar agregados
mais complexos com a amilose retrogradada e/ou complexos amilose-lipídeo,
contribuindo portanto para a formação de amido resistente (NAMRATHA et al., 2002).
Segundo Colonna et al. (1992), a produção de amido resistente é máxima sob pressão
em condições de baixa umidade (1 amido:3,5 água).
Os resultados das interferências do teor de amilose e do tempo de
armazenamento do arroz parboilizado cru sobre os teores de amido resistente estão
apresentados na Tabela 10.
De acordo com os dados da Tabela 10, os teores de amilose determinam
comportamentos diferentes do arroz em relação aos teores de amido resistente.
Ocorreram reduções de amido resistente dos 30 aos 60 dias de armazenamento,
independentemente do teor de amilose do arroz. Nos primeiros 30 dias de
armazenamento, no entanto, cada teor de amilose determinou um comportamento.
Houve aumento do teor de amido resistente nas amostras com baixos teores de
amilose, redução nas de alta e manutenção dos teores de amido resistente nas
amostras de médios teores de amilose. A partir dos 60 dias de armazenamento as
amostras de baixos teores de amilose continuaram tendo os teores de amido resistente
reduzidos, enquanto as amostras de alta e média amilose tiveram estabilização. Este
fênomeno deve-se provavelmente a uma maior dificuldade de retrogradação da
amilopectina, componente que estas amostras apresentam em proporção oposta aos
39
teores de amilose. De acordo com Van Soest et al. (1994) a retrogradação da amilose é
um processo rápido que ocorre em algumas horas, ao contrário da retrogradação da
amilopectina que é um processo que pode demorar muitos dias.
Tabela 10. Amido resistente (% b.s.) em função do teor de amilose e do tempo de
armazenamento em arroz parboilizado cru.
Amilose Armazenamento (dias)
1 30 60 120
Alto
A
2,33±0,26ª
B
1,77±0,08
b C
1,10±0,12
b C
1,11±0,03
a
Médio
A
1,97±0,24ª
,b A
2,24±0,15ª
B
1,06±0,01
b B
0,87±0,01
a
Baixo
B
1,71±0,16
b A
2,28±0,22ª
B
1,59±0,12
a C
0,82±0,22
a
Letras maiúsculas diferentes na mesma linha indicam diferença estatística, pelo Teste de Tukey (p<0,05).
Letras minúsculas diferentes para o mesmo grupo de amilose indicam diferença estatística, pelo Teste de
Tukey (p<0,05).
Amilose Alta = 31,57±0,22; Média = 21,84±0,20; Baixa = 6,31±0,10.
b.s. = base beca
O comportamento do amido resistente durante o armazenamento tem sido
estudado, sendo os resultados bastante controversos, pois são vários fatores
envolvidos como o teor de amilose, temperatura de armazenamento e umidade dos
géis. Berry (1986) e Siljeström et al. (1988) não encontraram dependência entre o
tempo de armazenamento e a formação de amido resistente em géis concentrados de
vários amidos que sofreram autoclavagem. Por outro lado, Eerlingen e Delcour (1995)
relatam que a produção de amido resistente em amidos gelatinizados depende
fortemente do tempo e da temperatura de estocagem do gel. De acordo com Colonna et
al. (1992) e Van Soest et al. (1994), a retrogradação da amilose é um processo rápido,
ao contrário da retrogradação da amilopectina que é um processo lento. Assim, é
possível que a formação do amido resistente em função do tempo de armazenamento
seja controlada também pela amilopectina.
A redução do amido resistente no armazenamento do arroz parboilizado cru,
deve-se provavelmente a um relaxamento das interações entre as moléculas de amido
40
e delas com as demais macromoléculas, bem como a uma redução das tensões entre
as diferentes zonas dos grãos que resultaram da secagem dos grãos de arroz,
ocasionado uma maior reatividade às enzimas amilolíticas.
Os resultados apresentados (Tabela 10) têm grande importância tecnológica,
mas podem indicar relevância maior para a área da saúde. Redução do teor de amido
resistente, mais acentuadas até dois meses após a parboilização deve ser mais
investigada, especialmente em dietas destinadas a diabéticos. Isso pode levar a uma
mudança de comportamento das indústrias, que em geral utilizam entre 10 e 12 meses
como prazo de validade do arroz parboilizado lançado no mercado.
5.3 Ensaio Biológico
Os resultados para amido resistente nas dietas experimentais fornecidas aos
ratos Wistar/UFPel em ensaio biológico são apresentados na Tabela 11.
Tabela 11. Teores de amido resistente (b.s.) nas dietas experimentais.
Dietas Amido Resistente
Amilose Processo (%)
Alta Convencional 1,71±0,10
c
Alta Parboilização 2,10±0,10
b
Média Convencional 2,15±0,03
a,b
Média Parboilização 2,41±0,12
a
Baixa Convencional 1,98±0,10
b
Baixa Parboilização 2,23±0,08
a,b
Controle* 1,49±0,10
c
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística (p<0,05), segundo ANOVA e Teste de
Tukey.
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
41
Verifica-se, observando os dados da Tabela 11, que as dietas experimentais
apresentaram diferença estatística entre si (p>0,05), sendo os maiores valores
encontrados no arroz parboilizado nos três níveis de amilose, entretanto, estas
diferenças não são de grande relevância para amido resistente em alimentos. De
acordo com Behall e Howe (1996), o amido resistente desempenha várias funções
benéficas ao organismo e também possui valor energético.
5.3.1 Ganho de Peso, Consumo de Dieta e Quociente de Eficiência Alimentar
(QEA)
O ganho de peso, o consumo de dieta e o QEA estão apresentados na Tabela
12.
Tabela 12. Ganho de peso (g), consumo de dieta (g) e Quociente de Eficiência
Alimentar (QEA) dos ratos alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais.
Dietas Ganho de Peso Consumo de QEA
Amilose Processo (g) Dieta (g)
Alta Convencional 29,30±3,40
c
357,52±12,71
a,b
0,082±0,009
c
Alta Parboilização 36,79±2,48ª
,b
345,33±12,23
b,c
0,106±0,007ª
,b
Média Convencional 37,27±5,27ª 365,75±19,79
a
0,102±0,010
a,b,c
Média Parboilização 37,76±4,67ª 322,24±26,46
e
0,117±0,015
a
Baixa Convencional 29,61±5,17
b,c
334,39±22,13
c,d,e
0,088±0,015
b,c
Baixa Parboilização 33,61±4,01
a,,c
341,21±18,20
b,c
0,099±0,013
a,b,c
Controle 34,10±3,04
a,c
343,76±3,04
b,d
0,099±0,007ª
,b,c
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= ratos/grupo).
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
QEA: ganho peso (g)/ consumo de dieta (g)
42
Um suprimento adequado de energia e proteína nos alimentos traz como
conseqüência uma melhor utilização dos nutrientes. A deficiência energética e/ou de
nutrientes em geral, afeta negativamente, diminui o crescimento e o ganho de peso,
entre outras conseqüências, comprometendo a saúde. Assim, as quantidades de
nutrientes necessárias para manter um bom estado nutricional dependem também da
velocidade com que um indivíduo ou animal está crescendo. Os dados apresentados na
Tabela 12 permitem uma visualização das principais variações ocorridas nos animais,
decorrentes do consumo alimentar das dietas com arroz.
A avaliação da eficiência alimentar de um alimento compreende determinações
do valor nutritivo através de métodos biológicos, químicos e microbiológicos. Conforme
Domene (1996), a utilização de métodos biológicos permite avaliar a qualidade de
determinado alimento e extrapolar os resultados para seres humanos.
O ganho de peso, o consumo de dieta e o QEA, apresentados na Tabela 12,
permitem verificar que para ganho de peso, não houve diferença em relação ao grupo
controle. Quanto ao consumo de dieta, os animais dos grupos alimentados com arroz
de médio teor de amilose, obtidos por beneficiamento convencional e parboilizado,
apresentaram o maior e o menor consumo, respectivamente, diferindo do grupo
controle.
O Quociente de Eficiência Alimentar (QEA) não diferiu significativamente entre
as dietas experimentais contendo arroz e o controle, indicando que a presença de
carboidratos não digeríveis nas dietas experimentais não alterou a eficiência das
mesmas. Estes resultados estão em concordância com Walter et al. (2005), que
utilizaram dietas suplementadas com amido resistente em ratos.
43
5.3.2 Massa Hepática, Material Intestinal e Massa Fecal
Na Tabela 13 estão apresentadas a massa dos fígados (g), do material
intestinal (g) e das fezes (g) dos ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28
dias com as dietas experimentais.
Tabela 13. Massa dos fígados (g), do material intestinal (g) e fezes (g) dos ratos
machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais.
Dietas Fígado Material Massa
Amilose Processo (g) Intestinal (g) Fecal (g)
Alta Convencional 11,47±1,24
a
0,87±0,38
a
27,36±2,82
a,b
Alta Parboilização 11,07±0,76
a
0,60±0,24
a
28,94±4,93
a
Média Convencional 10,45±1,17
a
0,57±0,16
a
21,88±2,31
c
Média Parboilização 10,47±0,75
a
0,77±0,34
a
22,06±1,93
b,c
Baixa Convencional 11,40±2,08
a
0,97±0,49
a
20,24±3,67
c
Baixa Parboilização 9,84±0,43
a
0,49±0,16
a
20,32±1,72
c
Controle* 10,38±1,80
a
0,71±0,36
a
23,92±1,80
a,c
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6 ratos/grupo).
Controle inicial: Fígado peso do órgão = 15,33±1,78
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
Conforme pode ser observado na Tabela 13, as massas dos fígados dos
animais experimentais não diferiram estatisticamente da dieta controle (p>0,05),
estando de acordo com a massa dos fígados encontradas para animais adultos
segundo Hossne et al. (1986/87). A relação percentual entre a massa do fígado e o
peso final dos animais não apresentou diferença estatística entre os grupos tendo como
valor médio 3,06%. Também, de acordo com Beynen et al. (1986) e Yamamoto et al.
44
(1999) o aumento da massa hepática ocasiona maior deposição de lipídeos, água,
proteína e glicogênio. Vários estudos têm documentado o efeito do amido resistente no
metabolismo lipídico. Em humanos Behall et al. (1989) e Behall e Howe (1996)
encontraram redução de colesterol, triacilgliceróis e de insulina sérica pós-prandial com
o uso de amido resistente na alimentação.
As massas fecais produzidas pelos ratos durante o ensaio biológico
apresentaram diferenças significativas entre si, não diferindo, entretanto, do controle.
Os maiores valores foram para a amostra de alto teor de amilose, tanto resultante de
beneficiamento convencional como parboilizado. O aumento observado na excreção
fecal é um fato citado na literatura especializada. Para Lajolo et. al (2001a) e Jenkins et.
al (2002), esse aumento é uma resposta ao maior consumo de fibras.
As excreções (Tabela 13) foram maiores nos ratos alimentados com dietas
contendo arroz com altos teores de amilose, diferente do que ocorreu com as amostras
de médios e baixos teores de amilose, as quais se equivaleram. Os aumentos,
conforme alguns autores (BARBOSA e JOKL, 1987; MENEZES e LAJOLO, 1997) são
devidos tanto a um aumento na matéria sólida quanto ao conteúdo de água nas fezes,
cujos resultados estão confirmados tanto em estudos em humanos como em ratos.
Roberfroid, (1993) e Márquez (1999) relatam que a fibra alimentar insolúvel, devido às
suas características físico-químicas, é bastante resistente à fermentação no intestino
grosso e possui pequena capacidade de retenção de água, assim auxiliando no
aumento da massa fecal e, conseqüentemente, na normalização do trânsito intestinal.
Os resultados obtidos com arroz nas dietas (Tabela 13) encontram
similaridades com relatos de autores que utilizaram outras fontes de amido resistente.
Estudos realizados por Monici (2004), sugerem que as fibras solúveis e o
amido resistente parecem pouco influenciar no aumento da massa fecal, pois ao serem
fermentados são degradados, perdendo algumas de suas características físico-
químicas. No estudo, o autor ainda cita que os carboidratos indigeríveis, em conjunto,
ao aumentarem a massa fecal, diminuem o tempo de trânsito intestinal, a pressão
intraluminal reduz e, conseqüentemente, favorecem o trofismo e a microbiota
45
intestinais. Trabalhando com farelo de trigo e amido resistente, Muir et al. (2004)
relatam ocorrência de maior produção fecal com menor tempo de trânsito intestinal,
aliado a menor pH fecal e maior excreção fecal de ácidos graxos de cadeia curta.
Respostas semelhantes foram relatadas por Walter et al. (2005), em níveis de 9 a 18%
de amido resistente na dieta, indicando o efeito benéfico desta substância no auxílio à
manutenção da saúde.
5.3.3 Dosagens Sorológicas
5.3.3.1 Colesterol Total, c-HDL, c-LDL, c-VLDL e Triacilgliceróis
Na Tabela 14 são apresentadas as dosagens sorológicas (mg.dL
-1
) de
colesterol total e triacilgliceróis dos ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28
dias com as dietas experimentais.
Tabela 14. Dosagens sorológicas (mg.dL
-1
) de colesterol total e triacilgliceróis dos ratos
machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais.
Dietas Colesterol Total Triacilgliceróis
Amilose Processo (mg.dL
-1
) (mg.dL
-1
)
Alta Convencional 198,46±6,03
a,b
71,05±5,97
b,c
Alta Parboilização 158,77±6,31
e
65,36±8,23
c,d
Média Convencional 173,26±3,72
d
56,69±8,87
d
Média Parboilização 158,96±4,69
e
74,39±6,75
a,c
Baixa Convencional 192,51±4,43
b,c
87,62±6,16ª
Baixa Parboilização 185,21±3,34
c
54,22±8,58
d
Controle* 205,97±2,07
a
83,93±6,71
a,b
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6ratos/grupo).
Valores de referência (mg.dL
-1
): Colesterol Total= 156,77± 2,98; Triacilgliceróis= 117,03±6,58.
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
46
De acordo com Jenkins et al. (1998), vários benefícios à saúde têm sido
atribuídos ao amido e aos alimentos amiláceos, com relativa ou absoluta resistência à
digestão no intestino delgado. Embora a fibra alimentar e o amido resistente possam
ser caracterizados como ¨substâncias funcionais¨, vêm sendo objeto de discussão suas
interferências sobre aspectos metabólicos (MONICI, 2004). Neste estudo as
concentrações séricas de colesterol total apresentaram diferenças significativas entre si
(Tabela 14). Verifica-se que as dietas com arroz parboilizado apresentaram os menores
valores, ocorrendo diferença entre os processos de beneficiamento, exceto para
amostras de baixo teor de amilose, onde não ocorreu uma redução significativa.
Os resultados obtidos demonstram, à semelhança do que relatam Champe e
Harvey, (2000) e, Mahan e Escott-Stump (2005), que a quantidade, a natureza dos
alimentos e os tipos de preparações ingeridas diariamente influenciam a concentração
do colesterol plasmático e, os níveis elevados de colesterol no sangue estão
relacionados com a incidência de doenças vasculares ateroscleróticas, especialmente
doenças coronarianas.
Para os triacilgliceróis, as dietas não apresentaram comportamento uniforme.
Amostras com alto e baixo nível de amilose foram influenciadas pelo processo de
beneficiamento, onde a parboilização promoveu uma redução nos níveis de
triacilgliceróis, sendo que a maior redução foi observada para arroz de baixa amilose
(35,4%). Já as amostras com médio teor de amilose apresentaram efeito contrário.
Os níveis de triacilgliceróis (Tabela 14) dos animais em consumo de arroz não
apresentaram diferença significativa quanto ao controle, isto tem relevância pois, de
acordo com Assis (1997), a alta ingestão de calorias, gorduras saturadas e colesterol
conduzem à obesidade, e são fatores que afetam o metabolismo lipídico (ASSIS, 1997).
O excesso de lipídeos no sangue conduz à formação de ateroma e trombogênese,
principais processos envolvidos nas doenças cardíacas, e estão ligados a fatores
dietéticos, além de fatores que afetam o estilo de vida.
47
Os teores de colesterol total e triacilgliceróis sérico dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais estão representados nas
Figuras 2 e 3.
Na Figura 4 está apresentado o percentual de redução do colesterol total e dos
triacilgliceróis séricos quanto ao controle após 28 dias do ensaio com ratos
Wistar/UFPel.
0
50
100
150
200
250
Grupos
CT mg.dL-1
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 2. Teores (mg.dL
-1
) de colesterol total sérico (CT) dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6 ratos/grupo).
0
20
40
60
80
100
Grupos
TAG mg.dL-1
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 3. Teores (mg.dL
-1
) de triacilgliceróis séricos (TAG) dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6 ratos/grupo).
48
-50
0
50
100
150
200
250
Colesterol Triglicerídeos
%
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 4. Redução (%) do colesterol total e de triacilgliceróis séricos quanto ao controle
após 28 dias do ensaio com ratos Wistar/UFPel (n= 6 ratos/grupo).
Conforme pode ser observado na Figura 4, as dietas contendo arroz
parboilizado apresentaram maior redução de colesterol total, em todos os teores de
amilose, enquanto para os triacilgliceróis as maiores reduções foram encontradas em
arroz parboilizado de alto e baixo teor de amilose. Segundo relatos na literatura
especializada (Salgado et al. 2005b) que trata do metabolismo lipídico, as propriedades
do amido resistente são decorrentes da ação dos produtos da fermentação e das
características da microbiota intestinal. A produção de ácidos graxos de cadeia curta,
como o ácido propiônico, reduz riscos de enfermidades cardiovasculares pela inibição
da síntese de colesterol nos hepatócitos, medida pela atividade da enzima
hidroximetilglutaril-coenzima A redutase (HMG-Coa). Este mecanismo ainda não está
totalmente esclarecido (ANNISON e TOPPING, 1994; FREITAS, 2002; FERREIRA,
2003).
Na Tabela 15 encontram-se as dosagens sorológicas de c-HDL, c-LDL e c-
VLDL dos animais utilizados no ensaio biológico.
49
Tabela 15. Dosagens sorológicas (mg.dL
-1
) c-HDL, c-LDL e c-VLDL dos ratos machos
Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais.
Dietas c-HDL c-LDL c-VLDL
Amilose Processo
Alta Convencional 38,70±3,91ª 145,55±6,43
a
14,21±1,19
b,c
Alta Parboilização 38,29±3,77ª 107,41±6,24
d
13,07±1,65
c,d
Média Convencional 44,01±2,89ª 117,90±2,76
c
11,34±1,74
d
Média Parboilização 38,31±3,67ª 105,76±7,06
d
14,88±1,35ª
,c
Baixa Convencional 39,64±5,98ª 135,34±6,42
b
17,52±1,23ª
Baixa Parboilização 43,02±4,44ª 131,34±5,34
b
10,84±1,72
d
Controle* 39,96±3,27ª 152,43±3,28
a
16,78±1,34ª
,b
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6 ratos/grupo).
Valores de referência (mg.dL
-1
): HDL= 48,53±3,64; LDL = 84,84±3,21; VLDL = 23,41±1,26.
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
Os teores de colesterol HDL, LDL e VLDL séricos dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais estão apresentados na Figura
5.
A fração c-HDL não apresentou alteração com relação ao controle tanto para o
nível de amilose como para o processamento. Já as frações c-LDL e c-VLDL foram
inferiores em relação ao controle, exceto para o arroz de baixo teor de amilose
beneficiado pelo processo convencional para a fração c-VLDL.
Além de o arroz ser o principal alimento de grande parte da população mundial,
é um cereal nutritivo e possui qualidades que o tornam alimento importante em
qualquer tipo de dieta ou condições nutricionais específicas.
50
0
50
100
150
200
c- HDL c- LDL c- VLDL
Grupos
mg.dL-1
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 5. Teores (mg.dL
-1
) de colesterol HDL (c-HDL), colesterol LDL (c-LDL) e
colesterol VLDL (c-VLDL) sérico dos ratos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias
com as dietas experimentais (n= 6 ratos/grupo).
Neste estudo com a utilização de arroz nas dietas (Figura 5) foi obtida a
manutenção dos níveis de c-HDL. Isto tem muita importância, pois o c-HDL previne
riscos de desenvolvimento de doenças coronarianas. Estudos com óleo de arroz
demonstram que este apresenta compostos benéficos ao organismo, como os
fitoesteróis, que diminuem a absorção de colesterol da dieta, e o gama-oryzanol, que é
um antioxidante natural (SCAVARIELLO e ARELLANO, 1998; CICERO e GADDI,
2001). Rukmini e Raghuram (1991) e Cícero e Gaddi (2001) também relatam os
benefícios do óleo de arroz. Seus estudos verificaram que este óleo reduziu o colesterol
plasmático e a concentração de triacilgliceróis, aumentando o colesterol de alta
densidade (HDL - lipoproteína de alta densidade).
A redução percentual das frações de colesterol HDL (c-HDL), LDL (c-LDL) e
VLDL (c-VLDL) séricos quanto ao controle após 28 dias com as dietas experimentais
estão expostas na Figura 6.
51
-50
0
50
100
150
200
c-HDL c-LDL c-VLDL
%
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 6. Redução (%) das frações de colesterol HDL (c-HDL), colesterol LDL (c-LDL) e
colesterol VLDL (c-VLDL) séricos quanto ao controle após 28 dias do ensaio com ratos
Wistar/UFPel (n= 6 ratos/grupo).
Observa-se, nas Figuras 4 e 6 que a maior redução quanto ao colesterol total
foi para os animais submetidos às dietas contendo arroz parboilizado. O mesmo
comportamento foi observado quanto ao c-LDL onde as amostras de alto e médio teor
de amilose apresentaram as maiores reduções, aproximadamente 30%, e 13,84% de
redução para a amostra de baixo teor de amilose. Para a fração c-VLDL a maior
redução ocorreu na dieta com arroz de baixa amilose parboilizado, sendo 35,40%
inferior ao controle (Figura 6). Neste estudo, apesar dos baixos níveis de amido
resistente, mesmo no arroz parboilizado, pode-se de uma maneira geral, observar que
dietas contendo arroz tanto parboilizado como convencional promovem redução no
colesterol total e c-LDL e c-VLDL, assim como nos triacilgliceróis, em relação ao
controle, sem afetar os níveis de c-HDL, lipoproteínas de alta densidade, as quais
segundo Lima et al. (2003), têm um papel protetor contra o desenvolvimento da
aterosclerose, impedindo a oxidação das LDL.
Muitos estudos têm examinado a relação entre o amido resistente e as
concentrações pós-prandiais de metabólitos e hormônios, documentando o efeito do
52
amido resistente no metabolismo lipídico (BEHALL et al., 1989; BEHALL e HOWE,
1995). Tem sido ainda atribuído ao consumo de amido resistente a redução do tamanho
relativo das células adipócitas (LERER-METZGER et al., 1996; KABIR et al., 1998a). De
acordo com Kabir et al. (1998b) a síntese da enzima sintetase de ácidos graxos é
menor em ratos alimentados com dietas contendo amido resistente. Desta forma, estes
estudos promovem evidências de que a ingestão de amido resistente desempenha
papel chave na atividade das enzimas lipogênicas e morfologia dos adipócitos. Diante
disso, está claro que os efeitos dos carboidratos e de seus sub-tipos devem ser melhor
examinados no metabolismo lipídico através de estudos com humanos.
5.3.3.2 Glicemia de Jejum e Curva Glicêmica
Na Tabela 16 são apresentados os resultados para glicemia de jejum de ratos
Wistar/UFPel alimentados com diferentes dietas experimentais.
Tabela 16. Glicemia de jejum (mg.dL
-1
) no tempo inicial, meio e fim do ensaio biológico
com ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas
experimentais.
Dietas Glicemia de Jejum (mg.dL
-1
)
Amilose Processo 1º dia 14º dia 28º dia
Alta Convencional 70,58±10,25
a
64,33±11,35
a
69,91±7,54
a
Alta Parboilização 73,17±20,43
a
67,17±10,20
a
74,17±26,39
a
Média Convencional 65,58±10,40
a
64,08±9,40
a
59,75±6,52
a
Média Parboilização 66,67±7,75
a
61,67±8,47
a
71,67±9,34
a
Baixa Convencional 76,17±14,37
a
62,08±9,37
a
70,17±8,35
a
Baixa Parboilização 63,14±6,27
a
64,47±7,89
a
59,89±7,10
a
Controle* 54,67±17,21
a
55,67±3,51
a
67,67±2,52
a
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6 ratos/grupo).
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
53
Verifica-se, conforme Tabela 16, que as dietas experimentais mantiveram
normais os níveis de glicemia nos ratos, não apresentando diferença estatística entre
os grupos nos três tempos avaliados, indicando que os diferentes níveis de amido
resistente presente nas dietas não foram suficientemente capazes de promover uma
resposta glicêmica significativa.
Os resultados obtidos com arroz nas dietas (Tabela 16) encontram
similaridades com relatos de autores que avaliaram a resposta glicêmica em outras
fontes de amido resistente. Estudos com humanos descrevem variabilidade nas
respostas glicêmicas e/ou insulinêmicas na ingestão de amido resistente. Em geral, é
aceito que o consumo de amido resistente reduz as concentrações pós-prandiais de
glicose e de insulina. Alguns grupos (RABEN, 1994; HEIJNEN et al., 1995) reportam um
decréscimo na glicemia pós-prandial ou resposta insulinêmica associada à ingestão de
amido resistente em comparação ao amido digerível consumido, enquanto outros
pesquisadores não encontraram mudanças (BEHALL e SCHOLFIELD, 1988; JENKINS
et al., 1998).
Segundo Raben (1994) e Hoebler et al. (1999), o conteúdo de lipídeos da dieta
tem significante impacto na resposta glicêmica da alimentação. Em estudos de dietas
com e sem lipídeos com variações no conteúdo de amido resistente resultaram em
dificuldade de interpretação dos dados. Também a fonte do amido resistente pode
influenciar na resposta glicêmica/insulinêmica, devido as suas diferente propriedades
físico-químicas (HIGGINS et al., 2004). Esses fatos explicam os resultados constantes
na Tabela 16, onde neste estudo foram utilizadas três fontes diferentes de arroz, com
diferença no teor de lipídeos e fibras decorrente do processo de beneficiamento,
entretanto, se observa que as dietas contendo arroz foram capazes de manter em
níveis normais a glicemia de jejum.
Na Figura 7 estão demonstradas as glicemias de jejum dos ratos alimentados
com dietas experimentais contendo arroz com diferentes níveis de amilose.
54
0
20
40
60
80
Grupos
Glicemia mg.dL
-1
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 7. Glicemia de jejum (mg.dL
-1
) dos ratos Wistar/UFPel alimentados durante 28
dias com as dietas experimentais (n= 6 ratos/grupo).
Na Figura 8 estão apresentadas as glicemias dos ratos Wistar/UFPel em jejum
e após a ingestão das dietas experimentais ao longo de 90 minutos.
0
20
40
60
80
100
120
0 min 30 min 60 min 90 min
Tempo (minutos)
Glicemia mg.dL
-1
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 8. Curva glicêmica (mg.dL
-1
) das dietas experimentais em ratos machos
Wistar/UFPel, no tempo inicial (jejum), e aos 30, 60 e 90 minutos após ingestão.
55
As glicemias dos ratos Wistar/UFPel em jejum e ao longo de 90 minutos, após
a ingestão das dietas experimentais, encontram-se na Tabela 17.
O amido resistente não apresentou efeito na curva glicêmica, dos ratos,
provavelmente devido à pequena quantidade presente nas dietas. Mesmo nas dietas
que continham arroz parboilizado, que apresenta amido retrogradado, indicando que o
teor de amilose, bem como o tipo de processamento (convencional ou parboilização)
tem o mesmo comportamento na glicemia. Segundo Englyst et al. (1996) os
carboidratos de baixa ou lenta digestão, e os classificados como amido resistente, são
digeridos ou não, lentamente no intestino delgado e, como resultado reduzem a
glicemia pós-prandial. Os alimentos de baixo índice glicêmico são resultantes de muitos
fatores incluindo a forma e a natureza do amido. É evidente que as baixas absorção e
digestão de carboidratos da dieta são favoráveis na manutenção de desordens
metabólicas decorrentes de diabetes e hiperlipidemias (ASP, 1994; WOLEVER e
MCHLING, 2002).
Tabela 17. Curva glicêmica (mg.dL
-1
) das dietas experimentais em ratos machos
Wistar/UFPel, no tempo inicial (jejum), e aos 30, 60 e 90 minutos após ingestão.
Dietas Glicemia (mg.dL
-1
)
Amilose Processo 0 min 30 min 60 min 90 min
Alta Convencional 72,25±11,38
a
93,25±10,40
a
97,50±4,02
a
105±3,64
a
Alta Parboilização 64,62±17,53
a
103,75±13,67
a
102,5±8,27
a
103,5±9,68
a
Média Convencional 60,17±5,89
a
94,66±6,98
a
96,33±5,35
a
98,87±3,57
a
Média Parboilização 71,00±13,24
a
91,25±5,91
a
99,50±8,54
a
104,75±8,54
a
Baixa Convencional 72,5±9,95
a
89,50±6,86
a
97,75±4,02
a
93,17±8,75
a
Baixa Parboilização 57,75±6,80
a
92,75±12,42
a
95,5±1,29
a
95,62±3,90
a
Controle* 67,5±2,88
a
90,21±17,32
a
101,75±1,44
a
105,5±3,89
a
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6 ratos/grupo).
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
56
Segundo alguns autores (LAJOLO et al., 2001a; PARKS, 2002) ocorre uma
melhora do controle glicêmico após a administração de diferentes fontes de fibras.
Embora os resultados destes trabalhos não sejam coincidentes em todos os estudos,
constatou-se que a fibra solúvel e o amido resistente proporcionam em maior ou menor
grau, uma alternativa efetiva e benéfica para o controle dos níveis de glicemia de jejum
e pós-prandial. Para Higgins (2004), estas evidências estão associadas à relação dose-
resposta na ingestão de amido resistente na glicemia pós-prandial, insulinemia,
oxidação lipídica e armazenamento de lipídeos.
As curvas glicêmicas das dietas experimentais, em ensaio biológico com ratos
adultos Wistar/UFPel, em jejum e ao longo de 90 minutos, são apresentadas na Figura
9.
0
20
40
60
80
100
120
Tempo 0 30 min 60 min 90 min
Tempo (minutos)
Glicemia mg.dL
-1
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 9. Curvas glicêmicas (mg.dL
-1
) das dietas experimentais em ratos adultos
Wistar/UFPel em jejum e ao longo de 90 minutos.
57
Os efeitos do amido resistente sobre a resposta glicêmica ainda são
conflitantes, embora se tenha o conceito de amido resistente e o conhecimento dos
diferentes graus de digestibilidade do amido, Caruso e Menezes (2000) demonstraram
que cornflakes produziram elevada resposta glicêmica, embora contenham elevado teor
de amido resistente e amido rapidamente digerível.
Conforme os resultados apresentados (Tabelas 16 e 17, Figuras 7, 8 e 9),
observa-se que o teor de amilose não interferiu na resposta glicêmica, contrariando
Caruso e Menezes (2000) que sugerem ser o elevado teor de amilopectina responsável
pelo aumento da glicemia, onde a digestão ocorre mais rapidamente devido às
ramificações do glicano que contribui para aumentar a superfície exposta à hidrólise
enzimática. E nos alimentos ricos em amilose, a resposta glicêmica poderá ser menor
em decorrência da formação de complexos entre essa e ácidos orgânicos, lipídios e
fatores antinutricionais.
O índice glicêmico é amplamente utilizado em estudos de biodisponibilidade
dos carboidratos, com ressalvas. Os resultados podem ser influenciados pelo baixo
conteúdo de carboidratos da amostra e a presença de fibras solúveis em alimento fonte
de amido é capaz de reduzir a resposta glicêmica e insulinêmica pós-prandiais e
mascarar os efeitos do amido resistente. Esse fenômeno acontece pelo retardo no ritmo
de esvaziamento gástrico, decorrente da capacidade de retenção de água das pectinas,
gomas e β-glicanas. O conseqüente aumento da viscosidade do meio reflete-se no
aumento da saciedade, em menor taxa de absorção no intestino e no decréscimo do
índice glicêmico (LEMOS et al., 2002).
5.3.3.3 Lípideos Totais, Colesterol Total e Triacilgliceróis Hepáticos
Os lipídeos totais, colesterol total e triacilgliceróis hepáticos de ratos machos
Wistar/UFPel, alimentados durante 28 dias com dietas contendo arroz, estão na Tabela
18.
58
Tabela 18. Lipídeos totais, colesterol total e triacilgliceróis hepáticos de ratos machos
Wistar/UFPel, em base seca.
Dietas Lipídeos Colesterol Triacilgliceróis
Amilose Processo (mg) (mg) (mg)
Alta Convencional 541,18±29,97
a,b
29,68±3,08
a,c
196,36±6,98
a
Alta Parboilização 486,68±33,40
b
23,45±6,27
b,c
156,66±4,89
c
Média Convencional 498,00±55,88
b
33,10±5,55
a,b
159,84±7,46
c
Média Parboilização 612,63±40,73
a
30,62±3,81
a,c
133,98±5,41
d
Baixa Convencional 315,51±58,31
c
34,48±7,92
a
174,72±8,92
b
Baixa Parboilização 499,07±22,00
b
23,87±5,98
b,c
122,80±5,41
d
Controle* 366,77±69,35
c
21,15±6,32
c
81,84±7,77
e
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6 ratos/grupo).
Valores de referência no tempo inicial: Lipídeos (mg)= 442,30±25,32;Colesterol (mg)= 23,44±4,28;
Triacilgliceróis (mg)= 155,45±6,34; Fígado (g)= 15,33±1,23.
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
Os lipídeos hepáticos específicos dos animais que consumiram dieta controle e
dieta com arroz convencional de baixo teor de amilose foram inferiores aos demais
tratamentos. Os maiores valores foram encontrados nos animais que consumiram arroz
com médio e baixo teor de amilose parboilizado. Para o colesterol hepático, os teores
encontrados não apresentaram diferença significativa (p>0,05) entre os tratamentos.
Quanto aos teores de triacilgliceróis, os grupos diferiram entre si (p>0,05). O grupo
controle apresentou os menores teores, sendo os maiores encontrados para as dietas
elaboradas com arroz convencional.
Estudos com animais experimentais têm indicado que dietas ricas em fibra
alimentar, incluindo o amido resistente, influenciam no perfil lipídico sérico e hepático
(KIM et al., 2003; PIEDADE e CANNIATTI-BRAZACA, 2003).
59
Na Tabela 19 são apresentados os teores de lipídeos, colesterol e
triacilgliceróis hepáticos específicos, em base seca, dos ratos machos Wistar
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais.
Tabela 19. Teores de lipídeos, colesterol e triacilgliceróis hepáticos (mg.g
-1
) específicos,
em base seca, dos ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as
dietas experimentais.
Dietas Lipídeos Colesterol Triacilgliceróis
Amilose Processo (mg.g
-1
) (mg.g
-1
) (mg.g
-1
)
Alta Convencional 46,04±2,55
b
2,62±0,42
a
16,42±2,67
a
Alta Parboilização 43,96±3,02
b
2,13±0,60
a
14,46±2,90
a
Média Convencional 47,64±5,34
b
3,21±0,66
a
15,31±3,29
a
Média Parboilização 57,51±3,82ª 2,93±0,42
a
12,81±3,60
a,b
Baixa Convencional 27,57±5,09
c
3,09±0,88
a
15,99±2,76
a
Baixa Parboilização 50,72±2,23
a,b
2,42±0,55
a
12,48±2,35
a,b
Controle* 34,73±6,57
c
2,33±0,77
a
8,63±2,33
b
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6 ratos/grupo).
Valores de referência no tempo inicial (mg.dL
-1
): Lipídeos= 28,83±2,53; Colesterol= 1,53±0,19;
Triacilgliceróis= 9,93± 1,98
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
Considerando a massa hepática de cada grupo (Tabela 13 e 19), foi verificado
que os animais com dieta controle e arroz convencional de baixa amilose apresentaram
teores de lipídeos totais inferiores, diferindo dos demais grupos (p>0,05). Em relação
aos teores de colesterol total, os grupos não diferiram quando comparados ao controle
(p>0,05), sendo os menores valores absolutos encontrados para o arroz parboilizado
nas amostras com três níveis de amilose. Da mesma forma, para os triacilgliceróis, os
menores valores foram encontrados nos animais tratados com arroz parboilizado,
60
qualquer que seja o teor de amilose, sendo que as cultivares com médio e baixo teor de
amilose apresentaram comportamento estatístico equivalente ao controle (p>0,05).
5.3.3.4 Lipídeos Totais, Colesterol Total, Triacilgliceróis e Amido Resistente
Fecais
Na Tabela 20 são apresentados os lipídeos totais, colesterol total e
triacilgliceróis fecais, em base seca, dos ratos machos Wistar/UFPel.
Tabela 20. Teores de lipídeos totais, colesterol total e triacilgliceróis excretados (b.s.),
dos ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas
experimentais.
Dietas Lipídeos Colesterol Triacilgliceróis
Amilose Processo (mg) (mg) (mg)
Alta Convencional 1094,00±109,67
a,b
43,11±4,45
a
83,99±6,54
b
Alta Parboilização 1295,15±135,64
a
15,46±2,40
c
60,04±3,99
c
Média Convencional 1063,95±117,58
b
29,73±3,14
b
38,55±4,07
d
Média Parboilização 1004,00±232,00
b
27,98±2,45
b
41,85±3,67
d
Baixa Convencional 894,18±119,56
b
20,77±3,77
c
37,50±6,80
d
Baixa Parboilização 894,46±113,77
b
28,14±2,35
b
21,03±1,76
e
Controle* 926,33±132,81
b
3,63±0,27
d
115,26±5,21
a
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6 ratos/grupo).
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
Conforme pode ser observado na Tabela 20, ocorreu maior excreção de
lipídeos e colesterol em ratos alimentados com as dietas contendo arroz. A importância
da excreção fecal de lipídeos e colesterol não está somente na contribuição da
regulação dos níveis séricos de colesterol total e frações, mas também na prevenção de
61
determinadas patologias. Há fortes evidências de que a ocorrência de câncer de cólon
e de reto está associada a dietas altamente gordurosas, hipercalóricas e pobres em
fibras. Uma dieta balanceada, que fornece os nutrientes necessários para que o
organismo se mantenha em equilíbrio, é considerada como forte aliada na prevenção
do câncer colorretal. Os compostos lipídicos podem ser considerados promotores de
câncer colorretal, por ocasionar, entre outros efeitos, um aumento na quantidade de
ácidos biliares excretados no intestino pela bile (MONICI, 2004).
Na Tabela 21 são apresentados os teores de excreção de lipídeos totais,
colesterol total e triacilgliceróis fecais, (mg.g
-1
base seca), dos ratos machos
Wistar/UFPel.
Tabela 21. Teores de lipídeos, colesterol e triacilgliceróis excretados (b.s.), dos ratos
machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais.
Dietas Lipídeos Colesterol Triacilgliceróis
Amilose Processo (mg.g
-1
) (mg.g
-1
) (mg.g
-1
)
Alta Convencional 39,99±4,01
a,b
1,58±0,42
a
3,00±0,84
b
Alta Parboilização 44,74±4,68
a,b
0,52±0,32
b,c
2,04±0,59
b,c
Média Convencional 48,61±5,37
a
1,36±0,53
a,b
1,76±1,42
b,c
Média Parboilização 45,51±4,60
a,b
1,27±0,55
a,b
1,90±0,84
b,c
Baixa Convencional 44,17±5,91
a,b
1,03±0,60
a,b,c
1,85±0,99
b,c
Baixa Parboilização 44,00±5,60
a,b
1,38±0,76
a,b
1,03±0,84
c
Controle 38,72±5,55
b
0,15±0,01
c
4,92±0,37
a
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6 ratos/grupo).
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
De acordo com os resultados apresentados na Tabela 21 as dietas contendo
arroz promoveram maior excreção de lipídeos e colesterol. Para Ferreira (2003), a
excreção de colesterol está relacionada à composição da microbiota intestinal, pois a
62
presença de bactérias lácticas é capaz de desconjugar ácidos biliares, tornando-os
menos solúveis em pH baixo. Tal fato induz à precipitação do colesterol junto com os
ácidos biliares, tornando-os indisponíveis para reabsorção no fígado, sendo eliminados
nas fezes.
Efeitos similares aos encontrados neste trabalho são apresentados por Monici
(2004), em estudo com diferentes fontes de amido resistente, o autor atribui às fibras
solúveis e ao amido resistente a capacidade de seqüestrar sais biliares eliminando-os
nas fezes. Este efeito tem demonstrado grande importância, pois previne a ação de
determinadas cepas bacterianas (Clostridium putrificans) que desconjugam e reduzem
ácidos biliares e colesterol, ativando a proteinoquinase C celular, que é uma
estimuladora da proliferação de células intestinais. Enzimas de bactérias atuam sobre o
colesterol dietético e sobre os ácidos biliares, originando o ácido litolítico e outros
mutagênicos. Por outro lado, embora não seja conhecida qual fração de fibra seja
responsável pelo efeito protetor, existem demonstrações experimentais de que a
celulose possui capacidade de catalisar a redução e a conjugação dos ácidos biliares,
os quais desconjugados não são utilizados pelas cepas bacterianas patogênicas
(MÁRQUEZ, 1999).
Na Figura 10 são apresentados os lipídeos totais excretados, dos ratos
Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais.
A excreção fecal, relacionada à massa fecal (Tabela 21), apresentou valores
maiores para lipídeos e colesterol total (p>0,05) para os animais submetidos às dietas
contendo arroz. Para triacilgliceróis, observou-se que os grupos experimentais diferiram
do grupo controle (p>0,05), onde os animais em dieta contendo arroz com alta amilose
apresentaram a maior excreção. De acordo com St-Onge et al. (2000), o consumo de
fibras aumenta o quociente dos ácidos biliares primários/secundários do pool biliar,
devido à eliminação fecal destes, pois ocorre solubilização do colesterol biliar e
diminuição da litogenicidade da bile, com a interrupção da circulação entero-hepática,
estes deverão ser produzidos no fígado e, desta forma, o organismo deverá recorrer às
suas reservas de colesterol.
63
0
500
1000
1500
Grupos
Lipídeos Totais
Fecais (mg)
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 10. Lipídeos totais fecais (mg), em base seca, dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6 ratos/grupo).
Na Figura 11 e 12 encontram-se respectivamente, colesterol total e
triacilgliceróis fecais dos ratos Wistar alimentados com as dietas experimentais
contendo arroz de diferentes níveis de amilose.
0
10
20
30
40
50
Grupos
Colesterol Total Fecal
(mg)
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 11. Colesterol total fecal (mg), em base seca, dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6 ratos/grupo).
64
O aumento na excreção de colesterol (Figura 11), de acordo Tomasik e
Tomasik (2003) e ST-Onge et al. (2000), está relacionado à presença de carboidratos
indigeríveis no trato intestina, os quais reduzem a reabsorção de sais biliares. Assim, o
colesterol endógeno é o único precursor para a síntese de ácido biliar, através de
inibição da síntese de colesterol hepático ou redistribuição do colesterol sérico para o
fígado o que reduz a concentração do colesterol circulante.
0
20
40
60
80
100
120
140
Grupos
Triglicerídeos Totais
Fecais (mg)
Alta amilose convencional Alta amilose parboilizado
Média amilose convencional Média amilose parboilizado
Baixa amilose convencional Baixa amilose parboilizado
Controle
Figura 12. Triacilgliceróis fecais (mg), em base seca, dos ratos Wistar/UFPel
alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais (n= 6 ratos/grupo).
O teor de amido resistente nas fezes e no material intestinal, e o volume fecal,
dos ratos machos Wistar alimentados durante 28 dias com as dietas experimentais
encontram-se na Tabela 22.
O amido resistente no material intestinal dos animais (Tabela 22) submetidos
às dietas com arroz, não diferiu estatisticamente do grupo controle (p>0,05), indicando
que não houve uma maior fermentação do amido resistente de arroz, tanto o
beneficiado na forma convencional quanto no arroz parboilizado, diferentemente do que
relata Heijnen (1996), segundo o qual o amido de arroz é completamente fermentado
pelas bactérias intestinais. Um dos maiores interesses no amido resistente tem sido a
possível promoção de substrato para a microflora colônica e a síntese de ácidos graxos
de cadeia curta, especialmente o butirato. Tem sido proposto que doenças colônicas,
65
incluindo colite ulcerativa são desordens por deficiência de energia (ROEDIGER, 1980),
onde o butirato é conhecidamente uma importante fonte energética para os colonócitos
(ROEDIGER, 1982). Conforme Topping e Clifton (2001), o ácido butírico atua em nível
intestinal, gerando aporte calórico, mantendo sua integridade e inibindo o crescimento
desordenado das células pela estabilização do DNA, conferindo ao amido resistente
efeito de proteção contra câncer colorretal (SÁYAGO-AYERDI et al., 2005).
Tabela 22. Amido resistente (mg.g
-1
) nas fezes e no material intestinal, e volume fecal
(mL) dos ratos machos Wistar/UFPel alimentados durante 28 dias com as dietas
experimentais.
Dietas AR Fecal AR matéria intestinal Volume Fecal
Amilose Processo (mg.g
-1
) (mg.g
-1
) (mL)
Alta Convencional 11,02±1,13
a
5,82±1,24
b,c
50,25±6,09
a
Alta Parboilização 12,02±2,01
a
9,52±1,19
a
52,53±5,82
a
Média Convencional 9,76±1,03
a,b
4,97±1,45
c
39,75±3,25
b
Média Parboilização 12,12±1,06
a
8,06±0,99
a,b
38,25±2,18
b
Baixa Convencional 10,17±1,85
a
7,86±1,34
a,b
36,33±6,23
b
Baixa Parboilização 7,41±0,62
b
5,28±1,76
c
37,17±3,43
b
Controle* 11,31±0,96
a
6,50±0,85
b,c
44,75±7,91ª
,b
Letras diferentes na mesma coluna indicam diferença estatística p<0,05, segundo ANOVA e Teste de
Tukey (n= 6 ratos/grupo).
Amilose alta = 31,57±0,22; média = 21,84±0,20; baixa = 6,31±0,10.
*Controle: AIN-93M, fonte de carboidratos amido de milho e amido dextrinizado.
Os resultados obtidos com arroz parboilizado de alta e média amilose (Tabela
22), demonstram maior teor de substância fermentável na matéria intestinal, diferindo
estatisticamente do arroz parboilizado de baixa amilose. Estes resultados têm
sustentação em relatos de estudos in vivo, realizados por Jenkins et al. (1998) e Walter
et al. (2005), onde demonstram que o amido resistente pode ser fermentado pela
microflora intestinal, sendo, no entanto encontradas diferenças na fermentação, no
66
produto gerado e na seletividade por microbiota benéfica (NOAKES et al., 1996;
KOLIDA et al., 2002).
Salgado et al. (2005b) também supõem que o amido resistente pode
apresentar propriedades funcionais semelhantes às fibras alimentares na prevenção de
doenças degenerativas associadas ao metabolismo intestinal. Assim, uma maior
excreção é favorável, pois elimina substâncias nocivas ao intestino. No presente estudo
(Tabela 22) se observa que o amido resistente que não foi totalmente fermentado é
eliminado via fecal. Neste caso, a associação entre amido resistente e lipídeos da dieta
é benéfica, podem ser excretados, reduzindo o aporte calórico decorrente do consumo
elevado de lipídeos. Higgins et al. (2004) atribuem ao amido resistente a condição de
fibra insolúvel, pois em alto consumo de amido resistente (maior que 10,7%), somente
uma porção deste será fermentada, sendo o remanescente eliminado do cólon como
fibra insolúvel.
O volume fecal (Tabela 22) apresentado pelos ratos com dietas contendo arroz
branco e parboilizado não diferiram do controle (p>0,05). Neste estudo, o amido
resistente presente nas amostras de arroz de diferentes teores de amilose, não foi
capaz de promover aumento significativo de volume fecal. No entanto, o arroz com alta
amilose tanto na forma de beneficiamento convencional quanto parboilizado apresentou
os maiores valores de volume fecal (50,25 e 52,53 mL). Vários estudos verificaram o
aumento do volume fecal decorrente do consumo de amido resistente (PHILLIPS et al.,
1995; BEHALL e HOWE, 1996; CUMMINGS et al., 1996; JENKINS et al., 1998;
CUMMINGS e MACFARLANE, 2002); entretanto Kestell et al. (2004) relatam que dietas
contendo amido resistente comparadas a dietas com polissacarídeos não amiláceos
(NSP) são menos efetivas na redução do tempo de trânsito intestinal em ratos, sendo
elas altamente efetivas no aumento do volume fecal em cerca de 50%.
67
6 CONCLUSÕES
– A parboilização e a cocção provocam aumentos nos teores de amido
resistente, sem haver correlação com a pressão utilizada na autoclavagem,
diferentemente do que ocorre com o tempo de armazenamento, cujo aumento provoca
reduções no teor de amido resistente, havendo tendência de estabilização em tempo
mais curto na cultivar com alto teor de amilose do que nas de médio e baixo.
- O teor de amilose do arroz não interfere no ganho de peso, no consumo de
dieta e na massa hepática, enquanto a massa e o volume fecal produzidos pelos ratos
são afetados pelo nível de amilose e não dependem do processo de beneficiamento do
arroz, mas arroz com maiores teores de amilose proporciona maiores massa e volume
fecal.
– O consumo de arroz parboilizado de altos e médios teores de amilose
proporciona redução de colesterol, ocorrendo efeito contrário para os triacilgliceróis,
sem interferir nos níveis de HDL, enquanto para o LDL em todas as dietas contendo
arroz ocorre redução, que é mais acentuada para o arroz parboilizado com altos e
médios teores de amilose.
- A glicemia de jejum e ao longo de 90 minutos não é afetada pelo teor de
amilose e nem pelo processo de beneficiamento industrial do arroz, mas o aumento do
teor de amilose ocasiona aumentos de triacilgliceróis hepáticos em ratos alimentados
com dietas contendo arroz branco e o processo de beneficiamento não interfere na
retenção hepática do colesterol.
- As dietas contendo arroz aumentam a excreção fecal de colesterol
independentemente do teor de amilose e do processo de beneficiamento, e provocam
diminuição na excreção de triacilgliceróis, a qual é mais intensa no arroz de baixo teor
de amilose parboilizado, sendo que a parboilização de arroz de altos e médios teores
de amilose resulta em maior teor de amido resistente nos materiais intestinal e fecal.
68
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